二氢杨梅素诱导人卵巢癌HO-8910细胞凋亡及机制研究

目的二氢杨梅素体外对人卵巢癌HO-8910细胞生长、凋亡的影响,及其作用机制的探讨。方法体外培养HO-8910细胞,以不同浓度(10、20、40 μmol/L)的二氢杨梅素作用于HO-8910细胞,MTT法及CCK-8法检测对细胞生长的抑制作用;AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞仪检测对细胞凋亡的影响;Hoechst 33258荧光染色观察细胞凋亡情况;Western blotting法检测Caspase-3、Bcl-2、Bax、ERK、p-ERK蛋白表达情况。结果MTT和CCK-8结果均显示二氢杨梅素可浓度依赖性地抑制HO-8910细胞的生长;流式细胞仪结果显示二氢杨梅素可浓度依赖性促进HO-8910细胞凋亡;Hoechst 33258荧光染色结果显示,二氢杨梅素作用后的HO-8910细胞呈现典型凋亡形态学改变;Western blotting结果显示二氢杨梅素可上调HO-8910细胞Caspase-3和Bax水平,下调Bcl-2、ERK、p-ERK水平(P < 0.05)。结论二氢杨梅素具有抗人卵巢癌HO-8910细胞活性的作用,并诱导其凋亡,其作用机制与调控ERK/MAPK信号通路有关。     

姜黄素对人卵巢癌细胞株HO-8910增殖和凋亡的影响

目的:探讨姜黄素对体外培养人卵巢癌HO-8910细胞增殖和凋亡的影响。方法:选用人卵巢癌细胞株HO-8910进行体外培养至对数生长期,以0~80μmol/L姜黄素(5μmol/L,10μmol/L,20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L)分别处理HO-8910细胞24、48、72h,四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验测定细胞的生长抑制率;流式细胞仪检测不同浓度药物对细胞凋亡率的影响;免疫组化法检测PCNA在细胞中的表达,评价细胞的增殖状态。结果:姜黄素对HO-8910细胞增殖抑制率随药物浓度增加及作用时间延长有升高趋势,呈时间剂量依赖性。姜黄素作用24h随浓度的升高PCNA阳性表达逐渐降低。流式细胞仪分析证实随着浓度的升高细胞凋亡率和膜受损率均提高。结论:姜黄素对人卵巢癌细胞株HO-8910的生长有显著的抑制作用,并能诱导其凋亡。     

姜黄素对人卵巢癌细胞株HO-8910增殖和凋亡的影响

目的：探讨姜黄素(cureumin)对体外培养人卵巢癌细胞株HO-8910细胞增殖、细胞周期调控及细胞凋亡的影响.方法：选用人卵巢癌细胞株HO-8910进行体外培养,以1．25—20μg/ml姜黄素分别处理HO-8910细胞6-24h,倒置相差显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测凋亡和细胞周期,SABC免疫组化检测细胞凋亡相关蛋白Fas、Fas-L、Bcl-2及Bax的表达。结果：姜黄素对HO-8910生长有抑制作用,并呈剂量时间依赖性。流式细胞仪分析证实姜黄素能使HO-8910细胞积聚在S和G2／M期,并出现亚二倍体凋亡峰。Fas、Fas-L、Bcl-2表达均上调,Bax加药前后均为阳性。结论：姜黄素对人卵巢癌细胞株H0．8910的增殖具有显著的抑制作用;Fas、Fas-L、Bcl-2的表达上调可能参与了诱导细胞凋亡。     

