阿霉素诱导人肝癌细胞BEL—7402凋亡的观察

目的研究化疗药物阿霉素抗癌作用与癌细胞凋广的关系及意义。方法应用流式细胞仪、激光共聚焦扫描显微镜动态观察阿霉素对体外培养的人肝癌细胞BEL－7402的生长抑制作用与细胞凋亡的关系。结果阿霉素可阻滞人肝癌细胞BEL－7402从G0/G1期进入S期,诱导细胞凋亡。结论本研究显示阿霉素抗癌作用与诱导细胞凋亡有关。应用流式细胞仪、激光共聚焦扫描显微镜观察细胞凋亡是有效、可行的方法。     

雷氏大疣蛛蛛毒对人肝癌BEL-7402 细胞增殖的抑制作用及其机制的研究

背景与目的蜘蛛毒素抗肿瘤的研究迄今还是未知领域。本研究探讨雷氏大疣蛛(Macrotheleraveni)蛛毒对BEL-7402细胞增殖的抑制作用,进一步探讨其作用机制。方法采用MTT法测定了雷氏大疣蛛蛛毒(10、20、40、80滋g/ml)对BEL-7402细胞增殖作用的影响;采用[3H]-TdR掺入法检测蛛毒加入前后BEL-7402细胞DNA的变化;利用流式细胞光度术(FCM)探讨雷氏大疣蛛蛛毒对BEL-7402细胞凋亡率和细胞周期的影响;利用Westernblot方法进一步检测雷氏大疣蛛蛛毒对细胞周期相关基因c-myc的变化。结果雷氏大疣蛛蛛毒对BEL-7402细胞增殖有较强的抑制作用(P<0.05),IC50为20滋g/ml,时效和量效关系良好。雷氏大疣蛛蛛毒可以抑制BEL-7402细胞DNA的合成。流式细胞仪检测发现经过雷氏大疣蛛蛛毒作用下的BEL-7402细胞凋亡率增加,细胞周期阻滞在G0/G1期。Westernblot方法进一步检测表明雷氏大疣蛛蛛毒作用于BEL-7402细胞72h后,c-myc基因表达减弱。结论雷氏大疣蛛蛛毒就可以抑制人肝癌BEL-7402细胞的增殖和DNA的合成。其药理作用机制可能是除了诱导凋亡外,主要是使细胞周期相关基因c-myc表达减弱,导致细胞周期的变化。     

肝细胞提取物对癌细胞凋亡相关基因表达的影响

研究资料表明,肝细胞提取物(hepatocyteextraction)在诱导BEL-7402细胞凋亡的同时能促进p53和Fas基因表达,而对bcl-2和C-myc表达具有一定的抑制作用.本研究采用免疫组化技术,进一步观察纯化的肝提取肽(S4)对4种肝癌和4种非肝癌细胞凋亡及凋亡相关基因的影响.1 材料与方法1.1 肝细胞提取物和S4(subfraction 4)的制备参见文献[2].1.2 细胞系及培养条件SMMC 7721、QGY-7703人肝癌细胞、HCT-8结肠癌细胞、GLC-82低分化肺腺癌细胞引自中国科学院细胞所.BEL-7402人肝癌细胞引自北京中日友好医院中西医结合研究所.Hepe小鼠肝癌细胞、CNE-2鼻咽癌细胞引自中山医科大学.SGC-7901胃腺癌细胞由第四军医大学生化室惠赠.实验时将对数生长期细胞用0.25%胰酶加0.025?TA消化,配成(2.5～5)×10~4/ml细胞悬液,加入内置盖玻片的24孔Costar培养板中,每孔0,5ml.37℃,5%CO_2条件下孵育24小时后,置4℃水浴1小时后立即升到37℃,将S4以不同浓度加入培养孔,每孔0.5ml,继续孵育.洗涤固定细胞,分别做DNA原位末端标记检测和癌基因免疫组化测定.根据预实验结果,选定S4为5μg/ml,作用48小时为统一条件,以利于结果的可比性及准确性.     

