重组人红细胞生成素对癫痫持续状态大鼠海马p-Akt和XIAP的影响

目的 观察重组人红细胞生成素(recombinant human EPO,rHuEPO)对戊四氮(Pentylenetetrazol,PTZ)点燃的癫痫持续状态(status epilepticus,SE)的SD大鼠海马神经元磷酸化蛋白激酶B(p-PKB/p-Akt)和X-连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibtor of apoptosis protein,XIAP)表达的影响,应用磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidyl inositol 3 kinase,P13K)抑制剂LY294002进一步探讨rHuEPO作用的可能机制.方法 采用PTZ制作大鼠SE模型,将点燃后的大鼠随机分为PTZ组(PTZ+NS)、rHuEPO组(PTZ+rHuEPO)、LY294002组(PTZ+LY294002+rHuEPO)、LY294002溶剂二甲基亚砜(DMSO)对照组(PTZ+DMSO+rHuEPO),正常对照组腹腔注射生理盐水(n=35).观察大鼠行为学和脑电图的改变;TUNEL法检测海马神经细胞的凋亡情况;免疫组织化学法观察p-Akt、XIAP的表达;RT-PCR法检测各组大鼠海马XIAPmRNA的表达;Western blot法检测各组大鼠海马Akt、P-Akt蛋白的表达.结果 正常对照组仅见少量凋亡细胞,p-Akt和XIAP阳性细胞、p-Akt蛋白、XIAP mRNA均有少量表达;PTZ组与rHuEPO组、LY294002组、LY294002溶剂DMSO对照组比较,p-Akt和XIAP阳性细胞数、P-Akt蛋白表达及XIAP mRNA表达均减少(P<0.05),凋亡细胞数增加(P<0.05);rHuEPO组、LY294002溶剂DMSO对照组与LY294002组比较,p-Akt和XIAP阳性细胞数、p-Akt蛋白表达及XIAP mRNA表达均增加(P<0.05),凋亡细胞数减少(P<0.05).结论 rHuEPO在SE模型中活化了PI3K/Akt,提高p-Akt蛋白的表达,进而对线粒体凋亡途径的相关调控因子XIAP的表达进行了调控,从而介导线粒体凋亡途经,发挥抗凋亡、促存活的神经保护作用.     

重组人红细胞生成素对大鼠癫痫持续状态诱导的海马神经元凋亡及p-Akt表达的影响

目的 观察重组人红细胞生成素(Recombinant human erythropoietin,rHuEPO)对戊四氮(pentylenetetrazol,PTZ)点燃的癫痫持续状态(status epilepticus,SE)大鼠海马神经元凋亡及磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)表达的影响,应用磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidyl inositol 3 kinase,PI3K)抑制剂LY294002进一步探讨rHuEPO作用的可能机制.方法 采用PTZ点燃SD大鼠制成SE模型,将75只SD大鼠随机分为正常对照组(A组)、PTZ组(B组)、rHuEPO组(C组)、LY294002组(D组)、LY294002溶剂DMSO对照组(E组),每组15只,检测大鼠行为学和脑电图的改变及HE染色观察海马病理学的改变;用TUNEL方法检测海马神经细胞的凋亡情况;免疫组织化学法观察磷酸化蛋白激酶B(P-PKB/p-Akt)的表达.结果 A组海马区凋亡细胞数目(7.2±1.0)个与B、C、D、E[分别为(26.7±3.5)、(16.6±1.1)、(21.1±2.7)和(17.5±1.9)个]组相比差异均有统计学意义(P<0.01);C、D、E组凋亡细胞数目与B组相比差异均有统计学意义(P<0.05);D组凋亡细胞数目与C、E组比较差异均有统计学意义(P<0.05).A组p-Akt的阳性细胞数(21.4±1.2)与B、C、D、E组[分别为(26.6±2.5)、(54.8±5.1)、(33.1±4.9)、(52.4±4.6)]比较差异均有有统计学意义(P<0.01),且后者在胞核中也开始出现阳性信号;C、D、E组p-Akt的阳性细胞数与B组比较差异均有统计学意义(P<0.05);C、E组p-Akt的阳性细胞数与D组比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论 rHuEPO具有抗凋亡、促存活的神经保护作用,PI3K/Akt信号通路可能是rHuEPO发挥神经保护作用的通路之一.其作用机制可能是rHuEPO激活了重要的存活通路PI3K/Akt途径,与提高Akt的活性有关,借以发挥神经保护作用.     

