LncRNA HULC通过调控NF-κB信号通路对淋巴瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨长非编码RNA(LncRNA)HULC对淋巴瘤细胞增殖、凋亡的影响和机制。方法 将淋巴瘤细胞JVM-2分为对照组(正常培养)、si-NC组(转染si-NC)、si-HULC组(转染si-HULC)、Vector组(转染Vector)、HULC组(转染HULC)、si-HULC+PMA组(转染si-HULC+0.5μmol·L^-1佛波酯)。实时反转录定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测HULC表达;细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞活力;流式细胞术检测凋亡和周期分布;蛋白质印迹法检测人核因子κB抑制蛋白α(IKBα)、磷酸化IKBα(p-IKBα)和p-p65蛋白表达。结果 si-NC组、si-HULC组、Vector组、HULC组JVM-2细胞HULC表达水平分别为0.97±0.08,0.19±0.04,1.01±0.11和11.41±0.85;细胞活力分别为(98.15±5.14)%,(51.01±5.95)%,(98.10±4.80)%和(138.25±13.24)%;G0/G1期比例分别为(54.01±2.77)%,(70.85±2.93...     

布比卡因调控LncRNA LBX2-AS1对宫颈癌细胞SiHa增殖及凋亡的影响

摘要：目的:探讨布比卡因对宫颈癌细胞SiHa增殖、凋亡的影响及其对LncRNA LBX2-AS1的调控作用。方法:体外培养人宫颈癌细胞SiHa,分别加入不同剂量的布比卡因处理细胞,分别将si-NC、si-LBX2-AS1转染至SiHa细胞,分别将pcDNA、pcDNA-LBX2-AS1转染至SiHa细胞后使用布比卡因处理;采用MTT实验检测细胞增殖;应用流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率;采用qRT-PCR法检测LBX2-AS1的表达量;Western blot法检测Cleaved-caspase3、pro-caspase3蛋白表达量。结果:布比卡因可明显降低光密度（OD）值、S期细胞比例、LBX2-AS1的表达水平及pro-caspase3蛋白水平（P<0.05）,提高凋亡率、G0-G1期细胞比例及Cleaved-caspase3蛋白水平（P<0.05）;转染si-LBX2-AS1可明显降低OD值、S期细胞比例及pro-caspase3蛋白水平（P<0.05）,提高凋亡率、G0-G1期细胞比例及Cleaved-caspase3蛋白水平（P<0.05）;转染pcDNA-LBX2-AS1可明显逆转布比卡因对SiHa细胞增殖、细胞周期及凋亡的作用（P<0.05）。结论:布比卡因可通过下调LBX2-AS1的表达从而抑制宫颈癌细胞增殖、诱导细胞周期阻滞于G0-G1期细胞比例及促进细胞凋亡。     

LncRNA PVT1调控miR-1207-5p/FMNL2对HL-60细胞凋亡及化疗敏感性的影响

目的 探讨长链非编码RNA浆细胞瘤转化迁移基因1(LncRNA PVT1)对HL-60细胞生物学行为及柔红霉素敏感性的影响。方法 将HL-60细胞分为对照组、miR-NC组、PVT1-siRNA组、miR-1207-5p inhibitor组和miR-1207-5p mimic组。除对照组细胞不处理外,其余各组细胞分别将miR-NC,PVT1-siRNA,miR-1207-5p inhibitor,miR-1207-5p mimic转染到HL-60细胞中。采用萤光素酶检测试剂分析LncRNA PVT1对微小RNA-1207-5p(miR-1207-5p)和同源形成素样蛋白2(FMNL2)的调控作用,CCK-8法检测细胞存活率,改良Matrigel Boyden室测定法测定细胞侵袭性,划痕实验检测细胞迁移力,流式细胞术检测细胞凋亡率,MTT法检测细胞对柔红霉素敏感性,实时逆转录定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）法检测miR-1207-5p和FMNL2 mRNA表达水平,免疫印迹（Western blot）法检测FMNL2蛋白表达水平。结果 萤光素酶分析结果显示,LncRNA PVT1与...     