合成紫花茄皂苷诱导人肝癌BEL-7402细胞凋亡

目的：探讨合成紫花茄皂苷对BEL-7402细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用。方法：采用酸性磷酸酶(APA)法、吖啶橙荧光染色法和流式细胞术检测合成紫花茄皂苷对人肝癌BEL-72102细胞增殖的影响以及诱导细胞凋亡的作用利用蛋白印迹法检测药物作用后凋亡相关蛋白PARP的表达水平。结果：合成紫花茄皂苷对人肝癌BEL-7402细胞有明显的增殖抑制作用，其72h的IC50为4．2μg／ml。荧光显微镜下细胞呈现典型的凋亡形态流式细胞术分析发现，细胞经皂苷作用6h、12h和24h后，凋亡率显著增加蛋白印迹检测结果显示，合成紫花茄皂苷作用后肿瘤细胞内的PARP蛋白被剪切，Bcl-2蛋白的表达量下调。结论：合成紫花茄皂苷对人肝癌细胞的增殖抑制呈浓度相关性，具有诱导肿瘤细胞凋亡的作用，且这一作用可能与Bcl-2表达下调有关.     

冬凌草甲素对人肝癌BEL-7402细胞的增殖抑制作用研究

目的:探讨冬凌草甲素对人肝癌BEL-7402细胞的增殖抑制作用。方法:以8、16、24和32μmol/L不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的BEL-7402细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,应用流式细胞仪检测细胞凋亡,Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡时的形态学变化。结果:16~32μmol/L的冬凌草甲素可显著抑制BEL-7402细胞的生长,诱导细胞发生凋亡,并呈现出明显的量-效与时-效关系。冬凌草甲素作用48~60h后Hoechst33258荧光染色图片上可见核浓缩及核碎裂等典型的细胞凋亡特征。结论:冬凌草甲素能通过诱导细胞发生凋亡,抑制BEL-7402细胞的生长而发挥抗增殖作用。     

STAT3抑制剂S3I-201对人肝癌BEL-7402细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响

目的 研究STAT3小分子抑制剂S3I-201对人肝癌细胞系BEL-7402增殖、凋亡与细胞周期的影响和初步的作用机制。方法 分别采用细胞活性检测试剂盒cell couting kit-8(CCK-8)和EdU细胞增殖法检测S3I-201对人肝癌细胞BEL-7402细胞增殖的影响,应用流式细胞术分析S3I-201对BEL-7402的细胞凋亡和周期的影响,通过Western blotting检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果 CCK-8及EdU结果显示,S3I-201能抑制BEL-7402细胞的生长和增殖(P<0.05),使BEL-7402细胞阻滞于S期,具有诱导细胞凋亡的作用,上调Bax的表达,下调Bcl-2的表达(P<0.05)。结论 STAT3小分子抑制剂S3I-201通过促进BEL-7402凋亡、上调促凋亡蛋白Bax、下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,并将BEL-7402阻滞于S期而发挥抗肿瘤效应。     

环氧合酶-2选择性抑制剂NS-398诱导人肝癌BEL-7402细胞凋亡及其机制探讨

目的:探讨环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)选择性抑制剂NS-398对人肝癌BEL-7402细胞凋亡及凋亡抑制蛋白survivin、XIAP和c-IAP1表达的调节作用.方法:用不同浓度的NS-398作用BEL-7402细胞后,MTT法测定细胞增殖抑制情况,FCM法和TUNEL法检测细胞凋亡情况,免疫细胞化学法检测COX-2、survivin、XIAP和c-IAP1蛋白的表达情况.结果:NS-398 可以显著抑制BEL-7402细胞的增殖,诱导其凋亡.免疫细胞化学法检测结果显示,与未处理组相比,NS-398作用可使BEL-7402细胞中COX-2、survivin、XIAP和c-IAP1蛋白的表达明显下调(P<0.01).结论:NS-398对人肝癌细胞株BEL-7402有抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用,其机制可能与通过下调survivin、XIAP和c-IAP1的表达有关.     

干扰素α对BEL-7402细胞生长与端粒酶活性影响的观察

目的:探讨干扰素α(IFN-α)对肝癌BEL-7402细胞的生长抑制作用及其对肝癌细胞端粒酶hTERT-mRNA表达水平和端粒酶活性的影响。方法:以不同浓度的IFN-α作用于体外培养的肝癌BEL-7402细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,应用流式细胞仪及ho-echst33258荧光染色法观察细胞凋亡;并对细胞凋亡前后的端粒酶hTERT-mRNA表达水平及端粒酶活性进行检测。结果:IFN-α可显著抑制肝癌BEL-7402细胞的生长及诱导细胞发生凋亡,呈现出明显的量-效与时-效关系。在细胞凋亡过程中端粒酶hTERT-mRNA的表达水平及端粒酶活性均显著下降。结论:IFN-α能抑制BEL-7402细胞的生长并诱导细胞发生凋亡,降低端粒酶hTERT-mRNA的表达水平及端粒酶活性可能是其重要作用机制。     

