红细胞生成素对高糖诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响及其可能机制

目的：肾间质纤维化（ renal interstital fibrosia , RIF）的核心是肾小管上皮细胞转分化。探讨促红细胞生成素（Erythropoietin, EPO）对高糖诱导的正常人肾小管上皮细胞（human kidney cells, HK-2）转分化的影响及其可能机制。方法体外培养HK-2细胞,按随机数字表法分为空白对照组、高糖诱导组（高糖终浓度30 mmol/L）、甘露醇对照组（甘露醇浓度24．5 mmol/L）、EPO对照组（ EPO终浓度为20 U/mL）、5 U/mL EPO干预组、10 U/mL EPO干预组、20 U/mL EPO干预组及ROCK抑制剂（ Y27632）组（ Y27632终浓度为30μmol/L,加入Y2763230 min后加高糖,高糖终浓度为30 mmol/L）,各组均刺激24 h。应用RT-PCR法检测细胞 RhoA mRNA、ROCK1 mRNA 的水平;细胞免疫荧光法检测细胞 E-钙黏蛋白、α-平滑肌肌动蛋白（αsmoothmuscleactin,α-SMA）的表达;ELISA法检测上清液纤维连接蛋白（fibronectin, FN）的表达。结果 RT-PCR结果显示高糖诱导组RhoA mRNA及ROCK1 mRNA表达较空白对照组显著升高（1．400±0．022 vs 0．945±0．132,1．913±0．011 vs 1．007±0．002,P＜0．05）;5、10、20 U/mL EPO干预组,RhoA mRNA的表达水平（0．278±0．006、0．770±0．005、0．334±0．009）均较空白对照组（0．945±0．131）减少（P＜0．05）,ROCK1 mRNA的表达水平（1．418±0．006、0．919±0．004、0．477±0．002）较空白对照组（51．007±0．002）减少（P＜0．05）;ELISA及细胞免疫荧光结果显示高糖诱导组FN、α-SMA蛋白的表达较空白对照组明显增加[（14545．53±317．27）ng/mL vs （2582．50±87．20）ng/mL,0．335±0．006 vs 0．224±0．006,P＜0．05];直线相关性分析,高糖诱导组,5、10、20 U/mL EPO干预组RhoA mRNA与ROCK1 mRNA表达均呈正相关（P＜0．05）。高糖诱导组α-SMA较空白对照组上升,E-钙黏蛋白较空白对照组下降（P＜0．05）;EPO干预组及ROCK抑制剂组E-钙黏蛋白表达较高糖诱导组增加,而α-SMA表达下降（P＜0．05）;ELISA结果显示,EPO干预组ROCK抑制剂组FN表达较高糖诱导组下降（P＜0．05）,且下降程度与EPO浓度相关。结论 EPO可抑制高糖诱导的HK-2细胞转分化,从而延缓肾间质纤维化,其机制可能与RhoA/ROCK信号通路有关。     

