活性维生素D3对人系膜细胞凋亡及Caspase-3表达的影响

目的 探讨活性维生素D3〔1,25（OH）2D3〕对人系膜细胞凋亡的影响,并初步探究其作用机制。方法 体外培养人系膜细胞,随机分为4组：正常对照组,表皮生长因子（EGF）组,1,25（OH）2D3组,EGF联合1,25（OH）2D3组,采用流式细胞术检测各组系膜细胞的凋亡率,Western blotting检测各组半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）蛋白表达的情况。结果 与正常对照组比较,EGF组系膜细胞凋亡率降低,Caspase-3表达量降低（P＜0.05）,1,25（OH）2D3组系膜细胞的凋亡率升高,Caspase-3表达量升高（P＜0.05）;与EGF组比较,EGF联合1,25（OH）2D3组系膜细胞的凋亡率升高,Caspase-3表达量升高（P＜0.05）;EGF联合1,25（OH）2D3组与正常对照组系膜细胞的凋亡率和Caspase-3表达量间差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论 1,25（OH）2D3可能是通过上调Caspase-3的表达而诱导系膜细胞的凋亡。EGF可抑制人系膜细胞的凋亡,1,25（OH）2D3可逆转EGF对系膜细胞凋亡的抑制作用。     

1,25（OH）2D3抑制高糖致大鼠肾脏系膜细胞肥大的机制研究

目的 观察1,25（OH）2D3能否抑制高糖导致的大鼠肾小球系膜细胞（RMC）肥大,并探讨其可能的作用机制.方法 将体外培养的RMC分为正常对照组、等渗对照组、高糖组、单纯1,25（OH）2D3组、等渗＋1,25（OH）2D3组及高糖＋1,25 （OH）2D3组.1,25（OH）2D3浓度为10-2mol/L,培养48 h,检测各组细胞总蛋白/细胞数比值,流式细胞仪检测各组前向角光强度（FSC）,并采用Western blot检测各组维生素D受体（VDR）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、核蛋白S6激酶（p70S6K）、延长因子4E结合蛋白（4EBP1）的表达情况.结果 高糖＋1,25（OH）2D3组与高糖组比较,FSC降低（530.7±15.6 vs.509.0±35.0,P＜ 0.05）、总蛋白/细胞数比值降低（41.5±1.7 vs.49.9±1.1,P＜0.05）;Western blot半定量灰度分析显示,高糖组较正常对照组VDR下调,mTOR及p70S6K的蛋白水平上调（P＜0.05）;高糖＋1,25（OH）2D3组较高糖组mTOR及p70S6K的蛋白水平均下调（P＜0.05）.结论 1,25（OH）2D3可逆转高糖导致的RMC肥大,其机制可能是通过抑制mTOR及其下游信号通路,减少了蛋白质的合成.     

Ezrin蛋白在糖尿病肾病鼠肾小球的表达及活性维生素D对其的影响

目的：观察Ezrin蛋白在糖尿病肾病（DN）大鼠肾小球的表达以及活性维生素D[1,25-（OH）2D3]对其表达的影响。方法：Wistar大鼠随机分为对照组和糖尿病肾病模型组;后者经腹腔注射链佐脲菌素（STZ）诱导DN大鼠模型,再随机分DN组和1,25-（OH）2D3组。1,25-（OH）2D3组皮下埋置渗透性微量泵,给予1,25-（OH）2D3 0．03ng／g·d^-1,连用8周。检测大鼠血糖（Glu）、肾重／体重（KW／BW）、24h尿蛋白（24hUP）、血肌酐（Scr）、尿足细胞（UPC）。采用间接免疫荧光检测肾小球Ezrin蛋白的表达与分布。WT-1免疫组化染色检测每个肾小球足细胞数目。结果：与对照组相比,DN组Glu、KW／BW、24hUP、Scr、UPC显著升高;肾小球Ezrin表达显著下降,足细胞数目减少。DN组与1,25-（OH）2D3组Glu水平无显著性差异,1,25-（OH）2D3组KW／BW、24hUP、Scr、UPC较DN组显著降低;而肾小球Ezrin表达及足细胞数目显著增加。对照组Ezrin蛋白荧光染色沿肾小球毛细血管壁均匀线型分布;DN组呈不连续的粗颗粒样分布;1,25-（OH）2D3组部分呈短线型荧光。Ezrin表达荧光强度与肾小球足细胞数目呈正相关（FS=0．51,P〈0．01）,与24hUP、UPC呈负相关（rs=-0．43,-0．45,P〈0．01）。结论：1,25-（OH）2D3可减少DN鼠肾小球Ezrin的表达,减少足细胞脱落,维持肾小球足细胞数量。     