不同时间和浓度大蒜素对卵巢癌细胞的影响及机制探究

目的 探讨大蒜素(allicin)对人卵巢癌普通型HO-8910和高侵袭型HO-8910PM细胞株增殖的影响及诱导细胞凋亡机制、作用效果比较。方法 不同浓度的大蒜素作用于人卵巢癌HO-8910和HO-8910PM细胞株不同时间,采用MTT法观察细胞活力;集落形成实验计算克隆形成率;PI/Hochest 33342荧光染色,检测caspase-3活性;Western blot法检测caspase-3和PARP蛋白表达。结果 大蒜素能显著抑制HO-8910和HO-8910PM细胞的增殖和集落形成,影响caspase-3的活性和PARP蛋白裂解(P＜0.05),呈时间和剂量依赖性;HO-8910PM细胞对大蒜素的敏感度均强于HO-8910细胞。结论 大蒜素可显著抑制卵巢癌细胞增殖,可能通过调节caspase-3和PARP诱导细胞凋亡,且高侵袭性卵巢癌细胞更敏感。     

粉防己碱抑制人卵巢癌HO-8910细胞生长的研究

目的探讨粉防己碱对人卵巢癌细胞株HO-8910增殖与凋亡的作用。方法MTT法测定细胞增殖情况;吖啶橙荧光染色（AO）观察细胞凋亡的形态学变化;流式细胞仪分析细胞周期及细胞凋亡。结果粉防己碱对HO-8910细胞有抑制增殖作用,呈时间、剂量依赖性;光镜可观察到细胞凋亡的形态学变化;流式细胞术检测结果分析,实验组G1／G0期上升,S期和G2／M期下降,细胞凋亡率上升。结论粉防己碱在体外能抑制卵巢癌HO-8910细胞增殖,诱导HO-8910细胞发生凋亡。     

性激素及促性腺激素对卵巢癌细胞株HO-8910体外生长的调控

目的:探讨雌二醇(E2)、孕酮(P)及卵泡刺激素(FSH)对人卵巢癌细胞株HO-8910细胞体外增殖及凋亡的调控作用.方法:选用人卵巢癌细胞株HO-8910进行体外培养,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖,流式细胞仪测定细胞周期和凋亡率,光镜和电镜进行形态学观察,终末脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)计数凋亡细胞,流式细胞仪间接免疫荧光技术检测细胞内bcl-2蛋白的表达.结果:1×10-12mol/L E2和10ng/mlFSH作用48h能显著促进癌细胞增殖,E2和FSH分别使S期和G2/M期细胞比例增加.P浓度为1×10-7～1×10-5mol/L时,作用24、48、72h均明显抑制HO-8910细胞的增殖,并具有剂量依赖性.P作用后C0/G1期细胞增加,并伴随凋亡率升高,凋亡细胞计数明显多于对照组,光镜和电镜可观察到细胞凋亡的形态学改变;细胞内bcl-2蛋白检测显示,P能降调bcl-2蛋白表达.结论:卵巢癌细胞株HO-8910的生长受到生殖激素的调控,低浓度E2和高浓度FSH具有促癌细胞增殖作用,P则对癌细胞的生长产生明显的抑制效应.P的这种抗癌作用与诱导细胞凋亡有关,抗凋亡基因bcl-2蛋白表达下降可能是诱发细胞凋亡的机理之一.     

塞来昔布对卵巢癌细胞株HO-8910增殖与凋亡影响的研究

目的探讨选择性COX-2抑制剂塞来昔布对人卵巢癌细胞株HO-8910增殖与凋亡的作用。方法MTT法测定细胞增殖情况;Hoechst33258染色观察细胞凋亡的形态学变化;流式细胞仪分析细胞周期及细胞凋亡。结果塞来昔布对HO-8910细胞有增殖抑制作用,呈时间、剂量依赖性;光镜可观察到细胞凋亡的形态学变化;流式细胞术检测结果分析,实验组G1／G0期上升,S期和G2／M期下降,细胞凋亡率上升。结论选择性COX-2抑制剂塞来昔布在体外能诱导卵巢癌HO-8910细胞发生凋亡,抑制细胞增殖。     