雷帕霉素诱导人肝癌细胞BEL-7402凋亡中Bcl-2作用研究

目的探讨雷帕霉素(rapamycin,RAPA)体外对肝癌BEL-7402细胞生长抑制及诱导细胞凋亡中的作用及Bcl-2变化在凋亡机制中的意义。方法以5、10、20、30、40和50nmol/L不同浓度的RAPA作用于体外培养的BEL-7402细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,应用流式细胞仪检测细胞凋亡,Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡时的形态学变化,Westernblot观察Bcl-2、Bcl-xl和bax等凋亡相关表达变化。结果RAPA可显著抑制BEL-7402细胞的生长,诱导细胞发生凋亡,并呈现出明显的量-效与时-效关系。RAPA作用肝癌细胞BEL-740248h后,在Hoechst33258荧光染色图片上可见核浓缩及核碎裂等典型的细胞凋亡特征,凋亡过程中伴有抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xl表达的降低和促凋亡蛋白bax上调。结论RAPA可能通过诱导抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xl表达的降低和促凋亡蛋白bax表达上调而诱导凋亡发生,抑制BEL-7402细胞的生长。     

Caspase-3在雷帕霉素诱导肝癌细胞BEL-7402凋亡中的作用

背景与目的:雷帕霉素是从吸水性链霉菌(Streptomyceshygroscopicus)发酵液中提取,最近研究发现雷帕霉素具有免疫抑制作用和广泛的抗肿瘤作用。本研究主要探讨Caspase-3在雷帕霉素诱导肝癌细胞BEL-7402凋亡中的作用。方法:以不同浓度(5、10、20、30、40、50nmol/L)的雷帕霉素作用于BEL-7402细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡形态学变化,采用Caspase-3试剂盒和Westernblot蛋白电泳测定Caspase-3活性。结果:雷帕霉素可显著抑制BEL-7402细胞的生长,诱导细胞发生凋亡,具有量-效与时-效关系;雷帕霉素作用BEL-7402细胞48h后,Hoechst33258荧光染色可见核浓缩及核碎裂等典型的细胞凋亡特征;凋亡过程中Caspase-3酶原蛋白的激活,出现20ku亚单位,Caspase-3特异性抑制剂z-DEVD-FMK能阻断凋亡的发生。结论:雷帕霉素能抑制BEL-7402细胞的生长,诱导细胞凋亡发生,Caspase-3酶的激活在雷帕霉素诱导细胞凋亡机制中起到重要作用。     

EGCG诱导胃癌和肝癌细胞凋亡及bcl-2表达下调的研究

目的：探讨表没食子儿茶素投食子酸酯[（－）－epigallocatechin-3-gallate,EGCG]诱导胃癌MGC－803细胞和肝癌BEL－7402细胞凋亡的作用及其调亡相关基因bcl-2产物表达的改变。方法：用MTT法、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术检测EGCG处理MGC-803细胞和BEL-7402细胞后,他们在形态学和生化方面的改变以及bcl－2蛋白表达水平的变化。结果：EGCG以剂量依赖的方式抑制MGC－803细胞和BEL－7402细胞的生长,其IC50值分别为188．52和264．53μg／ml。200～300μg／ml的EGCG处理MGC-803细胞和BEL-7402细胞24～36h,在琼脂糖凝胶电泳上可见凋亡细胞特征性的“梯状”带和PI染色流式细胞仪直方图上可见亚二倍体峰;流式细胞术显示EGCG以时间依赖的方式下调bcl-2蛋白的表达。结论：EGCG对胃癌MGC-803细胞和肝癌BEL-7402细胞生长具有抑制作用,其机制之一是诱导这两株肿瘤细胞的凋亡。诱导细胞凋亡的机制可能与其下调bcl-2蛋白的表达水平有关。     

