急性淋巴细胞白血病患者CD4+CD25+调节性T细胞水平变化

目的 观察急性淋巴细胞白血病(ALL)患者外周血中CD4+ CD25+调节性T细胞(Treg)的变化,探讨其临床意义.方法 收集47例ALL初诊患者组、13例经化疗完全缓解组、9例未缓解组及20例健康对照组抗凝血,采用流式细胞仪检测CD4+ CD25+ Treg的水平.结果 CD4+ CD25+ Treg比例在ALL初...     

急性淋巴细胞白血病的免疫分型及CD4+CD25+T调节细胞检测

背景：在急性淋巴细胞白血病发病过程中,CD4⁺CD25⁺T调节细胞对机体免疫反应可能起着一定的调节作用。 目的：观察急性淋巴细胞白血病患者的免疫分型及外周血CD4+CD25+T调节细胞的变化情况。 方法：采用流式细胞仪对35例急性淋巴细胞白血病患者进行免疫分型,并检测外周血CD4⁺CD25⁺T调节细胞的数目,与18名健康对照作比较。 结果与结论：急性B细胞淋巴细胞白血病22例,急性T细胞淋巴细胞白血病13例;22例急性B细胞淋巴细胞白血病中CD19的阳性表达率最高(100%),而13例急性T细胞淋巴细胞白血病中CD7阳性表达率最高(100%)。急性B细胞淋巴细胞白血病患者外周血CD4⁺CD25⁺T调节细胞和急性T细胞淋巴细胞白血病患者差异无显著性意义(P > 0.05),但均高于健康对照(P < 0.05)。表明急性B细胞淋巴细胞白血病中CD19阳性表达率最高,急性T细胞淋巴细胞白血病中CD7阳性表达率最高,同时急性淋巴细胞白血病患者外周血CD4⁺CD25⁺T调节细胞水平显著增高。     

miRNA-93在急性淋巴细胞白血病中的表达

目的:探讨微小RNA(miRNA)-93在急性淋巴细胞白血病中的表达情况及其对急性T细胞白血病细胞株Jurkat增殖的影响和潜在作用机制。方法:Real-time PCR技术检测急性白血病患者骨髓样本中miRNA-93的表达水平。转染miRNA-93 inhibitor下调Jurkat细胞中miRNA-93的表达,分别采用CCK-8法、Ed U法和流式细胞术检测细胞活力、增殖及周期,Western blot检测周期相关调控因子cyclin D1、细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)、p-Rb及P27的蛋白表达水平。结果:miRNA-93在急性白血病患者中呈现高表达,且在高危患者中表达水平最高;沉默miRNA-93后,Jurkat细胞的活力下降并出现明显的G1/S期阻滞,同时细胞中cyclin D1、CDK4、p-Rb的蛋白水平显著降低,而P27的蛋白水平显著升高。结论:miRNA-93在急性淋巴细胞白血病中表达显著升高;沉默miRNA-93可通过调控周期相关因子的表达抑制急性T细胞白血病细胞株Jurkat的增殖。     

