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相似文献
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1.
目的观察不同干粉培养基对鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)的生长作用,筛选优质干粉培养基。方法分别按照5种干粉培养基(赫氏培养基、营养琼脂、亚硫酸钠琼脂基础、溶血琼脂基础和赫金格尔干粉培养基)说明制作培养基,倾注平皿。将0.1 ml鼠疫菌悬液涂布于制备好的平皿中,于28℃48 h培养后进行活菌计数,观察鼠疫菌在5种干粉培养基中的生长效果。结果鼠疫菌在赫氏培养基、营养琼脂、亚硫酸钠琼脂基础培养基中的生长情况相互间差异无统计学意义(P0.05);在溶血琼脂基础、赫金格尔干粉培养基组间差异无统计学意义(P0.05);鼠疫菌在溶血琼脂基础和赫金格尔干粉培养基中的生长效果优于赫氏培养基、营养琼脂和亚硫酸钠琼脂基础培养基,差异有统计学意义(P0.05)。结论 5种干粉培养基均可用于鼠疫菌的分离培养,但溶血琼脂基础干粉和赫金格尔干粉培养基中鼠疫菌的生长效果优于其他3种干粉培养基。  相似文献   

2.
目的利用差异区段(DFR)基因分型方法鉴别沙鼠型鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)和鼠疫菌EV76疫苗株。方法采取水煮法对2015年内蒙古自治区杭锦旗、2013年宁夏回族自治区银川市和2003年河北省康保县分离的6株沙鼠型鼠疫菌和鼠疫菌EV76疫苗株提取DNA,引物选用文献报道中的22个差异区段和pMT1,PCR扩增经琼脂糖凝胶电泳后分析其基因型别。结果沙鼠型鼠疫菌DFR基因型分别为G11、G17和G20。G11缺失位点为DFR01、06、07、13、15、16和17,G17缺失位点较G11增加DFR18,G20缺失位点较G17增加DFR12;鼠疫菌EV76疫苗株的缺失位点则为DFR01、02、04和10。结论利用DFR基因分型方法能快速区分沙鼠型鼠疫菌和鼠疫菌EV76疫苗株,可避免工作中因菌苗污染而造成分离到鼠疫菌的假象,鼠疫菌株基因型别的鉴定可以快速追溯疫情来源。  相似文献   

3.
目的建立鼠疫耶尔森菌的免疫蛋白质组学研究方法 ,初步筛选鼠疫耶尔森菌特异性抗原。方法利用双向电泳技术对37℃培养的鼠疫耶尔森菌EV76株全菌蛋白进行分离,结合免疫印迹技术寻找能与鼠疫耶尔森菌免疫兔血清发生免疫反应的蛋白质,并用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对阳性蛋白点进行鉴定。结果与鼠疫耶尔森菌免疫兔血清反应的鼠疫EV76株蛋白点共472个,经基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴定出277个,对应于159种蛋白,其中,35种蛋白为耶尔森菌特有,5种蛋白[F1荚膜抗原(F1 capsule antigen)、鼠毒素(murine toxin)、鼠疫菌素(pesticin)、纤维蛋白溶解酶原激活因子(Pla)、F1抗原伴侣蛋白(F1 chaperone protein)]为鼠疫耶尔森菌特有。结论初步完成鼠疫耶尔森菌EV76株的免疫蛋白质组学分析,筛选出具有抗原活性的鼠疫耶尔森菌特有蛋白,为后续特异性诊断技术的建立和疫苗研究奠定良好的基础。  相似文献   

4.
目的:评价辣根过氧化酶标记鼠疫F1单克隆抗体(HRP‐F1McAb)酶免疫染色技术检测小鼠脏器鼠疫F1抗原的应用效果。方法通过HRP‐F1McAb酶免疫染色法检测鼠疫菌EV株感染小鼠脏器标本和对照小鼠脏器标本,同时用细菌学、RIHA和ELISA做平行检测。结果 HRP‐F1McAb酶免疫染色法与细菌学一致率为96.36%,阳性检出率差异无统计学意义(χ2=0,P>0.05);HRP‐F1McAb酶免疫染色法和RIHA一致率为98.18%,阳性检出率差异无统计学意义(χ2=0,P>0.05);HRP‐F1McAb酶免疫染色法和ELISA一致率为96.36%,阳性检出率差异无统计学意义(χ2=0,P>0.05)。结论酶免疫染色法检测小鼠脏器鼠疫F1抗原特异敏感、简单快速。  相似文献   

