连黛片药物血清对人胃癌细胞株MGC803的作用

目的 探讨比较中药连黛片及其主要单体成分在诱导癌凋亡及引起DNA损伤方面的不同药理作用。方法 用复方连黛片的大鼠药物血清,以及黄连的主要药效成分小檗碱、青黛的主要药效成分靛玉红分别作用于人胃癌细胞株MGC803,观察药物对细胞生长和凋亡的影响,及其对细胞DNA损伤的作用。结果 边黛片血清高低剂量组及小檗碱各剂量组细胞与相应对照组细胞生长形态相比较差异较大;甲基绿－派诺宁染色后,细胞表现出典型的凋亡形态;对细胞生长率均有明显抑制。靛玉红各浓度组对细胞生长抑制不明显。琼脂糖凝胶电泳分析表明：小檗碱各浓度组可使细胞DNA裂成大自然;连黛片血清各浓度组对MGC803细胞染色质DNA的损伤作用较小檗碱各浓度组小;靛玉红在实验浓度下对细胞的DNA无损伤作用。结论 中药连黛片大鼠药物血清与小檗碱一样均能抑制癌细胞生长及诱导细胞凋亡,但其作用比小檗碱弱,对DNA的损伤程度也较轻,这可能是连黛片血清组中由于血清影响了细胞对小檗碱的吸收所致。     

清肝化瘀方含药血清对肝癌细胞的影响

目的 观察原发性肝癌(primary liver cancer,PLC)患者和健康志愿者清肝化瘀方含药血清对肝癌细胞SMMC-7721增殖、细胞凋亡、细胞周期的影响.方法 采用四唑盐比色法[3-(4,5-dimethy-2 thiahiazoyl)-3,5-di-phenyl-tetrazolium bromide,M...     

益气化痰散瘀方含药血清对低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡的影响

目的观察益气化痰散瘀方含药血清对低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)凋亡的影响,并探讨其机制是否通过线粒体途径。方法制备益气化痰散瘀方含药血清和空白血清。组织贴块法培养大鼠PASMCs并进行a-SMA细胞免疫荧光鉴定。MTT法筛选最佳含药血清及最佳低氧时间:常氧对照组,低氧模型组,5%含药血清、10%含药血清、20%含药血清组(含药血清用空白血清稀释),分别作用12、24、48 h。正式实验根据MTT结果分为常氧对照组、低氧模型组、最佳含药血清组,含药血清作用最佳低氧时间后,TUNEL-FITC/DAPI法检测各组PASMCs凋亡情况,Western Blot法检测各组casepase-9、casepase-3、Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果 MTT结果显示益气化痰散瘀方含药血清浓度为20%、低氧作用24 h时抑制作用最强,效果最佳。TUNEL-FITC/DAPI法显示与低氧模型组比较,益气化痰散瘀方含药血清可明显促进低氧条件下大鼠PASMCs的凋亡(P0.01);Western Blot法显示益气化痰散瘀方含药血清可升高低氧大鼠PASMCs的casepase-9、casepase-3和Bax蛋白表达(P0.05,P0.01),降低Bcl-2蛋白表达(P0.01)。结论益气化痰散瘀方含药血清可能通过线粒体途径诱导低氧大鼠PASMCs凋亡。     

胃癌血清肿瘤标志物的研究进展

胃癌的发病率高、死亡率高,严重威胁人类健康,但其早期诊断率低。胃癌早期筛查和诊断主要依靠有创性的检查,如胃镜和活检,费用比较高,可行性较差。血清肿瘤标志物以其简便、快捷、无痛苦等优点,成为胃癌患者的理想检查指标。本文主要就近期相关肿瘤标志物的研究以及其对胃癌的协助诊断、预后评估做一综述。     

胃安宁含药血清对人胃癌MGC-803细胞COX-2mRNA、VEGF mRNA表达的影响

目的:观察胃安宁含药血清在体外对人胃癌MGC-803细胞株COX-2 mRNA、VEGF mRNA表达的影响.方法:分别采用低、中、高不同浓度梯度的胃安宁含药血清干预胃癌细胞MGC-803 48 h,通过RT-PCR法分析胃安宁含药血清对该细胞系COX-2 mRNA、VEGF mRNA的表达情况.结果:与空白血清对照组相比,胃安宁小、中剂量含药血清组中COX-2 mRNA表达量明显降低(P＜0.05),具有统计学意义;而大剂量含药血清组则变化不明显(P＞0.05);胃安宁含药血清干预MGC-803细胞48 h后,各剂量含药血清组中VEGF mRNA表达量与空白血清对照组比较无统计学意义(P＞0     