老年初诊急性髓细胞白血病患者CD4+CD25+调节性T细胞的表达

背景：研究证实,很多恶性肿瘤患者体内CD4⁺CD25⁺调节性T细胞存在高表达,近期也有研究发现,急性髓细胞白血病患者外周血CD4⁺CD25⁺调节性T细胞同样表现出高比例表达。 目的：分析老年初诊急性髓细胞白血病患者CD4⁺CD25⁺调节性T细胞的表达特点。 方法：纳入初诊急性髓细胞白血病患者92例,将年龄在60岁以下者设为中青年组(n=22),年龄在60岁以上者设为老年观察组(n=70)。在老年观察组中,32例经规范化疗后完全缓解,设为完全缓解组;将余下38例设为老年组,依据FAB分型标准,分为M2 6例、M3 19例、M4 7例、M5 6例。另选择同期体检健康人群42名作为正常对照组。抽取受试者外周静脉血,检测CD4⁺CD25⁺调节性T细胞表达情况。 结果与结论：老年组、完全缓解组CD4⁺CD25^highFOXP3⁺调节性T细胞比例高于正常对照组(P < 0.01),并且老年组CD4⁺CD25^high FOXP3⁺调节性T细胞比例高于完全缓解组(P < 0.01)。老年组、完全缓解组CD4⁺FOXP3⁺T细胞比例高于正常对照组(P < 0.01),并且老年组CD4⁺ FOXP3⁺T细胞比例高于完全缓解组(P < 0.01)。老年组CD4⁺CD25^high FOXP3⁺调节性T细胞与CD4⁺ FOXP3⁺T细胞比例高于中青年组(P < 0.01)。老年组不同分型间CD4⁺CD25^high FOXP3⁺调节性T细胞和CD4⁺ FOXP3⁺T细胞比例比较差异均无显著性意义(P > 0.05)。Pearson相关性检验结果显示,老年初诊急性髓细胞白血病患者外周血CD4⁺CD25^high FOXP3⁺调节性T细胞比例和CD4⁺ FOXP3⁺T细胞比例呈正相关(r=0.87,P=0.019)。表明老年初诊急性髓细胞白血病患者CD4⁺CD25⁺调节性T细胞比例高于健康人群和中青年急性髓细胞白血病患者。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

溃疡性结肠炎患者外周血CD4+CD25+Treg细胞的表达及其意义

探讨CD4 CD25 Treg细胞在溃疡性结肠炎(UC)发病中的作用及其与疾病活动性的关系。采用三色流式细胞术检测52例UC患者,30例其它肠病患者和30名对照者。UC患者中活动期的30例,稳定期的22例,使用和未使用激素和/或免疫抑制剂活动期UC患者分别为18例和12例。对以上各组外周血中CD4 CD25 Treg细胞亚群的百分率进行测定。结果显示,活动期UC患者外周血CD4 CD25 Treg细胞比例明显低于其他肠病和对照组(P<0.001);疾病活动期UC患者外周血CD4 CD25 Treg细胞比例明显低于疾病稳定期患者(P<0.001);活动期UC患者中使用激素和/或免疫抑制剂与未使用激素和/或免疫抑制剂结果差异有统计学意义;UC患者外周血CD4 CD25 Treg细胞表达率与疾病活动指数评分呈负相关性,提示UC患者外周血CD4 CD25 Treg细胞异常表达,可能参与疾病的发生发展,与疾病的活动性密切相关。     

急性淋巴细胞白血病浸润牙龈1例

患者男性 ,30岁 ,在无任何诱因下出现左上颌牙龈包块2个月。检查 :贫血貌 ,颌下可触及肿大淋巴结 ,5 6 78颊侧面有一 5ｃｍ× 4ｃｍ× 2 5ｃｍ大小的肿块 ,表面呈菜花状 ,有糜烂。实验室检查 :Ｈｂ 6 6ｇ/Ｌ ,ＷＢＣ 2 4× 10 9/Ｌ ,Ｐｌｔ 190×10 9/Ｌ ,Ｌ 0 37,Ｎ 0 6 0 ,骨髓象增生明显活跃 ,淋巴系统显著增生 ,其中原幼淋占 0 6 5。临床初步诊断 :左上颌牙龈白血病浸润。遂活检左上颌牙龈包块以进一步证实。病理检查　灰白组织一块 2ｃｍ× 1 5ｃｍ× 1ｃｍ ,切面灰白 ,质细嫩 ,呈鱼肉状。镜检 :牙龈黏膜下方为弥漫浸润的肿瘤性原…     