促红细胞生成素对高糖诱导人肾小球系膜细胞纤维化的影响及其机制研究

目的 研究促红细胞生成素（EPO）对高糖诱导人肾小球系膜细胞（MCs）增殖及其表达相关细胞因子和炎性因子的影响,探讨EPO对肾脏组织的生物学效应。方法 2014年12月-2015年5月选取人MCs,采用随机数字表法分为：空白对照组、高糖诱导组、甘露醇对照组、EPO对照组、5 U/ml EPO干预组、10 U/ml EPO干预组、20 U/ml EPO干预组、Rho激酶抑制剂组。采用反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）法检测RhoA、锌离子相关的RhoA蛋白1（ROCK1）mRNA表达水平;酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测结缔组织生长因子（CTGF）、Ⅳ型胶原蛋白、白介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）表达水平;CCK-8法测定细胞增殖吸光度（OD值）。结果 高糖诱导组较空白对照组RhoA、ROCK1 mRNA表达水平升高（P＜0.05）;5 U/ml EPO干预组、10 U/ml EPO干预组、20 U/ml EPO干预组较高糖诱导组RhoA、ROCK1 mRNA表达水平降低（P＜0.05）;5 U/ml EPO干预组、10 U/ml EPO干预组、20 U/ml EPO干预组RhoA、ROCK1 mRNA表达水平组间两两比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）;Rho激酶抑制剂组较5 U/ml EPO干预组、10 U/ml EPO干预组、20 U/ml EPO干预组RhoA mRNA表达水平升高,ROCK1 mRNA表达水平降低（P＜0.05）。高糖诱导组、5 U/ml EPO干预组、10 U/ml EPO 干预组、20 U/ml EPO 干预组RhoA mRNA表达水平与ROCK1 mRNA表达水平均呈正相关（r值分别为0.829、0.898、0.831、0.861,P＜0.05）。高糖诱导组较空白对照组培养24 h时CTGF及Ⅳ型胶原蛋白、培养24 h及48 h 时IL-6及TNF-α表达水平升高（P＜0.05）;5 U/ml EPO干预组、10 U/ml EPO干预组、20 U/ml EPO干预组、Rho激酶抑制剂组培养24 h时CTGF及Ⅳ型胶原蛋白,培养24 h及48 h 时IL-6及TNF-α表达水平较空白对照组升高,较高糖诱导组降低（P＜0.05）;10 U/ml EPO干预组、20 U/ml EPO干预组、Rho激酶抑制剂组较5 U/ml EPO干预组培养24 h时CTGF及Ⅳ型胶原蛋白、培养24 h及48 h 时IL-6及TNF-α表达水平降低（P＜0.05）;20 U/ml EPO干预组、Rho激酶抑制剂组较10 U/ml EPO干预组培养24 h时CTGF及Ⅳ型胶原蛋白、培养24 h及48 h 时IL-6及TNF-α表达水平降低（P＜0.05）。培养24、48、72 h时,高糖诱导组、EPO对照组、5 U/ml EPO干预组、10 U/ml EPO干预组、20 U/ml EPO干预组较空白对照组MCs增殖OD值升高,Rho激酶抑制剂组较空白对照组MCs增殖OD值降低（P＜0.05）;5 U/ml EPO干预组、10 U/ml EPO干预组、20 U/ml EPO干预组较高糖诱导组MCs增殖OD值升高,Rho激酶抑制剂组较高糖诱导组MCs增殖OD值降低（P＜0.05）;5 U/ml EPO干预组、10 U/ml EPO干预组、20 U/ml EPO干预组MCs增殖OD值组间两两比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）;3组MCs增殖OD值培养24、48、72 h时两两比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 高糖可抑制人MCs增殖;高糖可促进人MCs的CTGF、Ⅳ型胶原蛋白和IL-6、TNF-α的表达,而EPO在一定浓度和时间范围内可抑制高糖诱导MCs的CTGF、Ⅳ型胶原蛋白和IL-6、TNF-α的表达,促进增殖,保护肾脏,其机制可能与RhoA/ROCK信号转导通路有关。     

