益智口服液对老年性痴呆大鼠模型行为学、脑内胆碱乙酰转移酶及突触素水平的影响

目的：观察益智口服液对大鼠中枢胆碱能系统和突触的保护作用。方法：Ibotenic acid定位损伤大鼠脑建立AD模型，给与不同药物灌胃，利用水迷宫和跳台观察其行产学改变，利用原位杂交，免疫组化及图像分析测定大鼠脑内胆碱乙酰转移酶（ChAT)和突触素的表达。结果：益智口服液灌胃组大鼠的学习记忆成绩优于其他组，其脑内ChAT和突触素的表达也明显增高（P＜0．01），结论：益智口服液对中枢胆碱能系统有保护作用，能改善认知记忆能力。     

健脑安对血管性痴呆模型大鼠海马胆碱乙酰转移酶和突触素表达的影响

目的观察健脑安对血管性疾呆(VD)大鼠海马胆碱乙酰转移酶(ChAT)和突触素(Syn)表达的影响。方法健脑安口服给药治疗VD大鼠1月后采用免疫组化技术观测大鼠海马ChAT和Syn表达变化,与都可喜(Duxil)对照。结果①各组大鼠海马ChAT和Syn阳性表达面积比较如下,健脑安组(2 980±786.53)/(2 948.0±811.92)μm2和都可喜组(3 116.6±808.25)/(3 086.5±862.48)μm2均明显高于模型组(1 004±464.4)/(1 704±671.74)μm2)P值均<0.01)。②ChAT免疫组化染色:健脑安组和都可喜组大鼠海马ChAT阳性神经细胞排列较规则,胞浆ChAT阳性染色较明显,可见阳性染色神经纤维,较密集。③Syn免疫组化染色:健脑安组和都可喜组大鼠海马神经细胞周围Syn阳性颗粒密集、染色深,可见少量胶质细胞。健脑安组和都可喜组比较未见有明显差异。结论健脑安具有显著增加VD大鼠海马ChAT和Syn表达的作用,这可能是其改善痴呆认知和记忆障碍的作用机制。     

大鼠海马突触体素及胆碱乙酰转移酶的增龄变化

目的 观察不同月龄(1、3、6、12、18、24月龄)大鼠脑海马区突触体素(SYP)和胆碱乙酰转移酶(ChAT)表达的变化,探讨其与学习记忆功能之间的关系.方法 采用免疫组织化学染色方法,观察SYP和ChAT在增龄大鼠海马中的表达水平.结果 1～6月龄SYP免疫反应阳性产物逐渐增加,6～18月龄缓慢减少,进入24月龄明显减少,与其他各组相比具有非常显著性差异(P＜0.01).ChAT免疫反应阳性神经元在1月龄时比较少,3～6月龄时最多,以后明显减少,进入24月龄后,偶见阳性细胞.结论 SYP和ChAT在大鼠海马中的表达存在随龄变化,特别是老年期表达量显著降低,可能是导致学习记忆障碍的重要机制之一.     

倍美力对去卵巢痴呆模型大鼠行为学及不同脑区胆碱乙酰转移酶的干预作用

目的 观察去卵巢痴呆大鼠行为学及额叶皮质、基底前脑、海马CA1区胆碱乙酰转移酶(ChAT)的变化及倍美力对其影响,探讨倍美力的脑保护机制.方法 采用穹窿海马伞切除术及双侧卵巢切除制备痴呆及雌激素缺乏复合模型鼠,采用Morris水迷宫观察其行为学变化,利用RT-PCR法观察大鼠额叶皮质、基底前脑、海马CA1区ChAT mRNA的变化.结果 倍美力干预组大鼠学习、记忆能力增强,额叶皮质、基底前脑、海马CA1区ChAT mRNA表达增加(均P＜0.01).结论 倍美力可通过增加额叶皮质、基底前脑、海马CA1区ChAT mRNA表达,改善模型鼠学习及记忆能力.     