急性淋巴细胞性白血病细胞及其骨髓基质细胞粘附分子表达和粘附行为的探讨

分析了５８例急性淋巴细胞性白血病（ＡＬＬ）患者和１０例正常人骨髓单个核细胞及其骨髓基质细胞上粘附分子的表达。发现与正常人相比，白血病细胞上表达的ＣＤ１１ａ、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１８、ＣＤ３４、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｄ和基质细胞上表达的ＣＤ５４，ＣＤ４９ｂ均有显著性改变（明显下降或显著增高）；同时，来自ＡＬＬ的基质细胞在粘附分子表达和粘附行为上亦不同于正常骨髓基质细胞，认为粘附分子的异常表达可能参与了ＡＬＬ的发病机制。     

急性淋巴细胞白血病患者HLA-DRB1基因多态性研究

目的 :研究北方汉族人群HLA DRB1等位基因多态性与急性淋巴细胞性白血病 (ALL)患者的遗传关联。方法 :采用聚合酶链反应 序列特异性寡核苷酸探针 (PCR SSO)方法 ,对 184例北方汉族人群ALL患者和 3 5 78例健康脐带血样本HLA DRB1等位基因多态性进行研究。结果 :184例ALL患者HLA DR9( 18 2 1%,χ2 =16 .0 7,P <0 0 1,RR =1 74,EF =0 0 774) ,DR12 ( 14 13%,χ2 =7.12 ,P <0 0 1,RR =1 5 2 3,EF =0 0 49) ,DR14( 7 88%,χ2 =5 .194,P <0 0 5 ,RR =1 5 74,EF =0 0 2 87)和DR16 ( 4 89%,χ2 =8.5 2 7,P <0 0 1,RR =2 0 6 5 ,EF =0 0 2 5 )基因频率显著高于正常人群 ,而HLA DR7( 8 15 %,χ2 =7.0 78,P <0 0 1,RR =0 6 0 ,EF =0 0 86 )和DR15 ( 12 2 3%,χ2 =4.0 49,P <0 0 5 ,RR =0 710 9,EF =0 0 6 7)基因频率显著下降。结论 :HLA DR9、DR12、DR14、DR16等位基因对ALL患者有遗传易感作用 ,而HLA DR7、DR15等位基因对ALL患者有遗传拮抗作用。     

Survivin在儿童急性淋巴细胞白血病的表达及中期随访报告

目的:了解Survivin 在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)的表达及预后意义.方法:测定了54例儿童ALL的标本, 同时分析其临床特征、危险程度分类, 并对所有病例进行2年的随访, 并比较2年的无事生存率(EFS).结果:ALL患者Survivin阳性41例, 阴性13例, 36例对照组Survivin皆为阴性.阳性组和阴性组在平均年龄、初诊时白细胞计数、肿瘤细胞百分数无统计学意义(P>0.05), 但阳性组中、高危病儿明显多于阴性组, Kaplan-Meier分析, Survivin阴性的2年EFS优于Survivin阳性组(P<0.05).结论:在儿童ALL Survivin的表达阳性病例中, 中、高危病例数多, EFS时间短, 预后差.     

急性淋巴细胞白血病患者外周血CD4+CD25+T调节细胞与白细胞介素2、白细胞介素10、转化生长因子β的检测*

背景：目前急性淋巴细胞白血病的病因尚未完全清楚,而CD4+CD25+T调节细胞对机体的免疫反应可能起着一定的调节作用。 目的：观察急性淋巴细胞白血病患者外周血CD4+CD25+T调节细胞分泌白细胞介素2、白细胞介素10及转化生长因子β的情况。 方法：采用密度梯度离心法分离22例B细胞系列的急性淋巴细胞白血病(B-ALL)患者、13例T细胞系列的急性淋巴细胞白血病(T-ALL)患者和18名正常人外周血单个核细胞。采用免疫磁珠法分离出CD4+CD25+T调节细胞进行培养,同时用双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测细胞培养上清中白细胞介素2、白细胞介素10及转化生长因子β的水平。 结果与结论：B-ALL患者和T-ALL患者外周血CD4+CD25+T调节细胞培养上清中白细胞介素10和转化生长因子β水平显著高于正常人水平,而白细胞介素2水平显著低于正常人水平(P < 0.05);B-ALL和T-ALL患者的CD4+CD25+T调节细胞培养上清中3种因子表达差异无显著性意义(P > 0.05)。提示CD4+CD25+T调节细胞可能通过增加分泌白细胞介素10和转化生长因子β、减少分泌白细胞介素2等干扰抗肿瘤的免疫反应。      