大蒜素对高糖诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响

目的 探讨大蒜素对高糖诱导的人肾小管上皮细胞（HK-2）转分化的影响。方法 复苏并传代培养HK-2细胞,分为正常糖对照组（NG,5.5mmol/L）、高糖组（HG,25mmol/L）、高糖+不同剂量的大蒜素干预组（HG+2.5、5、10、20μg/ml Allicn）、高糖+JAK2抑制剂AG490组（HG+10μmol/L AG490）。倒置显微镜下观察高糖对细胞形态的影响,细胞免疫荧光检测α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、E钙黏蛋白（E-cadherin）、Ⅰ型胶原蛋白（collagen Ⅰ）的表达变化,荧光定量PCR检测 TGF-β1 mRNA的表达变化,Western blot法检测TGF-β1、p-STAT3、STAT3蛋白的表达变化。结果 与正常对照组相比,高糖刺激后的HK-2细胞的形态发生明显的长梭形改变,上皮细胞标志物E-cadherin表达明显减少,而间充质细胞标志物ɑ-SMA及collagen Ⅰ的表达明显升高（P<0.01）;TGF-β1及p-STAT3的表达明显增高（P<0.05）;而加入大蒜素或JAK2抑制剂AG490后,均能不同程度抑制高糖诱导的HK-2细胞转分化,而且大蒜素可明显抑制TGF-β1及p-STAT3的表达,以20μg/ml尤为显著（P<0.05）。结论 大蒜素可能通过抑制JAK2/STAT3信号通路活化,从而抑制高糖诱导的HK-2细胞转分化。     

促红细胞生成素对TNF-α诱导的血管内皮细胞凋亡的影响

目的:观察重组人促红细胞生成素(Recombinant human erythropoietin,rhEPO)对肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)诱导的人脐静脉血内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)凋亡的...     

黄芪注射液对早期糖尿病肾病细胞炎性因子的影响

目的 探讨对早期糖尿病肾病给予黄芪注射液治疗后细胞炎性因子IL-6、IL-18、TNF-α的变化.方法 将60例早期糖尿病肾病患者随机分为对照组和治疗组各30例,对照组给予缬沙坦胶囊80 mg/d,治疗3个月.治疗组给予黄芪注射液和缬沙坦联合治疗3个疗程(每疗程15 d).检测各组患者血清IL-6、IL-18、TNF-α的水平.结果 黄苠注射液联合缬沙坦治疗3个疗程后患者血清IL-6、IL-18、TNF-α、TG、TC及UAER的水平明显下降(P均＜0.05),且与单用缬沙坦组比较差异有统计学意义(P均＜0.05).结论 黄芪注射液联合缬沙坦治疗早期糖尿病肾病,能明显降低血清IL-6、IL-18、TNF-α水平,提示黄芪有肾脏保护作用.     

促红细胞生成素对高糖环境下系膜细胞凋亡的影响及其可能机制

目的探究促红细胞生成素（EPO）在高糖环境下对正常人肾小球系膜细胞凋亡的影响及其可能机制,为延缓糖尿病肾病（DN）进展寻找新的治疗方法。方法体外培养正常人肾小球系膜细胞。将培养后的正常人肾小球系膜细胞随机分为8组:空白对照（A）组（未加任何刺激物）,高糖（B）组(D-葡萄糖30 mmol·L-1),高渗（C）组(甘露醇25 mmol·L-1),EPO（D）组(EPO 20 U·mL-1),低浓度EPO干预（E）组(D-葡萄糖30 mmol·L-1+EPO 5 U·mL-1),中浓度EPO干预（F）组(D-葡萄糖30 mmol·L-1+EPO 10 U·mL-1),高浓度EPO干预（G）组(D-葡萄糖30mmol·L-1+EPO 20 U·mL-1),Y27632（H）组(D-葡萄糖30 mmol·L-1+Rho激酶抑制剂10μmol·L-1)。各组细胞均培养24 h。RT-PCR检测各组RhoA mRNA、ROCK1 mRNA的表达水平,流式细胞术检测各组的细胞凋亡。结果C、D、E 3组系膜细胞凋亡率与A组比较差异无统计学意义（P>0.05）。与B组比较,C、D、E、F、G 5组系膜细胞凋亡率、RhoA mRNA、ROCK1 mRNA表达水平均降低,H组系膜细胞凋亡率、ROCK1 mRNA表达水平均降低（均P<0.05）;与E组比较,F、G、H 3组系膜细胞凋亡率均升高,RhoA mRNA、ROCK1 mRNA表达水平均降低（均P<0.05）;与F组比较,G、H 2组系膜细胞凋亡率、ROCK1 mRNA表达水平均降低,G组RhoA mRNA表达水平降低、H组RhoA mRNA表达水平升高（均P<0.05）。Pearson相关性分析结果显示,B组及E、F、G 3组RhoA mRNA表达与ROCK1 mRNA表达均呈正相关（r=0.829、0.898、0.831、0.861,均P<0.05）。结论 EPO可抑制高糖诱导的正常人肾小球系膜细胞的凋亡,其作用机制可能与阻断RhoA/ROCK信号通路有关。     

