PCR检测患者分泌物中淋球菌,衣原体,支原体的临床观察

为在临床上对某些疾病及性病明确诊断,采用聚合酶链反应法检测男性尿道口及女性宫颈口分泌物中淋球菌（ＮＧ）、衣原体（ＣＴ）、支原体（ＵＵ）均获得较为满意的结果。１　材料与方法１１　皮肤科性病门诊就诊患者１００例,其中男性８０例,女性２０例。１２　聚合酶链反应混合物,样品裂解液,琼脂糖（含溴化锭）,液体石蜡、ＴＡＥ电泳缓冲液。１３　方法与结果判定按华美生物工程公司ＰＣＲ检测试剂盒法操作判定。２　结果８０例男性尿道口及２０例女性宫颈口分泌物检测中,淋球菌阳性者男性１４例,年龄在２２～４２岁,占总检…     

输卵管妊娠患者解脲支原体检测

目的：探讨生殖道解脲支原体（ＵＵ）感染与输卵管妊娠的关系。方法：采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法，检测３０例输卵管妊娠患者的宫颈分泌物、输卵管组织中ＵＵＤＮＡ。结果：输卵管妊娠患者的宫颈分泌物、输卵管组织中ＵＵＤＮＡ阳性检出率分别为４６．７％和１０．０％，盆腔宫组和无粘连组宫颈分泌物，输卵管组织ＵＵＤＮＡ阳性检出率比较，差异无显著性，结论：输卵管妊娠与生殖道ＵＵ感染有关，生死道与盆腔粘连形成与否无明     

生殖支原体的PCR法检测

目的 :探讨生殖支原体 ( MG)检测的方法及临床意义。方法 :利用聚合酶链反应 ( PCR)对1 54份临床标本进行 MG的检测。结果 :2 5例阳性 ,阳性率 1 6.2 3%。结论 :生殖支原体是引起人类泌尿生殖道感染的病原体之一 ,PCR方法是目前适于临床检测 MG的理想方法。     

PCR和分离培养检测细胞培养支原体污染的比较

目的：检测细胞培养中支原体的污染,建立支原体通用的ＰＣＲ方法。方法：根据已出版的序列设计并合成一对支原体（柔膜体纲）１６Ｓ ｒＲＮＡ基因组特异引物。对实验室所存的１２种支原体、大肠杆菌、变形杆菌及无支原体污染的组织培养细胞进行了ＰＣＲ扩增。以ＰＣＲ与分离培养比较检测了３３份细胞培养标本。结果：１２种支原体均出现了约６２０ｂｐ左右的特异性扩增带,敏感性为１００￣１０００个支原体细胞,且常见的６种细胞     

500例宫颈分泌物支原体检测及支原体药敏分析

目的了解女性泌尿生殖道支原体感染及药物的敏感性情况。方法对500例女性患者的宫颈分泌物标本进行培养及药敏试验。结果500例患者宫颈分泌物支原体感染289例，总阳性率为57．8％，其中解脲支原体单项阳性213例，阳性率为42．6％，人型支原体单项阳性16例，阳性率为3．2％，混合感染60例，阳性率为12．0％。289例支原体感染的药敏结果中敏感率最高的是交沙霉素（95．15％），其次为强力霉素（88．58％），中介度最高的是司帕沙星（68．51％），而耐药率最高的为左氧氟沙星（76．47％）、阿奇霉素（76．13％）及罗红霉素（69．55％）。结论对于女性泌尿生殖道支原体的感染，应进行培养和药敏试验，科学合理地使用抗菌药物，减少耐药菌株的产生。     