苦参碱对人卵巢癌细胞株HO-8910PM增殖及侵袭运动能力的影响

目的 研究苦参碱对人高转移卵巢癌细胞系HO-8910PM增殖及转移相关能力的影响及其作用机制.方法 以MTT法和台盼蓝拒染法检测苦参碱对人高转移卵巢癌HO-8910PM细胞增殖的影响;Transwell小室法检测其对HO-8910PM细胞侵袭运动能力的影响;考马斯亮蓝染色法检测不同质量浓度苦参碱对H0-8910PM细胞细胞骨架的改变及免疫细胞化学方法检测药物作用前后HO-8910PM细胞Ezrin蛋白的表达.结果 苦参碱对HO-8910PM细胞增殖抑制呈明显剂量和时间效应;1.5 g/L苦参碱能明显抑制细胞的增殖,作用6 h后能抑制HO-8910PM细胞体外侵袭人工基底膜和运动能力,抑制率分别为(41.52±10.76)%和(39.73±10.67)%;1.0、1.5g/L苦参碱作用HO-8910PM细胞24 h后使细胞骨架明显改变,并上调Ezrin蛋白的表达.结论 苦参碱能抑制高转移性人卵巢癌细胞HO-8910PM的增殖能力和侵袭运动能力,其抗肿瘤侵袭运动的机制与细胞骨架和Ezrin蛋白表达的改变有关.     

β1整合素与卵巢癌细胞凋亡关系的实验研究

目的 研究β1整合素及纤维黏连蛋白在人卵巢癌HO-8910细胞增殖、凋亡中的作用及其意义.方法 以培养在包被纤雏黏连蛋白底物上的人卵巢癌HO-8910细胞为靶细胞,用不同浓度抗β1整合素单克隆抗体阻断β1整合素与纤维黏连蛋白的相互作用.用MTT法测定细胞增殖抑制率;吖啶橙(acridine orange,AO)染色观察细胞凋亡的形态学变化;流式细胞仪检测细胞周期分布及细胞凋亡率.结果 抗β1整合素单克隆抗体能抑制人卵巢癌HO-8910细胞的增殖,并有明显的时间和剂量依赖性(P＜0.05).荧光显微镜观察到细胞凋亡的形态学改变;流式细胞术检测结果显示实验组S期上升,细胞凋亡率上升.结论 抗β1整合素单克隆抗体可抑制卵巢癌细胞的增殖,β1整合素抗体与卵巢癌细胞凋亡密切相关,阻断β1整合素与其特意配体纤维黏连蛋白的相互作用可诱导卵巢癌细胞凋亡.     

生殖激素对卵巢癌细胞株H0-8910体外生长的调控

目的:探讨雌二醇(F2)、孕酮(P)及卵泡刺激素(FSH)对人卵巢癌细胞株H0-8910细胞体外增殖及凋亡的调控作用.方法:选用人卵巢癌细胞株H0-8910进行体外培养,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖,流式细胞仪(FCM)测定细胞周期和凋亡率,透射电子显微镜进行形态学观察,终未脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)计数凋亡细胞,FCM间接免疫荧光技术检测细胞内bcl-2蛋白的表达.结果:1×10-12mol/L E2和10ng/ml FSH作用48h能显著促进癌细胞增殖,E2和FSH分别使S期和G2/M期细胞比例增加.P浓度为1×10-7～1×10-5mol/L时,作用24、48、72h均明显抑制HO-8910细胞的增殖,并具有剂量依赖性.P作用后G0/G1期细胞增加,并伴随凋亡率升高,凋亡细胞计数明显多于对照组,电镜可观察到细胞凋亡的形态学改变;细胞内bcl-2蛋白检测显示,P能降调bcl-2蛋白表达.结论:卵巢癌细胞株HO-8910的生长受到生殖激素的调控,低浓度E2和高浓度FSH具有促癌细胞增殖作用,P则对癌细胞的生长产生明显的抑制效应.P的这种抗癌作用与诱导细胞凋亡有关,抗调亡某因bcl-2蛋白表达下降可能是诱发细胞凋亡的机理之一.     