益肾化湿颗粒通过RhoA/ROCK1信号通路对糖尿病肾病炎症的影响

目的 探讨益肾化湿颗粒通过RhoA/Rho相关卷曲螺旋形成的蛋白激酶(ROCK)1信号通路对糖尿病肾病炎症的影响。方法 SD大鼠分为对照组、糖尿病肾病组、干预组,构建糖尿病肾病模型,干预时间为4周。留取血清、尿液,检测24 h尿蛋白定量、血肌酐、血糖、核因子-κB(NF-κB)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平。留取肾组织,光镜下观察肾组织病理改变,Western blot检测肾组织RhoA、ROCK1、NF-κB、IL-6、TNF-α蛋白的相对表达情况。结果 动物模型建立前,3组大鼠体重、血糖、血肌酐比较,差异无统计学意义(P>0.05)。药物干预前,与对照组比较,糖尿病肾病组24 h尿蛋白定量、血肌酐、NF-κB、IL-6、TNF-α水平明显升高(P<0.05),而干预组与糖尿病肾病组以上指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。药物干预后,与糖尿病肾病组比较,干预组24 h尿蛋白定量、血肌酐、NF-κB、IL-6、TNF-α水平降低(P<0.05)。对照组肾组织的肾小球结构完整,糖尿病肾病组肾小球、肾小管提示中晚期改变,...     

促红细胞生成素对腹透患者免疫功能的影响

目的 :为了探讨重组促红细胞生成素 ( r Hu EPO)对腹透患者免疫功能的影响。方法 :选择 36例 CRF腹透贫血患者 ,2 0例应用 r Hu EPO治疗 ,1 6例应用输血治疗 ,分别观察两组治疗前、后白介素 1 ( IL - 1 )、白介素 6( IL - 6)、白介素 2 ( IL- 2 )、可溶性白介素 2受体( SIL - 2 R)、肿瘤坏死因子 ( TNF-α)的含量和血清中 T淋巴细胞亚群的比例。结果和结论 :r Hu EPO能提高腹透患者血清 IL- 2的含量、CD4 +T细胞的比例和 CD4 /CD8的比值 ,降低血清 SIL - 2 R、IL- 1和 TNF-α的含量 ,单纯输血没有上述作用     

灯盏花乙素调节RhoA/ROCK信号通路对糖尿病肾病大鼠肾组织损伤的影响

目的:探讨灯盏花乙素(Scu)调节RhoA/ROCK信号通路对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织损伤的影响。方法:将SD大鼠随机选择10只作为对照组(Con),其余60大鼠构建DN模型,造模成功的大鼠按随机数字表法分为5组：DN组、Scu低剂量组(Scu-L组,25mg/kg)、Scu中剂量组(Scu-M组,50mg/kg)、Scu高剂量组(Scu-H组,100mg/kg)、Scu-H+LPA组(100mg/kg Scu+50μmoL/L的RhoA/ROCK信号通路激活剂LPA)。ELISA试剂盒法检测24h尿微量白蛋白(MAU)及血清生化指标;HE染色、Masson染色观察肾组织损伤情况;RT-qPCR及Western blot检测TGF-β1、VEGF、PTEN水平;Western blot检测RhoA/ROCK通路蛋白水平。结果:Con组大鼠肾小球形态结构正常;DN组肾小球形态结构异常,肾小管出现水肿以及坏死现象,鲍曼囊出现粘连现象且出现大面积的蓝染胶原纤维沉积;Scu处理后,肾小管水肿以及坏死现象减少,肾小球形态结构变得较为规则,鲍曼囊腔缩小,且蓝染胶原纤维沉积减小。与Con组相比,...     

