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1.
目的克隆并表达短穗鱼尾葵花粉中泛变应原肌动蛋白抑制蛋白(profilin)。方法利用RT-PCR结合RACE技术克隆短穗鱼尾葵花粉中泛变应原profilin的全长基因,并进行序列分析。然后设计带有酶切位点的特异性引物,采用RT-PCR获得整个短穗鱼尾葵花粉profilin的开放阅读框,将其与pET28a载体连接并转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,通过Ni2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,采用Western-blot检测其IgE结合活性。结果克隆获得了短穗鱼尾葵花粉profilin的全长基因,由608个碱基组成,开放阅读框为396个碱基(包括终止密码子),编码131个氨基酸。该序列编码的蛋白为小分子量酸性蛋白,等电点为4.52,相对分子质量约为14200。此序列已被GenBank收录,登陆号为EF173600。重组短穗鱼尾葵花粉profilin在大肠杆菌中高效的表达,进一步经Ni2+亲和层析柱纯化后经Western-blot检测具有良好的免疫学活性。结论成功地克隆和表达了短穗鱼尾葵花粉profilin,为短穗鱼尾葵花粉过敏的诊断和免疫治疗奠定了基础。  相似文献   

2.
目的:给予粉尘螨抗原致敏小鼠分别灌服粉尘螨抗原PLGA微球(直径7~10μm)和粉尘螨(浸液)抗原脱敏或减敏治疗疗效的观察,以选择一种对尘螨性哮喘脱敏治疗的药物.方法:粉尘螨抗原致敏C57-BL/6小鼠,灌服粉尘螨抗原PLGA微球以及等剂量的粉尘螨(浸液)抗原减敏后,检测小鼠BALF和血清中的弹性蛋白酶、粉尘螨特异性IgG、粉尘螨特异性IgE,以及血清中的IL-4、IFN-γ,并对支气管肺组织进行病理学检查.结果:粉尘螨抗原致敏小鼠血清中粉尘螨特异性IgE、IL-4水平明显升高,粉尘螨特异性IgG水平和IFN-γ含量明显降低,BALF中弹性蛋白酶活性、粉尘螨特异性IgE水平升高,与正常对照组相比具有显著性差异;致敏小鼠气道中产生大量炎性渗出液.灌服粉尘螨抗原PLGA微球减敏后,血清中粉尘螨特异性IgE、IL-4水平下降,粉尘螨特异性IgG水平、IFN-γ含量明显升高,BALF中弹性蛋白酶活性、粉尘螨特异性IgE水平明显降低,与粉尘螨抗原致敏模型组相比具有显著性差异(P<0·05);气道中渗出液明显减少,粉尘螨特异性IgG水平无明显差异;而灌服等剂量的粉尘螨(浸液)抗原后对致敏小鼠无明显疗效.结论:直径为7~10μm、10μg/10g体重的粉尘螨抗原PLGA微球对致敏小鼠具有减敏作用,是一种新型的治疗粉尘螨过敏性哮喘的口服脱敏缓释制剂.  相似文献   

3.
王丽峰 《陕西医学杂志》2011,40(10):1333-1334
目的:探讨血清特异性IgE检测在支气管哮喘诊断、预防及流行病学研究中的意义。方法:对52例支气管哮喘患者进行血清吸入性过敏原特异性IgE监测,对不同过敏原的定量及阳性率进行比较,并观察季节性致敏原谱的变化。结果:屋尘螨、粉尘螨及蒿花粉的特异性IgE定量较高,屋尘、蒿花粉及粉尘螨的IgE阳性率较高。屋尘螨和粉尘螨在4~10月特异性IgE阳性率为51.4%,在11~3月特异性IgE阳性率为53.3%,两组间差异无统计学意义。蒿花粉、桦木花粉、艾草花粉的特异性IgE阳性率在两组间差异有统计学意义(P<0.05)。狗毛和猫毛在4~10月特异性IgE阳性率分别为10.8%和5.4%,在11~3月阳性率分别为20.0%和26.7%,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:支气管哮喘过敏原特异性IgE增高以屋尘螨、粉尘螨和蒿花粉多见,且致敏原谱呈季节性变化,春夏季花粉致敏比率上升,秋冬季动物毛发致敏比率上升,而螨类是引起常年过敏的主要因素,故应提早季节性脱敏,避免接触致敏原,防止复发。  相似文献   