lncRNA Neat1介导p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路调控白蛋白诱导HK-2细胞凋亡

目的 探讨长链非编码RNA核富集丰富转录本1(lncRNA Neat 1)通过miR-204-3p介导p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路调控白蛋白诱导HK-2细胞凋亡的机制。方法 将HK-2细胞分为对照组(正常培养)、模型组(白蛋白损伤模型)、p38抑制药组(10μmol·L^-1p38抑制药SB203580处理后造模)、OV-Neat 1组(转染Neat 1过表达质粒后造模)和OV-Neat 1+p38抑制药组(转染Neat 1过表达质粒,再用p38抑制药SB203580处理后造模)。用细胞计数法-8(CCK-8)检测细胞增殖活力,用流式细胞术检测细胞凋亡情况,用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞中miR-204-3p、B细胞淋巴瘤2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)mRNA的表达水平;用蛋白质印迹法检测细胞中Bax、Bcl-2蛋白的表达水平。结果 对照组、模型组、p38抑制药组、OV-Neat 1组和OV-Neat 1+p38抑制药组的细胞增殖活性分别为0.95±0.02、0.70±0.01、0.78±0.0...     

二甲双胍对血管紧张素Ⅱ诱导的小鼠腹主动脉瘤形成的影响

目的观察二甲双胍对血管紧张素Ⅱ诱导的小鼠腹主动脉瘤(AAA)形成的影响。方法用皮下埋植血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)缓释泵1000 ng·min^-1·kg^-1构建AAA模型。按照体重将小鼠分为4组:正常组、模型组、硼替佐米组和二甲双胍组,每组5只。造模后第1天开始,硼替佐米组每天给予硼替佐米50 mg·kg^-1灌胃,二甲双胍组每天给予二甲双胍50 mg·kg-1灌胃,正常组和模型组给予等体积的0.9%NaCl灌胃,连续用药4周。用全自动生化分析仪酶法测定血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量;用免疫印迹法检测腹主动脉组织中腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)和西罗莫司靶蛋白(mTOR)蛋白相对表达水平。结果正常组、模型组、硼替佐米组和二甲双胍组TC分别为(14.23±1.32),(17.29±1.52),(15.64±1.29)和(15.09±1.24)mmol·L^-1;这4组的TG分别为(1.64±0.14),(1.95±0.15),(1.79±0.12)和(1.76±0.13)mmol·L^-1;这4组的HDL-C分别为(14.68±0.34),(19.21±0.43),(15.71±0.53)和(15.82±0.51)mmol·L^-1;这4组的LDL-C分别为(0.39±0.05),(0.24±0.03),(0.36±0.06)和(0.35±0.04)mmol·L^-1;这4组的AMPK相对表达量分别为1.02±0.11,2.84±0.34,1.37±0.21和1.34±0.19;这4组的mTOR相对表达量分别为1.05±0.12,2.81±0.32,1.48±0.19和1.45±0.15。上述指标:模型组与正常组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);硼替佐米组和二甲双胍组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论二甲双胍可以保护血管紧张素Ⅱ诱导的小鼠AAA的形成,其机制可能是通过AMPK/mTOR信号通路来完成的。     

依托咪酯通过下调LncRNA GPC3-AS1调控卵巢癌细胞CA-OV3增殖及凋亡

目的:探讨依托咪酯对卵巢癌细胞CAOV3增殖、凋亡的影响及其对LncRNA GPC3-AS1的调控作用.方法:体外培养人卵巢癌细胞CAOV3,使用不同剂量的依托咪酯处理细胞,另外将si-NC、si-GPC3-AS1转染至CAOV3细胞,分别将pcDNA、pcDNA-GPC3-AS1转染至CAOV3细胞后加入依托咪酯处理...     

长链非编码RNA MINCR靶向微小RNA-876-5p调控膀胱癌细胞生物学行为的分子机制研究

目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)MINCR靶向微小RNA(miR)-876-5p调控膀胱癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的分子机制.方法 体外培养人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1与膀胱癌细胞系T24、RT4、UM-UC-3,采用反转录与荧光定量聚合酶链反应法检测LncRNA MINCR和miR-876-5p的表...     