重组人红细胞生成素对癫痫持续状态大鼠海马p-Akt 和caspase-9 的影响及作用机制

目的观察重组人红细胞生成素(rHuEPO)对戊四氮(PTZ)点燃的癫痫持续状态(status epilepticus,SE)的SD大鼠海马神经元磷酸化蛋白激酶B(p-PKB/p-Akt)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(Caspase-9)表达的影响,应用磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂LY294002进一步探讨rHuEPO作用的可能机制。方法采用PTZ点燃大鼠SE模型,将175只大鼠随机分为正常对照组(给予生理盐水腹腔注射)、PTZ组(腹腔注射PTZ点燃SE发作后30min腹腔注射生理盐水)、rHuEPO组(SE发作后30min腹腔注射rHuEPO5000U/kg)、LY294002组(SE发作后10min脑室注射5μlLY294002,SE发作后30min腹腔注射rHuEPO5000U/kg)、二甲基亚砜(DMSO)组(SE发作后10min脑室注射5μlDMSO,SE发作后30min腹腔注射rHuEPO5000U/kg),并给予相应处理。检测大鼠行为学和脑电图的改变,免疫组织化学法观察p-Akt、caspase-9的表达,RT-PCR方法检测各组大鼠海马caspase-9mRNA的表达;Westernblot...     

促红细胞生成素预处理对锂-匹罗卡品诱导的癫痫持续状态大鼠海马神经元凋亡的影响

目的:探讨重组人促红细胞生成素(rhEpo)预处理对癫痫持续状态(SE)大鼠海马神经元凋亡的影响。方法:应用免疫组化法观察Epo预处理后SE大鼠海马caspase-3的表达情况。结果:rhEpo处理组大鼠CA1/CA3区、齿状回(DG)的caspase-3免疫阳性细胞的表达分别比癫痫组减少18%和26%,二者有显著性差异(P<0.05)。结论:腹腔注射Epo可减少SE大鼠海马神经元caspase-3表达,表明Epo对SE大鼠海马可经抗凋亡通路发挥神经保护作用。     

重组人红细胞生成素对大鼠急性心肌梗死的影响

目的:观察重组人红细胞生成素(rHuEPO)对心肌梗死大鼠心功能和心肌梗死面积的影响,并探讨其机制. 方法:16只Wistar大鼠随机分心肌梗死组和治疗组,结扎左冠前降支制备急性心肌梗死模型,治疗组围手术期连续3 d腹腔注射rHuEPO[3000 IU/(kg*d)], 14 d后以相同剂量再连续注射3 d;术后2 d及3 wk二维超声心动图检查心功能;术后3 wk处死大鼠,TTC测定心肌梗死面积,免疫组化检测缺血区毛细血管密度、Bcl-2和Bax的表达. 结果: 术后2 d两组之间心功能无明显差异,术后3 wk对照组左室射血分数(LVEF)和左室收缩末期内径(LVDs)改善程度明显劣于治疗组(P<0.05). 与对照组相比,术后3 wk治疗组梗死面积明显减少[分别为(26.0±0.9)%,(28.1±1.5)%, P<0.05]、毛细血管密度显著增加[分别为(10.4±1.5)/视野,(6.3±0.7)/视野,P<0.05],Bcl-2蛋白表达增加(A值分别为0.116±0.005,0.103±0.007, P<0.05),而Bax表达减弱(A值分别为0.125±0.010,0.147±0.014,P<0.05). 结论:rHuEPO能缩小大鼠心肌梗死面积,改善心肌梗死后心功能,其机制可能与减少缺血区心肌细胞凋亡以及促进缺血区毛细血管生成有关.     

