银杏生发合剂促进小鼠毛发生长的作用研究

目的:观察银杏生发合剂对毛发生长的促进作用。方法:取C57BL/6小鼠,随机分为章光101组,银杏合剂高、中、低剂量组,将小鼠背部双侧脱发,左侧分别外擦章光101育发剂,银杏生发合剂167.7mg/ml、100.6mg/ml、33.5 mg/ml,右侧外涂30%乙醇溶剂,每日2次。观察21天内动物新生毛发生长情况,测定各组动物新生毛发长度及重量,采用ELISA法测定皮肤组织中血管内皮生长因子及Ⅰ型胶原含量。结果:银杏生发合剂高剂量能显著增加动物毛发生长速度(P<0.05),中剂量能显著增加动物新生毛发长度及皮肤中血管内皮生长因子含量(P<0.05)。结论:外擦银杏生发合剂有显著的促生发作用,并能增加皮肤中VEGF的分泌。     

豆豉对小鼠雄激素源性脱发的改善作用及机制研究

目的:探讨豆豉对雄激素源性脱发小鼠的改善作用及作用机制。方法:将72只小鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组和豆豉高、中、低剂量组6组,每组12只。除正常组外,其余各组小鼠皮下注射丙酸睾酮溶液建立AGA模型,阳性药组灌胃非那雄胺,豆豉各剂量组给予豆豉溶液3. 25、6. 50、13. 00 g/(kg·d)灌胃,正常组和模型组灌胃等体积蒸馏水,观察小鼠一般状况,称量脱发重量评价脱发程度,光镜观察毛囊组织病理学改变,ELISA检测血清性激素水平,RT-PCR方法对皮肤组织TGF-β2(转化生长因子-β2)、Caspase-3mRNA(凋亡因子)含量进行测定。结果:造模5周后,小鼠背部毛色失去光泽并呈灰暗颜色,于7周左右逐渐出现毛发脱落。各给药组小鼠脱毛较模型组明显减轻;病理学观察可见与正常组相比,模型组小鼠毛囊总数明显变少,密度减小,毳毛明显增多,各给药组终毛多,毳毛较少。血清睾酮(T)、雌二醇(E2)测定结果显示模型组T含量明显高于正常组,差异非常显著(P 0. 01),各给药组T含量均低于模型组,具有显著性差异(P 0. 05);各给药组E2含量均高于模型组,有明显差异(P 0. 05)。与正常组比较,模型组小鼠皮肤组织TGF-β2、Caspase-3mRNA表达明显增加,各给药组小鼠皮肤组织TGF-β2、Caspase-3mRNA较模型组明显降低。结论:豆豉对AGA小鼠的作用机制可能是通过调节小鼠体内性激素水平,抑制T转化为二氢睾酮(DHT),削弱二氢睾酮诱导的TGF-β信号通路,抑制毛囊细胞凋亡,从而达到防脱发的作用。     

当归四逆汤对BALB/c硬皮病小鼠皮肤组织中 CTGF,TGF-β含量的影响

目的:观察当归四逆汤对BALB/c硬皮病小鼠皮肤组织及其结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、转化生长因子(transforming growth factor,TGF)β含量的影响。方法:选8周龄近交系BALB/c小鼠60只,剃去背部中央区被毛,随机分为5组,每组12只。模型组和观察组小鼠背部皮内注射100μL(200 mg·L-1)博来霉素(BLM)溶液,每天1次,连续3周。正常组小鼠用磷酸盐缓冲液(PBS)0.1 mL做背部皮内注射。造模成功后,各组按20 mL·kg-1容量灌胃,连续3周。当归四逆汤高、中、低剂量组(39,23.4,7.8 g·kg-1)。正常组和模型组给等容量生理盐水。实验结束处死动物,切取小鼠背部注射区皮组织,部分剪碎后与生理盐水研磨成2%组织浆,3 000 r·min离心10 min,取部分上清液,用ELISA法测定CTGF,TGF-β的含量。部分组织固定于10%甲醛液,石蜡包埋,苏木素2伊红(HE)染色和Masson三色染色,分别用彩色病理图像分析系统和细胞免疫组织化学定量分析系统测定皮肤厚度和纤维化指数。结果:当归四逆汤高、中、低剂量均能减轻BLM致硬皮病小鼠的真皮厚度高、中剂量组分别为(25.22±2.35),(29.13±2.03)μm,P<0.01;低剂量组为(29.95±2.85)μm,P<0.05);高、中剂量组能降低硬皮病小鼠皮肤纤维化指数,分别为(86 615±8 403),(103 174±18 439),P<0.01;皮肤组织中CTGF分别为(160.2±35.7),(109.5±28.6)ng·L-1,P<0.01,TGF-β的含量分别为(48.48±4.95),(63.30±7.32)ng·L-1,P<0.01),而且存在明显的量效关系。结论:当归四逆汤能使模型小鼠的皮肤硬化得到改善,对其皮肤组织中的CTGF,TGF-β含量有降低作用。     