槲皮素对人卵巢癌HO-8910细胞增殖与凋亡的影响

目的 探讨槲皮素对人卵巢癌HO-8910细胞增殖与凋亡的作用.方法 MTT法测定细胞增殖情况;流式细胞仪分析细胞周期及细胞凋亡;流式细胞仪检测槲皮素对凋亡相关蛋白Bcl-2、p53表达的影响.结果 槲皮素对HO-8910细胞有增殖抑制作用,呈时间、剂量依赖性;流式细胞术检测结果分析,实验组G1/G0期上升,S期和G2/M期下降,细胞凋亡率上升;流式细胞术结果显示,槲皮素使Bel-2表达下调,而上调p53蛋白的表达.结论 槲皮素在体外能抑制卵巢癌HO-8910细胞的生长,阻止细胞由G1/G0期向S期和G2/M期移行并诱导细胞凋亡,其诱导HO-8910细胞凋亡的机制可能与上调促调亡蛋白p53表达和下调凋亡抑制蛋白Bel-2表达有关.     

雌激素对HO-8910细胞增殖与分泌CA-125量的影响

目的观察雌激素体外作用对卵巢癌细胞株HO-8910细胞增殖与分泌CA-125量的影响。方法采用MTT比色法检测不同浓度的雌激素体外作用48 h对人皮肤成纤维细胞（正常对照）和HO-8910细胞增殖的影响;放射免疫法检测不同浓度雌激素体外作用后细胞上清液中CA-125的变化。结果①雌激素对成纤维细胞增殖和分泌CA-125无影响;②10-5、10-13mol/L雌二醇对HO-8910细胞增殖有抑制作用,10-9、10-10mol/L雌二醇对其增殖则有促进作用;③CA-125水平与HO-8910细胞增殖或抑制状况无关。结论雌激素对HO-8910细胞增殖有影响,但CA-125水平与HO-8910细胞的增殖抑制状态无关。     

蝎毒抗癌多肽对卵巢癌细胞HO-8910生长的抑制作用

目的观察蝎毒抗癌多肽对卵巢癌细胞HO-8910生长的抑制作用。方法卵巢癌细胞HO-8910分为空白对照组和蝎毒抗癌多肽处理组(终浓度分别为1、100、200、400、800 mg/L),采用细胞毒试验(MTT)法检测蝎毒抗癌多肽对卵巢癌细胞HO-8910生长抑制率,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡的变化。结果1、100、200、400和800 mg/L组HO-8910细胞生长抑制率分别为2.56%、12.47%、28.53%、47.93%和66.92%,200、400和800 mg/L组与对照组比较差异具有显著性(P<0.01);在400和800 mg/L组,与空白对照组比较,400 mg/L组HO-8910细胞S期细胞数明显减少(P<0.01),G2 M期细胞明显增多(P<0.01),800 mg/L组HO-8910细胞G2 M期细胞数明显减少(P<0.01),G1期细胞数有增多趋势;与空白对照组比较,400和800mg/L组HO-8910凋亡细胞数明显增加(P<0.01)。结论在一定范围内蝎毒抗癌多肽可明显抑制卵巢癌细胞HO-8910的生长,其机制与蝎毒抗癌多肽抑制HO-8910细胞DNA合成、诱导HO-8910细胞发生G2 和G1期阻滞及诱导HO-8910细胞凋亡有关。     

αv整合素与卵巢癌细胞增殖及凋亡关系的研究

目的研究αv整合素与人卵巢癌细胞增殖及凋亡之间的关系。方法MTT法测定细胞增殖情况;吖啶橙荧光染色观察细胞凋亡的形态学变化;流式细胞仪分析细胞周期及细胞凋亡。结果抗整合素αv亚基抗体对HO-8910细胞有增殖抑制作用,呈时间、剂量依赖性;光镜可观察到细胞凋亡的形态学变化;流式细胞术检测结果分析,实验组G1/G0期上升,S期和G2/M期下降,细胞凋亡率上升。结论αv整合素可抑制卵巢癌HO-8910细胞凋亡,促进细胞生存。     