5.
摘要:目的 用不同剂量的141株鼠疫菌对实验豚鼠鼠蹊部皮下接种后引起的病理特征变化,并进行其组织形态学观察。方法 采用141株鼠疫菌分25个(低剂量组)、100个(中剂量组)、5 000个(高剂量组)三个剂量组接种成体实验豚鼠鼠蹊部皮下,接种后,有病死的立即取材、未病死的14 d分别处死实验豚鼠取材。取肝脏、脾脏、肺脏、肾脏及心脏等实质性脏器固定灭菌做病理切片,HE染色,光镜下观察,同时对所取的脏器材料做鼠疫细菌学培养和鼠疫噬菌体裂解实验,以确定各脏器是否含菌,豚鼠是否是特异性死亡。结果 接种不同剂量141株强毒鼠疫菌的实验豚鼠的肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和心脏均分离出鼠疫菌;其组织巨检均有显著的病理变化,镜检除心脏外均有明显的病理变化,且呈不同程度的充血、出血、脂肪变性及组织坏死表现。结论 141株鼠疫菌的不同剂量组均引起实验豚鼠急性炎症反应,豚鼠肝、脾、肺、肾、心等实质性脏器的病理变化显著,并随接种剂量增大而出血及组织坏死逐渐严重。  相似文献   

6.
鼠疫菌是典型的异养菌 ,不同自然疫源地的鼠疫菌表现有不同的营养需求 ,为了查明四川省石渠县鼠疫自然疫源地青海田鼠鼠疫菌的营养特性 ,我们对从青海田鼠体内分离的鼠疫菌做了营养鉴定 ,现将结果报告如下。1 材料与方法1 1 菌株 实验菌株来源于四川省石渠县俄多玛乡青海田鼠鼠疫菌 19株 ,内蒙古阿巴嘎旗布氏田鼠、长爪沙鼠鼠疫菌各 1株 ,青海省共和县、称多县、都兰县喜玛拉雅旱獭 ,腹窦纤蚤鼠疫菌 3株、鼠疫菌141、EV和假结核菌 0 5各 1株 (表 1)。1 2 最小培养基 选用Lawton配方[3 ] ,氨基酸浓度 (mg/l)为DL -苏氨酸 6…  相似文献   

7.
目的以滴鼻感染的方式对Balb/c小鼠进行鼠疫强毒株敏感性实验。方法将鼠疫菌141标准株37℃24 h培养物,用灭菌生理盐水研磨制成均匀菌悬液,标准比浊后稀释成不同剂量组,分别滴于Balb/c小鼠鼻孔处,攻击感染后连续观察22 d,记录小鼠特异性死亡。同时进行平板计数,以菌落形成单位可推算出实际攻击活菌数量。结果活菌计数结果:培养48 h后7个平板菌落形成单位平均为23.6 cfu,强毒鼠疫菌141株滴鼻感染Balb/c小鼠的绝对致死量为118 000 cfu。结论 Balb/c小鼠经滴鼻感染后对鼠疫菌的敏感性远远低于皮下感染,故鼠疫菌滴鼻感染Balb/c小鼠的方式在鼠疫鉴定和鼠疫疫苗方面的研究中具有重要意义。  相似文献   

8.
[目的]观察常见几种致病菌对鼠疫菌的生长与形态的影响。[方法]选择5种致病菌与鼠疫菌分别混合接种在不同培养基,置28℃温箱,培养24h后观察菌落生长状况和菌落特征。[结果]结果表明各种菌在不同培养基上对鼠疫菌的生长发育及形态有不同的影响[结论]大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、小肠结肠炎菌、假结核菌对鼠疫菌生长有抑制作用,A群链球菌对鼠疫菌生长有刺激作用。  相似文献   