柿叶黄酮对KKAy小鼠视网膜病变CTGF,VEGF,HIF-1α的影响

目的:观察柿叶黄酮对KKAy小鼠糖尿病视网膜病变(DR)结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF),血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF),以及低氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)的影响及其保护机制。方法:取30只8周龄C57BL6/J小鼠作为正常组,另取150只8周龄雄性KKAy小鼠随机分为KKAy模型组、柿叶黄酮高、中、低剂量组、羟苯磺酸钙组,每组各30只小鼠。柿叶黄酮高、中、低剂量组分别给予柿叶黄酮(50,100,200 mg·kg~(-1)·d~(-1))ig,羟苯磺酸钙组给予羟苯磺酸钙230 mg·kg~(-1)·d~(-1)ig,KKAy模型组及正常组给予等量生理盐水灌胃,共16周。检测血糖(FBG),糖化血红蛋白(GHb),血液流变学指标;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测法检测视网膜内CTGF,VEGF,蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测HIF-1α的表达。苏木素-伊红(HE)染色观察视网膜组织损伤情况,TUNEL检测视网膜细胞凋亡程度。结果:与正常组小鼠比较,KKAy模型组小鼠的血糖显著升高,GHb的水平显著降低(P0.01),视网膜CTGF,VEGF和HIF-1α的表达显著增加(P0.01),视网膜组织结构损伤严重。经过16周给药,与KKAy模型组比较,柿叶黄酮中、高剂量组小鼠的血糖显著降低(P0.01),GHb的水平显著提高(P0.01),视网膜CTGF,VEGF和HIF-1α的表达及明显减少(P0.05,P0.01),视网膜组织损伤情况改善明显。结论:柿叶黄酮对KKAy小鼠DR具有保护作用,其机制可能与调节视网膜内CTGF,VEGF和,HIF-1α的表达有关。     

芍药苷调节RhoA/ROCK 信号通路对实验性自身免疫性葡萄膜 炎小鼠Th17/Treg 免疫平衡的影响

目的 探讨芍药苷调节Ras同源基因家族蛋白A(RhoA)/Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)信号通路对实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveitis,EAU)小鼠辅助性T淋巴细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)免疫平衡的影响。方法 随机选出10只小鼠作为正常对照组,其余小鼠构建EAU模型,将造模成功小鼠随机平分为模型组、芍药苷组(10 mg·kg^-1芍药苷)、 RhoA/ROCK信号通路激活剂溶血磷脂酸(LPA)组(25μmol·L^-1 LPA)、芍药苷+LPA组(10 mg·kg^-1芍药苷+25μmol·L^-1 LPA),每组10只。模型组和正常对照组给予等量生理盐水,给药每天1次,持续14 d。眼前节临床表现评分评估炎症严重程度;HE染色观察眼球组织病理形态;ELISA法检测血清中炎性因子转化生长因子-β(trarsforming growth factor beta,TGF-β)、白细胞介素10(IL-10)、白细胞介素17(IL-1...     