CD4+CD25+免疫调节性T细胞对CD4+T细胞介导的移植物抗宿主病预防作用的研究

目的研究CD4+CD25+免疫调节性T(Treg)细胞在小鼠骨髓移植后,对移植物抗宿主病的预防作用及其作用机制.方法用C3H(H-2k)小鼠骨髓作为供体,提取C3H(H-2k)小鼠CD4+T及CD4+CD25+T细胞,C3H×B6(H-2k/b)F1小鼠为骨髓移植的受者.在受者接受致死量全身放射后,输注供者去除T细胞的骨髓(ATBM),使其造血功能重建(ATBM组).于不同的实验组给予CD4+(CD4组)T细胞,CD4+CD25+T(CD25组)或二者同时输注(CD4/CD25组).观察各组小鼠移植物抗宿主病(GVHD)的发生率.结果所有10只ATBM组小鼠至骨髓移植后60天仍全部存活,无GVHD发生;所有10只CD4组小鼠在骨髓移植10天内全部死于GVHD(P＜0.01);所有5只CD25组小鼠于骨髓移植后60天仍全部存活,无明显GVHD发生(P＞0.05);同样,所有6只CD4/CD25组小鼠至骨髓移植后仍全部存活,无明显GVHD发生(P＞0.05).结论在同种异基因小鼠的骨髓移植模型中,CD4+CD25+T不诱导GVHD的发生,并有预防CD4+T细胞介导的GVHD发生的作用.     

浆细胞性乳腺炎患者外周血CD4+CD25+CD127-调节性T细胞变化

目的:观察浆细胞性乳腺炎(Plasma cell mastitis,PCM)患者外周血CD4+ CD25+ CD127-调节性T细胞(CD4+CD25+ CD127-Treg)数量和功能变化,以探讨PCM免疫病理机制.方法:将58例浆细胞乳腺炎患者分成三组:其中急性组13例(22％)、亚急性组25例(43％)和慢性组20例(34％).并设正常对照组20例及乳腺癌对照组16例.以流式细胞术检测各型PCM患者外周血中CD4 +CD25+ CD127 Treg细胞百分率;实时荧光定量RT-PCR检测转录因子Foxp3表达及ELISA检测TGF-β水平.结果:三组PCM组与正常组相比,外周血CD4+ CD25+ CD127 Treg数量,外周血PBMC中Foxp3表达及血浆TGF-β水平均下降(P＜0.05),其中急性PCM组下降最为明显(P＜0.01),乳腺癌组三项指标均升高(P＜0.05).结论:浆细胞性乳腺炎患者的CD4+ CD25+ CD127-Treg数量及功能有所下降.     

小鼠脾细胞CD4+CD25+调节性T细胞的表型特征

观察CD4+CD25+T和CD4+CD25-T细胞的表型和细胞因子的表达。自小鼠脾脏制备单个细胞悬液,分离CD4+T细胞、CD4+CD25+和CD4+CD25-T细胞,进行细胞表面标记,激活后进行细胞内细胞因子染色,利用流式细胞仪在单个细胞水平上分析细胞表面分子、转录因子和细胞因子表达之间的关系。结果:在CD4+T细胞中,约有7.8%的细胞同时表达CD25分子。与CD4+CD25-T细胞相比,CD4+CD25+T细胞CD44的表达略有增加,CD45RB的表达明显下降,CTLA-4和Foxp3明显增加。以同时表达CTLA-4和Foxp3的细胞为主,其次为单独表达Foxp3的细胞。细胞因子的研究结果表明,与CD4+CD25-T细胞相比,CD4+CD25+T细胞IL-2、IFN-γ明显减少,而只产生IL-10的细胞略有增加。CD4+CD25+调节性T细胞无论在表型、转录因子的表达以及细胞因子表达方面均于非调节性T细胞不同。     