索拉非尼降低放射对肝癌细胞的作用

目的:观察放射联合索拉非尼(Sorafenib)对人肝癌细胞的作用.方法:人肝癌细胞株SMMC-7721和BEL-7402,以单纯放射(IR)和放射前联合索拉非尼(IR+S)处理后,使用克隆形成实验检测照射后细胞克隆形成率并计算放射增敏比;细胞增殖抑制实验检测照射后细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测放射后细胞凋亡率与细胞周期分布;免疫荧光染色观察照射后DNA损伤阳性细胞比例.结果:索拉非尼增加肝癌细胞放射后克隆形成,放射增敏在SMMC-7721和BEL-7402细胞中比分别为0.78和0.88.放射2天后,IR+S处理后肝癌细胞的细胞增殖抑制率与IR处理靠近.加入索拉非尼后出现:1)放射后24h肝癌细胞的细胞凋亡比增加(IR+S vs IR在sMMC-7721细胞中为18.3%±2.0%vs 6.1%±1.0%,在BEL-7402细胞中为17.0%±2.4%vs 8.2%±2.1%,P<0.05),但对放射后48h细胞凋亡比例无影响;2)延迟和延长放射后G2/M期细胞比例升高;3)不影响放射后DNA受损阳性细胞比例,但是减少放射后6h DNA受损阳性细胞残留(DNA受损阳性细胞比例IR+S V8 IR在SMMC-7721细胞中为23.8%±2.9%vs 59.9%±2.4%,在BEL-7402细胞中为25.0%±3.0%vs 46.4%土3.8%,P<0.001).结论:放射前联合索拉非尼降低了放射对肝癌细胞的作用.进一步体内实验需要考虑更合适的联合方式.     

应用中空纤维法评价酪丝缬肽对肝癌的抑制作用

目的 观察三肽化合物酪丝缬肽(YSV)的抗肝癌作用.方法 应用新型四氮唑盐(MTS)法,检测YSV对BEL-7402、SMMIC-7721、Hep3B、Her,G2和SK-HEP-1人肝癌细胞体外生长的抑制作用;应用中空纤维管皮下移植模型,进一步观察YSV对这5种人肝癌细胞体内生长的影响.结果 0.1～1.6 mg/ml的YSV能够明显抑制BEL-7402、SMMC-7721、Hep3B、ItepG2和SK-HEP-1人肝癌细胞的体外生长,YSV组的吸光度(A)值与相应阴性对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05),其中YSV对人肝癌细胞BEL-7402的抑制作用最强,1.6 mg/ml的YSV抑制率达63.3%.160μg·kg-1·d-1和320 μg·kg-1·d-1的YSV均能够明显抑制BEL-7402、SMMC-7721、ttep3B、HepG2和SK-HEP-1人肝癌细胞的体内生长,YSV组的A值与相应生理盐水组相比,差异均有统计学意义(P<0.05).YSV对人肝癌细胞BEL-7402的抑制作用最强,320 μg·kg-1·-1 YSV的抑制率为53.1%.结论 中空纤维法可以快速、准确地观察药物对不同肝癌细胞株体内生长的抑制作用,为YSV的临床应用提供了实验指导和可靠证据.     

极低频磁场对肝癌细胞株BEL-7402的作用初步观察

目的:观察极低频磁场对人肝癌细胞株BEL-7402的作用,探讨其抑制细胞生长的机制.方法:建立极低频磁场生物模型.极低频磁场处理(100 Hz,0.7 mT,30 min)人肝癌细胞系BEL-7402后,给予不同剂量X射线照射(2、4、6、8和10 Gy).作细胞集落形成试验;流式细胞仪研究极低频磁场作用下人肝癌细胞系BEL-7402细胞周期及相关蛋白的改变;RT-PCR检测p53水平.结果:细胞集落形成试验结果显示,极低频磁场加X射线组抑制率为73.00%、78.00%、58.00%、55.00%和67.00%,单纯X射线组抑制率为38.00%、41.00%、20.00%、24.00%和30.00%,F=5.89,P=0.03.流式细胞仪检测显示,5种不同放射强度下,极低频磁场加放射组凋亡率为10.00%、14.50%、4.30%、5.10%和7.10%,单纯放射组凋亡率为0.10%、8.10%、0.10%、0.41%和2.20%,极低频磁场加X射线对肝癌细胞株BEL-7402的凋亡率均高于单纯放射,2和4 Gy照射时最为明显,两组差异有统计学意义,F=6.9,P=0.03.极低频磁场组细胞生长停滞于G2/M期,细胞周期停滞相关的p53蛋白水平均显著增高.结论:100 Hz,0.7 mT极低频磁场能诱导人肝癌细胞BEL-7402产生凋亡.极低频磁场抑制癌细胞增殖作用的机制与G2/M期停滞有关.其中p53激活是引起细胞周期停滞重要原因.     

