贲门癌组织中多药耐药基因和多药而药相关蛋白基因表达的临床

目的 了解多药耐药基因（ＭＤＲＩ）和多药耐药相关蛋白基因（ＭＲＰ）在贲门癌组织中的表达及其临床意义。方法 采用反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术,检测了５６例贲门癌及癌旁组织中ＭＤＲＩ和ＭＲＰ的表达。结果 癌组织 ＭＤＲＩ和ＭＲＰ表达的阳性率分别６３％和５０％,均高于癌旁组织（Ｐ〈０．０５）有化疗的ＭＤＲ１ ｍＲＮＡ和ＭＤＲ１和ＭＲＰ表达的水平高于未化疗者（Ｐ〈０．０５）;中低分化肿瘤的的ＭＤ     

RT-PCR法定量检测恶性淋巴瘤多药耐药基因的表达

目的：应用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）方法检测非霍奇金淋巴瘤（NHL）患者多药耐药基因表达情况，以探讨NHL患者的抗药性与临床化疗的关系。方法：对30例淋巴瘤患者采用RT－PCR技术检测多药耐药基因（MDR）表达情况。结果：30例患者MDR1阳性表达13例，这13例MDR1阳性的淋巴瘤患者，没有1例经1个疗程化疗即能完全缓解。结论：RT－PCR是一种敏感性高、特异性强，可定量检测MDR1表达。MDR1表达可作为一个临床化疗耐药指标，有助于淋巴瘤患者个体化疗方案制定。     

肺癌组织中耐药相关基因的表达水平及其临床意义

目的 探讨肺癌组织耐药相关基因产物的表达水平及其临床意义。方法 采用免疫组化法S－P对60例肺癌组织及30例癌旁肺组织中Pgp,MRP,GST-π，TopoⅡ进行检测。结果 肺癌组织中Pgp,MRP,GST- π，TopoⅡ表达阳性率分别为40．0％（24／60）、61．7％（37／60）、45．0％（27／60）、81．7％（49／60），均明显高于癌旁肺组织（P＜0．01），上述耐药相关基因表达阳性率与肺癌TNM分期、病理类型、细胞分化程度、淋巴结转移状态均无显著关系（P＞0．05）。结论 肺癌在癌变发生过程中其耐药相关基因均有不同程度的过度表达，联合检测这些基因的表达水平有助于指导化疗。     

肺癌组织中耐药相关基因的表达及其临床意义

目的：探讨肺癌组织中耐药相关基因的表达及其临床意义。方法：应用免疫组化技术检测治疗前肺癌组织标本中P-gp、MRP和LRP表达。结果：72例非小细胞肺癌中P-gp、MRP、LRP阳性率分别为61％,49％，65％，并有部分共表达。9例小细胞肺癌中P-gp、MRP、LRP阳性率分别为56％，22％，44％，也有部分共表达。在TNM各分期中P-gp、MRP、LRP阳性表达无明显差异（P＞0．05），随访中化疗有效组P-gp、MRP、LRP阳性表达分别为29％（4／14）、36％（5／14）、21％（3／14），无效组P-gp、MRP、LRP性表达分别为83％（20／24）、67％（16／24）、75％（18／24）。有效组P-gp、LRP表达低于无效组（P＜0．05），随访中死亡16例，P-gp、MRP、LRP阳性表达分别占43％（7／16），31％（5／16），64％（11／16）。LRP阳性组占比例最高，提示LRP阳性表达预后差，其与预后关系密切。结论：肺癌耐药为一多途径多基因参与的过程，联合检测肺癌组织中耐药相关基因的表达有助于判断化疗疗效及预后。     

用RT—PCR法检测新鲜癌组织中多药耐药基因（mdr—1）表达的体会

目的：恶性肿瘤细胞的多药耐药性（ＭＤＲ）已普遍受到关注，其分了学基础之一是ｍｄｒ－１基因的过表达，检测ｍｄｒ－１基因的方法较多。本研究旨在介绍反转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ｍｄｒ－１基因表达的经验。方法：选取安阳市肿瘤医院１９９４年１１月～１９９５年９月术前未作治疗的恶性肿瘤切除标本１５１份。以ＲＴ－ＰＣＲ检测其ｍｄｒ－１基因的表达情况，评价ＲＴ－ＰＣＲ检测ｍｄｒ－１基因中的注意事项及优点     

多药耐药相关蛋白基因在肺癌组织中表达的意义

目的：探讨多药耐药相关蛋白（MRP）基因在肺癌组织中的表达以及与化疗结果的相关性。方法：采用免疫组化的方法检测52例肺癌组织MRP的表达,结果：鳞癌和腺癌的MRP表达阳性率为65．63％,62．5％,显著高于正常组织（P＜0．05）,SCLC则与正常组织差异无显著性（P＞0．05）,无纵隔淋巴结肿大者高于肿大者（P＜0．05）,中,高分化者高于低分化者（P＞0．05）;对鳞癌和腺癌化疗结果MRP阳性组与阴性组差异无显著性（P＜0．05）,结论：MRP基因表达是鳞癌和腺癌产生原发性耐药的机制之一,与SCLC耐药无明显相关性。     