LncRNA GAS5调控miR-223-5p逆转乳腺癌他莫昔芬耐药性分析

目的:探究LncRNA GAS5在乳腺癌他莫昔芬耐药性菌株中的表达情况,初步探究其可能的作用机制.方法:体外培养MCF-7、MCF-7/TAM细胞,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞LncRNA GAS5、miR-223-5p表达情况;LncRNA GAS5 mimics、对照序列转染至MCF-7/TAM...     

LncRNA TPT1-AS1在前列腺癌中的表达及对生物学功能的影响

摘要：目的:研究长链非编码RNA（LncRNA）肿瘤蛋白翻译调节因子1（TPT1）-反义RNA1（AS1）对前列腺癌细胞增殖、侵袭的影响。方法:体外培养人正常前列腺上皮细胞（RWPE-1）和前列腺癌细胞系雄激素非依赖f生前列腺癌（LNCa P）、DU-145、PC-3、22RV1,实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测各细胞系中LncRNA TPT1-AS1表达水平;选取表达差异最大的细胞系PC-3、DU-145,阳离子脂质体LipofectamineTM2000瞬时转染si-RNATPT1-AS1阴性对照（si-RNA对照）组和siRNA-TPT1-AS1干扰（siRNA-TPT1-AS1干扰）组,不添加任何试剂设为空白对照组。qRT-PCR验证siRNA-TPT1-AS1转染情况; CCK-8检测TPT1-AS1-sh对细胞增殖的影响; Transwell检验TPT1-AS1-sh对细胞侵袭的影响;免疫印记（WB）法检测细胞TPT1蛋白的变化。结果:与正常前列腺细胞系RWPE-1相比,前列腺癌细胞系LNCa P、DU-145、PC-3、22RV1中TPT1-AS1的水平显著升高（P<0.05）。在DU-145、PC-3中,空白对照组与si-RNA对照组中TPT1-AS1表达量、0,6,12,24,36,48 h各时期450 nm处的吸光度(A450)值、侵袭细胞数量、TPT1蛋白表达量差异均无统计学意义（P>0.05）;与空白对照组、si-RNA对照组相比,siRNATPT1-AS1干扰组中TPT1-AS1表达量,24,36,48 h细胞A450值、细胞侵袭数量、TPT1蛋白表达量显著降低（P<0.05）。在DU-145中,与空白对照组、si-RNA对照组相比,siRNA-TPT1-AS1干扰组12 h细胞A450值显著降低（P<0.05）。结论:前列腺癌细胞系中TPT1-AS1表达上调;干扰前列腺癌细胞系DU-145、PC-3中TPT1-AS1可抑制细胞增殖、侵袭。     

长链非编码小核仁RNA宿主基因7调控微小RNA-331-3p表达影响甲状腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制研究

目的 探讨长链非编码小核仁RNA宿主基因7(lncRNA SNHG7)对甲状腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响以及潜在的作用机制.方法 本研究起止时间为2018年1月至2019年2月,人甲状腺细胞Nthy-ori 3-1和人甲状腺癌细胞K1、BCPAP、TPC-1购自中国科学院上海细胞库,用qRT-PCR检测SNHG7和微...     