9.
目的:了解鼠疫菌在历史鼠疫患者坟墓土壤中的存在状况。方法:采用赫氏培养基对鼠疫菌进行培养,同时利用Real-time定量荧光PCR对样本进行定性分析。结果:病原培养及荧光定量PCR定性分析显示样本均为阴性。结论:鼠疫菌在历史鼠疫患者坟墓的土壤中无法存活64年。  相似文献   

10.
目的 从鼠疫疫源地鼠巢中分离1株野生型鼠疫噬菌体(YP060)并分析其生物学特性。方法 采用双层琼脂平皿法从云南省鼠疫疫源地鼠巢中分离鼠疫噬菌体;描述其形态特征;了解裂解能力、宿主谱、最佳感染复数、一步生长特性;分析不同温度和pH值、紫外线、氯仿对噬菌体的敏感性。结果 YP060形态呈蝌蚪形,头部为正多面体结构,带有一伸缩的尾鞘;对鼠疫疫苗株EV76的最佳感染复数为0.1;潜伏期为50 min,暴发期为80 min;宿主谱评价显示,YP060仅裂解鼠疫疫苗株;YP060在30~50℃具有较强的热稳定性;pH值5~10范围内均有较强的裂解活性;对紫外线比较敏感;对氯仿不敏感,5%浓度的氯仿对其活性基本没有影响。结论 本研究为国内首次从鼠疫疫源地鼠巢中分离到鼠疫噬菌体YP060,该噬菌体具有窄宿主谱和较强的生物学裂解特性。  相似文献   

11.
摘要:目的 分析2010-2013年间梧州市手足口病的病原学监测结果,探讨病毒流行特征,为今后制定预防及控制防治策略提供依据。方法 采用RT-PCR法对1 835例手足口病临床诊断病例的肛拭子样本进行核酸检测,用SPSS对数据进行统计分析。结果 1 835例手足口病病例的肛拭子样本中,EV71、CoxA16、其他类型的EV的总检出阳性率分别为28.55%、26.75%、45.83%;病毒优势流行株由2010年以EV71为优势毒株逐渐转变成2013年以其他类型的EV为优势毒株;普通与重症病例的检出阳性率的差异有统计学意义(χ2=491.54,P<0.001),不同病毒类型在普通与重症病例间的构成的差异有统计学意义(普通与重症病例间的构成比总体比较的χ2为26.34,普通与重症病例间其他类型的EV构成比较χ2为120.61,EV71为219.98,CoxA16为48.67,均为P<0.001);以5岁内婴幼儿的肠道病毒阳性检出为主(总肠道病毒检出率构成比为90.91%)。结论 EV71更易导致重症,但致死亡的风险与其他病毒相同;病毒的优势流行株改变是否与气候相关并影响发病值得进一步研究;5岁以下儿童,特别是3岁以下的儿童为防止手足口病进展为重症、死亡病例时需重点关注的人群。  相似文献   