垂体瘤发病相关基因的大规模筛选及鉴定

目的：探讨垂体瘤与垂体组织差异表达基因的大规模筛选及鉴定。方法：垂体无功能腺瘤及正常重体组织cDNA文库构建，大规模表达序列标签（expressed sequence thain reation,RT-PCR)鉴定。结果：从无功能腺瘤和正常垂体组织分别获得1253和7222个质量满意的ESTs；垂体瘤中已知基因的品种数200个，经组织表达谱差异比较的统计学软件处理，在这些已知基因中，差异的可靠性≥0.99者38个，≥0.95者130个；其中与细胞生长、分化相关的G2类基因共17个；6个经半定量RT-PCR证实4个基因的表达在垂体瘤中明显高于正常垂体。结论：与细胞生长、分化相关的G2类基因MEIS2、SMT3C、C1D、BUB3在垂体瘤中表达高于正常垂体，推测可能与垂体瘤的发生有关。     

耐药基因与凋亡相关基因在肺癌中的表达及其意义

是肺癌综合性治疗的重要措施之一,但多药耐药如耐药相关基因P-gp,GSH/GSTs解毒系及ToPo质与量改变等的共同作用,是导致肺癌化疗失败的主要原因之一.我们应用免疫组化S-P法检测肺癌组织耐药基因与细胞凋亡相关基因的表达,并探讨它们之间的关系及临床意义.     

人肺癌组织细胞单羧酸转运基因mRNA表达的半定量分析

研究证明,细胞膜上的单羧酸转运器(monocarboxylate transporter,MCT)在细胞内外乳酸和丙酮酸转运及pH调节方面具有重要作用.近年来,对MCT在肿瘤细胞中功能的研究越来越受到重视[1],但对MCT基因各亚型mRNA在人类肿瘤组织中的表达情况的研究未见报道.而研究其基因亚型在人癌组织中的表达,有助于我们洞悉肿瘤细胞MCT基因各亚型在体内细胞能量及pH调节方面的作用方式,从而寻找肿瘤治疗的靶基因.本文通过RT-PCR方法,研究MCT1、MCT2两个基因亚型在人肺癌、癌旁肺组织及人肺癌细胞株中mRNA的表达情况.     

一条新的人肺腺癌耐药相关基因全长cDNA片段的克隆及序列分析

背景与目的：肺癌细胞的多药耐药（multi-drug resistance,MDR)是药物治疗失败的重要原因,但其机制尚未完全清楚。我们已经通过SSH发现了1条新的耐药相关基因片段,经检索GenBank,发现其与2001年4月公布的一条新的基因序列BC006151同源性高达99%。本研究旨在克隆该基因的全长,并检验该基因在几种肺癌细胞株中的表达,为进一步研究功能和调控奠定基础。方法：根据BC006151基因序列设计引物,通过RT-PCR证实肺腺癌MDR细胞SPC-A-1/CDDP确实包含BC006151基因后,扩增该基因全长cDNA,通过测序对所得序列进行分析,并对其编码蛋白的氨基酸序列进行预测。应用半定量RT-PCR方法检验小细胞肺癌SH77、大细胞肺癌H460、肺腺癌SPC-A-1和SPC-A-1/CDDP等细胞株中该基因mRNA的表达。结果：成功克隆了BC006151基因的全长CDNA片段,长1298bp,它具有完整的阅读框和编码区,并与经SSH获得的片段有极高的同源性。该基因在MDR细胞株SPC-A-1/CDDP的表达明显高于其亲代细胞株;SPC-A-1表达高于H460,SH77未见表达。结论：BC006151基因是与cDDP致肺腺癌MDR密切相关的一条新基因。该基因全长CDNA片段的克隆将有助于阐明其在肺癌MDR发生中的作用。     

人非小细胞肺癌中FHIT基因转录本异常的研究

目的 探讨ＦＨＩＴ基因转录表达异常在人肺癌发生、发展中的作用。方法 ３应用ｎｅｓｔｅｄ ＲＴ－ＰＣＲ方法对３５例人非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）组织、癌旁组织和远癌肺组织。１０例肺良性病变肺组织以及４株肺癌细胞株中ＦＨＩＴ基因转录表达异常进行了研究。结果 ３５例肺癌中１４例肺癌组织存在ＦＨＩＴ转录表达异常,异常率为４０％;在这１４例癌组织转录本异常病例中,５例癌旁组织亦见转隶本异常（３５．７１％,５／     