长链非编码 RNA参与前列腺癌相关信号通路调控介导肿瘤发生进展的研究进展

前列腺癌( prostate cancer,PCa)属于一类恶性程度极高的泌尿系肿瘤,在全球新发癌症病例中前列腺癌位居第四位。由于前列腺癌具有高度异质性及耐药性,目前尚无治愈药物问世,阐明前列腺癌恶性进展的分子机制将对改善前列腺癌药物抗性,提升病人预后大有裨益。在前列腺癌发生发展的过程中各类信号通路起到了重要调控作用,包括胞内磷脂酰肌醇激酶 丝氨酸 /苏氨酸特异性蛋白激酶( PI3K-Akt)信号通路、雄激素受体( androgen receptor,AR)、无翼信号通路( WNT)、缺口信号通路( Notch)在内的多种信号通路失衡显著影响了前列腺癌的恶性进展,然而其深层的分子机制仍有待进一步阐述。长链非编码 RNA(long noncoding RNA,lncRNA)是一类长度大于 200 bp的 RNA分子,在过去十多年随着测序技术的发展, lncRNA的重要作用逐渐被研究者所认知,在前列腺癌中多种 lncRNA通过影响前列腺癌中关键信号通路发挥相应作用参与调控前列腺癌的进展。该文就 lncRNA在前列腺癌相关信号通路发挥的作用及相应分子机制作一综述,以期给前列腺癌治疗提供新的思路与方案。     

长链非编码 RNA LINC01419调控结直肠癌细胞增殖、凋亡、迁移侵袭的机制

目的研究长链非编码 RNA(lncRNA)LINC01419调控结直肠癌细胞增殖、凋亡、迁移侵袭的机制。方法收集漯河市中心医院 2015年 10月至 2018年 5月因结直肠癌手术切除的组织标本 20例,以距离结直肠癌边缘 ≥3 cm的癌旁正常组织标本 20例为对照。实时荧光定量逆转录聚合酶链反应( qRT-PCR)检测结直肠癌组织中 lncRNA LINC01419和微小 RNA-132-3p(miR-132-3p)表达。构建干扰 lncRNA LINC01419或 miR-132-3p过表达的结直肠癌 SW620细胞, MTT法和流式细胞术分别检测细胞增殖与凋亡, Transwell检测细胞迁移、侵袭,蛋白质印迹法( Western blotting)检测细胞周期蛋白 D1(cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂 1A(P21)、 B细胞淋巴瘤 -2(Bcl-2)蛋白、 Bcl-2相关 X(Bax)蛋白、基质金属蛋白酶 -2(MMP-2)、基质金属蛋白酶 -9(MMP-9)蛋白表达。生物信息学预测结合双荧光素酶报告实验分析 lncRNA LINC01419和 miR-132-3p的靶向关系。 si-LINC01419和 anti-miR-123-3p共转染,观察抑制 miR-132-3p表达对干扰 lncRNA LINC01419诱导的 SW620细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响。结果与癌旁组织［(1.00±0.09)、(1.01±0.08)］比较,结直肠癌组织中 lncRNA LINC01419表达量( 2.74± 0.26)明显增加( P<0.05)miR-132-3p表达量( 0.51±0.05)显著减少( P<0.05)。干扰 lncRNA LINC01419或 miR-132-3p过表达显著抑制 SW620细胞增殖、,迁移、侵袭、 cyclin D1、Bcl-2、MMP-2、MMP-9蛋白表达,并促进细胞凋亡、 P21、Bax蛋白表达。 lncRNA LINC01419靶向调控 miR-132-3p的表达。抑制 miR-132-3p表达逆转了干扰 lncRNA LINC01419对结直肠癌细胞 SW620增殖、迁移、侵袭的抑制作用,以及对细胞凋亡的促进作用。结论 lncRNA LINC01419通过靶向 miR-132-3p调控结直肠癌细胞增殖、凋亡、迁移侵袭。     