重组人促红细胞生成素对大鼠创伤性脑损伤细胞凋亡的影响

目的研究重组人促红细胞生成素（rhEPO）对大鼠创伤性脑损伤的创伤灶周围神经细胞凋亡的影响。探讨rhEPO对大鼠创伤性脑损伤的保护作用。方法采用改进的Feeney氏法制作脑创伤模型，而后实验组立即腹腔注射5000u／kg rhEPO，对照组和假手术组注射生理盐水。于伤后12h、48h、120h处死动物，制作脑切片后行HE染色、TUNEL染色。结果rhEPO干预组与对照组、假手术组比较，各时间点rhEPO治疗组创伤灶周围TUNEL阳性细胞数比对照组显著减少，差异有高度统计学意义（P〈0．01）。结论rhEPO可以抑制神经细胞凋亡，对大鼠创伤性脑损伤具有保护作用。     

重组人红细胞生成素对心肌梗死治疗作用的实验研究

目的观察重组人红细胞生成素(rHu-EPO)对大鼠心肌梗死的治疗作用并探讨其机制。方法体外培养出生3 d 内 SD 大鼠心肌细胞,缺氧培养和 H_2O_2模拟氧化应激反应诱导凋亡,培养体系中加入 rHu-EPO,荧光染色观察凋亡率的变化。32只成年 SD 大鼠分空白组8只、心肌梗死组12只和治疗组12只;空白组开胸但不结扎冠脉,心肌梗死组和治疗组结扎左冠前降支制备心肌梗死的模型,治疗组每天腹腔注射5000 IU/kg rHu-EPO 共7 d,14 d 后所有大鼠检测血流动力学指标,心脏切片原位末端标记(TUNEL)检测凋亡,免疫组化检测 Bcl-2、Bax 表达。结果 rHu-EPO 使心肌细胞缺氧诱导的凋亡率由47.92%±5.87%下降为28.21%±4.35%;氧化应激反应所诱导的凋亡率由60.42%±5.54%下降为43.40%±5.39%;腹腔注射 rHu-EPO 使得心肌梗死后大鼠心功能保存较好,动脉收缩压、平均动脉压、左心室收缩压、±dp/dt_(max)都有所提高,同时,左心室舒张压、左心室舒张末期压下降;细胞凋亡率由1.65%±0.50%减少为0.84%±0.30%;Bcl-2蛋白表达率由0.96%±0.37%增加为1.43%±0.28%;Bax 蛋白表达率由1.34%±0.47%减少为0.68%±0.30%。结论rHu-EPO 可抑制心肌细胞凋亡、保存心功能,可能是通过下调 Bax 表达和上调 bcl-2表达实现的。     

重组人促红细胞生成素治疗肾间质纤维化的作用机制研究

目的 探讨重组人促红细胞生成素（rHuEPO）治疗肾间质纤维化（RIF）的作用机制。方法 2014年7月-2015年6月,将人肾小管上皮细胞（HK-2细胞）随机分为7组：空白对照组（E1组）：未加任何刺激物;rHuEPO对照组（E2组）：rHuEPO终浓度为20 U/ml;人纯化清蛋白诱导组（E3组）：人纯化清蛋白终浓度为5 mg/ml;E4组：加人纯化清蛋白（5 mg/ml）和rHuEPO（5 U/ml）;E5组：加人纯化清蛋白（5 mg/ml）和rHuEPO（10 U/ml）;E6组：加人纯化清蛋白（5 mg/ml）和rHuEPO（20 U/ml）;Rho相关卷曲螺旋形成的蛋白激酶（ROCK）抑制剂Y27632组（E7组）：加ROCK抑制剂Y27632（10 μmol/L）,30 min后加人纯化清蛋白（5 mg/ml）。采用细胞增殖试验检测刺激16、24、48、72 h时各组细胞增殖数,反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）法检测RhoA、ROCK mRNA表达水平,细胞免疫荧光法检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）表达水平,酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测纤维连接蛋白（FN）表达水平。结果 16 h时,各组细胞增殖数比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。24、48、72 h时,各组细胞增殖数比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;其中E3~E6组高于E1组、E2组,E4~E6组高于E3组,E7组低于E3组,E5组、E6组高于E4组,E6组高于E5组（P＜0.05）。各组RhoA mRNA表达水平比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;其中E3~E6组高于E1组、E2组,E4~E6组低于E3组,E5组、E6组低于E4组,E6组低于E5组（P＜0.05）。各组ROCK mRNA表达水平比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;其中E3~E6组高于E1组、E2组,E4~E7组低于E3组,E5组、E6组低于E4组,E6组低于E5组（P＜0.05）。各组α-SMA表达水平比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;其中E3~E5组高于E1组、E2组,E4~E7组低于E3组,E5组、E6组低于E4组,E6组低于E5组（P＜0.05）。各组E-cadherin表达水平比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;其中E3~E6组低于E1组、E2组,E4~E7组高于E3组,E5组、E6组高于E4组,E6组高于E5组（P＜0.05）。各组FN表达水平比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;其中E3~E5组高于E1组、E2组,E4~E7组低于E3组,E5组、E6组低于E4组,E6组低于E5组（P＜0.05）。E3组、E4组、E5组、E6组RhoA mRNA与ROCK mRNA均呈正相关（P＜0.05）。结论 人纯化清蛋白能诱导HK-2细胞发生上皮细胞-间充质细胞转分化（EMT）,进而发生RIF,而rHuEPO通过阻断EMT的RhoA/ROCK信号转导通路从而抑制RIF发生,且在一定范围内rHuEPO水平越高,其抑制作用越强。     