去卵巢痴呆模型大鼠胆碱乙酰转移酶和脑源性神经生长因子的变化及倍美力的影响

目的 观察去卵巢后痴呆模型大鼠额叶、海马CA1区胆碱乙酰转移酶(ChAT)和脑源性神经生长因子(BDNF)的变化及倍美力(Premarin)对其的影响,探讨倍美力的脑保护作用机制.方法 采用穹窿海马伞切除术及双侧卵巢切除制备痴呆及雌激素缺乏复合模型大鼠,采用Morris水迷宫观察其行为学改变,利用免疫组化法检测各组大鼠额叶、海马CA1区ChAT及BDNF阳性神经元的数量.结果 倍美力组大鼠额叶、海马CA1区ChAT、BDNF阳性神经元数量增加,与模型组比较有显著差异(P＜0.01).结论 倍美力可同时增加额叶、海马CA1区ChAT、BDNF阳性神经元含量,从而改善中枢胆碱系统的功能,实现其脑保护作用.     

脂欣康对ApoE基因敲除小鼠海马形态学及胆碱乙酰转移酶和突触素表达的影响

目的研究脂欣康对ApoE基因敲除(ApoEKO)小鼠海马形态学及脑胆碱乙酰转移酶(ChAT)和突触素(P38)表达的影响。方法以ApoEKO小鼠为研究对象,随机分为ApoEKO组、脂欣康组、联合干预组,分别给予生理盐水、脂欣康、脂欣康+维生素E灌胃,每日一次,连续灌胃60d,以同龄C57BL/6J小鼠作为正常对照组,之后将所有小鼠断头处死,采用HE染色观察各组小鼠海马神经元组织形态学改变,采用免疫组化技术与计算机图像分析技术检测ApoEKO小鼠海马内ChAT和P38的表达。结果与C57BL/6J小鼠相比,ApoEKO组小鼠海马区神经细胞结构破坏,ChAT阳性神经细胞数目与P38阳性染色颗粒明显减少,染色变浅,ChAT与P38平均灰度值明显增高(P<0.05)。干预组的反应结果介于两者之间,联合干预组表达优于脂欣康组。结论脂欣康能够减轻ApoEKO小鼠海马区神经损害,增强ChAT与P38的表达,与维生素E间有协同作用。     

胰岛素样生长因子-1对痴呆大鼠行为学及胆碱乙酰转移酶表达的影响

目的探讨胰岛素样生长因子（IGF-1）对痴呆模型大鼠学习记忆能力的影响及其对胆碱乙酰转移酶的保护作用。方法采用切断成年Wistar大鼠双侧穹窿海马伞（FF），建立隔-海马胆碱能系统损害的痴呆模型。分为痴呆治疗组、痴呆对照组和正常对照组三组。痴呆治疗组经侧脑室给予IGF-1，痴呆对照组给予生理盐水，正常对照组不给予处理。利用水迷宫和Y迷宫观察其行为学改变，利用原位杂交及图像分析测定大鼠脑内胆碱乙酰转移酶（ChAT）的表达。结果痴呆治疗组大鼠的学习记忆成绩优于痴呆对照组（P〈0．01），其脑内ChAT的表达量与痴呆对照组相比也明显增多（P〈0．01）。结论IGF-1对中枢胆碱能系统有保护作用，能改善学习记忆能力。     

血管紧张素Ⅳ对糖尿病大鼠胆碱乙酰转移酶表达及认知功能的影响

目的 观察血管紧张素Ⅳ(AngⅣ)对糖尿病大鼠海马胆碱乙酰转移酶(ChAT)表达及认知功能的影响.方法 38只SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组和糖尿病+AngⅣ组,建立STZ糖尿病大鼠模型, Morris水迷宫测试大鼠学习和记忆能力,免疫组化观察大鼠海马ChAT的表达,RT-PCR检测ChAT mRNA水平的表达.结果 糖尿病+ AngⅣ组海马chAT及其mRNA表达与糖尿病组相比明显增高(P<0.05),糖尿病+ AngⅣ组大鼠学习和记忆成绩也明显优于糖尿病组(P<0.05).结论 AngⅣ对糖尿病大鼠认知功能有改善作用,其机制可能与ChAT表达增加有关.     