长链非编码RNA ATB调控miR-144对胶质瘤迁移和侵袭的影响

目的 探讨长链非编码RNA ATB （lncRNA ATB）调控miR-144对胶质瘤迁移和侵袭的影响。方法 采用qPCR检测lncRNA ATB在胶质瘤组织和癌旁正常组织中的表达差异以及慢病毒si-ATB对胶质瘤细胞的转染效率情况;通过双荧光素酶报告基因进行检测lncRNA ATB和miR-144之间的关系;通过平板克隆实验检测lncRNA ATB对胶质瘤细胞株U87和U251增殖能力的影响;流式细胞术检测lncRNA ATB对胶质瘤细胞株凋亡行为的影响;Transwell实验检测lncRNA ATB对细胞株侵袭能力的影响;裸鼠体内实验检测lncRNA ATB对裸鼠移植瘤的体积和质量的影响情况。结果 胶质瘤lncRNA ATB的表达水平高于癌旁正常组织（P<0.05）,高水平lncRNA ATB患者的生存率低于低水平lncRNA ATB患者;使用si-ATB1和si-ATB2分别转染胶质瘤U87和U251细胞后,lncRNA ATB的表达水平降低;过表达miR-144后,野生型lncRNA ATB的荧光素酶活性受到抑制,对突变型lncRNA ATB的荧光素酶活性影响不明显。转染si-ATB 24、48和72小时后,U87[（186.4±12.4）个比（73.6±8.6）个比（62.6±5.6）个,P<0.05]和U251细胞[（192.2±15.3）个比（63.6±6.3）个比（68.3±7.6）个,P<0.05]和U251细胞的增殖能力低于对照组;lncRNA ATB的下调提高了U87和U251凋亡百分比（P<0.05）;抑制lncRNA ATB后,U87细胞和U251细胞的细胞侵袭能力降低;与对照组相比,si-ATB组肿瘤体积和肿瘤重量均小于或低于对照组（P<0.05）。结论 lncRNA ATB通过调控miR-144的表达促进胶质瘤细胞的生物学行为。     

Nrf2与p53/p21信号通路在肿瘤中作用的研究进展

氧化应激普遍存在于肿瘤发生和发展的病理过程中。转录因子红细胞系-2p45相关因子-2(NF-E2 p45-related factor 2,Nrf2)信号通路是人体内重要的抗氧化机制,其产物保护机体的细胞免受毒性和氧化性损伤,对癌症的治疗具有重要的价值。肿瘤抑制基因p53能显著促进细胞周期调控因子p21转录活性,p53/p21信号通路是控制细胞周期进程以及调节肿瘤细胞凋亡的核心调控途径。然而,目前有关Nrf2和p53/p21信号通路在肿瘤中的相互调控机制尚未完全阐明。本文将从Nrf2信号通路的组成,p53/p21信号通路的结构与功能,Nrf2信号通路与p53/p21信号通路相互调控对肿瘤的作用关系以及相关抗肿瘤药物的研究进展等方面进行阐述。     

lncRNA EPB41L4A-AS2对卵巢癌细胞SKOV-3凋亡的影响及其机制

目的探讨卵巢癌中长非编码RNA EPB41L4A-AS2差异表达,检测其对卵巢癌细胞凋亡的影响及其作用机制。方法从TCGA数据库中下载并处理新一代测序(RNASEQ V2)数据,利用COX单因素风险回归分析以及K-M生存分析方法,识别与卵巢癌患者预后显著相关的lncRNA。利用生物信息学方法获取卵巢癌显著相关的lncRNA与mRNA共表达网络,挖掘风险lncRNA有关的互作子网,预测卵巢癌患者生存有关的lncRNA及其功能。同时,通过MTT、AO/EB、Western blot检测细胞表型及凋亡相关蛋白,进而研究其机制。结果共识别130个与卵巢癌风险显著相关的lncRNA(P<0.05),其中46个风险lncRNA能够显著区分卵巢癌患者的高低生存率;识别了2个重要的风险lncRNA EPB41L4A-AS2(HR=1.72,P=0.000 016 8)和C20orf203(HR=2.07,P=0.04),其中度最大的为EPB41L4A-AS2。该lncRNA的62个互作基因映射到病毒致癌作用(Viral carcinogenesis pathway)通路中,并且能影响下游信号通路。其lncRNA能通过影响下游增殖通路及内质网蛋白合成通路诱导卵巢癌。过表达lncRNA EPB41L4A-AS2可影响SKOV-3细胞增殖,同时使Bcl-2家族蛋白的表达下调,促凋亡蛋白Bax的表达上调,增加Caspase-3的活性,同时能够使MAPK信号通路中的p38、JNK、ERK1/2蛋白表达上调。结论 lncRNA EPB41L4A-AS2通过MAPK信号途径调节卵巢癌细胞系SKOV-3的凋亡,为长链非编码RNA EPB41L4A-AS2成为临床卵巢癌患者的有效治疗药物提供了新依据。     

