蛋白质组学方法在玻璃体研究中的应用

玻璃体以透明的凝胶状态充填于玻璃体腔内,当视网膜发生病变时,相邻的玻璃体的蛋白质构成会发生一些变化,这在很多研究中得到证实。最近10a,蛋白质组学技术被用来研究玻璃体的蛋白质组,希望发现与糖尿病性视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)病因相关的特异蛋白质。最近对动物自身免疫性葡萄膜炎的玻璃体样本进行蛋白质组学研究,发现了与眼内炎症相关的特异蛋白质。     

糖尿病性视网膜病变的蛋白质组学研究进展

糖尿病性视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)是糖尿病微血管病变在眼部的表现,是<75岁成年人的首要致盲眼病。定期随访检查糖尿病患者的眼底及控制血糖、血压、血脂都有助于降低因视网膜病变而致失明的发生率,但其机制仍不明确。蛋白质组学及其相关技术的发展为蛋白质水平上研究DR的病理生理机制提供了强有力手段,该技术可以一次性研究大量蛋白质。比较蛋白质组学研究结果表明DR并不是由单一蛋白质启动的疾病,而是多种蛋白质共同参与的病理过程。目前,绝大多数鉴定出的差异性蛋白质其功能都不太明确,而且各蛋白质之间存在着复杂的网络调节关系。我们就其在DR蛋白质组学方面的研究进展作一综述。     

视网膜蛋白质组的研究进展

蛋白质组学是对由一个基因组,或一个细胞、组织表达的所有蛋白质视为一个整体进行研究,是后基因时代的生命科学研究的重心。蛋白质组学技术为研究视网膜生理活动规律和疾病病变机制提供了一个新的研究平台。我们就蛋白质组学在视网膜领域的应用作一综述。     

蛋白质组学及其在增生性玻璃体视网膜病变中的应用进展

蛋白质组学是研究特定时间或特定条件下一个细胞、组织或有机体所有蛋白质表达情况及其动态变化的科学,是在蛋白质水平上对生命体动态的、整体的研究。目前蛋白质组学已广泛应用于生命科学的各个领域。但在眼科的研究刚刚起步,发展尚不完全。现就蛋白质组学在增生性玻璃体视网膜病变中的应用进展做一综述。     

蛋白质组学在眼底病研究中的应用

蛋白质组学是从整体的角度分析动态变化的蛋白质组成、表达水平和修饰状态,了解蛋白质之间相互作用的学科,开辟了研究蛋白质功能与细胞生命活动规律的新领域。通过对生理及病理状态下蛋白质的分析比较,蛋白质组学研究在许多疾病的早期诊断、药物治疗靶点的研究等方面取得了一定进展,也逐渐被应用于眼部疾病包括眼底疾病的研究,如年龄相关性黄斑变性（AMD）、糖尿病视网膜病变（DR）、增生性玻璃体视网膜病变（PVR）、视网膜变性、孔源性视网膜脱离（RRD）等。蛋白质组学在眼底病研究中的应用尚处于起步阶段,就蛋白质组学在眼底病尤其是高致盲性眼病研究中的应用进行综述。     

增生性玻璃体视网膜病变及蛋白质组学研究

增生性玻璃体视网膜病变（PVR）是一种复杂的多因素作用的致盲性眼病,与视网膜脱离、糖尿病视网膜病变（DR）等疾病密切相关。蛋白质组学是研究细胞或机体中全部蛋白质组成及其变化规律的科学,并能在大分子水平获得对疾病的发病机制和过程等方面新的认识。对PVR的发病机制及其在蛋白质组学方面的研究进展进行综述。     

蛋白质组学技术在眼底病研究中的应用进展

蛋白质组学是根据时间、空间及细胞类型定性、定量地研究一个蛋白质组的所有蛋白,包括蛋白质表达、细胞定位、蛋白质间相互作用、翻译后修饰及蛋白质周转.蛋白质组学的常用技术包括蛋白质分离、鉴定技术及生物信息学分析.蛋白质组学在眼底病研究中主要用于筛选玻璃体液及血浆中的特征性蛋白,开发特异的生物学标志物;探索差异性蛋白可能参与的发病机制,如视网膜变性、视网膜血管通透性的改变等,为疾病的早期诊断及治疗方案的优化提供帮助.目前蛋白组学技术应用于探索老年性黄斑变性、特发性黄斑前膜、糖尿病视网膜病变、增生性玻璃体视网膜病变、视网膜色素变性等眼底病的发病机制、诊断、治疗等方面.     

早期糖尿病大鼠视网膜蛋白质表达变化的初步研究

目的 观察2个月病程大鼠视网膜组织蛋白质变化情况;建立并优化视网膜蛋白质组分析所需要的双向凝胶电泳（2-DE）技术,提高其分辨率及重复性.方法 提取视网膜蛋白质进行2-DE,对影响2-DE结果的各种因素进行调整、优化.用PDQUest 7.3.2软件分析凝胶图谱以获得差异表达的蛋白点.结果 成功获得了视网膜组织的2-DE图谱.比较后得到36个表达差异有统计学意义（P＜0.05）的蛋白质点,包括上调5个,下调23个,消失8个.结论 2个月病程糖尿病大鼠视网膜已经有蛋白质表达的差异.已建立的视网膜蛋白质2-DE技术将为进一步开展视网膜疾病的蛋白质组学研究奠定基础.     