复方黄黛片含药灭活兔血清对NB4细胞株的作用

目的:研究复方黄黛片含药灭活兔血清对人急性早幼粒细胞白血病NB4细胞株的作用。方法:以兔为实验血清的供体,将兔血清灭活,以灭活前给药与否为分组依据,采用双道原子荧光法检测血清中砷的浓度,以细胞抑制率及凋亡率为观察指标,对实验结果进行分析。结果:给药前、后灭活兔血清中砷浓度分别为(0.0100±0.0010)mg/L和(0.1100±0.0064)mg/L,差异有统计学意义(P<0.01);两组兔血清对NB4细胞株生长均有抑制作用,且对NB4细胞株生长的抑制作用具有一定的浓度及时间依赖性,实验组间,各浓度及时间组间差异有统计学意义(P<0.01)。两组兔血清均可诱导NB4细胞株发生凋亡,且该作用具有一定的浓度及时间依赖性,实验组间,各浓度及时间组间差异有统计学意义(P<0.01)。结论:复方黄黛片含药灭活兔血清可明显抑制NB4细胞株的生长,抑制作用呈一定的浓度、时间依赖性。复方黄黛片含药灭活兔血清也可诱导NB4细胞株发生凋亡,作用也呈一定的浓度、时间依赖性。     

消痰散结方药物血清对人胃癌MKN-45细胞增殖和凋亡的影响

目的：观察消痰散结方药物血清对人胃癌MKN-45细胞生长和凋亡的影响。方法：采用低、中、高浓度消痰散结方药物血清处理MKN-45细胞后,倒置相差显微镜下观察MKN-45细胞的形态学变化,血球计数盘计数细胞,细胞活性计数试剂盒检测消痰散结方药物血清对MKN-45细胞增殖的影响;Annexin V-异硫氰酸荧光素（{luorescein isothiocyanate,FITC）／碘化丙啶（propidiumiodide,PI）双标记法流式细胞术检测消痰散结方药物血清诱导MKN-45细胞后细胞凋亡的情况。结果：低、中、高浓度消痰散结方药物血清均能不同程度地抑制人胃癌MKN-45细胞的增殖,细胞发生了脱落、变圆、折光率下降等形态学变化;Annexin V-FITC／PI双标记法检测显示消痰散结方药物血清可诱导细胞发生凋亡,其中中、高剂量的效果有高于低剂量的趋势。结论：消痰散结方药物血清可抑制人胃癌MKN-45细胞的增殖,促进其凋亡。     

中药复方香龙散(含药血清)诱导人胃癌细胞凋亡的研究

目的 探讨中药复方香龙散诱导人胃癌细胞(HS-746T)凋亡的作用。方法 在中医辨证论治理论指导下,根据胃癌多为“痰瘀毒气凝于中焦”的病理特点,选用半夏、天龙、九香虫、白术等组成香龙散方,通过血清药理学方法,选择不周浓度的含药兔血清与人胃癌细胞共同孵育24h、36h、48h后,应用倒置相差显微镜、荧光显微镜、流式细胞仪对细胞生长状况和凋亡形态、凋亡率及细胞周期分布进行观察、检测。结果 人胃癌细胞经含中药兔血清作用,由贴壁生长而避渐脱落,外形变圆,体积缩小,折光性增强;荧光镜下见细胞核碎裂,裂解为大小不等的凋亡小体;流式细胞仪检测显现典型的细胞凋亡峰,以5％含药血清作用36h凋亡峰最为明显,凋亡率为37．02％。而无含药血清培养液对人胃癌细胞无诱导凋亡作用。结论：中药复方香龙散通过血清药理学方法可诱导人胃癌细胞的凋亡,这可能是其抗肿瘤的分子机制之一。     

莪术不同品种含药血清对人胃癌细胞BGC823增殖、凋亡及核质比的影响

目的 探讨莪术3个不同品种蓬莪术、广莪术和温莪术含药血清对人胃癌细胞BGC823增殖、凋亡及核质比的影响,为临床治疗胃癌及中药抗肿瘤复方中莪术药材的品种选择提供实验依据.方法 体外培养人胃癌细胞BGC823,加入高、中、低剂量莪术不同品种含药血清,倒置相差显微镜下观察各组细胞形态.应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测胃癌细胞BGC823增殖抑制状况,流式细胞仪检测胃癌细胞BGC823凋亡,应用Image.pro.pius.5软件分析了各药物含药血清对胃癌细胞BGC823核质比的作用.结果 与阴性对照组比较,温莪术大小剂量、广莪术大中剂量及蓬莪术中剂量含药血清在加药后48 h都能抑制胃癌BGC823细胞增殖(P＜0.05),抑制率以温莪术大剂量最高(P＜0.01).温莪术对BGC823的凋亡抑制作用较高,与阴性对照组相比有显著性差异(P＜0.05);温莪术大剂量含药血清组对胃癌BGC823核质比的作用较大,细胞出现核固缩,核质比较阴性对照组明显变小.结论 蓬莪术、广莪术和温莪术含药血清均能明显抑制胃癌BGC823细胞增殖及凋亡,温莪术大剂量含药血清组对胃癌BGC823核质比的作用较大.莪术品种用于治疗胃癌时建议选用温莪术.     