神经保护肽慢病毒对老年性痴呆模型大鼠行为学及海马胆碱乙酰转移酶mRNA表达的影响

目的观察神经保护肽慢病毒（rLent／NT4-NAP）对老年性痴呆模型大鼠行为学及海马胆碱乙酰转移酶（ChAT）原位杂交的影响，进一步研究神经保护肽（NAP）对老年性痴呆疾病的治疗作用。方法建立β-淀粉样蛋白（Aβ）大鼠海马注射联用转移因子β1（TGFβ1）脑内注射改良的老年性痴呆大鼠模型。实验分成对照组，假手术组，痴呆组，rLent／NT4-NAP组，空病毒组。空病毒组和rLent／NT4．NAP组通过滴鼻给药方式给予。应用水迷宫试验观察各组大鼠行为学的改变，采用原位杂交技术观测各组大鼠海马神经元胆碱乙酰转移酶（ChAT）mRNA的表达变化。结果各组大鼠水迷宫的学习和记忆成绩比较，rLent／NT4-NAP组优于痴呆组（P〈0．05）；对照组，假手术组，NAP组，空病毒组无显著差别。rLent／NT4-NAP组海马ChATmRNA表达也明显增高。各组海马ChATmRNA阳性神经元面密度之比较，痴呆组ChATmRNA阳性神经元面密度值（0．0698&#177;0．0182），低于对照组（0．12170&#177;0．0165），假手术组（0．1130&#177;0．0154）及rLent／NT4-NAP组（0．1083&#177;0．01718），空病毒组（0．1193&#177;0．01118）（P〈0．05），对照组，假手术组，rLent／NT4-NAP组，空病毒组间无明显差别。结论NAP改善老年性痴呆模型大鼠记忆成绩与其恢复大鼠海马低水平的ChATmRNA表达有关。     

血管性痴呆大鼠海马胆碱乙酰基转移酶的动态变化

目的 观察血管性痴呆(VD)模型大鼠海马组织胆碱乙酰转移酶(ChAT)与学习记忆功能的动态变化,探讨VD发病的可能机制.方法 采用双侧颈总动脉反复夹闭再灌注,同时腹腔注射硝普钠建立VD大鼠模型,在7、15 d、1、2、4个月等时间点,采用水迷宫检测大鼠学习记忆能力的变化,HE染色和免疫组化染色观察大鼠海马神经元的形态学改变及ChAT表达的变化.结果 模型组大鼠各时间点的逃逸潜伏期(EL)比假手术组均明显延长(P＜0.01);海马区锥体细胞数比假手术组明显减少(P＜0.01);免疫组织化学观察海马ChAT阳性神经元表达均显著少于假手术组(P＜0.01).而且随造模手术后时间的延长,以上变化逐渐加重,与水迷宫EL呈负相关(r=-0.937,P＜0.05).结论 缺血再灌注后,海马胆碱能神经元进行性缺失与ChAT活性降低可能是VD大鼠学习记忆障碍的重要机制之一.     

阿尔茨海默病大鼠海马PKC和GDNF的变化

目的　选用切断大鼠穹窿海马伞作为阿尔茨海默病 (Alzheimer’sdisease ,AD)的动物模型 ,观察AD大鼠海马PKC和GDNF的变化 ,探讨其在AD发病中的作用。方法　应用放射性同位素方法检测穹窿海马伞切断AD大鼠海马PKC的活性 ,应用Westernblot方法检测穹窿海马伞切断AD大鼠海马GDNF。结果　穹窿海马伞切断AD大鼠手术侧海马PKC活性 (565 85± 1 80 70pmol·mg- 1 ·min- 1 )与正常对照组 (744 45±1 33 2 0pmol·mg- 1 ·min- 1 )比较明显降低 (P <0 0 5) ,而手术对侧 (681 50± 1 2 0 2 0pmol·mg- 1 ·min- 1 )和假手术组 (675 52± 1 35 51pmol·mg- 1 ·min- 1 )与正常对照组比较无明显差别。用Westernblot方法检测GDNF ,手术组条带浅于正常对照组和假手术组。结论　穹窿海马伞切断AD大鼠海马PKC和GDNF均降低 ,这表明在AD海马有PKC和GDNF变化 ,PKC和GDNF在AD发病中起到一定的作用     

对氧磷酶2基因多态性与阿尔茨海默病的相关性研究

目的 探讨对氧磷酶2（paraoxonase 2,PON2）基因多态性（148Ala/Gly;311Cys/Ser）与Alzheimer病（AD）之间的关系.方法 用PCR-RFLP分析技术对132例AD患者和186例年龄匹配的健康对照者进行PON2 148Ala/Gly及311Cys/Ser基因多态性的分析.结果 PON2基因148、311位点存在多态性,其基因型频率和等位基因频率在AD患者和正常对照者间差异无显著性.结论 PON2基因多态性与AD未发现显著相关性.     