蒺藜皂苷对白细胞介素-1β诱导的软骨细胞凋亡和炎症因子分泌的影响

目的:观察蒺藜皂苷对白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)诱导的软骨细胞凋亡和炎症因子分泌的影响,并探讨其作用机制。方法:(1)软骨细胞培养和转染。采用DMEM培养液培养小鼠软骨细胞(ATDC5细胞),培养后采用转染试剂分别转染pcDNA-circ＿0045714、pcDNA、si-circ＿0045714、si-NC。(2)蒺藜皂苷浓度筛选。将ATDC5细胞接种于96孔板中,一组正常培养(正常组),一组加入10 ng·mL^-1的IL-1β(IL-1β组),其他组在加入10 ng·mL^-1 IL-1β的基础上分别加入浓度为25μg·mL^-1、50μg·mL^-1、100μg·mL^-1、200μg·mL^-1、400μg·mL^-1的蒺藜皂苷。培养后计算软骨细胞存活率,并确定后续实验蒺藜皂苷的浓度。(3)软骨细胞增殖抑制率检测。将ATDC5细胞分为对照组、IL-1β组、IL-1β+蒺藜皂苷低剂量组、IL-1β+蒺藜皂苷中...     

虫白蜡治疗雄激素性脱发的作用机理研究

目的:前期研究发现虫白蜡能明显促进脂溢性脱发毛发的生长,但促进毛发生长的机理尚不清楚。方法:采用组织切片法、酶联免疫法测定给药14 d、21 d、28 d、45 d、60 d后单位面积内小鼠毛发重量、生长期和休止期毛囊数量比(A/T)和碱性磷酸酶含量(ALP);采用酶联免疫法测定给药28 d后小鼠皮肤内血管内皮生长因子和表皮生长因子的表达量。结果:试验第28天, A/T比值和ALP含量明显高于其他测试时间;且10%虫白蜡组小鼠皮肤内VEGF、EGF和A/T比值的表达量明显高于模式组。结论:虫白蜡对毛囊生长周期没有调节,但其能促进毛囊营养的供应。     

皮肤针不同刺激量对脱毛小鼠毛发生长的影响（英文）

目的:观察不同皮肤针刺激量对脱毛小鼠毛发生长的影响。方法:BALB/c小鼠随机分为正常组、对照组、滚针组、梅花针轻叩组、梅花针重叩组。8%硫化钠外涂使小鼠局部脱毛。皮肤针治疗后观察毛发生长、毛囊改变及局部炎症因子变化。结果:小鼠局部经8%的硫化钠涂抹后毛发完全脱落,毛囊进入退行期,炎症细胞因子白介素(IL)-1α、IL-1β、IL-2、肿瘤坏死因子(TNF)-α、干扰素(IFN)-γ、IL-17表达增加。滚针组小鼠毛发生长完全程度与模型对照组相同,但毛干较模型对照组更粗大;梅花针轻叩组小鼠毛发生长不完全、欠均匀,但毛干较模型对照组粗大;梅花针重叩组小鼠毛发未生长。病理显示对照组脱毛小鼠局部毛囊球部炎症浸润明显,进入退行期的毛囊增多;滚针组、梅花针轻叩组与对照组比较,处于生长期的毛囊明显增多、个体粗大,并可见明显毛干;梅花针重叩组毛囊多进入静止期,且周围炎性浸润明显。免疫组化显示滚针、梅花针轻叩、梅花针重叩治疗均能使增高的IL-2、IL-1α、IL-1β、TNF-α、IFN-γ下降(P0.05),但对增高的CD34表达无明显作用(P0.05)。结论:刺激量大的梅花针重叩抑制了毛发的生长;刺激量最轻的滚针,不影响毛发生长,而且能使毛干、毛囊更粗大。     