不同剂量的1，25（OH）2D3对大鼠Thy1肾炎系膜细胞凋亡的影响

目的：探讨不同剂量的1,25（OH）2D3对大鼠抗胸腺细胞抗体（Thy1）肾炎系膜细胞凋亡的影响。方法将SD大鼠120只分为空白对照组（A组）、肾炎模型组（B组）、低剂量1,25（OH）2D3组（C组）和高剂量1,25（OH）2D3组（D组）,每组30只。C、D两组造模成功后给药干预,4组分别于干预后第1、3、7、14、21天每组随机处死6只大鼠,取肾组织标本经HE及PAS染色后确定肾脏病理损害分级;免疫组化法检测肾组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase‐3）的表达;TUNEL试剂盒检测其肾小球内细胞凋亡。结果与A组比较,B组Caspase‐3表达增强（P＜0．05）;与B组比较,C、D组Caspase‐3表达增强,但差异无统计学意义（P＞0．05）;D组表达最高,但与C组比较差异无统计学意义（P＞0．05）。与A组比较,B组肾小球内凋亡细胞明显增多（P＜0．05）,且随时间推移逐渐增强;与B组比较,C、D两组凋亡明显增多（P＜0．05）,并在3d达高峰,7、14d逐渐下降,21d趋于正常（P＜0．05）;C、D两组比较,D组凋亡细胞增多明显,但差异无统计学意义（P＞0．05）。结论1,25（OH）2D3具有诱导大鼠肾小球系膜细胞凋亡的作用,其参与了对Caspase‐3的调节,诱导系膜细胞凋亡,促进肾炎的修复,可延缓肾脏疾病进展。     

尘螨抗原对P815肥大细胞维生素D受体和炎症介质分泌的影响及1,25（OH）2D3的免疫调节作用

目的探讨1,25（OH）2D3对尘螨抗原（Derp）直接作用的P815肥大细胞维生素D受体（VDR）表达及IL-4、IL-10分泌的影响及其免疫调节作用。方法用不同浓度Derp、1,25（OH）2D3单独或联合作用P815细胞,收集细胞和上清液。采用Westernblot、RT-PCR法分别检测P815肥大细胞VDR蛋白及mRNA表达,ELISA法检测细胞悬液上清液中IL-4、IL-10浓度。结果P815肥大细胞表达VDR。不同浓度Derp对P815肥大细胞VDR表达有调节作用,作用12、24h组VDRmRNA表达呈明显浓度依赖性下调（P＜0.05）。不同浓度Derp作用P815肥大细胞36h后,VDR蛋白表达呈浓度依赖性下调。高浓度1,25（OH）2D3单独作用对VDR表达有上调作用（P＜0.05）。不同浓度1,25（OH）2D3单独作用P815肥大细胞可促进IL-10的释放（P＜0.05）,但对P815肥大细胞IL-4分泌无明显影响（P＞0.05）。1,25（OH）2D3可抑制Derp引起的IL-4分泌（P＜0.05）,且1,25（OH）2D3浓度越高,抑制作用越强。Derp、1,25（OH）2D3联合处理P815肥大细胞36h后,上清液中IL-10浓度无明显变化（P＞0.05）。结论1,25（OH）2D3可通过上调肥大细胞上VDR表达,促进IL-10分泌,从而发挥抗炎作用。1,25（OH）2D3对Derp引起的肥大细胞免疫反应的干预作用可能是通过抑制IL-4的合成和分泌,从而抑制Th2型免疫应答的。     