针对CTGF的siRNA对高糖诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响

目的 探讨针对结缔组织生长因子（CTGF）基因的siRNA对高糖条件培养下的人肾小管上皮细胞株HK-2细胞向间充质细胞转分化（EMT）的影响。方法 将体外培养的HK-2细胞分为6组：(1)正常对照组,培养基含D-葡萄糖1g/L;(2)等渗对照组,培养基含D-葡萄糖1g/L,甘露醇3.5g/L;(3)高糖组组,培养基含D-葡萄糖4.5g/L;(4) 高糖+空白对照组：细胞转染空白质粒后于高糖培养基中培养;(5) 高糖+阴性对照组：细胞转染含无关序列的重组质粒后于高糖培养基中培养;(6) 高糖+干扰组：细胞转染针对CTGF的 siRNA表达质粒后于高糖培养基中培养。应用RT-PCR检测CTGF mRNA水平,Western blot法检测CTGF、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）蛋白水平。结果 高糖刺激可上调HK-2细胞的CTGF mRNA及蛋白水平,并呈时间依赖性降低HK-2细胞的E-cadherin蛋白表达水平,升高α-SMA蛋白表达水平。而通过特异性siRNA抑制CTGF mRNA表达后,细胞的CTGF蛋白表达随时间延长进行性降低,同时伴有细胞E-cadherin蛋白表达升高,α-SMA蛋白表达水平降低。结论 证实了CTGF是高糖诱导HK-2细胞EMT的重要介质。针对CTGF的siRNA能明显改善高糖诱导的肾小管上皮细胞EMT,为进一步寻找DN防治的靶点提供了新的实验依据。     

siRNA沉默CTGF表达对高糖诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响

目的探讨针对结缔组织生长因子(CTGF)基因的siRNA对高糖条件培养下的人肾小管上皮细胞株HK-2细胞向间充质细胞转分化(EMT)的影响。方法将体外培养的HK-2细胞分为6组:(1)正常对照组,培养基含D-葡萄糖1g/L;(2)等渗对照组,培养基含D-葡萄糖1g/L,甘露醇3.5 g/L;(3)高糖组,培养基含D-葡萄糖4.5 g/L;(4)高糖+空白对照组:细胞转染空白质粒后于高糖培养基中培养;(5)高糖+阴性对照组:细胞转染含无关序列的重组质粒后于高糖培养基中培养;(6)高糖+干扰组:细胞转染针对CTGF的siR-NA表达质粒后于高糖培养基中培养。应用RT-PCR检测CTGF mRNA水平,Western blot法检测CTGF、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白水平。结果高糖刺激可上调HK-2细胞的CTGFmRNA及蛋白水平,并呈时间依赖性降低HK-2细胞的E-cadherin蛋白表达水平,升高α-SMA蛋白表达水平。而通过特异性siRNA抑制CTGF mRNA表达后,细胞的CTGF蛋白表达随时间延长进行性降低,同时伴有细胞E-cadherin蛋白表达升高,α-...     

