无纺网与多孔海绵状材料作为软骨组织工程支架的适用性及体内降解性

背景：聚羟基乙酸无纺网与聚羟基丁酸酯-聚羟基己酸酯共聚物多孔海绵具有良好的塑形适应性、生物降解性与生物相容性。 目的：观察聚羟基乙酸无纺网与聚羟基丁酸酯-聚羟基己酸酯共聚物多孔海绵作为软骨组织工程支架的适用性及体内降解性。 方法：分别制备乳兔软骨细胞-聚羟基乙酸无纺网复合物、乳兔软骨细胞-聚羟基丁酸酯-聚羟基己酸酯共聚物多孔海绵复合物。在实验组成年兔两侧背部皮下分别植入制备的两种复合物,在对照组成年兔两侧背部皮下分别植入聚羟基乙酸无纺网与聚羟基丁酸酯-聚羟基己酸酯共聚物。 结果与结论：组织学观察显示,以聚羟基乙酸无纺网获取的组织工程软骨,植入4 周时软骨细胞较小,软骨内有较多聚羟基乙酸纤维残留,8周时软骨细胞较成熟,包埋在陷窝内,聚羟基乙酸纤维消失,12周时软骨细胞成熟,基质分泌丰富,无聚羟基乙酸存留;以聚羟基丁酸酯-聚羟基己酸酯共聚物多孔海绵获取的组织工程软骨,植入4周时软骨细胞不成熟,软骨基质内似“杂质”样材料残留物较多,8周时软骨细胞较成熟,软骨基质内仍可见材料残留,12周时软骨基质材料残留基本消失。两组组织工程软骨特殊染色与免疫组织化学检测均显示再生软骨胶原与基质黏多糖生成良好,软骨中均检测出Ⅱ型胶原。表明两种材料作为软骨组织工程支架具有良好的适用性,其降解时间均达到组织工程软骨构建的要求。中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程全文链接：     

聚羟基烷酸酯聚合物负载软骨细胞修复同种异体喉软骨缺损

背景：喉软骨组织缺损发病率较高,患者发病后主要以疼痛、肿胀、功能障碍等为主。目前,临床上对于喉软骨组织损伤更多的以修复手术治疗为主,常规材料虽然能够有效的改善患者症状,但是长期疗效欠佳。近年来,软骨组织工程在临床上研究相对较多,但是在耳鼻咽喉科实际使用相对较多。目的：探讨聚羟基烷酸酯聚合物负载软骨细胞在同种异体喉软骨缺损修复中的效果。方法：将聚羟基丁酸酯与聚羟基己酸酯共聚物材料设为细胞外基质,采用组织工程技术制备细胞-材料复合物,将初级组织工程软骨组织直接移植于兔甲状软骨缺损的修复,或将初级组织工程软骨组织体内植入一定时期形成较成熟组织工程软骨再应用于甲状软骨缺损的修复。实验设单纯聚羟基丁酸酯与聚羟基己酸酯共聚物材料修复组和单纯软骨细胞修复组进行对照,对甲状软骨缺损修复效果进行大体和组织学评价。结果与结论：初级组软骨在电镜扫描下能够看见软骨细胞表现为串珠状,培养4周后能够看见大量胶冻形状的基质。在电子显微镜下进行观察结果显示：细胞分布在复合材料表面和海绵状空隙中,显示多个类圆形小突起;入选新西兰兔均取得手术成功,并且手术后并未出现呼吸困难、进食困难等现象;实验初级组织工程软骨组1只兔出现短暂喘鸣;实验较成熟组织工程软骨组1只动物术后2周死于腹泻。大体测试负载软骨细胞的聚羟基丁酸酯与聚羟基己酸酯共聚物有一定硬度。皮下植入4周后成熟细胞表现为白色片状,材料具有弹性。植入后4,8周两组修复区与原有软骨间光滑平淡,但是修复区域则色发黄。单纯聚羟基丁酸酯与聚羟基己酸酯共聚物材料修复组和单纯软骨细胞修复组修复区均凹陷,仅见结缔组织。实验组兔不良反应发生率显著低于对照组(P < 0.05)。结果证实,聚羟基烷酸酯聚合物负载软骨细胞移植修复同种异体喉软骨缺损效果较好。中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程     