老年危重症患者血清维生素D水平与APACHEⅡ评分和预后的相关性分析

目的 探讨老年危重患者血清1,25羟-维生素D3[1,25（OH）2D3]水平与急性生理功能和慢性健康状态Ⅱ（APACHE Ⅱ）评分及预后的相关性.方法 将196例老年危重患者按APACHE Ⅱ评分分为A组（APAC HE Ⅱ≤15）、B组（16≤APACHE Ⅱ≤25）和C组（APACHEⅡ＞25）,根据转归分为死亡组与存活组,分析APACHEⅡ评分与血清1,25（OH）2D3及院内死亡率的相关性.结果 A组血清1,25（OH）2D3水平和院内病死率与B组和C组差异均有统计学意义（均P＜ 0.05）;B组血清1,25（OHhD3水平和院内病死率与C组差异均有统计学意义（均P＜ 0.05）.存活组血清1,25（OH）2D3水平明显高于死亡组（P＜0.01）,血清1,25（OH）2D3水平与APACHE Ⅱ评分呈负相关（r=-0.458,P＜0.05）,与院内病死率呈负相关（r=-0.871,P＜0.05）.结论 老年危重患者血清1,25（OH）2D3水平低下提示病情危重且不良预后可能性增加.     

1，25（OH）2D3对人系膜细胞增殖及PI3K/Akt信号通路的影响

目的 观察1,25-二羟维生素D3〔1,25（OH）2D3〕对人系膜细胞（HMC）增殖及Akt、mTOR表达的影响,探讨PI3K/Akt信号通路在1,25（OH）2D3对HMC增殖调控中的作用。方法 体外培养HMC,取传代培养至第3～7代细胞分为4组：正常对照组（N组）、1,25（OH）2D3组（10-8 mol/L,VD组）、PI3K抑制剂干预组（LY294002 2 μg/ml,LY组）,LY294002（2 μg/ml）联合1,25（OH）2D3组（10-8 mol/L）组（LY+VD组）,干预48 h,倒置相差显微镜观察各组细胞生长,CCK-8法检测各组细胞增殖,流式细胞术检测各组细胞周期时相分布,Western blotting检测各组Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR表达的情况。结果 各实验组吸光度值（A值）比较,差异有统计学意义（F=281.641,P＜0.01）,其中VD组、LY组和LY+VD组A值均低于N组,LY+VD组A值均分别低于VD组和LY组,差异均有统计学意义（P＜0.01）。各实验组G2/M期比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。各实验组G1期、S期和PI比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）;其中VD组、LY组和LY+VD组G1期均高于N组,S期和PI均低于N组,LY+VD组G1期均高于VD组,S期和PI均低于VD组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。各实验组Akt/β-actin、mTOR/β-actin灰度值比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。各实验组p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR灰度值比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;其中VD组、LY组和LY+VD组p-Akt/Akt、p-nmTOR/mTOR灰度值均低于N组,LY+VD组p-Akt/Akt、p-nmTOR/mTOR灰度值均低于VD组和LY组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 1,25-（OH）2D3可通过PI3K/Akt信号通路抑制体外培养HMC的增殖。     

糖尿病肾病患者血清1，25二羟维生素D3水平与氧化应激的关系

探讨糖尿病肾病（DN）患者血清1,25二羟维生素D3[1,25（OH）2D3]与氧化应激的关系。 DN组血清1,25（OH）2D3水平明显低于糖尿病（DM）组和正常对照组。在 DN 患者,1,25（OH）2D3与晚期氧化蛋白产物（AOPP,r＝-0.646,P＜0.01）、活性氧簇（ROS,r＝-0.703,P＜0.01）呈负相关,与超氧化物歧化酶（SOD,r＝0.962,P＜0.01）呈正相关。多元逐步线性回归分析显示,1,25（OH）2D3、LDL-C、BMI、血肌酐和年龄影响DN患者体内氧化应激系统。随着慢性肾脏病的进展,血清AOPP、ROS水平显著升高,SOD水平显著下降,血清1,25（OH）2D3水平亦明显降低。     