4.
目的:初步探讨补气散寒方对变应性鼻炎(AR)小鼠模型的作用及可能机制。方法:将BALB/c小鼠随机分为空白对照组、模型组、顺尔宁组及补气散寒方低、中、高浓度组,每组10只。采用卵清蛋白(OVA)致敏建立AR小鼠模型,分别予补气散寒方或孟鲁司特钠灌胃治疗1周,观测记录小鼠症状学积分,观察鼻黏膜组织学改变,血清总免疫球蛋白E(IgE)、OVA特异性IgE以及白介素17A(IL-17A)、白介素33(IL-33)水平。结果:补气散寒方能显著降低变应性鼻炎小鼠鼻部症状,减轻变应性鼻炎所导致的体质量、胸腺质量、胸腺指数的增加,能显著降低血清总IgE、OVA特异性IgE水平,以及降低胸腺中IL-17A、IL-33含量。结论:补气散寒方对AR小鼠疗效确切,其可能通过降低血清总IgE、特异性IgE水平、降低IL-17A水平而发挥治疗变应性鼻炎的效应。  相似文献   

5.
目的 探讨以改组尘螨Ⅱ类变应原基因Der f2和Der p2后表达的蛋白为变应原,对小鼠哮喘模型的特异性免疫治疗效果。方法 随机将160只清洁级BALB/c小鼠分为PBS组(阴性对照组),Der f2和Der p2免疫治疗组(阳性对照组),哮喘组,改组变应原免疫治疗M01、M03、M08、M10蛋白治疗组。用尘螨提取液于0、7、14d腹腔注射致敏激发BALB/c小鼠,第21天雾化吸入激发,连续7d,其中各免疫治疗组于第25~27天雾化前30min分别用Der f2、Der p2和改组变应原进行特异性免疫治疗,PBS组则用PBS进行腹腔注射和雾化吸入。最后1次雾化24h后,引颈处死。分别观察肺组织病理变化、支气管肺泡灌洗液(BLAF)白细胞计数,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定BLAF和脾细胞培养上清液细胞因子IL-4、IL-17和IFN γ的含量及血清中特异性IgG1、IgE抗体水平变化。结果 与哮喘组比较,改组变应原免疫治疗组和阳性治疗组肺部炎症显著减轻, BALF中的总细胞数及嗜酸性粒细胞数,血清中抗原特异性IgG1、IgE抗体均显著降低;免疫治疗组(包括阳性对照)的BALF和脾细胞培养上清液中的细胞因子IL-4、IL-17均明显降低,IFN-γ含量显著升高。结论 通过基因改组获得的尘螨Ⅱ类变应原改组疫苗免疫治疗小鼠哮喘,可有效降低尘螨引起的小鼠肺部炎症。  相似文献   

6.
目的 探讨灌服粉尘螨(抗原)PLGA微球减敏治疗对粉尘螨(抗原)致敏小鼠肺部变应性炎症的影响。方法 粉尘螨(抗原)致敏C57-BL/6小鼠,灌服粉尘螨(抗原)PLGA微球减敏后,检测小鼠BALF中弹性蛋白酶、粉尘螨特异性IgG、粉尘螨特异性IgE的变化,并对支气管肺组织进行病理学检查。结果 粉尘螨(抗原)致敏小鼠BALF中弹性蛋白酶活性、粉尘螨特异性IgE水平升高,与正常对照组相比具有显著性差异(P<0.01);致敏小鼠气道中产生大量炎性渗出液。灌服粉尘螨(抗原)PLGA微球减敏后,BALF中粉尘螨特异性IgE水平降低,与粉尘螨(抗原)致敏模型组相比具有显著性差异(P<0.05);BALF中弹性蛋白酶活性亦有降低,气道中渗出液明显减少,粉尘螨特异性IgG水平无明显差异。结论 粉尘螨(抗原)PLGA微球可以调节肺局部免疫应答,减轻粉尘螨(抗原)致敏所致肺部变应性炎症。  相似文献   