oleosin-rhFGF9融合蛋白的红花表达及其毛发再生、创伤修复研究北大核心CSCD

利用红花表达成纤维细胞生长因子9（fibroblast growth factor 9,FGF9）重组融合蛋白,研究其对毛发生长及创伤修复的作用,为红花作为植物反应器提供基础并对FGF9融合蛋白毛发及创伤商业化应用奠定基础。通过冻融法将鉴定的p OTBar-oleosin-rhFGF9质粒转入农杆菌EHA105中,农杆菌介导法将oleosin-rhFGF9基因转入红花子叶中,经红花组织培养、Basta筛选获得转基因再生苗,嫁接法,PCR试验验证,扩繁,获得转基因T3红花种子。Western blot法分析及ELISA定量融合蛋白含量为0.09%。在质量浓度为60μg·L-1时,转基因红花油体促NIH/3T3细胞增殖较好,且有一定剂量依赖性。C57BL/6小鼠60只,分别建立脱发模型和创伤模型,分别为空白组（PBS或生理盐水）、阴性组（野生型红花种子油体,60 g·L-1）、阳性组（FGF9,0.054 g·L-1）、低剂量组（转基因红花油体,10 g·L-1）和高剂量组（转基因红花油体,60 g·L-1）,隔天涂抹1次,每次100μL,15 d后取皮,固定包埋进行组织学分析。小鼠毛发实验结果表明各组小鼠毛发长势良好,其中高剂量组小鼠毛发浓密,再生毛发数均较阳性组有显著效果;创伤实验愈合明显,阳性组、高剂量组、低剂量组愈合效果较空白组均显著,且在第5天,高剂量组愈合效果显著优于阳性组。该实验成功转化红花,获得了oleosin-rhFGF9融合蛋白表达的T3转基因红花,其具有促进毛发再生和创伤修复的作用。     

银屑平丸对小鼠银屑病样模型血清中TGF-β、IL-10表达的影响

目的:观察银屑平丸对BALB/c小鼠银屑病样模型血清中转化生长因子-β(TGF-β)和白细胞介素10(IL-10)表达的影响,探讨银屑平丸治疗银屑病的可能作用机制。方法:将48只BALB/c雄性小鼠随机分为空白组、模型对照组、银屑平丸高、中、低剂量组、雷公藤组,每组8只。所有小鼠背部脱毛后,空白组小鼠外涂凡士林,其余5组小鼠外涂咪喹莫特乳膏,诱发小鼠银屑病样模型;同时予以相应药物进行灌胃干预,连续8 d。观察并记录小鼠背部皮肤皮损面积和严重程度指数(psoriasis area and serenty index,PASI)评分;ELISA法检测小鼠外周血清中TGF-β、IL-10水平;取小鼠背部皮肤组织做病理切片进行组织病理观察。结果:银屑平丸高、中、低剂量组、雷公藤组小鼠背部皮损PASI评分及外周血TGF-β、IL-10含量均明显低于模型对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:银屑平丸能降低银屑病样模型小鼠外周血TGF-β、IL-10的表达,这可能是银屑平丸治疗银屑病的作用机制之一。     

铁皮石斛多糖促进毛发生长的实验研究

目的：观察铁皮石斛多糖（DCP）促毛发生长的功效并探讨其作用机制,为铁皮石斛的开发利用奠定基础。方法：采用水提醇沉法提取DCP,并用苯酚-硫酸法测定其多糖含量。取C57BL/6J小鼠30只,用脱毛膏去除其背部毛发建立脱发模型,分为对照组、阳性对照组和DCP组,每日分别涂抹超纯水、米诺地尔酊、DCP（5.0 g·L^-1）l 次,每次 0.2 mL,连续给药21 d,应用小鼠毛发生长情况评分标准对C57BL/6J小鼠给药7,14 d毛发生长情况进行评分,及称量给药21 d C57BL/6J小鼠单位脱毛区域毛发质量评价DCP对C57BL/6J小鼠毛发生长的影响。采用MTT法和RT-PCR法分别评价DCP对人永生化角质形成细胞（HaCaT细胞）增殖和对HaCaT细胞血管内皮生长因子（VEGF）mRNA表达的影响。结果：DCP提取率为29.87%,DCP质量分数为79.65%。DCP组C57BL/6J小鼠的毛发生长平均得分、平均质量均显著优于对照组;DCP组HaCaT细胞生存率和VEGF mRNA的表达水平与对照组比较均显著提高。结论：DCP具有促毛发生长的作用,其机制可能是上调VEGF mRNA的表达。     

