感染约氏疟原虫的斯氏按蚊组织化学观察

目的观察蚊媒感染疟原虫后的组织化学变化.方法应用组织化学技术观察对照组和感染约氏疟原虫的斯氏按蚊体内乳酸脱氢酶(LDH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、三磷酸腺苷酶(Mg2+-ATPase)活性反应与含量以及糖原含量的变化.结果与对照组相比,感染约氏疟原虫后,蚊体内LDH活性与含量显著增加,SDH和Mg2+-ATPase活性与含量及糖原含量显著降低.结论感染约氏疟原虫可明显影响蚊媒的营养代谢和吸收.     

感染约氏疟原虫的斯氏按蚊组织化学观察

目的 观察蚊媒感染疟原虫后的组织化学变化。方法 应用组织化学技术观察对照组和感染约氏疟原虫的斯氏按蚊体内乳酸脱氢酶（LDH）、珀酸脱氢酶（SDH）、三磷酸腺苷酸（Mg^2 -ATPase)活性反应与含量以及糖原含量的变化。结果 与对照组相比,感染约氏疟原虫后,蚊体内LDH活性与含量显著增加,SDH和Mg^2 -ATPase活性与含量及糖原含量显著降低。结论 感染约氏疟原虫可明显影响蚊媒的营养代谢和吸收。     

硝喹对斯氏按蚊体内不同时期约氏疟原虫发育的影响

目的　观察硝喹对斯氏按蚊体内不同时期约氏疟原虫发育的影响。方法　在感染约氏疟原虫1 d前给予常规蔗糖水或硝喹蔗糖水（含100 μmol/L硝喹）供斯氏按蚊吸食,停糖水24 h后用感染约氏疟原虫的昆明鼠血餐,观察硝喹处理后约氏疟原虫在蚊胃内的卵囊数量变化。感染6、14 d后停常规蔗糖水24 h,随后给予常规蔗糖水或硝喹蔗糖水供斯氏按蚊吸食,观察斯氏按蚊血淋巴及唾液腺中的约氏疟原虫子孢子数量变化。结果　感染前1 d将斯氏按蚊暴露于硝喹蔗糖水后,感染第7天蚊胃中约氏疟原虫卵囊数量[（119.2 ± 16.1）只]较常规蔗糖水组[（207.3 ± 21.8）只]显著降低（t = 3.207,P < 0.05）。感染第6天停常规蔗糖水24 h,将斯氏按蚊暴露于硝喹蔗糖水后,按蚊血淋巴中约氏疟原虫子孢子数量峰值[（952.3 ± 22.7）只]在感染第14天出现,常规蔗糖水组按蚊血淋巴中子孢子数量峰值[（1 287.0 ± 39.0）只]在感染第12天出现;感染第17天,硝喹蔗糖水和常规蔗糖水组按蚊唾液腺中子孢子数量分别为（9 467.0 ± 1 304.0）只和（10 533.0 ± 758.7）只,差异无统计学意义（t = 0.707,P = 0.506）。感染第14天停常规蔗糖水24 h,将斯氏按蚊暴露于硝喹蔗糖水后,按蚊唾液腺中约氏疟原虫子孢子数量[（21 900.0 ± 2 613.0）只]较常规蔗糖水处理组[（10 533.0 ± 732.3）只]显著增加（t = 4.188,P < 0.05）。结论　在斯氏按蚊感染疟原虫不同时期给予硝喹处理对其体内约氏疟原虫发育影响不一,未感染斯氏按蚊经硝喹处理后可减少疟原虫传播。     

抗蚊中肠抗体对斯氏按蚊体内约氏疟原虫卵囊发育的影响

[目的 ]研究抗斯氏按蚊中肠抗体对约氏疟原虫蚊期的抑制作用。 [方法 ]在感染血中加入抗蚊中肠抗体 ,羊膜饲蚊 ,在蚊虫血餐后 14h、9和 12d ,分别检查蚊虫中肠动合子、卵囊及唾液腺中子孢子 ;并观察抗体浓度和蚊虫血餐抗体次数对卵囊的抑制作用。 [结果 ]抗蚊中肠抗体可降低蚊体内卵囊的感染率和子孢子的进腺率 ,尚可降低动合子的感染度和卵囊指数 (P <0 0 5 ) :且抗体浓度越高、蚊虫血餐抗体次数越多 ,卵囊数量越少。 [结论 ]抗蚊中肠抗体对疟原虫的动合子、卵囊发育有抑制作用 ,但对卵囊的抑制作用最明显 ,抗体的浓度高和维持时间长 ,抑制作用越明显。     