输卵管性不孕与生殖道解脲支原体感染

目的：探讨因输卵管炎症性闭塞引起的不孕与女性生殖道解脲支原体（ＵＵ） 感染关系。方法：用聚合酶链反应方法检测３９ 例因输卵管闭塞性不孕住院手术治疗患者的宫颈管分泌物、患侧输卵管粘膜的ＵＵＤＮＡ; 以同期住院行输卵管结扎、因附件良性肿瘤而行一侧附件切除的３０ 例病人为对照组。结果：输卵管闭塞组宫颈管ＵＵＤＮＡ阳性率为９４．９％ ,显著高于对照组的２３．３ ％（ Ｐ＜ ０．０１） 。病变输卵管的ＵＵＤＮＡ阳性率为８２．１ ％ ,显著高于对照组１３．３％ ,（ Ｐ＜０．０１）。结论：输卵管炎症性闭塞引起不孕与生殖道解脲支原体上行感染有关。     

艾滋病病毒感染者发酵支原体检出率关联性研究的Meta分析

目的系统分析发酵支原体和艾滋病病毒感染之间的关联性,并初步探讨发酵支原体对艾滋病病毒感染进程的影响。方法利用中英文电子数据库检索发酵支原体同艾滋病病毒／艾滋病关联性研究文献,使用随机效应模型进行评价。利用亚组和敏感性分析研究组间的异质性。结果纳入11篇文献,艾滋病病毒感染者发酵支原体检出率明显高于非艾滋病病毒感染者（比值比为4．47,95％可信区间1．41～14．15）,但存在发表偏倚。亚组分析和敏感性分析均未支持上述结果。结论发酵支原体同艾滋病病毒之间的关联性有待研究。     

用PCR和地高辛标记的核酸杂交技术检测女性下生殖道人乳头瘤病毒感染

应用多聚酶链反应(polymerase chain reaction)和地高辛标记的HPVDNA的斑点及Southernblot杂交3种方法,同时检测了17例外阴和宫颈湿疣的标本.检测结果表明PCR结合地高辛标记的斑点杂交技术是目前检测女性下生殖道人乳头瘤病毒HPV感染较为敏感、特异、简便的分子生物学方法.因杂交中所使用的HPVDNA探针为非放射性标记的,弥补了³²P标记探针的缺点,可制成试剂盒在临床推广、应用.从而为临床对HPV感染的诊断提供一条有效的检测方法.     

用PCR和地高辛标记的核酸杂交技术检测女性下生殖道人乳头瘤病毒感染

应用多聚酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ）和地高辛标记的ＨＰＶＤＮＡ的斑点及Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交３种方法，同时检测了１７例外阴和宫颈湿疣的标本。检测结果表明ＰＣＲ结合地高辛标记的斑点杂交技术是目前检测女性下生殖道人乳头瘤病毒ＨＰＶ感染较为敏感、特异、简便的分子生物学方法。因杂交中所使用的ＨＰＶＤＮＡ探针为非放射性标记的，弥补了３２Ｐ标记探针的缺点，可制成试剂盒在临床推广、应用。从而为临床对ＨＰＶ感染的诊断提供一条有效的检测方法。     

小儿肺炎支原体感染的早期诊断

探讨小儿肺炎支原体感染的早期诊断方法。方法：对３８５例呼吸道感染的住院患儿应用聚合酶链反应（Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）技术检测咽拭子肺炎支原体ＤＮＡ，同时行血冷凝集试验（Ｃｏｌｄａｇｇｌｕｔｉｎａｔｉｏｎｔｅｓｔ，ＣＡＴ），进行配对资料研究。结果：不同年龄患儿呼吸道感染肺炎支原体发病情况有所不同。ＰＣＲ法检测肺炎支原体ＤＮＡ阳性率不受自然病程的影响，ＣＡＴ法检测阳性率则明显受到病程的影响。ＰＣＲ法阳性率为３８．１８％，ＣＡＴ法阳性率为１１．６９％，差异有极显著性意义。结论：咽拭子ＰＣＲ法检测肺炎支原体ＤＮＡ，不受病程、年龄因素的影响，具有特异、快速、敏感、标本易于采集等优点。     