1,25二羟维生素D3联合塞来昔布抑制乳腺癌生长及VEGF表达研究

目的 研究1,25二羟维生素[1,25（OH）2D3]联合塞来昔布对裸鼠人乳腺癌模型中肿瘤细胞增殖与血管内皮生长因子（VEGF）的影响.方法 54只裸鼠人乳腺癌模型（HS578T）随机分成9组,A组：生理盐水组（0.2 ml/只）;B组：阿霉素组（1.75 mg/kg,5 d）;C组：塞莱昔布组（30 mg/kg）;D组：低剂量1,25（OH）2D3组（0.4 μg/kg）;E组：中等剂量1,25（OH）2D3组（0.8 μg/kg）;F组：高剂量1,25（OH）2D3组（1.6 μg/kg）.G组：塞莱昔布（30 mg/kg）联合低剂量1,25（OH）2D3（0.4 μg/kg）组;H组：塞莱昔布（30 mg/kg）联合中等剂量1,25（OH）2D3（0.8 μg/kg）组;I组：塞莱昔布（30 mg/kg）联合高剂量1,25（OH）2D3（1.6 μg/kg）.观察肿瘤大小,计算抑瘤率,免疫组化方法检测VEGF、环氧化酶-2（COX-2）、维生素受体（VDR）.结果 1,25（OH）2D3、塞莱昔布均能抑制裸鼠乳腺癌转移瘤肿瘤生长,两者联合显著提高对裸鼠转移瘤的抑制率.A组、B组、C组、D组、E组、F组、G组、H组、I组肿瘤体积分别为：（1 756.52±254.80）、（563.63±100.65）、（1 000.10±180.07）、（1 175.47±91.27）、（1 107.63±209.18）、（980.74±163.22）、（927.27±172.54）、（881.81±127.22）和（636.36±109.42）mm3.各组瘤体抑瘤率分别为69.52%、44.80%、36.04%、39.71%、46.62%、49.51%、53.23%和65.32%,各剂量组与A组差异有统计学意义（P〈0.05）,两药联合组较两药各自单药组均明显提高抑瘤作用.1,25（OH）2D3对VEGF的表达有抑制作用;对VDR的表达也有上调作用（P〈0.05）;塞莱昔布对VEGF、COX-2表达明显抑制（P〈0.05）;两药联合明显抑制VEGF、COX-2的表达（P〈0.05）,且抑制作用较单药得以增强,两药联合可以明显上调VDR的表达（P〈0.05）.结论 1,25（OH）2D3可抑制裸鼠乳腺癌的生长,作用呈剂量依耐性,联合塞莱昔布可增强抑制作用,两药联合增加了对血管内皮生长因子的抑制作用,1,25（OH）2D3联合塞来昔布的协同作用可能意味着新的临床治疗策略.     

1,25-二羟维生素D_3对哮喘大鼠血清中Eotaxin及IL-8表达的影响

目的探索1,25-（OH）2D3对哮喘大鼠血清中Eotaxin及IL-8表达的影响。方法 50只Wistar大鼠随机分为正常对照组（N）、哮喘组（A）、1,25-（OH）2D3组（VD）、布地奈德组（B）及1,25-（OH）2D3＋布地奈德联合治疗组（L）,每组10只。用ELISA法检测血清中Eotaxin及IL-8的表达水平。结果 Eotaxin和IL-8的表达,A组较N组和治疗组明显增高;VD组较A组明显减低,明显高于N组、B组及L组;L组较A组、B组和VD组明显减低。结论哮喘急性发作时血清中Eotaxin及IL-8的表达水平显著增高,1,25-（OH）2D3有效抑制了哮喘时的Eotaxin和IL-8的表达水平,1,25-（OH）2D3与布地奈德联合治疗作用更为明显。     