人CD4~+CD25~+调节性T细胞体外扩增研究

目的:建立有效的体外培养扩增人CD4+CD25+Treg细胞的体系,为临床输注供者来源的CD4+CD25+细胞抑制急性移植物抗宿主病(Auctegraft versus host disease,aGVHD)提供实验基础。方法:用免疫磁珠分选法从健康人外周血淋巴细胞中得到CD4+T细胞、CD4+CD25-T细胞和CD4+CD25+Treg细胞。分别进行长期培养、扩增;流式分析其表型及FOXP3表达,MTT法检测体外扩增的CD4+CD25+Treg对自体和异体的CD4+T细胞增殖的抑制作用。结果:经过3周培养,三组细胞均有明显的扩增。磁珠分选后的CD4+CD25+Treg细胞的扩增倍数为(20±8)倍,细胞纯度由89.28%±2.43%下降到76.36%±2.38%。CD4+CD25-T细胞组扩增迅速,倍数为(110±21)倍,并且CD4+CD25+Treg细胞的比例由培养前0.55%±0.27%增加到53.73%±3.81%。CD4+T细胞组扩增倍数为(89±8)倍,并且CD4+CD25+Treg细胞的比例由10.63%±3.87%增加到70.93%±1.71%。体外抑制实验显示体外扩增的CD4+CD25+T细胞对自体和异体的CD4+T细胞增殖均有明显的抑制作用,并且随着效靶比浓度的降低而降低。而且其各浓度梯度的抑制作用在自体和异体之间无明显的差异。结论:我们在体外成功扩增了CD4+CD25+Treg细胞,并且具有免疫抑制功能,其中CD4+T细胞组扩增倍数大,细胞数量多,细胞纯度有很大提高,方法简便,有望应用于临床试验。     

Foxp3在CD25+CD4+调节性T细胞发育和功能中作用的研究进展

CD25+CD4+调节性T细胞(Treg)是显性耐受的重要调节细胞,在免疫病理、自身免疫耐受的维持、针对病原体和肿瘤的免疫反应调节过程中发挥着关键的作用.Foxp3作为X染色体编码的叉头蛋白转录因子家族的一员,是Treg发育、分化和功能发挥所必不可少的.研究Foxp3调控机制及其在Treg生物功能中的作用对于Treg和显性耐受的研究具有极其重要的意义.     

Foxp3在CD25+CD4+调节性T细胞发育和功能中作用的研究进展

CD25+CD4+调节性T细胞(Treg)是显性耐受的重要调节细胞,在免疫病理、自身免疫耐受的维持、针对病原体和肿瘤的免疫反应调节过程中发挥着关键的作用.Foxp3作为X染色体编码的叉头蛋白转录因子家族的一员,是Treg发育、分化和功能发挥所必不可少的.研究Foxp3调控机制及其在Treg生物功能中的作用对于Treg和显性耐受的研究具有极其重要的意义.     

不同结核病患者CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞表达的变化

Objective To investigate the expression of CD4 + CD25 + Foxp3 + regulatory T cell in patients with tuberculosis, and to discover its role in the immune response to mycobacterium tuberculosis. Methods Thirty-three patients with tuberculosis and 30 healthy controls were selected who were consulted in our hospital. Patients were classified by their chemotherapy and smear sputum and CD4 + CD25 + Foxp3 + regulatory T cell were detected by flow cytometry. Results Expression of CD4 + CD25high and CD4+ CD25 + Foxp3 + regulatory T cell in experimental group were ( 8.84 ± 2.55 ) % and (6.30 ± 1.38 ) % respectively, which were significantly higher than they were in control group (t = 3.57,4. 01, P ＜ 0. 01 ). The expression of CD4 + CD25high and CD4+ CD25 + Foxp3 + regulatory T cell in patients with positive smear sputum were also significant higher than that in patients with negative smear sputum ( t = 2. 51,2. 42,P ＜ 0.05). No significance was founded between the first-visit group and revisit group ( t = 0. 03, 0. 02, P ＞ 0.05 ). Conclusions CD4 + CD25high and CD4 + CD25 + Foxp3 + regulatory T cell in patients with tuberculosis were higher than healthy control, which may result in immune suppression.     