应用多聚酶链反应检测肺炎支原体

参考Ｂｅｒｎｅｔ法合成引物一对，建立肺炎支原体ＤＮＡ的多聚酶链反应检测法，靶ＤＮＡ为１４４ｂｐ。特异性试验显示仅肺炎支原体呈阳性。敏感性试验显示≥１１３ｃｆｕ肺炎支原体呈阳性。检测３０例临床疑似肺炎支原体肺炎患儿的咽拭子，肺炎支原体ＤＮＡ阳性率８０％，１０例健康小儿咽拭子均呈阴性，全部操作可在２４ｈ内完成。     

用聚合酶链反应检测咽拭子和痰液中的肺炎支原体

采用聚合酶链反应（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）扩增肺炎支原体（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ，Ｍｐ）特异的１４４ｂｐＤＮＡ片段，并将ＰＣＲ扩增与常规培养或血清冷凝集素测定相比较。结果表明，该法的阳性率明显高于常规培养或冷凝集素测定。２５例患者标本常规培养阳性６例（２４．０％），ＰＣＲ扩增阳性１１例（４４．０％），５０例患儿咽拭子ＰＣＲ扩增阳性１５例（３０．０％），其中２７例同时进行了ＰＣＲ和血清冷凝集素测定，阳性率分别为４０．７％（１１／２７）和２５．９％（７／２７）。ＰＣＲ扩增阳性病例改用红霉素或四环素治疗均获显著疗效。本法具有快速、特异、灵敏度高等优点，可望成为早期诊断Ｍｐ感染的常规方法。     

生殖道衣原体感染与先兆流产的关系

目的：探讨女性生殖道沙眼衣原体感染与先兆流产的关系,并对其临床特点进行总结。方法：收集60例先兆流产和60例正常妊娠孕妇宫颈分泌物,应用PCR技术检测两组孕妇宫颈分泌物中衣原体非结构蛋白DNA（CT-DNA）。结果：60例先兆流产孕妇宫颈分泌物中,16例CT—DNA阳性,60例对照组孕妇宫颈分泌物中2例CT-DNA阳性,两者比较差异有统计学意义（P〈0．05）;先兆流产组中CT—DNA阳性的患者其孕期阴道不规则出血、宫颈脓性分泌物、宫颈糜烂水肿及宫颈息肉的临床表现均高于CT—DNA阴性的患者（P〈0．05）。结论：生殖道衣原体感染是导致先兆流产的原因之一;衣原体感染患者多伴有孕期阴道不规则出血、宫颈脓性分泌物、宫颈糜烂水肿及宫颈息肉。     

PCR法检测宫颈癌细胞中人乳头瘤病毒

采用ＰＣＲ（聚合酶链反应）技术对宫颈癌细胞中ＨＰＶ（人乳头瘤病毒）和ＨＰＶ１６、１８型的感染状况分别进行了研究。在新鲜组织中，宫颈癌细胞内ＨＰＶ和ＨＰＶ１６、１８型的感染率分别达８０％和７５％。但石蜡标本中ＨＰＶ和ＨＰＶ１６、１８型的感染率则为３３．３％和２６．７％。说明宫颈癌细胞中ＨＰＶ的感染率极高，且主要系ＨＰＶ１６、１８型的感染。ＰＣＲ技术检测宫颈癌细胞中的ＨＰＶ方法简便快速，灵敏度高。可广泛用于流行病学调查和高危致癌ＨＰＶ感染妇女的追踪观察。对宫颈癌的早期发现和早期诊断有重要意义     

57例小儿支原体肺炎PCR检测及其意义

对５７例小儿支原体肺炎鼻咽分泌物中肺炎支原体ＤＮＡ进行ＰＣＲ检测。采用快速制备ＤＮＡ模板的方法，简化ＰＣＲ实验过程，结果４２例阳性，阳性率７３．７％，而用支原体培养分离方法，阳性率为５５．３％，相差显著。