12.
目的 分析鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)的rRNA基因识别特征.方法 通过比较基因组学方法,利用Clustal W软件,对目前已完成全基因组测序的9株鼠疫菌的rRNA基因序列进行分析,分别比对rRNA基因簇两侧的2000bp序列、基因簇内16S、23S、5S rRNA及16S~23S基因间隔区序列,以确定鼠疫菌rRNA基因的识别特征.结果 菌株D182038、D106004、Z176003和CO92分别有6个rRNA基因簇拷贝(6拷贝菌株),菌株91001、KIM、Nepa1516、Antiqua和Pestoides F分别有7个rRNA基因簇拷贝(7拷贝菌株).按照两侧2000bp序列不同,可将鼠疫菌rRNA基因簇分成13种类型,并可将6拷贝与7拷贝菌株进行区分;16S~23S rRNA基因间隔区含有4种不同种类和数量的tRNA基因,可将6拷贝菌株和7拷贝菌株分别进行区分;23S rRNA基因在不同菌株间及不同rRNA拷贝间的碱基突变数方差分析显示,各菌株间F=0.548,P=0.815>0.05;各拷贝间F=5.228,P<0.01.结论 鼠疫菌rRNA基因簇两侧序列、间隔区tRNA基因和23S rRNA基因可作为识别不同菌株和不同rRNA基因簇拷贝的指标,将鼠疫菌不同菌株进行分类.
Abstract:
Objective To study the identification characteristics of rRNA genes on Yersinia (Y.)pestis.Methods By means of comparative genomics,we compared the rRNA genome sequences of nine completely sequenced strains of Y. pestis isolated from China and other countries by Clustal W software.we also compared the 2000 bp sequence adjacent to the rRNA genes,rRNA genes and 16S-23S rRNA spacer region respectively to determine the identification features of rRNA genes for Y. pestis.Results There were 6 rRNA gene clusters in the strains of D182038,D106004,Z176003 and CO92 respectively(6 copies strain).There were 7 rRNA gene clusters in the strains of 91001,KIM,Nepa1516,Antiqua and Pestoides F(7 copies strain).According to the 2000 bp sequence,13 types of rRNA gene clusters could classify the strains between the 6 copies and 7 copies.There were 4 types of tRNA gene among the 16S-23S rRNA spacer region that could classify the strains among the 6 copies and 7 copies strains respectively.The number of point mutation among the 23S rRNA gene was statistically different in some copies under ANOVA analysis(F=0.548,P=0.815>0.05 among the strains and F=5.228,P<0.01 among the copies).Conclusion The 2000 bp sequence adjacent to the rRNA genes,tRNA gene and 23S rRNA gene sequence could serve as the identification sign of rRNA genes for classifing the strains of Y. pestis.  相似文献   

13.
The lpxM mutant of the live vaccine Yersinia pestis EV NIIEG strain synthesising a less toxic penta-acylated lipopolysaccharide was found to be avirulent in mice and guinea pigs, notably showing no measurable virulence in Balb/c mice which do retain some susceptibility to the parental strain itself. Twenty-one days after a single injection of the lpxM-mutant, 85-100% protection was achieved in outbred mice and guinea pigs, whereas a 43% protection rate was achieved in Balb/c mice given single low doses (10(3) to 2.5 x 10(4) CFU) of this vaccine. A subcutaneous challenge with 2000 median lethal doses (equal to 20,000 CFU) of fully virulent Y. pestis 231 strain, is a 6-10-fold higher dose than that which the EV NIIEG itself can protect against.  相似文献   

14.
吴昀  陈强  冷红英 《实用预防医学》2019,26(12):1458-1461
目的 通过检测江苏省健康儿童脑膜炎奈瑟菌A、C、W135、Y群抗体水平,了解人群免疫状况,评价疫苗接种效果。 方法 分层随机抽样的方式抽取淮安、盐城两市14岁以下健康儿童517名,采用间接ELISA测定脑膜炎奈瑟菌A、C、W135、Y群多糖抗体IgG。用SPSS 20.0进行统计分析。 结果 脑膜炎奈瑟菌(Neisseria meningitides,Nm)A、C、W135、Y群抗体达到2 μg/ml保护性水平的健康儿童比例分别为:76.02%、65.38% 、29.21%、45.26%;抗体几何平均浓度(geometric mean concentration,GMC)分别为4.59、2.90、1.06、1.55 μg/ml。不同年龄组之间Nm A、C群抗体浓度差异有统计学意义(F=14.118、32.008,P<0.05);抗体浓度≥2 μg/ml的受试者所占比例差异有统计学意义(χ2=31.745、41.354,P<0.05);抗体 GMC和达保护性抗体水平比例最高的皆为6~岁年龄组。各年龄组NmW135、Y抗体浓度差异以及抗体浓度≥2 μg/ml儿童的百分比差异则均无统计学意义(F=2.558, F=0.611; χ2=0.800, χ2=1.896;P>0.05)。不同免疫史组别,Nm A、C抗体浓度差异有统计学意义(F=11.021、22.421,P<0.05),抗体浓度≥2 μg/ml的儿童百分率差异有统计学意义(χ2=41.578、46.300,P<0.05);均随着免疫次数递增而增加。 结论 现行我国脑膜炎球菌疫苗的预防接种可获得一定的针对A、C群脑膜炎奈瑟菌的免疫保护,但免疫应答强度及免疫持久性仍存在不足。建议继续提高脑膜炎球菌疫苗免疫效力及扩大型别覆盖范围,同时进一步调整免疫策略,阻止脑膜炎奈瑟菌的传播流行。  相似文献   