大劣按蚊对约氏疟原虫敏感性的观察

以斯氏按蚊传代保种的约氏疟原虫(BY265株)接种小鼠后第3、4天感染大劣按蚊,涎腺感染率为4.88％,进腺子孢子数少于10个。约氏疟原虫经过大劣按蚊传代后,大劣按蚊的涎腺感染率明显增高。感染蚊传3、4、6和7代首次血传的疟原虫,涎腺感染率分别为31.7％(13/41)、70％(14/20)、6.9％(2/29)和30％(6/20)。以含有第6代子孢子的大劣按蚊叮咬小鼠,能使鼠获得感染,第7代疟原虫感染的大劣按蚊涎腺内子孢子数可超过2,000个。结果表明约氏疟原虫对大劣按蚊有逐渐适应的能力。     

约氏疟原虫在适宜与非适宜蚊体内发育的观察

约氏疟原虫在蚊体内的早期发育不仅在斯氏按蚊 而且在非适宜的白纹伊蚊胃内均可完成,24℃时,一般于血餐后10小时,原虫动合子密度达到高峰,形态典型,并有部份已附着于围食膜上,15～20小时密度明显下降,动合子较小;仅动合子绝对数量在斯氏按蚊胃内明显为多,且此差异与两种蚊虫的摄血量、血餐消化及排     

对氨苯甲酸对斯氏按蚊传播约氏疟原虫及伯氏疟原虫的影响

本文报道对氯苯甲酸(PABA)对疟原虫在蚊虫体内的发育及其传播的影响。实验用约氏疟原虫17x株和伯氏疟原虫NK65株,以雄性小鼠为宿主。小鼠在室温为22±2℃、相对湿度为50%的环境中饲养。媒介为斯氏按蚊,饲养于温度为24±2℃、相对湿度为75±10%的恒温室内。实验时使用6天龄的雌蚊,在吸血感染前24小时断食。供血鼠用60mg/kg的戊巴比妥进行麻醉。用血传后第4天的感染鼠给蚊虫吸吮1小时。为了观     

感染约氏疟原虫的斯氏按蚊可溶性蛋白含量及酯酶...

In this paper, the system of Anopheles stephensi and Plasmodium yoelii yoelii was used as animal model. The soluble protein and esterase isozymes of adult female mosquitoes at various times after taking noninfected and plasmodia-infected blood meal were investigated. The result shows that the amount of soluble protein in plasmodia-infected mosquitoes was lower than that in noninfected ones (P less than 0.01); the activity and electrophoretic patterns of EST in infected mosquitoes being also different from those of the noninfected ones.     

斯氏按蚊血细胞对约氏疟原虫卵囊黑化的影响

目的　探讨斯氏按蚊血细胞及血细胞PPO对疟原虫卵囊黑化的影响。方法　利用电镜观察蚊血细胞在卵囊黑化中的作用、RT -PCR检测蚊血细胞、蚊胃中PPOmRNA的表达、原位杂交检测血细胞中PPOmRNA的表达。结果　通过RT -PCR和原位杂交 ,发现斯氏按蚊PPOmRNA在血细胞中有表达 ,颗粒细胞可能是其主要的表达细胞 ;硝喹可使约氏疟原虫卵囊发生退行性变 ,卵囊黑化比率明显增加。结论　说明血细胞能够合成PPO ,进一步证实了蚊血细胞 ,特别是硝喹对卵囊的发育有抑制和阻断作用时 ,颗粒细胞在疟原虫卵囊黑化中起重要作用。     