视网膜电图诊断早期糖尿病视网膜病变

视网膜电图是一项评价视网膜功能的客观检查,适用于评价多种眼科疾病的视网膜功能情况。近年研究发现,在早期糖尿病患者中,视网膜电图能够发现先于眼底视网膜形态学改变的功能变化,这一点为糖尿病视网膜病变的病理机制研究、早期诊断、以及预后评估提供了新思路,进而可能为治疗糖尿病视网膜病变提供新途径。我们就运用视网膜电图诊断早期糖尿病视网膜病变进行综述。     

糖尿病视网膜病变动物模型

糖尿病视网膜病变动物模型是在糖尿病模型上建立起来的,包括啮齿类和灵长类等多种自发性遗传性动物模型、诱发性动物模型和转基因动物模型。各种类型的糖尿病视网膜病变动物在疾病的发生发展、病理学变化等多方面与人类糖尿病视网膜病变具有相同或类似的特征。应用这些模型可对糖尿病视网膜病变的病理学改变、发病机制和药物治疗等多方面进行研究。本文就近20年来各种糖尿病视网膜病变动物模型的研究作一综述。     

Vascular Endothelial Growth Factor Gene Polymorphisms and Vitreous Proteome Changes in Diabetic Retinopathy

Abstract

Ischemic retinal diseases, particularly diabetic retinopathy, continue to significantly impact vision and remain a leading cause of vision loss in working-aged adults. Identifying specific genetic risk factors for ischemic-driven pathways that increase susceptibility to developing diabetic retinopathy is a priority to allow development of accurate risk assessment algorithms, employ earlier intervention, and design novel treatment strategies to reduce the associated visual complications. Single nucleotide polymorphisms (SNPs) in the VEGF gene have been shown to influence the expression of the VEGF protein. Several studies suggest that SNPs in the VEGF gene mediate genetic predisposition to diabetic retinopathy. In addition, alterations in the vitreous proteome, including carbonic anhydrase mediated vascular permeability, have been found to be associated with sight-threatening proliferative diabetic retinopathy and macular edema. Inhibition of these factors could provide new therapeutic opportunities for the treatment of diabetic retinopathy.     

优化并建立双向凝胶电泳初步研究糖尿病视网膜病变血清蛋白质组

目的建立并优化糖尿病视网膜病变（DR）血清蛋白质组研究的双向凝胶电泳技术。方法收集确诊为无明显视网膜病变和增生型糖尿病视网膜病变（PDR）的糖尿病患者各15例,每例患者空腹抽取肘正中静脉血3mL,通过自凝和二次离心提取血清,-80℃保存,采用同类型患者血清混合叠加共同差异蛋白质的方法进行优化,应用Merck去除试剂盒去除血清蛋白、IgG等高丰度蛋白质,运用pH3-10非线性胶条进行双向凝胶电泳,采用与质谱方法兼容的硝酸银染色,再运用ImageScanner采集图像并进行分析。结果优化的双向凝胶电泳图谱聚焦性好、重复性高。与无明显视网膜病变患者相比,PDR患者血清蛋白质丰度上调2倍以上的差异点40个,丰度下调2倍以上的差异点21个,新出现的蛋白质差异点20个,消失的蛋白质差异点27个。结论优化的双向凝胶电泳能够发现PDR患者和无明显视网膜病变患者血清存在明显的蛋白质组差异。     

Vitreous proteomics and diabetic retinopathy

Diabetic retinopathy is the major cause of acquired blindness in working-age adults. Studies of the vitreous proteome have provided insights into the etiology of diabetic retinopathy and suggested potential molecular targets for treatments. Further characterization of the protein changes associated with the progression of this disease may suggest additional therapeutic approaches as well as reveal novel factors that may be useful in predicting risk and functional outcomes of interventional therapies. This article provides an overview of the various techniques used for proteomic analysis of the vitreous and details results from various studies evaluating vitreous of diabetic patients using the proteomic approach.     

Vitreous Proteomics and Diabetic Retinopathy

Diabetic retinopathy is the major cause of acquired blindness in working-age adults. Studies of the vitreous proteome have provided insights into the etiology of diabetic retinopathy and suggested potential molecular targets for treatments. Further characterization of the protein changes associated with the progression of this disease may suggest additional therapeutic approaches as well as reveal novel factors that may be useful in predicting risk and functional outcomes of interventional therapies. This article provides an overview of the various techniques used for proteomic analysis of the vitreous and details results from various studies evaluating vitreous of diabetic patients using the proteomic approach.     

Pharmacologic Therapy for Diabetic Retinopathy

Abstract

Diabetic retinopathy is one of the most serious complications of chronic diabetes mellitus and is the leading cause of blindness in working-age populations. Large, randomized studies have demonstrated the benefits of systemic and ocular therapy in the prevention and treatment of diabetic retinopathy. The process of angiogenesis plays a critical role in the development of diabetic complications. VEGF is part of the angiogenic process and gives rise to retinal neovascularizations, which are part of the proliferative diabetic retinopathy. Various types of anti-VEGF drugs for the treatment of diabetic macular edema are currently being tested in ongoing clinical trials. Recently published prospective studies addressing the impact of anti-VEGF drugs on diabetic macular edema and proliferative diabetic retinopathy showed the clinical effects of these drugs and uncovered possible adverse effects. Herein we present a review on therapy of diabetic retinopathy with a special focus on anti-VEGF therapy.     

尿微量白蛋白对早期糖尿病视网膜病变的临床意义

糖尿病视网膜病变是糖尿病非常重要的并发症之一。目前对于糖尿病视网膜病变的治疗并没有非常有效的治疗手段,所以在糖尿病视网膜病变的前期,早期发现与预防治疗显得格外的重要,近年研究发现尿微量蛋白与糖尿病视网膜病变密切相关,对于早期防治糖尿病视网膜病变具有重要意义,本文就尿微量白蛋白在早期的糖尿病视网膜病变中的临床意义作一综述。