肺癌组织中Cyr61基因表达及临床意义

目的:研究人肺癌组织中Cyr61基因表达的临床意义。方法:采用实时荧光定量-PCR技术和免疫组织化学染色法对60名肺癌患者的肺癌组织和癌旁肺组织的Cyr61 mRNA和蛋白表达水平进行测量。结果:80%(48/60)肺癌患者的癌组织中Cyr61表达水平低于其配对的癌旁肺组织中的水平,与免疫组织化学染色法测定的结果相一致。统计分析显示,两组间差异有统计学意义(2.742±4.165vs4.933±3.349,t=-5.112,P=0.000)。肿瘤恶性程度分级、淋巴结转移、病理学类型、吸烟状况及家族史等临床参数均可影响癌组织中的Cyr61的表达水平(P<0.05)。结论:Cyr61对肺癌的进展起重要作用,因此Cyr61表达的蛋白产物可作为临床诊断的重要指标。     

肺癌组织CD44和TSP-1基因表达与肿瘤进展的关系

研究肺癌组织中ＣＤ４４和ＴＳＰ－１的表达并分析其与患者临床预后的关系。方法应用免疫组化法检测１１２例肺癌组织中ＣＤ４４和ＴＳＰ－１表达,其中２５例标本同时用ＲＴ－ＰＣＲ法检测ＴＳＰ－１表达。结果ＴＳＰ－１在肺腺癌中的表达（７４．３６％）明显高于鳞癌和小细胞癌（４７．１７％,Ｐ＝０．０３;３５．７１％,Ｐ＝０．０２）,ＣＤ４４Ｈ及ＣＤ４４ｖ６在小细胞肺癌中均表达极低;ＣＤ４４Ｈ在肺腺癌中的表达（６１     

肝癌组织和细胞系EGFL8基因表达及其临床意义

目的表皮生长因子样结构域8(epidermal growth factor-like domain 8,EGFL8)在多种癌症中表达失调且与患者的不良预后相关,但关于EGFL8在肝细胞癌组织表达尚不清楚。本研究旨在探讨EGFL8基因在肝癌组织及细胞系中表达水平并分析其临床意义。方法收集2014-02-01-2016-02-01暨南大学附属广州市红十字会医院行手术切除的42例肝癌患者标本及其对应的癌旁肝组织标本(距原发癌边缘>2cm)。培养HCCLM3、SMMC-7721、HepG2及Hep3B等4种具有不同侵袭转移潜能的肝癌细胞系和HL-7702正常肝细胞系,采用荧光实时定量PCR方法检测EGFL8基因在上述组织标本及细胞系中的表达量,并分析EGFL8基因表达与肝癌临床病理特征及侵袭转移潜能之间的相关性。结果 EGFL8基因在肝癌组织中的平均表达量(0.006 5±0.001 8)低于相应的癌旁肝组织(0.020 0±0.005 2),差异有统计学意义,U=425,P=0.015。且EGFL8基因表达下调与肝癌的静脉侵犯(χ~2=7.860,P=0.060)、多结节(χ~2=5.316,P=0.011)及较晚的TNM分期(χ~2=6.035,P=0.014)密切相关。EGFL8基因在肝癌细胞系中的表达量均低于正常肝细胞系(F=155.900,P=0.001),且其在高侵袭转移潜能肝癌细胞系中的表达量(0.000 26±0.000 03)低于低侵袭转移潜能的肝癌细胞系(0.001 36±0.000 12),P<0.001。结论 EGFL8在肝癌组织及细胞系中的表达水平明显下调,且其表达下调与肝癌的侵袭转移潜能、疾病进展及不良预后密切相关,提示EGFL8是一个潜在的肝癌分子标志物。     

非小细胞肺癌多药耐药基因表达及环孢菌素A对其逆转作用

研究非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）患者多药耐药基因（ＭＤＲ１）表达与化疗疗 间的关系,观察环孢霉素逆转ＭＤＲ１的疗效及毒性。方法利用ＲＴ－ＰＣＲ技术检测４６例ＮＳＣＬＣ患者肿瘤细胞和外周血淋细胞ＭＤＲ１表达,根据检测结果将患者分成ＭＤＲ１阳性逆转组、ＭＤＲ１阳性对照组和ＭＤＲ１阴性组。所有患者接受至少２个周期的化疗,阳性逆转组患者在化疗同时给予ＣｓＡ,剂量为４ｍｇ／ｋｇ。结果肿瘤细胞同阳性率为６５．２     

Expression of resistance-related proteins in tumoral and peritumoral tissues of patients with lung cancer