重组人红细胞生成素治疗肿瘤化疗相关贫血的作用

贫血是晚期肿瘤病人的常见并发症 ,可由多方面的因素造成。而化疗对骨髓造血系统的抑制 ,进一步引起或加重肿瘤病人的贫血状态。重组人红细胞生成素 (ｒｈＥＰＯ)能够以非输血治疗形式促进红细胞的生成 ,以纠正贫血 ,从而降低病人对异体输血的需求 ,改善生活质量。一、对象与方法1 对象 :恶性肿瘤病人 12 1例 ,男 6 2例 ,女 5 9例 ,年龄18～ 70岁。均经组织学或细胞学证实的肺癌、乳腺癌、胃肠道肿瘤、肝癌、淋巴瘤、妇科肿瘤、结直肠癌等。入选条件为血红蛋白 (Ｈｂ)≤ 10 5ｇ/Ｌ或红细胞压积 (Ｈｃｔ)≤ 0 .3,或Ｈｂ在化疗后降低≥ 15ｇ/…     

促红细胞生成素对阿尔茨海默病样大鼠记忆能力及凋亡相关蛋白的影响

目的探讨促红细胞生成素(EPO)对阿尔茨海默病(AD)样大鼠记忆能力和凋亡相关蛋白的影响。方法雄性Wistar大鼠应用Y迷宫进行空间定向学习和记忆训练5 d后,将达到学会标准的48只大鼠随机分为4组:正常对照组、生理盐水(NS)组、模型组和EPO治疗组,每组12只。其中NS组大鼠双侧海马注射NS各5μL,模型组和EPO治疗组大鼠双侧海马注射凝聚态β-淀粉样蛋白(Aβ)各5μL造模。EPO治疗组大鼠从造模手术当天按5 000 IU·kg-1腹腔注射EPO,隔日1次。术后第10天Y迷宫法检测各组大鼠空间定向学习和记忆能力,透射电镜观察海马线粒体和突触结构的改变,采用免疫组织化学技术检测各组大鼠海马组织Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果与NS组比较,模型组大鼠学习记忆能力显著下降(P<0.05);与模型组比较,EPO治疗组大鼠Y迷宫作业尝试次数减少,错误反应次数减少,全天总反应时间缩短,差异有统计学意义(P<0.05)。透射电镜结果显示,正常对照组和NS组大鼠神经细胞结构完整,线粒体膜、嵴完整,神经轴突和神经突触结构完整;EPO治疗组大鼠海马线粒体和神经突触基本正常;模型组大鼠海马线粒体结构破坏,线粒体肿胀,线粒体嵴断裂,结构紊乱,神经突触密度降低,突触膜增厚,突触间隙不清,突触小泡数量减少。与NS组比较,模型组大鼠海马Bcl-2蛋白表达减弱,Bax蛋白表达增强;与模型组比较,EPO治疗组大鼠海马Bcl-2蛋白表达增强,Bax蛋白表达减弱,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论EPO可以显著改善AD样大鼠的空间记忆能力,减轻Aβ对大鼠海马超微结构的破坏。EPO可能通过调节Bcl-2/Bax水平抑制神经元的凋亡,这可能是EPO改善AD大鼠认知功能障碍的机制之一。     