7.
目的 探讨多重致敏变应性鼻炎(AR)应用单一过敏原舌下免疫治疗和多种过敏原皮下免疫治疗两种方法的疗效及其临床意义.方法 60例多重致敏AR纳入开放性对照研究,皮内试验或体外实验显示粉尘螨合并一种以上过敏原阳性,分为两组,每组30例;一组应用多种过敏原皮下免疫治疗(SCIT),另一组应用单一粉尘螨滴剂舌下免疫治疗(SLIT),连续治疗3年,于治疗前、治疗第1、2、3年运用记分法和视觉模拟量表进行鼻部症状评分.结果 多种过敏原 SCIT和单一过敏原SLIT免疫治疗第1、2、3年与治疗前比较,两组的喷嚏、流涕、鼻塞和鼻痒症状评分以及鼻部症状总评分(包括记分法和视觉模拟量表)均明显下降,差异有统计学意义(P<0. 01),SCIT和SLIT免疫治疗2年、3年与1年比较,差异有统计学意义(P<0.01),第2年与第3年比较,差异无统计学意义.SCIT治疗第1、2、3年总有效率(60. 0%~66. 7%)均高于 SLIT(40. 0%~56. 7%), SCIT 显效率(10.0%~33.3%)均高于 SLIT(3.3%~23. 3%),但两组鼻部症状评分差异无统计学意义.结论 多重致敏AR运用多重致敏原SCIT和单一粉尘螨SLIT,在免疫治疗第1、 2.3年均有效,在免疫治疗第2年时治疗效果趋于稳定,多重致敏原皮下免疫治疗显效率及总有效率均高于单一粉尘螨舌下免疫治疗,多重致敏原皮下免疫治疗可能优于单一致敏原舌下免疫治疗.  相似文献   

8.
目的探讨特异性免疫治疗对尘螨及花粉多重致敏变应性鼻炎的疗效和皮下注射免疫治疗安全性评估。方法采用随机对照临床研究,入组的55例变应性鼻炎病人被随机分成特异性皮下免疫治疗组(过敏原注射液)和抗过敏药物治疗组(可选择抗过敏药物,包括:鼻喷激素、二代抗组胺剂和白三烯受体拮抗剂),对两组治疗前后鼻部症状、抗过敏药物及日常生活质量评分进行评估。同时观察并评估在特异性皮下免疫治疗过程中产生的不良反应。结果经治疗特异性免疫治疗组、抗过敏药物治疗组各项指标(症状评分、药物评分及生活质量评分)均较用药前降低,差异有统计学意义(Z__(治疗组组内)_=4.440、4.469、4.522、4.387、4.424、4.413、4.507、4.463、4.523、4.540、4.490、4.562、4.523,Z__(对照组组内)_=4.506、4.453、4.400、4.472、4.419、4.123、3.606、4.264、4.243、4.359、4.491、3.606、4.000,P均0.05)。特异性免疫治疗组评分也低于抗过敏药物治疗组,差异有统计学意义(Z=5.184、6.080、3.581、5.017、4.562、2.760、2.843、2.532、3.132、4.096、4.659,P均0.05)。在皮下免疫治疗期内仅少数病人产生局部不良反应,无明显全身严重不良反应。结论在尘螨和花粉多重致敏的变应性鼻炎病人中,使用尘螨和花粉联合免疫治疗安全、有效,比单纯使用药物治疗效果更佳,值得临床推广。  相似文献   

9.
目的 探讨鼻腔吸入γ干扰素(IFN-γ)对大鼠变应性鼻炎(AR)的治疗作用.方法 将32只大鼠随机分为4组(每组8只大鼠),采用卵白蛋白、氢氧化铝建立AR模型.A组:以生理盐水代替卵白蛋白(OVA)致敏和激发大鼠;B组:OVA 致敏和激发大鼠,鼻腔吸入磷酸盐缓冲液;C组:OVA致敏和激发大鼠,鼻腔吸入IFN-γ;D组: OVA致敏和激发大鼠,鼻腔吸入丙酸倍氯米松.第39天利用酶联免疫法测血清中IL-4 和IL-5的含量及血浆IgE水平.结果 C组血清IL-4和IL-5的含量及血浆中总IgE、卵白蛋白特异性IgE均低于B 组(P值均<0.01).结论 鼻腔吸入IFN-γ可抑制AR大鼠IL-4 和IL-5 的合成,降低血浆中总IgE和OVA特异性IgE 水平,对AR具有一定的防治作用.  相似文献   