15.
目的应用荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测土壤和动物脏器中鼠疫耶尔森菌,评价并优选环境样品目标核酸的纯化方法。方法应用TaqMan荧光定量PCR技术,以鼠疫耶尔森菌pla、caf1、hms引物、探针为指标,比较不同种从土壤和脏器中纯化鼠疫耶尔森菌核酸的方法。结果应用NaI—Glassmilk方法及荧光定量PCR检测土壤中的鼠疫菌,检出底限为10^4拷贝/g土壤(pla),从染疫动物脾脏、肝脏标本中也能敏感检出鼠疫菌。结论荧光定量PCR方法和Nal裂解Glassmilk制备模板联合应用可灵敏特异地从土壤和动物脏器中检测鼠疫耶尔森菌。  相似文献   

16.
Decline of maternal antibodies to plague in Norway rats.   总被引:1,自引:0,他引:1  
The decline of maternal antibodies to the fraciton I antigen of Yersinia pestis was investigated in newly weaned Rattus norvegicus obtained from dams vaccinated with strain EV76(51F) of Y. pestis. IHA titre decreased by 50% each 7-3 days and CF titre declined 50% each 10-0 days in young rats. An analysis of available data indicated that maternal IHA and CF antibodies could persist to 3 months of age. Therefore, positive serologic reactions in young R. norvegicus, detected in the course of serological surveys, could be the result either of active immunization after exposure to the plague bacillus or of transient passive immunization (i.e. maternal antibody).  相似文献   

17.
Rabbit polyclonal hyperimmune antibodies to Yersinia pestis, and a mouse monoclonal antibody against the capsular antigen fraction 1 (F1) were compared in immunofluorescence (IF) tests. Fluorescent antibody conjugates were prepared from polyclonal antisera to four F1 positive Y. pestis strains; the conjugated antibody to strain A1122 gave the strongest IF staining of F1 positive and F1 negative Y. pestis strains. Indirect assays were rejected in favour of direct assays utilizing polyclonal and monoclonal reagents because the increased background staining reduced the effective contrast of bacterial visualisation. Polyclonal conjugates gave fairly homogeneous staining of Y. pestis bacterial populations, but in monoclonal assays a skew distribution of fluorescence intensity was observed, the majority of bacteria being poorly stained. The proportion of cells stained well by the monoclonal sufficed for easy identification of Y. pestis of the F1 positive phenotype however, and staining was not affected by washing the bacteria or treating them with formaldehyde. Y. pestis strains of the F1 positive genotype reacted with the monoclonal if bacteria were grown at 37 degrees C but not if the growth temperature was reduced to 25 degrees C thus preventing capsule production. The polyclonal conjugate reacted with bacteria of these strains that had been grown at either temperature. Strains of F1 negative genotype grown at either temperature reacted with the polyclonal conjugate but not with the monoclonal. Cross reactions between the polyclonal reagents and Y. enterocolitica biovar 2, serovar O 8 could not be removed by selective absorption; however, the monoclonal antibody gave no cross reaction. The F1 phenotypic status of bacterial preparations was verified by ELISA measurement of the fraction 1 antigen concentration. Antigen levels for F1 positive and F1 negative phenotypes differed by about three logs for suspensions of Y. pestis harvested from solid media. The polyclonal and monoclonal direct IF tests applied to spleen and blood smears of laboratory mice infected with Y. pestis were able to differentiate between lethal infection with an F1 positive strain carrying all four classical virulence determinants, an F1 positive vaccine strain, and an F1 negative strain.  相似文献   