红细胞生成素对大鼠心肌细胞凋亡相关基因表达的影响

目的探讨红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对大鼠心肌缺血-再灌注损伤(ischemia-reperfu-sioninjury,IRI)时心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax基因及蛋白表达的影响。方法35只大鼠随机分成4组:假手术组(SHAM)、缺血再灌注组(IR)、红细胞生成素干预1组(EPO1)和红细胞生成素干预2组(EPO2)。以左冠脉穿线结扎法制备心肌缺血再灌注模型,造模前24h开始给药。以缺口末端标记法(TUNEL)检测凋亡细胞,S-P免疫组化法检测心肌Bcl-2、Bax蛋白表达,RT-PCR对Bcl-2、Bax的mRNA做半定量分析。结果与IR组相比,EPO干预组的凋亡细胞指数[apoptoticindex,A1,A1(%)=平均光密度×阳性细胞百分比×100]有明显下降。EPO2组的Bcl-2基因及蛋白表达均明显高于IR组[(0.29±0.04)vs(0.10±0.02),P=0,P<0.01;(4.97±1.82)vs(2.12±1.24),P=0.01,P<0.05)];而EPO干预组的Bax基因及蛋白表达与IR组之间并无显著差异。结论EPO干预对大鼠心肌IRI具有显著的抑制细胞凋亡的作用,其机制可能与诱导Bcl-2基因及蛋白表达,提高了Bcl-2/Bax的比值有关。     

重组人促红细胞生成素对压力作用下混合培养视网膜神经细胞凋亡及BCL-2表达的影响

目的 观察重组人促红细胞生成素(rhEPO)对压力作用所致鼠混合培养视网膜神经细胞凋亡的保护作用及可能的机制.方法 将体外混合培养3 d的原代大鼠视网膜神经细胞随机分为对照组、单纯压力组和预处理压力组,预处理压力组分别加入0.15、0.30、0.50 U/ml rhEPO作用24 h后,单纯压力组和预处理压力组均在60 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)压力下培养24 h,然后TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组化和RT-PCR法检测BCL-2蛋白质及mRNA的表达.结果 单纯压力组细胞凋亡指数(AI)显著高于对照组(P<0.01);与单纯压力组比较,各不同浓度rhEPO预处理压力组的AI明显降低,同时BCL-2 mRNA及蛋白的表达均显著增加,差异均有显著性意义(P<0.05或P<0.01),且呈rhEPO浓度依赖性.结论 rhEPO预处理可通过上调细胞凋亡抑制因子BCL-2的表达,从而抑制压力诱导的视网膜神经细胞的凋亡.     

重组人促红细胞生成素对高氧肺损伤新生大鼠细胞凋亡及蛋白激酶B表达的影响

目的支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)是新生儿呼吸系统常见疾病,文中探讨rhEPO对高氧肺损伤新生大鼠肺细胞凋亡和蛋白激酶B(又称Akt)表达的影响,为BPD的防治提供实验依据。方法将新生大鼠给予60%高氧暴露,rhEPO组皮下注射rhEPO,采用TUNEL法检测肺细胞凋亡和RT-PCR法检测Akt mRNA表达水平。结果①高氧组新生大鼠肺细胞凋亡指数为44.312±12.337,明显高于空气组的12.810±4.353(P<0.01);rhEPO组凋亡指数为23.371±9.508,明显低于高氧组(P<0.01)。②高氧组肺组织Akt mRNA表达水平为0.462±0.122,明显低于空气组的1.236±0.357(P<0.01);rhEPO组肺组织Akt mRNA表达水平为0.893±0.235,明显高于高氧组(P<0.01)。结论高氧可引起新生大鼠肺细胞凋亡增多,rhEPO可明显减少肺细胞凋亡,其机制可能与肺组织Akt mRNA表达有关。     

红景天苷对癫痫持续状态大鼠海马神经细胞凋亡的影响

目的:研究红景天苷对癫痫持续状态大鼠海马神经细胞凋亡的影响.方法:50只SD大鼠随机分成5组,每组10只,分别为对照组、癫痫持续状态组(SE组,注射和红景天苷等量的DMSO)和A组、B组、C组(在造模前15 min分别腹腔注射0.5、1.0、1.5 g/kg红景天苷),腹腔内注射氯化锂和匹罗卡品构建癫痫模型,并测定大鼠...     