大劣按蚊和斯氏按蚊对约氏疟原虫不同易感性的遗传多态性研究

目的 比较分析对约氏疟原虫易感的斯氏按蚊和不易感的大劣按蚊的基因组DNA的多态性，探讨媒介按蚊与疟原虫遗传基因间的相互关系。方法 设计5条随机引物，应用随机扩增多态性DNA（random amplified polymorphic DNA，RAPD）技术对斯氏按蚊、大劣按蚊成蚊（未感染蚊和感染蚊）及其幼虫的基因组DNA进行随机扩增，扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后分析。结果 5条随机引物对2种按蚊扩增的条带数不同，其中P5对斯氏按蚊扩增的效果较好，共16～17条带型，长度为200～1800bp；P4对大劣按蚊扩增效果较好，出现17条带型，长度为180～1500bp；P1对大劣按蚊无扩增产物。用P3对2种按蚊扩增，感染前后的扩增产物电泳条带数相同，但亮度不同；成蚊与幼虫带型数量不同，斯氏按蚊成虫与幼虫有3条相同带型（400、650、850bp），大劣按蚊成虫与幼虫有4条相同带型（350、500、750、800bp）；大劣和斯氏按蚊成蚊带型分别为10和13条，其中相同带型6条（300、350、400、550、600、800bp）。结论 斯氏按蚊和大劣按蚊之间存在基因差异。同种未感染蚊和感染蚊基因带型仅存在亮度差异，而幼虫与成虫的基因差异较大。     

恶性疟原虫在大劣按蚊体内发育的观察

供血源来自5个贵州省的疟疾患者。疟原虫发育各期在光镜下的形态与平均大小为:雄配子呈丝状,长13.31±2.22μm;雌配子和合子呈卵圆形或圆形,其当量直径分别为4.36±0.59μm和3.39±0.39μm;动合子呈香蕉形,13.56±0.80μm×2.90±0.48μm;卵囊球形或椭圆形,最小者直径为7.086μm(2日龄),最大为72.6μm(11日龄)子孢子长为10.625±0.82μm×1.79±0.13μm。应用扫描电镜观察孢子增殖晚期的形态,可见成孢子细胞体呈圆形、椭圆形或不规则形,从其表面长出子孢子芽;子孢子前端平齐,有些子孢子右近前端1/3处有一个微孔。对雌配子与合子的鉴别特征,以及卵囊疟色素的排列型式作了讨论。     

斯氏按蚊感染约氏鼠疟原虫后自然飞行活动的变化

作者用声学运动记录仪对 BEECH 株斯氏按蚊感染约氏鼠疟原虫后未加任何人工干预的自然飞行活动进行了17天的监测。结果,感染蚊虫从卵囊发育成熟开始破裂时起,活动量明显降低,约为对照组的2/3。斯氏按蚊羽化     

约氏疟原虫血淋巴子孢子诱导斯氏按蚊免疫基因分析

目的对约氏疟原虫感染后8、 11和14 d的斯氏按蚊进行转录组测序,分析约氏疟原虫血淋巴子孢子诱导斯氏按蚊的免疫信号通路及效应机制。方法约氏疟原虫BY265株按常规腹腔接种感染健康昆明小鼠,3 d后选择血液内有配子体的小鼠供斯氏按蚊雌蚊吸血,于吸血感染后8、 11和14 d各取斯氏按蚊20只,提取总RNA进行高通量转录组测序,分析按蚊基因表达情况;使用统计算法Bray Curtis进行层级聚类,分析各样本间基因表达的差异;根据每百万转录本(TPM)值进行差异基因分析;使用gplots package软件绘制聚类热图,分析感染后8、 11和14 d, Toll信号通路(Toll)、免疫缺陷信号通路(Imd)、信号转导和转录激活因子(STAT)和c-Jun氨基末端蛋白激酶(JNK)通路,效应分子如含硫酯蛋白家族分子(TEP)、抗菌肽、一氧化氮合酶(NOS)、硝化反应相关分子等的表达情况;利用实时荧光定量PCR (qPCR)扩增Rel1、 Rel2转录因子、含硫脂蛋白分子(TEP1)和血红素过氧化物酶(HPX8)进行验证。结果层级聚类分析显示,斯氏按蚊感染后11 d与8 d和14 d的基因表达变化差异较大。差异基因分析结果显示,斯氏按蚊感染后11 d与8 d相比,有1 109个基因上调,257个基因下调;感染后14 d与8 d相比,有62个基因上调,136个基因下调;感染后14 d与11 d相比,有174个基因上调,196个基因下调。聚类热图分析结果显示,在感染后11 d与8 d和14 d的比较中,斯氏按蚊Rel1转录因子、 Toll5A和Toll1A受体分别上调约1.9、 1.8和2.1倍;双过氧化物酶和双氧化酶均上调约2倍;HPX8上调约1.5倍。qPCR验证结果显示,感染后11 d Rel1、 Rel2和HPX8的相对表达量为3.43、 3.95和4.01,与对照组的0.82、 0.88和1.01差异有统计学意义(P 0.01)。结论约氏疟原虫血淋巴子孢子可诱导斯氏按蚊Toll信号通路通过直接或协调其他通路调控硝化反应相关分子表达。     