Twenty tumoral and peritumoral tissues from patients with lung cancer were analyzed immunohistochemically for the drug resistance-related proteins P-glycoprotein (P-170), topoisomerase II (Topo-II), glutathione S-transferase-π (GST-π), metallothionein (MT), heat shock protein-70 (HSP-70) and the putative regulators of resistance (ErbB1, Fos and Jun). Protein expression of Topo-II, GST-π, MT, HSP-70, ErbB1, Fos and Jun was elevated in tumor tissue in comparison to normal tissue. The different expression of the proteins between tumoral and normal tissues was statistically significant for Topo-II (P = 0.05), MT (P = 0.03), and HSP-70 (P = 0.01), whereas ErbB1 showed a borderline significance. The expression of the proteins was frequently increased in smokers in comparison to non-smokers. In general, the increase of the proteins of smokers corresponded in tumoral and non-tumoral tissue. Different expression was only found with MT and HSP-70 which were higher in tissues of smokers.     

非小细胞肺癌MAGE-3基因产物的表达

目的　检测MAGE 3基因编码的抗原在非小细胞肺癌表达的情况 ,探讨MAGE 3抗原的表达与患者临床表现的关系 ,以及利用MAGE 3基因产物对非小细胞肺癌患者进行特异性免疫治疗的可能性。方法　用免疫组化LSAB的方法对石蜡包埋的组织切片进行MAGE 3抗原的检测。结果　 10 4例非小细胞肺癌原发灶肿瘤组织切片中 ,MAGE 3抗原阳性者 31例 ,阳性率 2 9.8%。MAGE 3抗原阳性患者肿瘤转移率 (30 .0 % )明显低于阴性患者的转移率 (5 6 .1% ,P <0 .0 5 ) ,MAGE 3抗原阳性患者 18个月的生存率 (88.2 % )明显高于阴性患者生存率 (5 2 .9% ,P <0 .0 1)。结论　非小细胞肺癌有较高比例的MAGE 3抗原表达 ,并与患者的预后相关。对MAGE 3抗原阳性NSCLC患者 ,可以利用MAGE 3抗原作为靶分子进行免疫治疗。     

BRI基因在人非小细胞肺癌细胞系中的差异表达

目的 研究BRI基因在人非小细胞肺癌细胞系中的表达，探讨其表达情况与肺癌转移能力的相关性。方法 应用半定量RT-PCR、Northern blot法分析一对来源相同、转移能力不同的人肺腺癌细胞系AGZY83-a和Anip973中BRI基因的差异表达，并检测另外6个肺癌细胞系SPC-A-1、A549、95D、TKB-18、GLC-82和PAa中BRI基因的表达情况，分析其过度表达与肺癌转移能力的关系。结果 BRI基因在两同源细胞系中确实存在明显的差异表达，在具有高转移潜能的Anip973中呈高表达。在其他6个不同转移潜能的肺癌细胞系中BRI的表达情况也与其转移能力有一定的相关性。BRI基因存在1．6kb和2．0kb两个转录本，在肺癌细胞系中以1．6kb转录本为主。结论 BRI mRNA尤其是1．6kb转录本的表达上调与非小细胞肺癌转移表型的形成可能有一定关系。     

肺癌前病变、肺癌中FHIT基因表达的临床研究

背景与目的FHIT基因为近年发现的新的候选抑癌基因，位于3p14．2，跨越FRA3B易脆点，在包括肺癌在内的多种人类肿瘤中均存在异常表达。本研究旨在观察FHIT基因在人肺癌前病变、肺癌中的表达情况，探讨FHIT基因在肺癌发生、发展过程中的可能作用。方法采用免疫组化方法检测298例甲醛固定、石蜡包埋的标本（包括161例肺癌、51例肺癌前病变、30例正常肺组织、23例肺良性病变和33例肺癌转移淋巴结）中FHIT蛋白表达情况。结果FHIT蛋白在正常肺组织及肺良性病变组织中均无失表达，癌前病变组织和肺癌组织中失表达率分别为54．9％（28／51）和59．0％（95／161），肺癌转移淋巴结组织中失表达率为78．8％（26／33）；肺癌前病变、肺癌及转移淋巴结组织中FHIT蛋白失表达率显著高于正常肺组织及肺良性病变组织（P〈0．001）。肺癌组织中FHIT基因表达水平与肺癌组织学类型、肿瘤细胞分化程度、患者pTNM分期、淋巴结转移有密切关系（P〈O．05）。FHIT蛋白失表达组肺癌患者的术后5年生存率显著低于表达组（P〈0．01）。吸烟组患者FHIT基因失表达率69．1％显著高于无吸烟组49．5％（P〈0．01）。结论FHIT蛋白失表达可能是肺癌发生过程中的早期分子事件，与肺癌的发生、发展及预后有关；吸烟导致FHIT蛋白表达下降可能是诱发肺癌的原因之一。