癫痫持续状态幼鼠海马神经元凋亡及NGF的干预作用研究

目的观察癫痫持续状态(SE)SD大鼠幼鼠的海马区神经细胞的凋亡与Caspase3和Caspase9的表达关系,研究鼠神经生长因子(NGF)对其干预作用。方法采用氯化锂-匹罗卡品方法制备幼鼠SE模型,用TUNNEL染色观察海马区神经细胞凋亡情况,用免疫组化法分别检测Caspase3和Caspase9的表达。结果正常组TUNNEL阳性细胞在各观察点仅少量表达,SE组在8 h明显增加,72 h达到高峰,NGF组表达基本同SE组,但对应时间点显著减少(除4 h外,P<0.05);Caspase3和Caspase9在正常组仅有少量表达,SE组在4 h仅少量增加,24 h达到高峰,NGF组Caspase3、Caspase9在SE后24 h及72 h较SE组显著减少(P<0.01)。结论 SE可致幼鼠海马区神经元凋亡,随时间增加神经元凋亡加重,Caspase3和Caspase9的激活加重神经细胞的凋亡;NGF可减轻神经细胞的凋亡。     

重组人促红细胞生成素对癫痫大鼠海马齿状回的影响

目的探讨重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropietin,r-HuEPO)对癫痫大鼠海马齿状回的影响。方法 140只大鼠按随机数字表法分为正常对照组20只,余120只制作氯化锂-匹罗卡品颞叶癫痫模型,符合条件者采用随机数字表将其分为癫痫治疗组和癫痫组;各组均经腹腔注射BrdU,治疗组同时予以r-HuEPO处理;以FJ-B(Fluoro-Jade B)免疫荧光观察神经元变性情况,BrdU免疫组化观察细胞增殖情况,Timm’s染色观察齿状回苔藓纤维发芽情况。结果海马齿状回神经元变性在癫痫组(32.32±5.09)较治疗组(11.12±0.75)和对照组(6.50±1.08)明显(P<0.01),而治疗组和对照组相比无显著差异;第9天细胞增殖在癫痫组(92.8±2.97)较治疗组(16.95±0.54)和对照组(12.80±2.13)明显(P<0.01),治疗组和对照组相比无显著差异;第28天细胞增殖在癫痫组(146.45±5.91)较治疗组(46.27±2.93)和对照组(38.52±3.10)明显(P<0.01),治疗组和对照组相比无显著差异;Timm’s染色结果表明在第14天,癫痫组(0.45±0.19)苔藓纤维发芽比对照组(0.10±0.11)明显(P<0.05),第28天癫痫组(3.60±0.16)比治疗组(0.55±0.10)和对照组(0.30±0.11)更加明显(P<0.01),治疗组与对照组比差异不明显(P>0.05)。结论癫痫能诱发大鼠海马齿状回神经元变性、细胞增殖和苔藓纤维发芽;r-HuEPO处理能降癫痫大鼠海马齿状回神经元变性和细胞增殖,并能抑制苔藓纤维发芽。     

经鼻给小剂量重组人促红细胞生成素对大鼠癫痫的影响

目的:研究经鼻给小剂量重组人促红细胞生成素(r-HuEPO)对大鼠癫痫发作的影响.方法:大鼠经鼻或腹腔给r-HuEPO后,观察对戊四唑(PTZ)诱导癫痫发作潜伏时间、级别、大发作持续时间、次数的影响.另外,大鼠经鼻给r-HuEPO后,观察对最大电休克(MES)诱导的惊厥发作级别,前肢或后肢强直性伸展时间的影响;对杏仁核电点燃后阈刺激诱导的行为等级,大发作持续时间及后放电的影响.结果:经鼻给予小剂量r-HuEPO,可明显延长PTZ诱导的癫痫发作潜伏时间,降低癫痫发作级别、大发作持续时间和发作次数,其中2.4 IU剂量组作用最为明显.而腹腔给r-HuEPO(3 000、4 000 IU/kg),仅可减少大发作次数和缩短大发作持续时间.经鼻给2.4 IU的r-HuEPO,可显著降低MES诱导的大鼠惊厥发作级别,缩短前肢和后肢强直性伸展时间.另外,经鼻给2.4 IU r-HuEPO,明显降低杏仁核电点燃后阈刺激诱导的癫痫发作级别,缩短大发作时间和后放电时间.结论:经鼻给小剂量的r-HuEPO有明显的抗癫痫作用.     