1,25(OH)_2D_3对肾小球系膜细胞凋亡相关因子表达的影响

目的观察1,25(OH)_2D_3对肾小球系膜细胞(HMC)凋亡相关因子表达的影响。方法2017年10月—2018年9月在武汉科技大学附属普仁医院肾内科实验室经体外培养HMC,并按随机数字表法分成4组:A组(空白对照组)、B组(EGF组)、C组[1,25(OH)_2D_3组]、D组[EGF、1,25(OH)_2D_3联合组]。检测Caspase蛋白活性,Western bolt法测定Akt、p-Akt及Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白表达,选择荧光实时定量PCR法测定Caspase-3,Caspase-8、Caspase-9 mRNA表达。结果各组Caspase-3蛋白活性表达比较,B组D组> A组>B组(q/P=5. 156/<0.001、5.436/<0.001、7. 326/<0.001;5.074/<0. 001、5. 982/<0. 001、6. 513/<0. 001); Caslpase-8蛋白的表达4组比较差异无统计学意义(P>0. 05);Caspase-3 mRNA及Caspase-8 mRNA基因表达C组> A组> D组> B组,Caspase-9 mRNA表达C组> A组> B组> D组(q/P值=15. 672/<0. 001、17.526/<0. 001、19. 421/<0. 001;5. 168/<0. 001、5.689/<0.001、6.024/<0.001;6.425/<0.001、6.974/<0. 001、7. 654/<0. 001)。结论 1,25(OH)_2D_3通过增强HMC活性,抑制Akt磷酸化进程,提高Caspase-3及Caspase-9 mRNA表达水平,进而加速促进HMC凋亡。     

1,25（OH）2D3和ATRA对HO8910生长的协同抑制作用

目的：通过单独或联合使用1,25-二羟维生素D3[1,25-dihydroxy vitaminD3,1,25（OH）2D3]和全反式维甲酸（all trans rinoic acid,ATRA）,研究其对人卵巢癌细胞HO8910生长、细胞周期和细胞凋亡的影响,以及维生素D受体（vitamin D recept VDR）及维甲酸α受体受体（retinoic acid receptorα,RARα）mRNA的表达变化,探讨其作用的分子机制。方法：选用人卵巢癌细株HO8910在体外进行培养,培养时分别添加1,25（OH）2D3、ATRA或二者联合,采用MTT比色法测定细胞生长抑制率,流式细胞术（flow cytometry,FCM）进行细胞周期和细胞凋亡分析,用RT-PCR检测VDR及RARαmRNA的表达。结果：结果是单独或联合使用1,25-二羟维生素D3和全反式维甲酸诱导后,HO8910细胞生长均受到不同程度的抑制（P〈0.05）,并呈时间依赖关系;能够引起细胞周期时相的改变,G1细胞增多（P〈0.05）;能够诱导细胞产生细胞凋亡（P〈0.05）;能够上调VDR及RARαmRNA的表达（P〈0.05）,进而抑卵巢癌细胞增殖,其中以联合用药组最为显著。结论：说明1,25-二羟维生素D3和全反式维甲酸能抑制人卵巢癌细胞株HO8910生长;诱导细胞周期发生G1期阻滞,同时产生细胞凋亡作用;通过上调VDR及RARαmRNA的表达,从而抑制癌细胞增当1,25-二羟维生素D3与全反式维甲酸联合用药时,能够对HO8910细胞生长产生协同抑制作用。     

密骨胶囊对去卵巢骨质疏松大鼠体内25(OH)D3和1,25(OH)2D3含量及肾脏VDR mRNA表达的影响

目的 研究密骨胶囊对去卵巢骨质疏松大鼠体内两个骨代谢指标25-羟基维生素D3[25(OH)D3]和1,25-二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]含量及肾脏VDR mRNA表达的影响.方法 72只8月龄健康雌性SD大鼠随机分为6组,即假手术组,模型组,对照药物活性维生素D3组以及密骨胶囊小、中、大剂量组,每组12只,治疗3个月后全部处死,用双能X线骨密度仪及生物力学技术评估模型的骨密度(BMD)及骨质量,采用ELISA法检测血清和肝、肾组织中25(OH)D3和1,25(OH)2D3含量,用FQ-PCR法检测肾脏组织中VDR mRNA的表达情况.结果 ①模型组大鼠股骨头及粗隆部的BMD及骨生物力学指标(最大载荷和最大压应变)均明显下降(P＜0.05或P＜0 01);②使用密骨胶囊大、中剂量组与模型组比较,血清和肝脏、肾脏组织中25(OH)D3和1,25(OH)2D3的含量明显升高(P＜0.05或P＜0.01),与活性维生素D3组比较差异无统计学意义;③模型组大鼠肾脏VDR mRNA的表达低于密骨胶囊治疗组部分大鼠及假手术组(P＜0.05或P＜0.01).结论 密骨胶囊能促进体内VDR mRNA的表达,提高体内25(OH)D3和1,25(OH)2D3含量,从而激活骨代谢,增强骨质骨量.提示适当补充密骨胶囊可有效的防治绝经后骨质疏松.     