何首乌提取物对C57BL/6J小鼠毛囊生长和毛发生长周期的影响

目的:观察何首乌提取物对C57BL/6J小鼠毛囊体外培养和在体毛发生长周期的影响。方法:对小鼠毛囊生长的影响采用C57BL/6J小鼠触须毛囊体外培养模型,实验分为9组,空白对照组(蒸馏水)、阳性对照组(章光101)、何首乌提取物75,150,300,600,1 200,2 500,5 000μg·L-1组,24孔板,每孔2枚毛囊,培养12 d,通过观察毛发生长时间和生长速度,评价何首乌提取物对毛囊生长的影响;对小鼠毛发生长周期的影响采用C57BL/6J小鼠背部脱毛,分为5组,阳性对照组(章光101)、空白对照组、何首乌提取物高、中、低(2,1,0.5 g·mL-1)剂量组,涂抹不同浓度的何首乌提取物,观察其对小鼠毛发生长周期的影响。结果:体外毛囊培养实验表明,何首乌提取物在300,600,1 200μg·L-1浓度时对毛囊生长早、中、晚期都有加速生长的作用,并可延长毛发的生长时间,且在早、中期呈现一定的剂量依赖性,与空白对照组比较均有显著性差异。其中300μg·L-1时,第2,6,12天毛发生长速度分别为(0.236±0.061),(0.427±0.078),(0.325±0.054)mm·d-1,毛发生长时间为(9.60±1.43)d,与空白对照组比较P<0.01,与阳性对照组比较P<0.01;600μg·L-1时,第2,6天,毛发生长速度分别为(0.313±0.044),(0.522±0.084)mm·d-1,与空白对照组比较P<0.01,与阳性对照组比较P<0.05,第12天为(0.439±0.064)mm·d-1,毛发生长时间为(11.00±1.15)d,与空白对照组比较P<0.01;1 200μg·L-1时,第2,6,12天毛发生长速度分别为(0.406±0.053),(0.642±0.067),(0.475±0.036)mm·d-1;毛发生长时间为(12.40±1.43)d,与空白对照组比较P<0.01。体内药效学实验表明,何首乌提取物较空白对照组可以使毛发从休止期进入生长期,加速毛发的生长,具有显著性差异。高剂量组时皮肤粉红到变灰的时间为(9.06±0.43)d,灰色皮肤长出毛的时间为(14.68±1.19)d,皮肤长满毛的时间为(26.86±2.02)d,与空白对照组比较P<0.01,较中、低剂量可以加速皮肤黑色素的形成;毛发生长后期,剂量依赖关系不明显。结论:何首乌提取物能诱导C57BL/6J小鼠毛发生长,使其从休止期进入生长期,从而加速毛发生长,体内、外实验结果一致。     

高良姜—香附药对抗胃溃疡及镇痛作用的研究

目的：研究高良姜-香附药对抗胃溃疡和镇痛的作用，探究高良姜-香附合用是否能增强单用高良姜、香附的抗胃溃疡作用及镇痛作用。方法：将48只KM小鼠按随机数字表法分为正常对照组、模型对照组、阳性药(奥美拉唑，0.2 g·kg^-1)组、高良姜组(0.8 g·kg^-1)、香附组(0.8 g·kg^-1),良附组(高良姜-香附药对，0.8 g·kg^-1),共6组，每组8只。连续给药7 d后以10 mL·kg^-1剂量灌胃给予无水乙醇造模，测定小鼠的胃液pH值、胃溃疡指数、溃疡抑制率、IL-6和IL-1β含量，HE染色观察小鼠的胃黏膜病理组织形态。另选取50只KM小鼠进行热板法致痛试验，按随机数字表法分为5组，分别为正常对照组、阿司匹林组(0.2 g·kg^-1)、高良姜组(0.8 g·kg^-1)、香附组(0.8 g·kg^-1)、良附组(0.8 g·kg^-1),观察并记录小鼠舔后足或跳跃反应的潜伏期。结果：与模...     

生发小鼠模型建立常用脱毛方法的系统比较

目的:系统比较4种脱毛方法对小鼠毛发再生及毛发周期的影响。方法:分别用脱毛膏、硫化钠、松香/石蜡及丙酸睾丸酮建立小鼠脱毛模型,观察小鼠背部毛发脱毛状况及新生毛发生长情况,并通过HE染色切片来综合分析四种脱毛方法对毛囊形态、毛囊数量等影响。结果:脱毛膏法、硫化钠法、松香/石蜡和丙酸睾丸酮法脱毛时间依次为(90±10)s,(150±30)s,(119.36±26.42)s和4周。脱毛外观评定等级为优的比例依次为91.37%,25.00%,50.00%,83.33%。组织病理观察发现该4种方法炎性反应均较轻,毛发再生速度以硫化钠法最快,其次依次为脱毛膏、松香/石蜡、丙酸睾丸酮。结论:松香/石蜡适合于实验周期较长的实验、丙酸睾丸酮法适用于探究雄激素脱发的动物模型、脱毛膏法适用于微生物学及微生态学实验中快速去除被毛暴露皮肤显示血管便于采血及美容脱毛、硫化钠法适用于一次性脱毛。     