10.
目的提取和分离纯化白花鬼针草花粉主要过敏原,并鉴定主要过敏原的致敏性。方法提取白花鬼针草花粉蛋白粗提液,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离粗提液蛋白组分并测定其分子质量,经离子交换层析法分离纯化几类主要的蛋白,Western blotting分别检测其与花粉过敏患者血清IgE结合情况及10位正常人阴性混合血清结合情况,对比鉴定每种主要蛋白质致敏原的致敏性。结果 SDS-PAGE结果示:在12.5~120ku之间广泛分布了20余条蛋白条带,其中主带7条,分子质量在35~70ku和10~15ku的区带蛋白含量最为丰富,余下的范围内还有约10余条次带。Westen-blotting检测示:白花鬼针草花粉变应原的致敏性强,与花粉过敏患者血清特异性IgE结合大。离子交换层析出6类主要变应原蛋白,其分子质量分别为70、65、54、49、39及33ku;阴性对照组Westen-blotting在70ku处有弱显色。结论白花鬼针草花粉的主要过敏原为70、65、54、49、39及33ku;70ku变应原致敏性最强。  相似文献   

11.
《延边医学院学报》2015,(3):181-184
[目的]探讨反复臭氧暴露对小鼠实验性变应性鼻炎的影响.[方法]将雌性BALB/c实验小鼠分为对照组、卵清蛋白喷雾组、卵清蛋白喷雾/臭氧暴露组、卵清蛋白全身致敏组及卵清蛋白全身致敏/臭氧暴露组,给予相应处理.用ELISA法测定总血清中IgE,anti-OVA IgE,anti-OVA IgG1含量及鼻腔灌洗液中IL-4,IL-5,INF-γ水平.用Luna染色法测定鼻黏膜中嗜酸性粒细胞浸润数量.[结果]单独卵清蛋白喷雾暴露诱导较弱过敏反应,与臭氧同时暴露可明显升高血清IgE,anti-OVA IgE,anti-OVA IgG1水平,从而加剧免疫反应,且显著增加鼻腔灌洗液中Th2细胞因子水平及鼻黏膜中嗜酸性粒细胞数目;卵清蛋白喷雾/臭氧暴露组血清IgE,anti-OVA IgE水平显著低于卵清蛋白全身致敏组(P<0.05);全身致敏小鼠卵清蛋白喷雾与臭氧同时暴露可加重过敏反应.[结论]臭氧暴露诱导或加重过敏反应,其可能机制是通过抗原特异性抗体及Th2细胞因子生成增多而引起.  相似文献   

12.
RNA致敏树突状细胞治疗胶质瘤的实验研究   总被引:2,自引:2,他引:2  
目的:肿瘤RNA致敏树突状细胞(DC)治疗颅内荷瘤小鼠,观察DC疫苗对脑胶质瘤的治疗作用,探讨免疫反应的机理,为DC疫苗的临床应用提供实验基础。方法:用G422胶质母细胞瘤RNA冲击致敏DC制成DC疫苗,检测DC疫苗的CTL活性,瘤内和皮下两种途径注射荷瘤小鼠以进行免疫治疗,观察小鼠生存期,并与PBS、单纯DC组进行比较,同时检测血清IFN-γ、IL-2、IL-10、IL-4等细胞因子,并行病理检查。结果:DC疫苗的CTL活性明显高于对照组(P<0.01)。两种途径注射DC疫苗,治疗组小鼠生存时间均明显延长(P<0.01),血清IFN-γ显著升高(P<0.01),IL-10明显下降(P<0.05),病理提示肿瘤出现坏死。两种注射途径间以上指标无明显差异。结论:肿瘤RNA冲击致敏DC注射荷瘤小鼠具有明显的免疫治疗作用,能显著延长动物生存期,并能诱导特异性抗肿瘤细胞免疫反应,其机理主要是Th1细胞介导的细胞免疫反应,且免疫反应的程度与注射途径无关。  相似文献   