18.
目的明确阜阳市手足151病暴发的病原体,并对RT,PCR结果进行分析。方法利用巢式RT—PCR方法,分别采用肠道通用引物、EV71特异引物和CoxA16特异引物对这起暴发中156例病人的176份病例标本进行检测。结果156例病例的176份标本中,肠道通用引物、EV71特异引物和CoxA16特异引物检测阳性率分别为73.30%、63.07%、0%。咽拭子、气管吸痰液、肛拭子肠道通用引物检测阳性率分别为75.71%、54.54%、78.57%,χ^2=4.57,P〉0.05;EV71特异引物检测阳性率分别为65.00%、45.45%、71.43%,χ^2=3.57,P〉0.05,两种引物检测的三类标本阳性率比较均无统计学意义。156例病例中,有22人采集了双份或多份标本共计50份,其中标本阳性率和病例阳性率比较,肠道通用引物检测分别为56.00%、81.82%,χ^2=4.41,P〈0.05;EV71特异引物检测分别为54.00%、81.82%,χ^2=5.04,P〈0.05,两种引物检测结果均有统计学意义。结论巢式RT—PCR技术是肠道病毒快速诊断的重要手段,阜阳市手足口病暴发的病原体为肠道病毒EV71型。多次多样本采样能够提高病例阳性诊断率。  相似文献   

19.
目的 比较肠道病毒(EV)71型(EV71)与其他EV感染手足口病重症病例的临床特征,寻找EV71手足口病重症病例的特异性诊断指标.方法 病例定义采用卫生部"手足口病诊疗指南(2010年版)",通过查阅病历及现场个案调查,获得定点收治医院手足口病重症病例的临床资料,PCR检测粪便标本中EV、EV71及CoxA16等核酸.比较EV71与其他EV感染的手足口病重症病例临床特征,有统计学意义的指标进行Fisher逐步判别分析.结果 EV71与其他EV感染的手足口病重症病例比较,肢体抖动、易惊、精神差、抽搐等神经系统症状和体征以及脑脊液白细胞计数升高等指标的差异有统计学意义(P<0.05),Fisher逐步判别分析发现肢体抖动、脑脊液白细胞计数升高有统计学意义.EV71和其他EV感染的判别方程分别为Y=3.059X1+3.83X5-2.742和Y=1.634X1+1.623X5-1.693,EV71判别正确性为91%,其他EV判别正确性为40%.结论 肢体抖动和脑脊液白细胞计数升高可作为EV71重症病例的判别诊断指标.
Abstract:
Objective To compare the clinical features of severe hand foot and mouth disease between enterovirus(EV)71 and other EV to find specific diagnosis index of EV71 severe hand foot and mouth disease.Methods Case definition were adopted from national guideline of hand foot and mouth disease diagnose(Version 2010).Clinical data of severe hand foot and mouth disease came from case history and contents of questionnaire would include the ones between the time of onset and diagnoses being made.EV and EV71,Cox A16 nucleic acid tested were by RT-PCR in stopl samples.Clinical features of severe hand foot and mouth disease between EV71 and other EV were compare.Results There appeared statistical differences between neurologic symptoms such as tremor,myoclonic jerk,listlessness,convulsion and white blood cell counts in CSF(P<0.05).Results from the step Fisher discriminant analysis showed only tremor and white blood cell had an increase in CSF,with statistically significant differences.The discriminant equation of EV71 was Y=3.059X1+3.83X5-2.742 and the equation of other EV was Y=1.634X1+1.623X5-1.693.The specificity of EV71 was 91% and the specificity of other EV Was 40%.Conclusion The increase of clinical features of tremor and white blood cell in CSF could be used as diagnosis index of severe EV71.  相似文献   

20.
目的 筛选出既能降解农药又有抑制霉菌的芽孢杆菌,并测定此芽孢杆菌的最佳生长条件。方法 本实验以有机磷农药为试验用培养基中惟一氮源筛选出10株能分解有机磷农药的芽孢杆菌,并测试其抑制霉菌作用,摸索菌株最适生长条件。结果 筛选得到的降解农药的7号菌株,有抑制霉菌生长作用,培养温度为35℃,pH7.0。结论 芽孢杆菌能够抑制霉菌并且降解有机磷农药。  相似文献   

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