聚羟基烷酸酯聚合物负载软骨细胞修复同种异体喉软骨缺损

背景：软骨组织工程基础研究相当深入,但在耳鼻咽喉科实际应用研究颇少,探索组织工程技术简便实用的喉软骨修复方法是值得研究的课题。 目的：比较多孔海绵状聚羟基丁酸酯与聚羟基己酸酯共聚物生物材料负载软骨细胞体外培养形成的初期组织工程软骨组织与体内植入一定时期形成的较成熟组织工程软骨组织修复同种异体甲状软骨缺损的效果。 方法：收集体外培养第3代乳兔(3 d龄)软骨细胞,以多孔海绵状聚羟基丁酸酯与聚羟基己酸酯共聚物生物材料为细胞外基质,采用组织工程技术制备细胞-材料复合物,共同体外培养形成初级组织工程软骨组织后直接应用于成兔甲状软骨缺损的修复(实验组A,n=5)或将初级组织工程软骨组织体内植入一定时期形成较成熟组织工程软骨再应用于甲状软骨缺损的修复(实验组B,n=5)。设单纯聚羟基丁酸酯与聚羟基己酸酯共聚物材料修复组(对照A组,n=4)和单纯软骨细胞修复组(对照B组,n=4)作为对照。分别于术后4周(实验B组)和8周(实验A组、对照A组、对照B组)取材,对甲状软骨缺损修复效果进行大体和组织学评价。 结果与结论：两者大体支架形态基本一致,修复区与原有软骨均相续平坦,无凹陷及缺损。但实验A组存在界面无细胞区,修复区基质分泌不丰富;实验B组界面区有细胞生长,基质分泌良好。两者炎细胞浸润均不明显。对照组修复区凹陷,呈暗红色软组织充填,组织学及特殊染色检查未发现软骨样结构及其分泌的基质成分。结果表明在有免疫力的动物体内,初级组织工程软骨组织直接应用与体内植入后再应用均能有效修复同种异体甲状软骨缺损,无明显免疫反应;相同时期内,应用较成熟组织工程软骨组织修复效果优于应用初级组织工程软骨组织。然而,直接应用初级组织工程软骨组织可节省时间、成本、工作量及操作环节,避免二次皮下手术的痛苦,是比较实用的方法之一。     

纳米羟基磷灰石/聚羟基丁酸酯骨组织工程支架的制备及性能表征

背景：高分子聚合物聚羟基丁酸酯具有优良的生物相容性、生物降解性及压电性,但也存在脆性大、亲水性较差等不足。 目的：制备不同组成比例的电纺纳米羟基磷灰石/聚羟基丁酸酯纤维支架材料,分析其结构及性能。 方法：通过气流-高压静电纺丝技术制备纳米羟基磷灰石质量百分比分别为0、10%、20%、30%的电纺纳米羟基磷灰石/聚羟基丁酸酯纤维支架,检测支架材料的微观结构、基团组成、晶相分布、热学性能及表面润湿性。 结果与结论：扫描电镜观察显示,随着纳米羟基磷灰石含量的增大,越来越多的纳米羟基磷灰石颗粒分布于复合纤维表面且分布趋于均匀,到含量达到30%时,纳米羟基磷灰石已基本布满纤维表面,纤维表面的粗糙度也随之增加;差示扫描量热法及X射线衍射结果表明,纳米羟基磷灰石的加入可以降低复合纤维中聚羟基丁酸酯的结晶度及结晶规整程度,且纳米羟基磷灰石含量越大效果越明显;随着纳米羟基磷灰石含量的增大,复合支架表面的接触角逐渐降低,亲水性有所提高。表明将纳米羟基磷灰石与聚羟基丁酸酯复合进行电纺可以有效提高材料的表面润湿性及结晶度,改善材料的亲水性及脆性,且纳米羟基磷灰石含量越高作用越明显。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程     

聚羟基丁酸/戊酸酯共聚物膜与人骨髓间充质干细胞的体外生物相容性

背景：聚羟基丁酸/戊酸酯共聚物是近年来受到重视的聚羟基脂肪酸族组织工程支架材料,具有免疫排斥反应低、生物相容性好和降解产物无毒副作用的优点。 目的：观察聚羟基丁酸/戊酸酯共聚物膜材料与人骨髓间充质干细胞的体外生物相容性。 方法：将第3代人骨髓间充质干细胞种植于聚羟基丁酸/戊酸酯共聚物膜上作为实验组,培养板单纯培养细胞作为对照组,计算1,2,4 h两组贴壁细胞的数量,得出细胞贴壁率。MTT比色法观察2,4,6,8 d两组细胞的增殖情况。采用Hoechst33258荧光法,检测3,6,9,12 d两组细胞内的DNA含量。将人骨髓间充质干细胞接种聚羟基丁酸/戊酸酯共聚物膜材料上5 d后,电镜扫描观察细胞在材料上的生长情况。 结果与结论：共培养1 h时,实验组的细胞贴壁率低于对照组;其他时间段两组之间细胞贴壁率差异无显著意义。两组各时点间的细胞增殖差异无显著意义。两组各时间点细胞内DNA含量差异无显著意义。扫描电镜观察人骨髓间充质干细胞在聚羟基丁酸/戊酸酯共聚物膜上生长良好,形态呈梭形,细胞间连接紧密,分泌较多细胞基质。证明聚羟基丁酸/戊酸酯共聚物膜材料与人骨髓间充质干细胞有良好的生物相容性。中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程全文链接：     