miR-16对人肝癌细胞BEL-7402增殖与凋亡的影响

背景与目的：miR-16和miR-15a基因复合体位于人13q14区域的DLEU2基因内含子内,是目前公认的抑癌基因之一。该基因区域的缺失与多种实体肿瘤有关,miR-16同时促进肿瘤细胞的凋亡。该研究旨在探讨miR-16对BEL-7402肝癌细胞增殖与凋亡的影响。方法：人肝癌细胞BEL-7402分为miR-16感染组(加入LV-hsamiR-16-1慢病毒)和阴性对照组(加入阴性对照病毒),采用倒置荧光显微镜观察细胞绿色荧光的强度;采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测miR-16对BEL-7402肝癌细胞增殖的影响;采用流式细胞术分析miR-16对人肝癌细胞BEL-7402的细胞周期与凋亡的影响。结果：CCK-8检测结果显示,感染组细胞增殖能力明显降低(P<0.05);流式细胞术检测结果显示,阴性对照组BEL-7402细胞周期中G₁期细胞百分率数值明显下降,但S及G₂/M期细胞的百分率均明显上升(P<0.05)。miR-16促进BEL-7402肝癌细胞凋亡。结论：miR-16抑制BEL-7402肝癌细胞的增殖并促进其凋亡,miR-16有望成为临床肝癌靶向治疗的新靶点。     

黄芪多糖协同顺铂对BEL-7404人肝癌细胞的杀伤作用

目的探讨黄芪多糖对人肝癌细胞BEL-7404细胞株细胞周期的影响及与顺铂联合使用，对BEL-7404肝癌细胞的杀伤作用。方法通过四氮甲唑蓝(MTT)实验检测细胞的增殖抑制率，以观察黄芪多糖对肝癌细胞的增殖抑制作用；应用流式细胞仪检测细胞周期的改变及凋亡率。结果黄芪多糖可抑制肝癌BEL-7404细胞的生长、增殖；与顺铂联合应用对BEL-7404肝癌细胞杀伤作用强于2种药物单独使用。黄芪多糖处理后的BEL-7404细胞出现低于G1期DNA含量的亚二倍体凋亡峰，将细胞周期阻滞于G1期。结论黄芪多糖对肝癌BEL-7404细胞有杀伤作用；黄芪多糖与顺铂联合使用具有协同抗肿瘤作用。     

柴胡提取物对人肝癌细胞BEL-7402细胞内游离钙离子浓度和细胞内VCR蓄积的影响

目的:测定中药柴胡(BupleurumChineseDC,BCDC)提取物对人肝癌BEL-7402细胞内游离钙离子浓度([Ca2 ]i)和长春新碱(Vincristine,VCR)浓度的影响,探索柴胡提取物逆转BEL-7402细胞多药耐药的机制。方法:以Fura2/AM为细胞内钙离子的荧光指示剂,用双波长荧光分光光度计分别测定不同条件下的BEL7402细胞内[Ca2 ]i。高效液相色谱法测定BCDC作用于BEL-7402后细胞内VCR蓄积情况的变化。结果:柴胡提取物可使人肝癌细胞BEL-7402细胞内游离钙离子浓度下降(P<0.001),可使细胞内VCR浓度升高(P<0.01)。结论:柴胡提取物可以增加VCR在BEL7402细胞内的积聚浓度,部分逆转BEL7402细胞的多药耐药(multidrugresistance,MDR)。钙离子通道阻滞作用可能为柴胡提取物逆转BEL7402细胞多药耐药的机制之一。     