As2O3对胃癌细胞周期及端粒酶活性的影响

目的 探讨三氧化二砷（As2O3)对SGC－7901胃癌细胞端粒酶活性及细胞周期的影响及其机制。方法 细胞凋亡、细胞周期分布及相关蛋白的表达采用流式细胞术;端粒酶活性的检测采用端粒末端重复序列扩增－ELISA法（TRAP－ELISA）,端粒酶亚单位mRNA及c-myc mRNA的表达采用RT－PCR技术。结果 As2O3可明显抑制SGC-7901细胞的生长,细胞凋亡率明显增加,C0/G1期细胞减少,S和G2／M期细胞增加,Bcl-2、c-myc、PCNA蛋白表达减少,Bax蛋白表达增加,端粒酶活性明显下降;端粒酶亚单位hTR是TP1 mRNA无明显变化,hTRT mRNA表达减少,同时,c-myc mRNA的表达亦减少。结论 As2O3对SGC－7901细胞的抑制作用可能是通过二条途径实现：一个是诱导细胞凋亡,另一个是通过下调hTRT mRNA的表达来下调端粒酶活性,其机制有可能与c-myc和Bcl-2基因的减少以及Bax基因的增加有关。     

多西他赛抑制胃癌MKN45细胞增殖的研究

目的: 探讨多西他赛治疗胃癌细胞的作用机制.方法: 采用不同浓度的多西他赛处理胃癌MKN45细胞后,四唑盐比色试验检测癌细胞生长,分别以琼脂糖凝胶电泳和TUNEL检测癌细胞凋亡,采用荧光实时定量PCR和Western blot检测存活素(survivin)基因mRNA、蛋白表达情况.结果: 多西他赛抑制胃癌MKN45细胞的恶性增殖,且呈浓度依赖性;琼脂糖凝胶电泳和TUNEL显示,多西他赛处理组出现凋亡现象,且呈浓度依赖性.多西他赛处理组存活素基因mRNA、蛋白表达下调,且呈时间和浓度依赖性.结论: 多西他赛体外能抑制胃癌细胞的恶性增殖,与诱导凋亡,下调存活素基因表达有关.     

血脂及脂蛋白代谢改变在胃癌中的临床意义

目的 探讨血脂及脂蛋白代谢改变与胃癌临床病理特征和预后的关系.方法 比较山东大学齐鲁医院收治的127例胃癌患者(胃癌组)和100例健康体检者(对照组)的血脂、脂蛋白水平;胃癌组血脂、脂蛋白水平与临床病理特征的关系;Kaplan-Meier生存曲线及COX回归分析其与患者预后的关系.结果 胃癌组的TC、TG、HDL-C、LDL-C水平明显低于对照组(P＜0.05);胃癌患者血脂及脂蛋白水平与临床病理特征有不同程度的相关性;Kaplan-Meier生存分析显示TC、HDL-C与胃癌患者的总生存和无进展生存相关(P＜0.05),COX回归分析提示TC水平、TNM分期、术后辅助化疗是胃癌的独立预后因素.结论 胃癌患者存在脂代谢异常,血脂及脂蛋白水平可能作为进展期胃癌患者病情评估、预后判断的探索性指标.     

胃癌血清TPS的表达及意义

目的探讨血清组织多肽特异性抗原（TPS）检测在胃癌中的意义。方法ELISA方法检测50例胃癌患者（胃癌组）及25例健康体检者（对照组）血清TPS水平。结果胃癌组血清TPS水平明显高于对照组（P〈0．01）;手术前后胃癌患者血清TPS水平差异有非常显著性意义（P〈0．01）;淋巴结转移组与无淋巴结转移组血清TPS水平差异有显著性意义（P〈0．05）。结论血清TPS表达与胃癌发生及淋巴结转移有关。     