双喷头静电纺丝法制备载软骨脱细胞基质的复合纳米纤维支架

背景：软骨脱细胞基质是一种理想的用于构建软骨组织工程支架的生物材料,可以用于软骨缺损的修复。目的：以聚乙烯醇为脱细胞基质的负载材料,3-羟基丁酸酯与4-羟基丁酸酯共聚物为框架材料,通过双喷头静电纺丝构建复合纳米纤维支架,并初步探索其体外生物活性。方法：通过酶、化学与超声振荡清洗结合的方法去除软骨组织中的细胞成分,制成软骨脱细胞基质。用双喷头静电纺丝的方法分别制备3-羟基丁酸酯与4-羟基丁酸酯共聚物(记为P34HB)、3-羟基丁酸酯与4-羟基丁酸酯共聚物-聚乙烯醇(记为P34HB-PVA)、3-羟基丁酸酯与4-羟基丁酸酯共聚物-聚乙烯醇-脱细胞基质(记为P34HB-PVA-dECM)纳米纤维支架,表征支架的纤维形貌、组成成分、亲水性能和力学性能。将人骨髓间充质干细胞与3种支架共培养,通过Live/Dead染色来检测细胞在支架的活力,扫描电镜观察细胞在支架上的黏附形态,阿尔玛蓝试剂盒检测细胞在支架上的增殖性能,Ⅱ型胶原免疫荧光评估细胞在支架上的成软骨分化。结果与结论：(1)扫描电镜下可见,各组支架纤维呈随机分布,纤维之间互相连接呈现多孔结构,其中P34HB-PVA-dECM支架的纤维直径最...     

聚羟基丁酸己酸酯及其在组织工程中的应用

绍了羟基丁酸酯一羟基己酸酯共聚物的降解性、亲水性、力学性能、表面形态,改性研究、细胞相容性、降解产物的毒性等性能,并对这种材料在组织工程中的应用现状作了阐述,提出了需要改进研究的方向,指出这种微生物来源的新型生物医药材料在组织工程的应用中将具有极大的潜力。     

聚乳酸-乙醇酸共聚物/羟基磷灰石复合支架修复喉软骨缺损

背景：喉软骨缺损传统的修复方法受到供体来源、排斥反应等限制,因而难以推广。 目的：观察聚乳酸-乙醇酸共聚物/羟基磷灰石复合支架修复喉软骨缺损的效果。 方法：将20只Wistar 大鼠随机分为聚乳酸-乙醇酸共聚物/羟基磷灰石复合支架组和聚乳酸-乙醇酸共聚物支架组,建立喉软骨缺损模型后分别采用聚乳酸-乙醇酸共聚物/羟基磷灰石复合支架和聚乳酸-乙醇酸共聚物支架修复。 结果与结论：聚乳酸-乙醇酸共聚物/羟基磷灰石复合支架组大鼠造模后3,5,7 d时喉骨缺损直径显著小于聚乳酸-乙醇酸共聚物支架组;聚乳酸-乙醇酸共聚物/羟基磷灰石复合支架组大鼠喉软骨缺损部位基本修复,表面平整,且与周围其他组织之间没有明显界限;而聚乳酸-乙醇酸共聚物支架组大鼠喉软骨缺损部位存在凹陷,表面粗糙,和周围组织存在明显界限。说明聚乳酸-乙醇酸共聚物/羟基磷灰石复合支架能够促进喉软骨缺损部位修复,修复喉软骨缺损的效果更理想。  中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程     