雷帕霉素对人肝癌细胞BEL-7402体外抗肿瘤作用研究

目的：观察雷帕霉素体外对肝癌细胞BEL-7402生长、细胞凋亡以及细胞转移能力作用。方法：以5nmol／L。10nmol／L，20nmol／L，30nmol／L，40nmol／L和50nmol／L不同浪度的雷帕霉素作用于体外培养的BEL-7402细胞。MTT法检测细胞生长抑制率，应用流式细胞仪检测细胞凋亡。Hoechst 33258荧光染色法观察细胞凋亡时的形态学变化。细胞粘附分析及体外侵袭试验观察肿瘤细胞的转移能力。结果：雷帕霉素可显著的抑制BEL-7402细胞的生长．诱导细胞发生凋亡，并呈现出明显的量-效与时-效关系。雷帕霉素作用肝癌细胞BEL-740248h后，在Hoechst 33258荧光染色图片上可见核浓缩及核碎裂等典型的细胞凋亡特征。雷帕霉素能抑制其粘附性和侵袭性。具有剂量依赖性。随浓度增加而抑制增加。结论：雷帕霉素不仅能诱导BEL-7402肝癌细胞凋亡，抑制细胞的生长。而且同时抑制肿瘤细胞的粘附性和侵袭性．阻止肿瘤细胞的转移，雷帕霉素可能成为一种潜在的抗肝癌药物。     

Sorafenib联合紫杉醇不同给药顺序作用于人肝癌细胞BEL-7402的效应

背景与目的：Sorafenib是一种多靶点的抗肿瘤药物,其治疗原发性肝癌的疗效已经初步得到证实。本研究应用Sorafenib与紫杉醇（paclitaxel,TAX）联合．观察两药不同的给药顺序作用于人肝癌细胞BEL-7402的不同效应,初步探讨产生这种差异的机制。方法：采用MTY法检测Sorafenib与紫杉醇单药作用于BEL-7402细胞的IC50流式细胞术检测Sorafenib与紫杉醇不同给药顺序作用后,BEL-7402细胞周期和凋亡率的变化。Western blot检测不同给药顺序作用后的BEL-7402细胞Bcl-2的表达情况。结果：Sorafenib和紫杉醇单药作用于BEL．7402细胞48h的IC50分别为（2.43±0.32） μg/mL、（1.89±0.72） μg/mL。分析Sorafenib、紫杉醇单药,先用紫杉醇再加入Sorafenib,先用Sorafenib再加入紫杉醇及紫杉醇与Sorafenib同时作用后BEL-7402细胞周期及凋亡率的变化,结果显示：①Sorafenib主要将细胞阻滞在S期,而紫杉醇主要将细胞阻滞在G2-M期。②先用紫杉醇再给予Sorafenib组细胞S期及G2-M期均有延长,且较其他组获得较高的凋亡率（36.43±2.29）％（P〈0．01）。Western blot显示先用紫杉醇再给予Sorafenib组BEL-7402细胞的Bcl-2表达的水平最低。结论：Sorafenib联合紫杉醇不同给药顺序作用于BEL-7402细胞,先应用紫杉醇诱导再序贯给予Sorafenib时细胞凋亡率更高：产生这种不同效应的可能机制为两种药物作用于不同的细胞周期,以及不同给药方法后的Bcl-2的表达水平不同。     

康莱特注射液诱导肝癌细胞凋亡及其对凋亡蛋白procaspase-3和caspase-9表达的影响

目的:探讨康莱特注射液(Kanglaite)对人肝癌BEL-7404细胞的增殖抑制作用、凋亡诱导作用以及对凋亡蛋白procaspase-3和caspase-9表达的影响.方法:采用MTT法检测康莱特注射液和阳性对照顺铂(cisplatin ,DDP)对BEL-7404细胞的增殖抑制作用,Hoechst 33258染色观察凋亡细胞核的情况,FCM检测细胞凋亡率,Western印迹法检测凋亡蛋白procaspase-3和caspase-9的表达.结果:MTT结果显示,经不同体积浓度康莱特注射液(10、20、40、80及160 μL/mL)作用BEL-7404细胞后,80 μL/mL康莱特注射液作用48 h时对肝癌BEL-7404细胞有明显的抑制增殖作用;Hoechst 33258染色可见细胞出现典型的凋亡细胞形态学改变;FCM法检测结果提示,空白对照组、DDP 10 μg/mL组和康莱特注射液80 μL/mL组的凋亡率分别为(1.23±0.40)%、(32.53±0.65)%和(3.13±0.32)% (P＜0.01);Western印迹法检测结果提示,康莱特注射液及DDP作用48 h后 procaspase-3蛋白的表达量明显降低 (P＜0.01),caspase-9蛋白的表达量显著升高(P＜0.01).结论:康莱特注射液可抑制肝癌BEL-7404细胞增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与凋亡相关蛋白procaspase-3表达下调及caspase-9表达上调有关.