不同株间日疟原虫在两种按蚊体内的发育

北美的疟疾已被消灭,但主要蚊媒仍然存在,且曾多次发生过因外地输入传染源而引起的小范围暴发流行。本文着重探讨了当地蚊媒对各地域株间日疟原虫的敏感性,借此了解这种潜在的危险性。     

恶性疟原虫;期特异性rRNA作为监测斯氏按蚊体内疟原虫发育的潜在目标

传统的传疟媒介蚊鉴定一般是解剖新鲜蚊并镜检唾腺有无子孢子或中肠有无卵囊。这种方法费时费力,还需训练有素的人员。近年发展的用单抗检测环子孢子(CS)蛋白的免疫方法,虽然敏感性较高,但由于CS蛋白的异质性,使其使用更为复杂化。本文报道用核糖体寡聚核苷酸探针鉴定阳性蚊及监测蚊体内子孢子发育的实验结果。     

感染约氏疟原虫的斯氏按蚊可溶性蛋白含量及酯酶同工酶的分析研究

以约氏疟原虫—斯氏按蚊系统为模型,对感染疟原虫后不同时期蚊媒的可溶性蛋白和酯酶同工酶进行了初步研究。结果表明,在所观察的大多数时期,每只蚊的平均可溶性蛋白含量低于同期对照蚊(P<0.01);感染疟原虫后,酯酶同工酶谱发生改变,同时酶活力亦存在差异(P<0.05)。     

对氨基苯甲酸对斯氏按蚊传播约氏鼠疟原虫和伯氏鼠疟原虫的影响

作者实验室中的几种鼠疟原虫均以斯氏按蚊来进行生活史循环,但经常发现斯氏按??蚊的手孢子阳性率不稳定。作者通过研究证明,对氨基苯甲酸(PABA)是影响疟原虫在蚊体内孢子增殖的重要因素。作者用约氏鼠疟原虫17X株和伯氏鼠疟原虫NK65株和无球状附红细胞体感染的小鼠(Tucks TFW)在22±2℃、相对湿度     

蚊与疟原虫相互关系Ⅱ:支持疟原虫在按蚊体内发育的因子

疟疾是一种严重危害人类健康和阻碍流行区国家经济、社会发展的寄生虫病,随着多抗药虫株的出现和媒介按蚊对杀虫剂产生抗性,疟疾的防治面临新的挑战。对按蚊与疟原虫相互关系的研究,特别是寻找按蚊支持疟原虫发育因子,弄清疟原虫在蚊体内的配子生殖和孢子生殖机制,可为疟疾防治研究提供有益线索。近年来,这方面的研究已经取得了一些进展,这些进展不但促进了人们对疟原虫和按蚊相互关系的理解,丰富了疟原虫生物学知识,更重要的是可为寻找新型杀虫剂靶点、发现新的抗疟疫苗的合适候选抗原、完善疟原虫的体外培养技术、实现遗传改造蚊媒的防疟…     

感染约氏疟原虫斯氏按蚊体内的血液消化——蚊胃内酶活性检测

胃蛋白酶对于蚊的疟原虫感染有着至关重要的作用。本文检测了感染约氏疟原虫 (P.y.)尼日利亚亚种后对斯氏按蚊胃胰蛋白酶、糜蛋白酶、氨基肽酶和羧基肽酶以及蛋白质消化率的影响。 两组未经产的蚊禁食12—18小时后,分别对一只感染P.y.后24—30小时的小     

蚊与疟原虫相互关系Ⅱ：支持疟原虫在按蚊体内发育的因子

疟疾是一种严重危害人类健康和阻碍流行区国家经济、社会发展的寄生虫病，随着多抗药虫株的出现和媒介按蚊对杀虫剂产生抗性，疟疾的防治面临新的挑战。对按蚊与疟原虫相互关系的研究，特别是寻找按蚊支持疟原虫发育因子，弄清疟原虫在蚊体内的配子生殖和孢子生殖机制，可为疟疾防治研究提供有益线索。近年来，这方面的研究已经取得了一些进展，