13.
目的分析泰安地区不同年龄段支气管哮喘儿童过敏原特点,为环境控制和免疫治疗提供依据。方法应用免疫印迹法,对诊断为支气管哮喘儿童62例(≤3岁组26例;>3岁组36例)进行过敏原总IgE、特异性IgE浓度检测。结果总IgE检出率≤3岁组、>3岁组分别为19.23%、63.89%,两组差异有统计学意义(P<0.05)。1个以上过敏原检出率≤3岁组、>3岁组分别为76.92%(20/26)、88.9%(32/36),两组差异无统计学意义(P>0.05)。结论支气管哮喘儿童过敏原总IgE检出率随年龄增长有逐渐增长的趋势,吸入性过敏原是主要致敏因素以屋尘、尘螨为主。≤3岁屋尘是主要致敏因素,>3岁尘螨是主要致敏因素。  相似文献   

14.
目的 建立变应性鼻炎的豚鼠模型,探讨新型变应原疫苗的治疗效果.方法 70只豚鼠随机分为5组,以卵白蛋白为致敏原建立豚鼠变应性鼻炎模型,将泛过敏原与白介素IL-10的重组偶联物作为新型变应原疫苗,经鼻腔给药治疗,观察豚鼠抓鼻、打喷嚏等鼻部症状及其鼻黏膜形态.结果 豚鼠变应性鼻炎模型成功建立,新型变应原疫苗LTT可显著减轻变应性鼻炎鼻部症状(P<0.01),改善鼻黏膜形态结构,减少炎症细胞浸润,具有明显的治疗效果.结论 LTT作为新型免疫疫苗,可有效治疗变应性鼻炎,预示该类疫苗在免疫治疗上具有较好的前景.  相似文献   

15.
目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染时间对花粉诱导的呼吸道过敏性反应是否有影响作用。方法用花粉抽提物JCP致敏BALB/c鼠,致敏前或后经鼻感染RSV,提取肺组织细胞,体外培养,ELISA试剂盒检测培养上清中细胞因子水平;姬姆萨染色法分类并计数肺组织内浸润细胞数量;ELISA方法检测血清特异性抗体IgE水平。结果JCP致敏鼠肺组织细胞培养上清中Th2型细胞因子IL-4明显升高,血清JCP特异性IgE抗体水平亦显著上升,提示JCP是Th2型免疫应答的诱导剂。致敏前RSV感染诱导BALB/c鼠肺组织细胞合成分泌Th1型细胞因子,下调JCP诱导的Th2型免疫应答,降低致敏鼠肺组织炎性细胞的浸润,减少前炎性因子TNF-α及趋化因子IL-8的分泌,降低血清JCP特异性IgE抗体水平。结论在某种条件下,RSV感染对花粉过敏原诱导的过敏性反应有一定的保护作用。  相似文献   

16.
目的了解哮喘患儿过敏原分布。方法128例哮喘患儿分别进行血清吸入性和食入性过敏原特异性IgE检测。结果哮喘患儿吸入性过敏原特异性IgE阳性112例,阳性率为87.5%,78.1%为两种或两种以上过敏原特异性IgE阳性;食入性过敏原特异性IgE阳性29例,阳性率为22.6%,32.8%为两种或两种以上过敏原特异性IgE阳性。结论哮喘患儿以吸入性过敏原为主,多数为多种过敏原混合致敏,近年夏秋季发病率升高,夏秋季杂草花粉为其过敏原。  相似文献   

17.
喘息患儿324例过敏原检测分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
王晖 《中国医刊》2007,42(11):47-48
目的研究喘息患儿血清特异性IgE(sIgE)的变化,了解喘息患儿过敏原分布情况,为其防治提供科学依据。方法采用体外特异性过敏原检测试剂盒对324例喘息患儿进行吸入过敏原(IVT701)和食物过敏原(IVT702)检测。结果①婴幼儿(≤3岁)和年长儿(>3岁)总IgE阳性率分别为61.29%和95.08%(χ2=44.97,P<0.01);②支气管哮喘患儿血清总过敏原和单一过敏原均高于喘息性支气管炎患儿;③吸入过敏原中尘螨、霉菌、豚草花粉年长儿阳性率明显高于婴幼儿;食物过敏原中鱼虾蛋白阳性率最高,蛋黄蛋白阳性率婴幼儿明显高于年长儿。婴幼儿以食物过敏原为主,年长儿以吸入过敏原为主。结论本地区尘螨、霉菌、豚草花粉、鱼虾蛋白为常见过敏原。随着年龄增长,食入性过敏反应逐渐减少,吸入性过敏反应相对增加。过敏原分布随年龄、地区、气候不同而有差异。明确过敏原对特异性免疫治疗具有指导意义。  相似文献   