重组人促红细胞生成素治疗肾间质纤维化的作用机制研究

目的 探讨重组人促红细胞生成素（rHuEPO）治疗肾间质纤维化（RIF）的作用机制。方法 2014年7月-2015年6月,将人肾小管上皮细胞（HK-2细胞）随机分为7组：空白对照组（E1组）：未加任何刺激物;rHuEPO对照组（E2组）：rHuEPO终浓度为20 U/ml;人纯化清蛋白诱导组（E3组）：人纯化清蛋白终浓度为5 mg/ml;E4组：加人纯化清蛋白（5 mg/ml）和rHuEPO（5 U/ml）;E5组：加人纯化清蛋白（5 mg/ml）和rHuEPO（10 U/ml）;E6组：加人纯化清蛋白（5 mg/ml）和rHuEPO（20 U/ml）;Rho相关卷曲螺旋形成的蛋白激酶（ROCK）抑制剂Y27632组（E7组）：加ROCK抑制剂Y27632（10 μmol/L）,30 min后加人纯化清蛋白（5 mg/ml）。采用细胞增殖试验检测刺激16、24、48、72 h时各组细胞增殖数,反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）法检测RhoA、ROCK mRNA表达水平,细胞免疫荧光法检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）表达水平,酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测纤维连接蛋白（FN）表达水平。结果 16 h时,各组细胞增殖数比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。24、48、72 h时,各组细胞增殖数比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;其中E3~E6组高于E1组、E2组,E4~E6组高于E3组,E7组低于E3组,E5组、E6组高于E4组,E6组高于E5组（P＜0.05）。各组RhoA mRNA表达水平比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;其中E3~E6组高于E1组、E2组,E4~E6组低于E3组,E5组、E6组低于E4组,E6组低于E5组（P＜0.05）。各组ROCK mRNA表达水平比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;其中E3~E6组高于E1组、E2组,E4~E7组低于E3组,E5组、E6组低于E4组,E6组低于E5组（P＜0.05）。各组α-SMA表达水平比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;其中E3~E5组高于E1组、E2组,E4~E7组低于E3组,E5组、E6组低于E4组,E6组低于E5组（P＜0.05）。各组E-cadherin表达水平比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;其中E3~E6组低于E1组、E2组,E4~E7组高于E3组,E5组、E6组高于E4组,E6组高于E5组（P＜0.05）。各组FN表达水平比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;其中E3~E5组高于E1组、E2组,E4~E7组低于E3组,E5组、E6组低于E4组,E6组低于E5组（P＜0.05）。E3组、E4组、E5组、E6组RhoA mRNA与ROCK mRNA均呈正相关（P＜0.05）。结论 人纯化清蛋白能诱导HK-2细胞发生上皮细胞-间充质细胞转分化（EMT）,进而发生RIF,而rHuEPO通过阻断EMT的RhoA/ROCK信号转导通路从而抑制RIF发生,且在一定范围内rHuEPO水平越高,其抑制作用越强。     

富血小板血浆对大鼠宫颈糜烂的治疗作用及其对炎性因子表达的影响

目的 探讨富血小板血浆(PRP)对大鼠宫颈糜烂的治疗作用及其对白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和IL-6表达的影响.方法 将60只雌性SD大鼠分为对照组、假手术组、模型组和PRP组,采用苯酚胶浆制作大鼠宫颈糜烂模型;实验期间观察各组大鼠的行为学变化;实验结束后进行取材,称量宫颈组织质量并计算宫颈脏...     