重组人促红细胞生成素对创伤性脑损伤大鼠炎性因子及线粒体损伤的影响

目的研究重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rh EPO)对创伤性脑损伤大鼠炎性因子及线粒体损伤的影响。方法将SPF级SD雄性大鼠随机分为三组,每组15只,分别为假手术组(sham组),模型组、rh EPO干预组(治疗组),模型组、治疗组采用改良过的Feeney自由落体撞击头部来建立创伤性大鼠模型,sham组大鼠不撞击脑部。造模结束后,治疗组每日定时以5000 IU/kg剂量rh EPO进行腹腔注射,sham组和模型组腹腔注射等剂量生理盐水。连续给药7 d后处死大鼠。罗丹明123(rhodamine 123,Rh 123)染色检测脑组织线粒体膜电位改变。免疫组化检测脑组织中白细胞介素-1β(interleukin-1β,L-1β),白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达。蛋白免疫印迹检测脑组织中线粒体动力学有关蛋白(动力相关蛋白1(Drp-1)、分裂蛋白1(Fis-1)、融合蛋白2(Mfn 2)、视神经萎缩蛋白1 (Opa 1)的表达水平。结果与sham组相比,模型组脑组织Rh123荧光强度明显减弱,IL-1β、IL-6、TNF-α、Drp-1、Fis-1蛋白的表达明显升高,Mfn 2、Opa 1蛋白的表达明显降低(均P<0.05)。与模型组相比,治疗组脑组织Rh123荧光强度明显增强,IL-1β、IL-6、TNF-α、Drp-1、Fis-1蛋白的表达明显降低,Mfn 2、Opa 1蛋白的表达明显升高(均P<0.05)。结论重组人促红细胞生成素可以减轻创伤性脑损伤后的炎性反应及线粒体损伤,从而起到对创伤性脑损伤后脑组织的保护作用。     

重组人促红细胞生成素对择期手术患者的红细胞生成作用观察

目的系统观察重组人红细胞生成素应用于外科择期手术患者的术前红细胞动员及术后贫血恢复的临床疗效及不良反应,及骨髓像中红系系统的变化。方法 82例择期手术患者随机分为治疗组和对照组,治疗组将重组人红细胞生成素分别于术前第7d、术后第3d静脉注射8000 IU,对照组则口服铁剂。观察临床症状以及用药后及术后红细胞、血红蛋白、红细胞比容、血小板、铁蛋白和肝肾功能。结果治疗组术后血红蛋白、红细胞比容、红细胞计数均明显提高,骨髓红系各阶段比例增高,血小板、肝肾功无明显变化。结论重组人红细胞生成素可有效改善围手术期贫血,并可避免或减少异体血的输入。     

重组人促红细胞生成素对糖尿病大鼠随意皮瓣的影响

目的 研究重组人促红细胞生成素对糖尿病大鼠超长随意皮瓣存活的影响.方法 36只SD大鼠.随机选取12只为对照组(A组),其余24只腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型后随机平均分为两组(B组、C组),再次构建大鼠背部任意瓣(3cm×10cm)模型,成模后B组术后腹腔注射重组人促红细胞生成素(rhEPO)(5000 U/kg),A组、C组腹腔注射等量生理盐水.术后第10天取皮瓣检测成活面积、组织学观察、VEGF表达情况,ELISA检测血清中SDF-1α及MMP-9含量.结果 皮瓣面积C组(33.34±2.01)％明显低于A(50.17 +2.29)％组与B(48.3±2.43)％组(P＜0.01),A、B组间比较无统计学差异(P＞0.05);组织学观察B组皮瓣的组织水肿、炎症细胞浸润情况明显比C组减轻;新生血管计数B组17.5±3.29/平方毫米明显高于A组22.08±3.84/mm2,A、B组均明显高于C组11.33±2.42/mm2(p＜0.01).VEGF表达量A组4528.16±551.26、B组3671.67±482.04明显高于C组2571.08±535.45(P＜0.01),A组与B组无差异(P＞0.05).血清中SDF-1α、MMP-9的含量A组、B组均明显高于C组(P＜0.01).结论 促红细胞生成素可能通过增加SDF-1α、MMP-9、VEGF表达等途径促进皮瓣生血管增生,减轻炎症反应,从而提高糖尿病大鼠随意型皮瓣的存活.