Cyclin D3与Ki-67在涎腺腺泡细胞癌中的表达及意义

目的 研究cyclin D3和Ki-67在ACC中的表达情况及意义.方法 采用免疫组织化学法,分别检测cyclin D3和Ki-67蛋白在10例正常涎腺组织(NSG)及34例ACC组织标本中的表达情况.结果 Cyclin D3 LI在ACC组高于NSG组(P＜0.05).复发组的cyclin D3 LI高于无复发组(P＜0.05).Ki-67 LI在ACC组明显高于NSG组(P＜0.05).小涎腺组的Ki-67 LI低于腮腺组显著性(P＜0.05).Ki-67 LI在复发组高于无复发组(P＜0.05).在ACC中cyclin D3的表达与Ki-67的表达呈正相关(r=0.392,P＜0.05).结论 Cyclin D3的表达在ACC的发展过程中有一定作用,促进了细胞增殖.并可能与复发有关.Ki-67可能是一个重要的ACC预后因子.     

1,25（OH）2D3对脂多糖诱导的小鼠蛋白尿的影响

目的观察1,25(OH)2D3对脂多糖诱导的小鼠蛋白尿和uPAR表达的影响。方法 24只C57BL/6雄性小鼠随机分为正常对照组(Sham组)、脂多糖(LPS)处理组(LPS组)、LPS与1,25(OH)2D3共同处理组[LPS+1,25(OH)2D3)组]。LPS组及LPS+1,25(OH)2D3组腹腔注射LPS 300μg(第1天200μg,第2天100μg),Sham组给予等量生理盐水腹腔注射,LPS+1,25(OH)2D3组提前2 d给予1,25(OH)2D32.5μg/(kg·d)灌胃,Sham组及LPS组每天给予等量橄榄油灌胃。第3天留取尿液后处死小鼠。结果 (1)Sham组、LPS组、LPS+1,25(OH)2D3组的尿蛋白分别为(72.0±35.6)、(732.9±233.2)、(412.3±82.7)μg/mg,LPS组尿蛋白比Sham组明显升高(P=0.000);LPS+1,25(OH)2D3组与LPS组相比,尿蛋白明显减少(P=0.001)。(2)LPS组足细胞uPAR蛋白及PLAUR mRNA的表达均高于Sham组和LPS+1,25(OH)2D3组(P<0.05)。结论 1,25(OH)2D3可能通过抑制uPAR的表达,减少蛋白尿。     

1,25-(OH)2D3在2型糖尿病大鼠发病过程中对血清脂联素及脂肪组织脂联素mRNA的影响

目的 通过观察1,25-(OH)2D3在2型糖尿病(T2DM)大鼠发病过程中对血清脂联素及脂肪组织脂联素mRNA表达的影响,探讨维生素D在T2DM发病机制中的作用.方法 选取8周龄雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、1,25-(OH)2D3干预组(VD干预组)、糖尿病组.正常对照组大鼠饲普通饲料,VD干预组和糖尿病组饲高脂高糖饲料.6周后VD干预组和糖尿病组大鼠予以链脲佐菌素(STZ)30 mg/kg腹腔注射建立T2DM动物模型,测定体质量、空腹血糖、空腹胰岛素、三酰甘油、总胆固醇,用ELISA法检测血清脂联素,用RT-PCR法检测脂肪组织脂联素mRNA.结果 糖尿病组大鼠血清脂联素水平[(3.36±1.28)ng/ml]、脂肪组织脂联素mRNA的表达(0.24±0.15)均较正常对照组显著下降,差异有统计学意义(P＜0.05),使用维生素D干预后得到有效改善[VD干预组血清脂联素(5.27±1.37)ng/ml,脂联素mRNA(0.50±0.29),P＜0.05];糖尿病组和VD干预组空腹胰岛素均显著高于正常对照组,VD干预组空腹胰岛素显著低于糖尿病组(P＜0.05).脂肪组织脂联素mRNA的表达与血清空腹胰岛素呈负相关(r=-0.417,P＜0.05).结论 1,25-(OH)2D3可以明显改善T2DM大鼠在发病过程中血清脂联素及脂肪组织脂联素基因表达的下降,从而从分子水平对T2DM大鼠的发病起到保护作用.     