全反式维甲酸对高糖环境下HK-2细胞转分化的影响及其可能机制

目的：探讨全反式维甲酸（ATRA）对高糖环境下正常人肾小管上皮 HK‐2细胞株转分化的影响及其可能机制。方法将体外培养的 HK‐2细胞按随机数字表法分为以下7组：空白组、高糖组、高渗组、高糖＋低浓度ATRA组、高糖＋中浓度ATRA组、高糖＋高浓度ATRA组、Rho激酶抑制剂Y27632干预组。采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT‐PCR）检测各组细胞RhoA及ROCK1 mRNA表达水平,采用细胞免疫荧光检测高糖环境下 HK‐2细胞α‐平滑肌肌动蛋白（α‐SMA）及E‐钙黏蛋白的表达变化。结果 RT‐PCR结果显示：空白组与高渗组RhoA及ROCK1 mRNA表达水平比较,差异均无统计学意义（P＞0．05）;高糖组RhoA及ROCK1 mRNA表达水平较空白组、高渗组高,差异均有统计学意义（P＜0．05）;予以ATRA或Y27632干预后, RhoA及ROCK1 mRNA表达较高糖组减少,差异均有统计学意义（P＜0．05）,且呈现ATRA浓度依赖性。相关性分析示,高糖组及各ATRA干预组RhoA mRNA与ROCK1 mRNA表达水平呈正相关（P＜0．05）。细胞免疫荧光检测结果显示：空白组与高渗组α‐SMA及E‐钙黏蛋白表达水平比较,差异均无统计学意义（P＞0．05）;高糖组α‐SMA表达水平较空白组高,E‐钙黏蛋白表达水平较空白组低,差异均有统计学意义（P＜0．05）;予以ATRA或Y27632干预后,α‐SMA表达明显减少,E‐钙黏蛋白表达明显增多,差异均有统计学意义（P＜0．05）。结论 ATRA可部分逆转高糖环境下 HK‐2细胞转分化的过程,其机制可能与抑制RhoA／ROCK信号通路有关。     

肝素对脂多糖诱导人肾小球系膜细胞增殖及细胞分泌的影响

为了解肝素对脂多糖(LPS) 诱导人肾小球系膜细胞(MC)增殖和细胞因子分泌的影响,作者采用四甲基偶氮唑蓝比色分析法及生物活性法,分别测定了人肾小球MC增殖和细胞因子的分泌情况.结果显示:在正常培养条件下,人肾小球MC分泌一定量的白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α).脂多糖诱导MC增殖及分泌IL-6 、 TNF-α. 高浓度的肝素(500U/ml)促进MC增殖及分泌细胞因子, 低浓度的肝素(5U/ml)抑制MC增殖及分泌细胞因子. 据此,作者认为肝素仅在低浓度抑制MC增殖及细胞因子分泌,从而为临床治疗肾小球疾病和肝素剂量选择提供了一定的实验依据.     

氯沙坦对2型糖尿病肾病患者TNF-α和IL-6的影响

目的观察氯沙坦对2型糖尿病肾病(DN)患者血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的影响。方法将60例2型糖尿病肾病患者按随机数字法分为对照组和治疗组,各30例,对照组给予常规治疗,治疗组在此基础上加用氯沙坦,连用8周,于治疗前后检测患者FBG、UAER、TNF-α和IL-6水平。结果治疗前,两组患者FBG、UAER、TNF-α和IL-6水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,治疗组患者FBG、UAER、TNF-α和IL-6水平显著低于对照组(P<0.01)。结论氯沙坦对2型糖尿病肾病有显著疗效,作用机制可能与其调节炎性细胞因子TNF-α和IL-6的产生,抑制炎症反应有关。     

氨甲酰化促红细胞生成素对慢性心力衰竭大鼠心脏的保护作用

目的 观察氨甲酰化促红细胞生成素(carbamylated erythropoietin,CEPO)对慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)大鼠的心脏保护作用并探讨其可能的作用机制.方法 90只Wistar大鼠采用随机抽签法选取10只作为对照组,剩余腹腔注射异丙肾上腺素(isoproter...     