羟基丁酸-羟基辛酸聚合物/胶原软骨组织工程支架的细胞亲和性

背景：已有很多实验证明,单独高分子材料或生物性材料制备的组织工程支架无法满足组织工程研究。 目的：评价羟基丁酸-羟基辛酸聚合物/胶原组织工程支架的生物学特性及细胞亲和性。 方法：以羟基丁酸-羟基辛酸聚合物作为主体材料,按质量分数复合不同比例(2%,4%,6%,8%,10%)的胶原,采用溶剂浇铸-颗粒沥滤法制备组织工程支架。通过扫描电镜观察材料内部结构及孔径大小,液体位移法测定材料孔隙率。将羟基丁酸-羟基辛酸聚合物/胶原支架、羟基丁酸-羟基辛酸聚合物支架分别与兔软骨细胞复合培养,MTT法测定细胞的生长曲线,扫描电镜观察细胞在材料上的生长黏附情况。 结果与结论：羟基丁酸-羟基辛酸聚合物/胶原复合软骨组织工程支架孔径大小200 μm左右,孔隙率为(85±2)%,细胞亲水性随加入胶原比例的增加而升高。与羟基丁酸-羟基辛酸聚合物支架比较,不同比例的羟基丁酸-羟基辛酸聚合物/胶原支架可明显促进软骨细胞的黏附、增殖。证实羟基丁酸-羟基辛酸聚合物/胶原复合支架具备更好的细胞亲和性。中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程全文链接：     

羟基丁酸-羟基辛酸一体化骨软骨支架的体外血管化

背景：前期实验构建的羟基丁酸-羟基辛酸共聚体一体化骨软骨支架具备良好的生物相容性、生物可降解性,并且降解产物无毒性。 目的：将兔肾微血管内皮细胞与羟基丁酸-羟基辛酸一体化骨软骨支架复合培养,观察支架骨层血管化效果。 方法：运用溶剂浇铸-颗粒沥滤法,制备具有骨层/骨与软骨界面层/软骨层3层结构的羟基丁酸-羟基辛酸一体化骨软骨支架。将传代培养至第3 代的兔肾微血管内皮细胞,接种到一体化骨软骨支架骨层支架上,MTT法检测细胞在支架上的增殖活性,10 d后苏木精-伊红染色及电镜观察细胞在支架内的生长状况。 结果与结论：一体化骨软骨支架外观具备明显的3层结构,各层之间连接紧密,骨层疏松多孔,各层支架孔隙均匀且相通,一体化支架孔隙率为78%。兔肾微血管内皮细胞在支架上分裂增殖良好,复合培养10 d后,细胞在骨层支架内呈立体生长,中间界面层内未发现细胞,苏木精-伊红染色可见细胞黏附生长于骨层支架孔隙间,细胞依附支架的多孔结构生长,形成管腔样结构,但细胞并未长入中间界面层。中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程全文链接：     

人工听骨链重建材料生物相容性、特性及修复喉软骨缺损的效果

BACKGROUND: DefectedLaryngeal cartilage has many alternatives, including autologous cartilage, allograft cartilage and metal stents. Although these materials can achieve desired outcomes in laryngeal cartilage defect repair, certain limitations exist.     

The anatomy of the larynx of the bowhead whale,Balaena mysticetus,and its sound‐producing functions

This study describes the morphology of the laryngeal apparatus in bowhead whales (Balaena mysticetus) with respect to respiration, deglutition, and vocalization. We also examined the intrinsic cricoarytenothyroid muscle (Musculus (M.) diverticuli laryngei) which forms the laryngeal diverticulum, to ascertain its interactions with the laryngeal cartilages during respiration and sound production. Five fetal larynges and four from adult whales were studied using noninvasive imaging, as well as macroscopic and microscopic techniques. The larynx extends from the skull base into the thoracic inlet. The dorsally curved laryngeal stalk, supported by epiglottis and the corniculate processes of arytenoid cartilages, is situated within the nasopharynx. The epiglottic cartilage exhibits a prominent medial ridge. The arytenoid cartilages are rod‐shaped, and extend through the laryngeal cavity. The thyroid cartilage possesses a prominent caudal horn with a fibrous articulation to the ventrally incomplete cricoid cartilage. The M. thyroepiglotticus forms the connection between epiglottic and thyroid cartilages. The M. cricothyroideus lateralis connects the caudal horn of the thyroid cartilage with the cricoid cartilage and the M. cricothyroideus medialis connects the cricoid and thyroid cartilage. An extensive laryngeal diverticulum (Diverticulum laryngis), formed by the laryngeal mucosa and M. diverticuli laryngei, is positioned caudo‐ventral to the laryngeal vestibule. The mucosa thickens into a fold medial to the vocal processes of the arytenoid cartilages. Experiments with airflow combined with histological and anatomical evidence strongly suggest a sound producing function for these (vocal) folds. This analysis provides the first account of sound producing structures and function in bowhead whales. Anat Rec, 297:1316–1330, 2014. © 2014 Wiley Periodicals, Inc.     