LncRNA LUCAT1靶向调控miR-937-5p/MMP13轴对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移能力的影响

目的 探究长链非编码核糖核酸(LncRNA)肺癌相关转录物1(LUCAT1)靶向调控微小RNA-937-5p(miR-937-5p)/基质金属蛋白酶13(MMP-13)轴对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、迁移的影响。方法 采用定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)检测NSCLC组织和细胞中LUCAT1、miR-937-5p和MMP-13 mRNA相对表达水平。将A549细胞分为Control组、sh-NC组、sh-LUCAT1组、sh-LUCAT1+anti-miR-937-5P组、sh-LUCAT1+OE-MMP-13组。并进行相应转染处理后,qRT-PCR和蛋白印迹检测转染效率,CCK-8和BrdU检测细胞活力和增殖;Transwell检测细胞迁移。双荧光素酶用于验证LUCAT1、miR-937-5p和MMP-13之间关系。异种移植肿瘤实验用于证实LUCAT1对肿瘤生长的影响,分为sh-NC组和sh-LUCAT1组。结果 LUCAT1和MMP-13 mRNA在NSCLC组织和细胞系中高表达,而miR-937-5p表达下调(P<0.05)。敲低LUCAT1在体外抑制A549...     

硫利达嗪调控长链非编码RNA癌症易感候选基因7对膀胱癌细胞增殖、凋亡的影响及作用机制

目的 研究硫利达嗪调控长链非编码RNA癌症易感候选基因7（CASC7）对膀胱癌细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法 膀胱癌T24细胞分成对照组、Vector组、CASC7组、实验组、实验组+sh-NC组、实验组+sh-CASC7组。Vector组转染阴性对照载体、CASC7组转染CASC7过表达载体。对照组正常培养,实验组给予48μmol·L^-1的硫利达嗪处理,实验组+sh-NC组先转染shRNA control再给予48μmol·L^-1的硫利达嗪处理,实验组+sh-CASC7组先转染CASC7 shRNA再给予48μmol·L^-1的硫利达嗪处理。转染前将对数期的T24细胞调整浓度为每毫升5×10⁴个,接种于无菌细胞培养板,细胞融合度至75%～85%时,使用0.5%胰蛋白酶消化,用Lipofectamine^? 2000转染试剂将阴性对照载体、CASC7过表达载体、shRNA control、CASC7 shRNA转染进细胞。以实时定量反转录聚合酶链反应检测CASC7表达水平;以细胞...     

桦木酸调控LncRNA MFI2-AS1对骨关节炎软骨细胞损伤的保护作用

目的:探讨桦木酸对骨关节炎软骨细胞损伤的影响及其对LncRNA MFI2-AS1的调控作用.方法:白细胞介素-1β(IL-1β)诱导软骨细胞建立骨关节炎软骨细胞损伤模型,用不同剂量的桦木酸处理细胞,MFI2-AS1小分子干扰RNA(si-MFI2-AS1)及其阴性对照(si-NC)转染至软骨细胞后加入IL-1β处理细胞...     

p21基因对肝癌细胞的生物学影响

目的探讨逆转录病毒介导的p21基因对肝癌Hep3B细胞的杀伤作用。方法通过脂质体将有p21基因的逆转录病毒载体MMLV-p21转染肝癌Hep3B细胞系,并用G418筛选。试验分为转p21基因的Hep3B-P21组及相同遗传背景及培养过程的两对照组肝癌Hep3B系细胞组、转Hep3B-MMLV组3组。采用RT-PCR检测实验组p21基因的表达;应用流式细胞计数分别分析3组细胞周期;MTT法检测细胞增殖并比较细胞抑制率。结果野生p21基因阻止Hep3B系细胞进入S期,停滞在G1期,Hep3B-P21组细胞增殖比两对照组明显受到抑制（P〈0.05）。结论逆转录病毒介导p21基因可有效抑制肝癌Hep3B系细胞的增殖并诱导肝癌细胞的凋亡。