贝前列素对糖尿病肾病患者血清胱抑素C及炎性因子水平的影响

目的观察贝前列素对糖尿病肾病(DN)患者血清胱抑素C(Cys-C)及炎性因子水平的影响。方法选择2014年8月—2015年8月重庆永川区中医院DN患者84例,根据随机数字表将患者分为观察组及对照组各42例,2组患者均进行糖尿病饮食管理,积极治疗糖尿病,控制患者空腹血糖水平及餐后血糖水平,同时给予患者降糖、降压治疗。观察组在此基础上给予贝前列素治疗,持续服药4周,对比分析2组患者治疗效果及治疗前后血清Cys-C及炎性因子水平的变化。结果观察组总有效率为95.24%,明显高于对照组的76.19%(χ~2=6.222,P<0.05)。治疗后,观察组尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、尿红细胞(RBC)及24 h尿蛋白排泄率(24 h UAER)分别为(4.32±1.23)mmol/L、(86.93±14.67)μmol/L、(23.62±7.98)个/μl、(36.28±6.25)μg/min低于对照组(7.98±1.54)mmol/L、(102.62±21.25)μmol/L、(35.87±9.65)个/μl、(98.36±8.36)μg/min(P<0.01);观察组治疗后CysC及C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平分别为(1.02±0.15)μmol/L、(0.75±0.18)mg/ml、(12.25±4.02)ng/ml、(4.25±0.85)ng/ml,对照组分别为(1.72±0.13)μmol/L、(3.98±0.85)mg/ml、(28.25±3.89)ng/ml、(6.85±0.96)ng/ml,2组治疗后上述指标均较治疗前显著下降,且观察组较对照组下降更明显(P均<0.01)。结论贝前列素可有效减轻DN患者炎性反应及降低血清Cys-C水平,改善患者肾功能功能,提高患者治疗效果。     

重组人红细胞生成素对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖和TGF-βmRNA的影响

目的探讨重组人红细胞生成素(rHuEPO)对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞(MCs)增殖和表达TGF-βmRNA的影响。方法以大鼠M Cs为研究对象,分为正常对照组(NC组,葡萄糖浓度为5 mmol/L),高糖组(HG组,葡萄糖浓度为10、20、30、40、50 mmol/L),其中30 mmol/L的高糖组分别以不同浓度rHuEPO(1、10、50、100、1 000 U/mL)分别干预24、48、72 h,Cell Counting Kit-8(CCK-8)比色法检测细胞增殖情况。用RealtimePCR法测定干预24、48、72 h时细胞TGF-βmRNA表达水平。结果在30 mmol/L以下时,葡萄糖能明显刺激M Cs的增殖,以30 mmol/L培养72 h反应最佳,rHuEPO在低于100 U/mL时能促进高糖诱导的M Cs增殖。rHuEPO在1 000 U/mL时,细胞毒性明显,大部分细胞死亡。结论高糖在一定时间和浓度内有刺激大鼠M Cs增殖的效应,rHuEPO在一定浓度和时间内能刺激高糖培养的MCs增殖,抑制高糖培养的MCs表达TGF-βmRNA。     

自体脂肪间充质干细胞原位移植联合重组人促红细胞生成素注射对脊髓损伤大鼠的干预效果及其可能机制

目的探讨自体脂肪间充质干细胞(ADMSC)原位移植联合重组人促红细胞生成素(rhEPO)注射对脊髓损伤大鼠的干预效果及其可能机制。方法从105只SD大鼠随机取21只作为正常组,其余大鼠成功建立脊髓损伤模型后随机分为模型组、rhEPO组、ADMSC组、联合组各21只。rhEPO组、ADMSC组分别给予腹腔注射rhEPO、ADMSC原位移植进行干预,联合组同时给予上述两种方法干预,其他两组不接受任何干预。干预29 d后,采用BBB运动功能评分法评估各组大鼠脊髓损伤情况,并处死各组大鼠取出脊髓组织,观察各组大鼠脊髓的病理变化,检测组织中神经营养因子3(NT-3)、酪氨酸激酶受体C(TrkC)、颈上神经节神经元特异性蛋白10(SCG10)、脑源性神经营养因子(BDNF)、降钙素基因肽(CGRP)水平,以及Rho和Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)蛋白的相对表达量。结果 (1)模型组、rhEPO组、ADMSC组、联合组、正常组BBB运动功能评分依次升高(均P<0.05)。(2)模型组大鼠脊髓细胞神经元肿胀坏死,可见较多炎症细胞浸润以及严重的脱髓鞘样改变;rhEPO组大鼠脊髓组织损伤...