甘草酸二铵对脱毛小鼠治疗的药理作用机制研究

目的:探讨甘草酸二铵对环磷酰胺诱导小鼠脱毛动物模型治疗的药理作用机制。方法:采用环磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX)建立小鼠脱毛模型,甘草酸二铵(Diammonium Glycyrrhizinate,DG)组和生理盐水组脱毛后,分别灌胃DG(100mg/kg)和生理盐水(100mg/kg),持续8周。模型组不作任何处理。运用HE染色、电镜观察脱毛区毛囊的病理形态学改变,利用免疫组织化学法检测小鼠脱毛区CD4+T细胞(CD4+)、CD8+T细胞(CD8+)、INF-γ表达水平。利用流式细胞术检测外周血IL-2、IL-4以及INF-γ表达水平。采用ELISA检测外周血CD4+/CD8+比值。结果:给药8周后,肉眼观察到DG组脱毛区毛发生长与模型组和生理盐水组相比较为浓密;电镜观察到DG组残存毛囊细胞中线粒体模糊、空泡样化程度比模型组和生理盐水组较轻。在各个时间点,DG组脱毛区CD4+、CD8+、INF-γ表达和外周血IL-2、INF-γ表达水平及CD4+/CD8+比值明显低于生理盐水组和模型组(P0.05),而外周血IL-4表达显著升高(P0.05)。结论:CTX造成脱毛小鼠T淋巴细胞过度表达,DG通过抑制T淋巴细胞及其分泌的促炎因子过度表达、提高抗炎因子的表达来改善脱毛小鼠毛发的生长情况。     

人参提取物对C57小鼠生发作用的影响

目的: 研究人参提取物对C57BL/6J小鼠毛发生长促进作用及其机制。 方法: 实验分为阳性对照组(章光101)、空白对照组、人参提取物高、中、低(2, 1, 0.5 g·mL^-1)剂量组。小鼠脱毛,通过观察脱毛区肤色的变化和组织学检查,研究人参提取物对小鼠毛发生长周期的影响;采用红外测温仪观察对小鼠皮肤温度的影响;采用浊度法和底物发色法,观察其抗血小板聚集的作用,初步探讨其促进毛发生长的机制。 结果: 人参各剂量组均能诱导C57BL/6J小鼠毛发生长,使其从休止期进入生长期,但对毛发的最终长度无影响,且呈现一定的剂量依赖作用(P<0.01),高剂量组与阳性组无显著性差异;组织学检查显示人参提取物可以刺激毛囊生长,产生黑色素;给药20,60 min后,人参各剂量组均能显著提高小鼠的体温(P<0.01),120 min后,恢复到给药前水平;人参高、中、低剂量组对血小板活化因子(PAF)诱导的大鼠5 min时血小板聚集率分别为49.41%,27.80%,18.39%(均P<0.01),且呈现一定的剂量依赖作用,与阳性对照组则无显著性差异;其抗血小板聚集的作用与抗凝血酶有关, 人参高、中、低剂量组的凝血酶抑制率分别为(20.24±2.72)%,(15.42±1.03)%,(8.61±0.80)%(P<0.01)。 结论: 人参提取物具有明显的促进毛发生长的作用,其机制与扩张皮肤毛细血管、改善局部微循环有关。     