二十二碳六烯酸缺乏对Alzheimer病动物模型神经元突触caspase活化和drebrin丢失的影响

目的　探讨二十二碳六烯酸 (DHA)对 Alzheimer病转基因小鼠 APPsw神经元突触半胱氨酸蛋白酶 (caspase)活化和肌动蛋白结合蛋白 (drebrin)丢失的影响。方法　 2 7只 APPsw鼠随机分为三组 ,每组分别以普通饲料、高 DHA、无 DHA饲料喂养 ,5个月后以蛋白免疫印迹法测量其脑皮质内 caspase- 3在突触部位裂解肌动蛋白 (actin)的产物 (fractin)和 drebrin含量 (OD值 )。结果　无 DHA组 fractin(2 .72± 0 .57)与普通饲料组 (1 .1 7± 0 .30 )和高 DHA组 (1 .70± 0 .85)比较明显增高 ,差异有显著性 (P<0 .0 0 1 )。无 DHA组 drebrin(0 .47± 0 .2 3)与普通饲料组 (4.2 4± 1 .36)和高 DHA饲料组 (4.66± 1 .0 5)比较大幅度下降 ,差异有显著性 (P<0 .0 0 5)。结论　以缺乏 DHA的饲料喂养的 APPsw鼠可促进其神经细胞凋亡和加重突触的退行性改变     

Alzheimer病动物模型的构建及其分子病理学的变化

目的 建立能够在行为、生物化学以及组织病理方面较好地模拟AD的动物模型。方法 采用MRI，γ-刀立体定位射频热凝损毁老年猴脑的穹隆-海马伞建立动物模型；应用Hedreen方法、免疫组织化学ABC法检测AD动物模型的分子病理学的变化。结果 损伤侧海马CA1区的AchE阳性纤维密度明显低于对侧未损伤的对应区的纤维密度；动物模型大脑皮质的大锥体神经元胞体中均可见APPA4的免疫活性物质、抗Tau免疫活性物质沉着，形态上有的近似人AD的老年斑；大脑损伤侧内侧隔核的ChAT阳性神经元的数目明显少于对侧。结论 所建立的AD动物模型在理论和实验中接近于AD的病理改变。     

Alzheimer病模型大鼠类P3及其c-fos基因表达

目的 研究Alzheimer病(AD)大鼠类事件相关电位(类P3)及其c—fos基因的表达。方法 手术切断大鼠左侧穹窿—海马伞(FF)建立AD大鼠模型，于建模后1h、7d和15d对大鼠进行灌注固定，取含有海马结构的脑组织分别进行HE染色和Fos蛋白的免疫组化染色；并于建模前后分别进行电迷宫检查和类P3L测定．结果 ①AD大鼠类P3L显著延长于对照组，与迷宫试验指标EN，TRT呈正相关(r分别是0．78和0．51，P＜0．05)．②Fos样免疫活性在加大鼠的海马及大脑皮层均有增强，并随术后时间的延长而不断增强。结论 ①手术切断FF所建AD模型可以由拟出与加患者类似的P3L延长和c—fos过度表达．②建模后，AD大鼠类P3L延长与Fos—LI增强呈正相关趋势。     

血管性痴呆小鼠海马胆碱乙酰转移酶和其mRNA变化特征及喜得镇的影响

目的观测喜得镇对血管性痴呆(VD)小鼠海马神经元胆碱乙酰转移酶(CHAT)及其mRNA变化的影响,以探讨两者在VD发病中的作用及喜得镇对其影响的机制.方法双侧颈总动脉线结,反复缺血-再灌注法制备模型,药物组用喜得镇溶液灌胃,利用跳台试验和水迷宫试验观测其行为学改变,采用免疫组织化学和原位杂交技术观测小鼠海马神经元CHAT及其mRNA的表达变化.结果喜得镇组小鼠学习、记忆成绩优于模型组(P<0.01),其海马CHAT及其mRNA表达也明显增高(P<0.01).结论喜得镇改善VD小鼠学习、记忆成绩与其恢复海马低水平的CHAT及其mRNA有关.