巴豆生物碱抑制卵巢癌细胞增殖和诱导其凋亡的实验研究

目的 了解巴豆生物碱诱导人卵巢癌细胞HO-8910细胞周期、凋亡效果,以及凋亡与增殖细胞核抗原(PCNA)表达之间的关系.方法 将浓度分别为50、100和150 μg/ml的巴豆生物碱作用于人卵巢癌细胞HO-8910细胞后,采用流式细胞术检测巴豆生物碱对人卵巢癌细胞HO-8910细胞的增殖抑制作用和诱导细胞凋亡;采用倒置显微镜及免疫组织化学法对凋亡调节基因PCNA表达进行检测.结果 巴豆生物碱作用48 h后,倒置显微镜下可见细胞皱缩、出芽及少量凋亡小体形成.应用不同剂量的巴豆生物碱(50～150 μg/ml)分别作用于 HO-8910 细胞 24、48、72 h后,巴豆生物碱抑制了HO-8910细胞增殖,并呈现剂量、时间依赖性.随着巴豆生物碱的作用时间延长,G0/G1期细胞比例明显下降,而较多的细胞阻滞于G2/M期.巴豆生物碱的作用浓度从50 μg/ml增至150 μg/ml,则平均细胞凋亡率从2.13%上升为21.89%.结论 巴豆生物碱可以通过时间依赖性和剂量依赖性方式,促使细胞G2/M 期阻滞和抑制细胞有丝分裂,从而诱导人卵巢癌细胞HO-8910细胞凋亡.由于PCNA在G1～S期进程过度中起着重要作用,PCNA 表达的下调也导致细胞周期进程被阻抑.巴豆生物碱作用24 h,随浓度的升高,PCNA阳性细胞百分率逐渐降低.     

SGI-1776 钝化Pim-1 对卵巢癌细胞增殖和侵袭的抑制作用及其机制

目的：检测SGI-1776 对卵巢癌HO-8910 细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用及其可能机制。方法：体外培 养卵巢癌HO-8910 细胞;M法和克隆形成法检测SGI-1776 对HO-8910 细胞的增殖抑制作用;PI 染色流式细胞术(ow cytometry,FCM) 检测SGI-1776 对HO-8910 细胞周期分布的影响;Transwell 法检测SGI-1776 对HO-8910 细胞迁移 及侵袭的抑制作用;ELISA,Western 印迹,siRNA/cDNA 转染检测SGI-1776 对HO-8910 细胞增殖、迁移、侵袭抑制 作用的可能分子机制。结果：SGI-1776 在体外对HO-8910 细胞增殖、迁移、侵袭呈现出浓度依赖性的抑制作用,阻 滞细胞周期于G1 期。随Pim-1 激酶活性降低,Pim-1 蛋白表达下调,同时Pim-1 下游蛋白CDK6,pCDK6,CDK4, pCDK4,CDK2 和pCDK2 表达下调,而P21 和P27 蛋白表达上调。用siRNA 干扰沉默Pim-1 基因,则SGI-1776 对 HO-8910 细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用明显加强;用Pim-1-cDNA 转染HO-8910 细胞,则能部分抵消SGI-1776 对细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用。结论：SGI-1776 通过钝化Pim-1 而发挥其抑制卵巢癌HO-8910 细胞增殖、迁 移和侵袭的作用,提示Pim-1 是卵巢癌治疗的新的分子靶。     

马铃薯提取物对人卵巢癌细胞(HO-8910)的作用

目的探讨马铃薯提取物对人卵巢癌细胞(HO-8910)体外增殖的影响和可能的作用机制。方法用MTT法检测不同作用时间(24、48、72h)、不同体积比(13、25、50、100μL·mL-1)马铃薯提取物对HO-8910体外增殖的影响,倒置显微镜观察不同马铃薯提取物对HO-8910的形态学改变。应用Western blot技术,在50μL·mL-1马铃薯提取物作用HO-8910细胞后0、20、40、60min Bcl-2和Bax的的表达量。结果作用48h时,50μL·mL-1体积比马铃薯提取物对HO-8910抑制率为(88.44±4.56)%,显著高于其他体积比(P<0.05);马铃薯提取物使Bax表达量均较空白增加,且随时间的增加表达量有上升趋势,Bcl-2蛋白则与之相反,促进细胞凋亡。结论马铃薯提取物对HO-8910增殖具有显著的抑制作用。更多还原     