骨形态发生蛋白复合物结合CAD/CAM技术原位修复喉甲状软骨缺损

背景：临床修复喉甲状软骨缺损时使用一定的支架材料。骨形态发生蛋白具有成骨诱导活性,与其他形式的载体联合起来进行复合应用可以更好的发挥出其诱导成骨作用。联合使用计算机辅助设计/计算机辅助制造技术能提高修复效果。 目的：进一步验证骨形态发生蛋白复合物结合计算机辅助设计/计算机辅助制造技术在原位修复喉甲状软骨缺损中的应用效果。 方法：纳入18只新西兰大白兔,对动物喉部进行三维扫描,建立兔甲状软骨三维数字模型。利用泡沫凝胶注模法制备羟基磷灰石支架,再制备骨形态发生蛋白复合物。18只动物随机分为观察组和对照组。两组兔行一侧甲状软骨切除后,观察组植入珊瑚羟基磷灰石支架;对照组填充明胶海绵。处理后 4,8,12周,进行大体观察和评分;处理后12周,对动物行喉镜检查,喉组织常规切片后进行苏木精-伊红染色,进行组织学观察。 结果与结论：处理后12周,对照组兔的喉腔出现明显的变窄现象,且存在轻微充血;观察组喉腔黏膜光滑,且通畅、宽敞,未出现肉芽生长情况。处理后4,8,12周,两组喉甲状软骨评分均呈现出不断下降的情况,且不同时间点,观察组评分均显著低于对照组(均P < 0.05)。处理后12周,对照组未出现成熟骨细胞和软骨细胞的生成;观察组则可见植入材料完全降解,存在大量多核样组织细胞增生和吞噬,手术区域软骨母细胞出现增生现象,并伴有成软骨区域形成情况,另外还以观察到软骨骨质形成以及软骨细胞增生现象。结果表明,利用骨形态发生蛋白复合物结合计算机辅助设计/计算机辅助制造技术进行原位喉甲状软骨缺损修复可以获得良好的效果,实验过程中所使用的复合物具有良好的骨诱导作用以及组织相容性。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程      

喉返神经喉外分支的显微解剖及临床意义

目的探讨甲状腺手术区域喉返神经(RLN)的解剖特点和方法。方法运用大体解剖的方法,对48例成人标本甲状腺手术区域的RLN及其周围毗邻结构进行了观测。结果 48例96侧成人标本中,29%RLN主干穿过环咽肌肌束至致密结缔组织膜下缘,71%RLN主干走行在环咽肌深面。69%RLN在距离甲状软骨下角尖端(15.2±5.5)mm处分为前、后两支,前支多于环状软骨侧方下缘距离甲状软骨下角尖端(5.9±1.8)mm处穿过结缔组织膜,后支入喉点距甲状软骨下角尖端(4.8±2.1)mm;31%RLN未见分支。结缔组织膜下缘RLN与甲状腺下动脉(ITA)分支的关系为:66%(63/96)RLN位于ITA前方,27%(32/96)位于ITA后方。结论大多数RLN具有喉外分支,在以甲状软骨下角作为标志寻找RLN时,要同时找寻RLN及喉外分支的入喉点。ITA与RLN的关系复杂多变,ITA不作为RLN定位的首选。     

羟基乙酸负载软骨细胞组织工程软骨修复喉软骨缺损

BACKGROUND: A three-dimensional biodegradable scaffold is important for tissue-engineered cartilage construction, and it that can provide conditions for cell attachment and proliferation. OBJECTIVE: To observe the treatment outcomes of glycolic acid loaded with chondrocytes in laryngeal cartilage repair. METHODS: Sixty New Zealand white rabbits were enrolled and randomly divided into control and experimental groups. Laryngeal cartilage defect models were established in each group, followed by implanted with glycolic acid loaded with chondrocytes and glycolic acid, respectively. Gross and histological observations were conducted at 4 and 8 weeks after implantation. RESULTS AND CONCLUSION: Gross observation showed that at 4 weeks after implantation, a deep red wound with an obvious boundary was seen in the control group; the dark red and smooth defect parallel to the surrounding tissue was found in the experimental group. Toluidine blue staining revealed that at 8 weeks after implantation, the laryngeal defect site showed no obvious inflammation and cartilage collapse, with numerous newly-formed chondrocytes in the experimental group; in contrast, mild inflammation and cartilage collapse were found in the defect region of the control group, and few newly-formed chondrocytes appeared. The positive areas of glycosaminoglycan and type II collagen in the experimental group were significantly larger than those in the control group at 4 and 8 weeks after implantation (P < 0.05). These results indicate that glycolic acid loaded with chondrocytes contributes to the repair of laryngeal cartilage defects.     