1,25-二羟基维生素D3对肾小球系膜细胞生长的作用

目的 研究1,25二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]对大鼠肾小球系膜细胞生长及细胞周期的影响.方法 通过肾小球系膜细胞体外培养技术,用含有不同浓度(0～10-6mol/L)1,25(OH)2D3的培养液干预系膜细胞,作用不同时间,应用噻唑蓝(MTT)法检测其对系膜细胞生长及增殖的影响,显微镜观察细胞形态变化,流式细胞仪(FCM)检测其对系膜细胞周期及凋亡的影响.结果 0～10-6mol/L浓度的1,25(OH)2D3作用于系膜细胞48 h均能显著抑制系膜细胞生长及增殖(P<0.01),并呈浓度依赖性;一定浓度的1,25(OH)2D3(10-8mol/L)对系膜细胞生长的抑制作用在一定时间范围内随着时间的延长,其抑制作用增强.不同浓度的1,(OH)2D3作用系膜细胞72 h后,各组GO/GI期细胞含量均较对照组增高,S期含量随之减少,尤以10-6mol/L(P<0.01)、10-8mol/L(P<0.05)显著,并呈浓度依赖性,G2/M期含量无显著变化(P>0.05).各干预组均可见亚G1凋亡峰.结论 0～10-6mol/L浓度的1,25(OH)2D3能够抑制系膜细胞的生长及增殖,促进其凋亡,并呈浓度及时间依赖性.     

鼠尾草酸联合1,25-二羟基维生素D3诱导HL-60细胞分化作用的研究

目的 研究鼠尾草酸与1,25-二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]联合应用对HL-60细胞分化的影响.方法 通过四唑氮蓝(MTT)法观察细胞生长,光学显微镜观察细胞形态,应用流式细胞仪测定细胞周期及成熟单核细胞分化标记CD14的表达,观察联合应用鼠尾草酸与低浓度1,25(OH)2D3对HL-60细胞的影响.结果 低浓度1,25(OH)2D3(1nmol/L)抑制HL-60细胞增殖、诱导细胞分化的作用与对照组比较无统计学意义(P＞0.05).同浓度1,25(OH)2D3与10μmol/L鼠尾草酸联合处理HL-60细胞72h后,细胞形态具有成熟单核细胞特征、细胞增殖明显受抑制、细胞阻滞于G0/G1期、CD14的表达率为57.624%;其作用效应与对照组比较有显著性差异(P＜0.01),与单独应用高浓度1,25(OH)2D3(100nmol/L)组比较作用相似,无统计学意义(P＞0.05).结论 鼠尾草酸可增强1,25(OH)2D3对HL-60细胞的诱导分化、抑制增殖作用.     

1,25(OH)2D3对体外培养大鼠成骨细胞RANKL/OPG mRNA表达的影响

目的：观察1,25（OH）2D3对体外培养的大鼠成骨细胞RANKL／OPG mRNA表达的影响,探讨其促进骨吸收的作用机制。方法：体外分离培养大鼠成骨细胞,分别观察不同浓度1,25（OH）2D3及用1,25（OH）2D,处理不同时间对RANKL／OPG mRNA表达的影响,RANKL／OPG mRNA表达采用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法测定。结果：1,25（OH）2D3呈时间和剂量依赖性地刺激大鼠成骨细胞RANKL mRNA的表达,而抑制OPG mRNA的表达,使RANKL／OPG值增高。结论：1,25（OH）2D3通过调节成骨细胞RANKL／OPG的基因表达,从而发挥促进破骨细胞介导的骨吸收作用。