初发系统性红斑狼疮患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+和CD4~+CD25~-Foxp3~+T细胞

目的：研究初发系统性红斑狼疮患者（Systemic lupus elythematosus，SLE）外周血CD4^＋T细胞中CD25和Foxp3表达及其在SLE发病中的意义。方法：根据SLE疾病活动积分（SLEDAI）将初发SLE患者分为活动组（10例）和不活动组（11例），流式细胞仪检测治疗前后外周血CD4^＋T细胞中CD25、Foxp3和CD127表达百分率，并对其与SLE临床活动度、尿蛋白、补体和anti-ds-DNA相关性进行研究。结果：初发活动组和不活动组SLE患者CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞表达百分率分别为（1．91％～6．75％）和（2．74％～7．01％），与正常对照（2．11％～9．90％）相比没有统计学差异（P=0．524，P=0．794）；且初发SLE患者外周血CD4^＋CD25^＋T细胞在体外增殖反应和增殖抑制功能与正常对照相比无明显差别（P=0．174，P=0．689）；外周血CD4^＋CD25^-Foxp3^＋T细胞百分率在初发活动组（3．71％～10．94％）和不活动组（2．97％～7．69％）SLE患者均比正常对照（1．01％～3．62％）显著增高（P〈0．01和P〈0．01）；而CD4^＋CD2^＋Foxp34^-T百分率在初发活动组SLE患者（1．19％～9．23％）显著低于正常对照（2．67％～11．26％）和初发不活动组SLE患者（3．73～8．27％）（P=0．039，P=0．048）；与CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞类似，90％左右的CD4^＋CD25一Foxp3^＋T细胞不表达或低表达CD127，其百分率与anti-ds-DNA浓度呈正相关，且尽管未达到统计学意义，但激素和免疫抑制治疗后其水平下降。结论：初发未经治疗的SLE患者CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞数量和功能无明显异常，而CD4^＋CD25^-Foxp3^＋T细胞数量增多，与SLE疾病活动相关，可能具有调节功能。     

CD73 expression on extracellular vesicles derived from CD4+CD25+Foxp3+ T cells contributes to their regulatory function

CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg cells maintain immunological tolerance. In this study, the possibility that Treg cells control immune responses via the production of secreted membrane vesicles, such as exosomes, was investigated. Exosomes are released by many cell types, including T cells, and have regulatory functions. Indeed, TCR activation of both freshly isolated Treg cells and an antigen‐specific Treg‐cell line resulted in the production of exosomes as defined morphologically by EM and by the presence of tetraspanin molecules LAMP‐1/CD63 and CD81. Expression of the ecto‐5‐nucleotide enzyme CD73 by Treg cells has been shown to contribute to their suppressive function by converting extracellular adenosine‐5‐monophosphate to adenosine, which, following interaction with adenosine receptors expressed on target cells, leads to immune modulation. CD73 was evident on Treg cell derived exosomes, accordingly when these exosomes were incubated in the presence of adenosine‐5‐monophosphate production of adenosine was observed. Most importantly, CD73 present on Treg cell derived exosomes was essential for their suppressive function hitherto exosomes derived from a CD73‐negative CD4⁺ T‐cell line did not have such capabilities. Overall our findings demonstrate that CD73‐expressing exosomes produced by Treg cells following activation contribute to their suppressive activity through the production of adenosine.