颈前区器官的应用解剖研究

目的观察颈前区器官与血管和神经的毗邻关系,为临床手术提供解剖学依据。方法在18例36侧成人头颈标本上解剖观测喉、气管颈部和甲状腺的血管和神经的走行及分布。结果甲状腺左、右叶平均长度为48．9±8．8mm和49．9±7．9mm．锥状叶者8例,占44．4％;1例出现甲状腺最下动脉（出现率5．6％）．2例出现甲状腺最下静脉（出现率11．1％）;喉上动脉人喉处在甲状软骨上角的前下方左侧为13．94±2．79mm,右侧为14．93±2．58mm,差异有统计学意义;喉上神经内支人喉处在甲状软骨上角前下方左侧为11．78±3．44mm,右侧为12．26±2．66mm;喉下神经在甲状软骨下角后下人喉,距离甲状软骨下角左侧5．34±1．61mm,右侧5．72±1．74mm,差异有统计学意义。结论手术时应注意这一区域血管神经走行情况,防止并发症的发生。     

Morphology of GNAT3‐immunoreactive chemosensory cells in the rat larynx

The upper airways play important roles in respiratory defensive reflexes. Although solitary chemosensory cells and chemosensory cell clusters have been reported in the laryngeal mucosa of mammalian species, the distribution and cellular morphology of chemosensory cells remain unclear. In the present study, the distribution and morphology of solitary chemosensory cells and chemosensory cell clusters were examined by immunofluorescence for GNAT3 on whole‐mount preparations of the rat laryngeal mucosa. Electrophysiological experiments were performed to analyze the respiratory reflexes evoked by bitter stimuli to the laryngeal cavity. In the whole area of the laryngeal mucosa, the numbers of GNAT3‐immunoreactive solitary chemosensory cells and chemosensory clusters were 421.0 ± 20.3 and 62.7 ± 6.9, respectively. GNAT3‐immunoreactive solitary chemosensory cells were mainly distributed in the mucosa overlying epiglottic and arytenoid cartilage, and chemosensory clusters were mainly distributed on the edge of the epiglottis and aryepiglottic fold. GNAT3‐immunoreactive solitary chemosensory cells were slender with elongated processes or had a flask‐like/columnar shape. The number of GNAT3‐immunoreactive cells in chemosensory clusters was 6.1 ± 0.4, ranging between 2 and 14 cells. GNAT3‐immunoreactive cells in the cluster were variform and the tips of apical processes gathered at one point at the surface of the epithelium. The tips of apical cytoplasmic processes in solitary chemosensory cells and cells in the cluster were immunoreactive for espin, and faced the laryngeal cavity. Physiological experiments showed that the application of 10 mm quinine hydrochloride to the laryngeal cavity decreased respiratory frequency. The present results revealed the chemosensory field of the larynx and the morphological characteristics of the laryngeal chemosensory system for respiratory depression.     

以转染CDMP1基因的BMSCs修复软骨缺损

 目的 探讨CDMP1基因转染的骨髓间充质干细胞（BMSCs）负载于聚乳酸-羟基乙酸（PLGA）支架上修复喉软骨缺损的能力,并对其修复效果做出初步评估。方法 用反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）和免疫印迹法(Western blot)检测hCDMP1mRNA和蛋白的表达;用免疫组织化学方法检测Ⅱ型胶原蛋白(ColⅡ)以及糖胺聚糖(GAG)的表达;将转染前后的细胞支架培养体系移植入兔甲状软骨全层缺损处,从大体、组织学方面观察其对软骨缺损的修复作用。结果 腺病毒感染方法可以将外源hCDMP1基因成功转入BMSCs,并使其获得稳定表达;和对照组比较,转染hCDMP1基因的BMSCs分泌ColⅡ、GAG等软骨特异性基质的能力增强,有促进软骨分化趋势;转染细胞支架复合物可更加有效地修复喉软骨缺损。结论 转染hCDMP1基因的BMSCs/PLGA三维生物支架复合物移植动物体内可修复喉软骨缺损。