18.
目的 建立葎草花粉粗浸液诱导的小鼠变态反应气管炎症动物模型.方法 制备葎草花粉粗浸液,将40只清洁级雌性BALB/c小鼠按随机数字表法分为4组,每组10只.①空白对照组:PBS+氢氧化铝致敏激发;②低剂量组:100 μg葎草粗浸液+氢氧化铝致敏激发;③中剂量组:200 μg葎草粗浸液+氢氧化铝致敏激发;④高剂量组:300 μg葎草粗浸液+氢氧化铝致敏激发.通过HE染色观察小鼠肺部炎症和黏液分泌,支气管肺泡灌洗液中细胞总数和细胞分类,酶联免疫吸附试验检测BALF,脾组织匀浆上清的IL- 4、IFN-γ和血清抗原特异的抗体验证哮喘动物模型.结果 随着抗原浓度的升高,肺部病理改变呈明显的变态反应炎症;高剂量组小鼠支气管肺泡灌洗液中的细胞总数为(210.75±78.80)×106/L、巨噬细胞数为(48.65±3.27)%、EOS数为(24.37±4.28)%、IL- 4、血清抗原特异性IgE抗体、IgG1抗体明显高于空白对照组(P<0.05);支气管肺泡灌洗液﹑脾组织匀浆上清的IFN-γ较空白对照组下降(P<0.05).结论 葎草花粉成功构建小鼠变态反应气道炎症动物模型.  相似文献   

19.
目的:研究芦荟多糖对卵清蛋白(OVA)致敏小鼠的脱敏效果.方法:50只BABL/c小鼠随机分为5组,分别为正常组(A),模型组(B),小、中、高剂量组(C,D,E)组.采用OVA加Al(OH)3注射法复制小鼠OVA致敏模型,期间C,D,E组灌服不同剂量的芦荟多糖干预.24 d后检测小鼠受OVA激发后的反应、肺泡灌洗液(BALF)中总细胞及嗜酸性粒细胞(EOS)数量、肺组织丙二醛(MDA)及一氧化氮(NO)含量、血清特异性IgE,BALF及淋巴细胞培养液中的IL-4,IFN-γ含量.结果:芦荟多糖能够减轻致敏小鼠受OVA激发所引起的症状,能够下调BALF及淋巴细胞培养液中的IL-4水平,提升IFN-γ,降低肺泡灌洗液(BALF)中总细胞及EOS数量,使肺组织中与炎症相关的MDA及NO浓度降低,下调血清中特异性IgE.结论:芦荟多糖能够纠正致敏小鼠体内的免疫失衡,对致敏小鼠有一定的治疗作用.  相似文献   

20.
目的?探讨消风宣窍汤对变应性鼻炎(AR)小鼠治疗效应及其相关机制。方法?48只BALB/c小鼠随机分为正常组,模型组,消风宣窍汤组,孟鲁斯特组,每组12只。采用OVA致敏建立小鼠AR模型。灌胃治疗1周,观测小鼠鼻部症状积分,体质量、胸腺和脾脏质量及指数,鼻黏膜组织学改变,血清总IgE、OVA特异性IgE以及胸腺IL-4、IL-17、IL-33、IFN-γ水平。结果?消风宣窍汤能够显著降低AR小鼠鼻部症状,减轻变应性反应引起的体质量、胸腺质量、胸腺指数的增加,能够显著减少血清总IgE、OVA特异性IgE的水平,抑制胸腺IL-4、IL-17、IL-33、IFN-γ产生,且在降低胸腺IL-33水平方面,消风宣窍汤效果优于西药孟鲁斯特组。结论?消风宣窍汤对AR小鼠疗效确切,其可能通过抑制胸腺细胞因子水平发挥抗AR效应。   相似文献   

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