The effect of IGF-IR and erlotinib on the apoptosis of HO-8910 cells

目的 观察单用胰岛素样生长因子1型受体(IGF-1R)抑制剂鬼臼苦素(PPP)或联合表皮生长因子受体抑制剂厄洛替尼对卵巢上皮性癌HO-8910细胞的影响.方法 使用PPP处理HO-8910细胞后,采用SRB法检测细胞的增殖情况;PI染色法检测细胞周期;Annexin-V和PI双染检测细胞凋亡;依据中效原理,使用CombiDrug 软件分析PPP与厄洛替尼的协同作用.结果 PPP可抑制HO-8910细胞增殖,呈现时间剂量依赖性,其抑制作用与诱导细胞G2/M期阻滞和凋亡相关;PPP联合厄洛替尼较单用PPP或厄洛替尼能显著抑制HO-8910细胞增殖,两者联合具有协同作用.结论 特异性抑制IGF-1R可以抑制卵巢癌细胞生长,诱导其凋亡;在卵巢癌的治疗中,IGF-1R和EGFR可能具有联合靶向治疗价值.     

IGF-1R抑制剂与厄洛替尼对卵巢上皮性癌HO-8910细胞凋亡的影响

目的观察单用胰岛素样生长因子1型受体(IGF-1R)抑制剂鬼臼苦素(PPP)或联合表皮生长因子受体抑制剂厄洛替尼对卵巢上皮性癌HO-8910细胞的影响。方法使用PPP处理HO-8910细胞后,采用SRB法检测细胞的增殖情况;PI染色法检测细胞周期;Annexin-V和PI双染检测细胞凋亡;依据中效原理,使用CombiDrug软件分析PPP与厄洛替尼的协同作用。结果 PPP可抑制HO-8910细胞增殖,呈现时间剂量依赖性,其抑制作用与诱导细胞G2/M期阻滞和凋亡相关;PPP联合厄洛替尼较单用PPP或厄洛替尼能显著抑制HO-8910细胞增殖,两者联合具有协同作用。结论特异性抑制IGF-1R可以抑制卵巢癌细胞生长,诱导其凋亡;在卵巢癌的治疗中,IGF-1R和EGFR可能具有联合靶向治疗价值。     

他莫昔芬联合顺铂对人卵巢癌细胞HO-8910增殖抑制作用的研究

目的:验证他莫昔芬(TAM)和顺铂(DDP)两种药物联合应用抑制人卵巢癌细胞HO-8910增殖作用的有效性,为卵巢癌的内分泌治疗和化学治疗联合应用提供理论依据。方法:以体外培养的HO-8910细胞为研究对象,不同剂量的TAM和DDP联合作用于HO-8910细胞,MTT法检测细胞生长抑制率;免疫组化SP法检测PCNA在细胞中的表达;流式细胞仪PI染色法分析细胞周期分布的改变,并用AV-PI双染色法检测TAM联合DDP对细胞凋亡的影响。结果:TAM和DDP联合用药组与阳性对照组相比,大剂量TAM合用不同剂量的DDP组及中剂量TAM合用大剂量DDP(3.3μmol/L)组,细胞生长抑制率有显著性差异(P<0.05);TAM浓度≥1.0μmol/L合用不同剂量的DDP时PCNA表达阳性率有显著性差异(P<0.05);TAM使G1期细胞抑制,DDP作用于G1期细胞,G1期减少,细胞阻滞于S期;TAM和DDP联合应用时随着药物浓度增加凋亡指数逐渐增大。联合用药组组间比较,大剂量TAM合用小剂量DDP(1.7μmol/L)组与中剂量TAM合用大剂量DDP(3.3μmol/L)组间细胞生长抑制率及PCNA表达阳性率无显著性差异(P>0.05)。结论:TAM和DDP联合用药可有效抑制人卵巢癌细胞HO-8910细胞生长及增殖。