oleosin-rhFGF9融合蛋白的红花表达及其毛发再生、创伤修复研究

利用红花表达成纤维细胞生长因子9(fibroblast growth factor 9,FGF9)重组融合蛋白,研究其对毛发生长及创伤修复的作用,为红花作为植物反应器提供基础并对FGF9融合蛋白毛发及创伤商业化应用奠定基础。通过冻融法将鉴定的p OTBar-oleosin-rhFGF9质粒转入农杆菌EHA105中,农杆菌介导法将oleosin-rhFGF9基因转入红花子叶中,经红花组织培养、Basta筛选获得转基因再生苗,嫁接法,PCR试验验证,扩繁,获得转基因T3红花种子。Western blot法分析及ELISA定量融合蛋白含量为0.09%。在质量浓度为60μg·L-1时,转基因红花油体促NIH/3T3细胞增殖较好,且有一定剂量依赖性。C57BL/6小鼠60只,分别建立脱发模型和创伤模型,分别为空白组(PBS或生理盐水)、阴性组(野生型红花种子油体,60 g·L-1)、阳性组(FGF9,0.054 g·L-1)、低剂量组(转基因红花油体,10 g·L-1)和高剂量组(转基因红花油体,60 g·L-1),隔天涂抹1次,每次100μL,15 d后取皮,固定包埋进行组织学分析。小鼠毛发实验结果表明各组小鼠毛发长势良好,其中高剂量组小鼠毛发浓密,再生毛发数均较阳性组有显著效果;创伤实验愈合明显,阳性组、高剂量组、低剂量组愈合效果较空白组均显著,且在第5天,高剂量组愈合效果显著优于阳性组。该实验成功转化红花,获得了oleosin-rhFGF9融合蛋白表达的T3转基因红花,其具有促进毛发再生和创伤修复的作用。     

羟基红花黄色素A对裸鼠人胃腺癌BGC 823移植瘤血管及VEGF，bFGF mRNA表达的影响

目的:研究羟基红花黄色素A(HSYA)对人癌裸鼠皮下移植瘤血管生长、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)mRNA表达的影响.方法:运用BALB/C nu/nu裸小鼠接种人胃腺癌细胞株BGC-823于右前肢腋部皮下建立裸鼠人癌移植瘤模型,随机分为模型组、阳性药对照组、HSYA高、低剂量组,模型组给予生理盐水腹腔注射,HSYA两组分别给予0.056,0.028 g·L~(-1)HSYA溶液腹腔注射,此3组均每只每日注射2次,间隔4～6 h,每次0.2 mL;阳性药对照组给予2 g·L~(-1)环磷酰胺(cytoxan,CTX)每只腹腔注射0.2 mL,每2天1次.20 d后,检测各组肿瘤体积、重量,光镜观察瘤组织病理改变,实时荧光定量PCR(real time quantitative PCR,RT-qPCR)检测瘤组织VEGF和bFGF mRNA的表达.结果:HSYA 0.028 g·L~(-1)组移植瘤体积(607.42±252.96)mm~3、质量(0.88±0.14)g,VEGF mRNA表达0.49±0.13,bFGF mRNA表达0.60±0.48均较模型组低(P＜0.05或P＜0.01);给药组较模型组瘤组织血管生成明显减少.结论:一定浓度的HSYA有抑制肿瘤生长的作用,其机制可能与抑制肿瘤血管生成有关.     

补髓生血丸对再生障碍性贫血小鼠造血功能及骨髓VEGF、TPO、VCAM-1 水平的影响

目的 观察补髓生血丸(熟地黄、鹿角胶、黄芪、当归等)对再生障碍性贫血(AA)小鼠的防治作用,并从改善骨髓造血微环境角度分析相关作用机制。方法 将昆明种雄性小鼠随机分为正常组、模型组、阳性药组(再造生血片,2.70 g·kg^-1)及补髓生血丸低、中、高剂量组(2.25,4.50,9.00 g·kg^-1),每组15只。采用白消安(10 mg·kg^-1)及环磷酰胺(20 mg·kg^-1)交替腹腔注射给药12 d,制备AA小鼠模型。造模同时灌胃给药,每日1次,连续30 d。检测小鼠外周血象;采用瑞士-姬姆萨染色法观察小鼠骨髓涂片;进行骨髓有核细胞计数;HE染色法观察骨髓病理变化;ELISA法检测小鼠血清及骨髓中血管内皮生长因子(VEGF)、血小板生成素(TPO)、血管细胞黏附因子1(VCAM-1)的水平。结果 各组间的血清及骨髓TPO水平无明显差异(P>0.05)。与正常组比较,模型组小鼠的红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、血红蛋白(HGB)和血小板(PLT)水平均明显下降(P<0.05);血...