胃癌患者血浆可溶性血管内皮细胞生长因子的检测及其意义

目的：应用定量ELISA法检测胃癌患者血浆可溶性血管内皮细胞生长因(VEGF)的水平,并探讨其临床意义。方法：采用定量酶联免疫吸附试验双抗体夹心法检测32例胃癌患者和20例正常对照人群的血浆可溶性VEGF水平。结果：血浆可溶性VEGF水平胃癌患者显著高于正常对照人群,分化程度较差、有区域淋巴结转移和远处转移的胃癌患者显著高于分化程度较好、没有区域淋巴结转移和远处转移的患者。结论：血浆可溶性VEGF浓度对于预测胃癌的侵袭和转移可能具有重要临床意义。     

胃癌血清适配体的筛选及其鉴定

目的:以羧基化琼脂磁珠为筛选介质,利用RT-PCR和靶标替换消减SELEX技术从胃癌血清中筛选得到高特异性?强亲和力的适配体?方法:以离心超滤(50 000超滤管)法处理后的胃癌血清作为靶分子,羧基化琼脂磁珠为载体,先将寡核苷酸文库与反筛磁珠(结合正常血清)结合,取上清再与筛选磁珠(结合胃癌血清)结合,洗去未结合的寡核苷酸分子,对结合在磁珠上的寡核苷酸分子进行分离和扩增,λ酶切法制备ssDNA次级库,进行10轮筛选,将第10轮的文库扩增得到dsDNA,利用胶回收试剂盒回收纯化目的片段的dsDNA,并与pMDTM18-T载体连接,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,挑取阳性克隆,测序获得适配体序列,同时用流式细胞术测定胃癌血清适配体的Kd值?结果:经过10轮筛选后,得到20条与胃癌血清结合的适配体?结论:特异性检测表明,筛选得到的胃癌血清适配体与胃癌血清的结合解离常数均在纳摩尔级水平,其中5?7?16?17?18号适配体能高特异性?强亲和力结合胃癌血清,与正常人血清不结合?该研究为胃癌的早期诊断提供了实验基础?     

鬼臼毒素抗胃癌细胞株SGC 7901作用的实验研究

目的:研究鬼臼毒素抗胃癌SGC 7901细胞株的作用,为鬼臼毒素用于临床治疗胃癌提供依据.方法:不同浓度的鬼臼毒素(0,5,10,20和50mg/L)处理SGC 7901细胞后,采用MTT比色法和平板克隆形成实验检测细胞的增殖;采用流式细胞术检测细胞周期分布和细胞凋亡;裸鼠成瘤实验检测鬼臼毒素对SGC 7901细胞体内致瘤能力的影响.结果:鬼臼毒素呈时间与剂量依赖性抑制SGC 7901细胞生长,明显降低SGC 7901细胞平板克隆,显著诱导SGC 7901细胞凋亡,并使SGC 7901细胞阻滞于G2/M期,还能显著降低SGC 7901细胞裸鼠移植瘤的体积及质量.结论:鬼臼毒素能抑制胃癌SGC 7901细胞的生长,诱导SGC 7901细胞凋亡,并能抑制GC7901细胞的体内致瘤能力,此为鬼臼毒素临床治疗胃癌提供了科学依据.     

生长抑素类似物对胃癌细胞株MKN45生长的调控作用

目的　探讨生长抑素类似物奥曲肽对胃癌细胞株MKN4 5生长的体外调节作用。方法　MTT法和细胞增殖核抗原 (PCNA)免疫细胞化学染色检测细胞增殖情况 ,RIA法测定表皮生长因子 (EGF)、转化生长因子 -α(TGF -α)的含量。结果　奥曲肽对胃癌细胞生长有抑制作用 ,以 1× 10 -6mol/L浓度最明显 ,并能抑制胃癌细胞合成EGF、TGF -α。结论　奥曲肽对胃癌生长具有负性调控作用 ,为胃癌患者应用奥曲肽治疗提供了依据     

汉防己甲素联合紫杉醇对胃癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究汉防己甲素(tetrandrine,TET)联合化疗药物紫杉醇(paclitaxel,PTX)对人胃癌细胞增殖和凋亡的影响?方法:MKN-45细胞常规培养于RPMI-1640培养液中,细胞长至亚单层后加TET和 (或)PTX,连续培养48 h?四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法分析细胞增殖情况,DAPI染色和流式细胞仪检测细胞凋亡情况?结果:TET和PTX单药或联合均呈剂量依赖性地抑制MKN-45细胞增殖,两药联合时IC50较两药单用时显著降低(P < 0.05)?DAPI染色和流式细胞仪显示TET和PTX联合用药组细胞凋亡率显著高于单药组(P < 0.05)?结论:TET联合PTX对胃癌细胞的增殖抑制及凋亡诱导有良好的协同效应?