7种抗-HIV ELISA试剂盒对质控血清参考品的反应结果分析

抗-HIV检测是采供血机构筛查献血者的常规项目之一，提高抗-HIV的检出率对于遏制HIV经血液传播极为重要。由于试剂质量问题，可能造成抗-HIV的漏检，尽管抗-HIV ELISA检测试剂盒均要进行“批批”抽检，但由于包被抗原不同，工艺差别，试剂盒保存、运输各环节等多种原因，各厂家试剂质量仍可能出现较大差异，为了解试剂在实际使用情况下的质量，我们用中国药品生物制品检定所抗-HIV国家参考品对市售的7家抗-HIV ELISA试剂的质量进行了比较，现报告如下。     

用非特异性反应标本选择抗-HIV试剂

随着第3代抗-HIV试剂的广泛应用，试剂的灵敏度和特异性有了很大的提高，但在实际使用过程中质量仍有差异，特别是抗-HIV试剂在灵敏度达到要求的同时，如果特异性不好，假阳性过高，将给血站检验结果的反馈、解释工作带来很多的麻烦，同时也对血源的稳定有一定的影响，本站采用非特异性标本对抗-HIV试剂进行选择，现报告如下。     

抗-HIV(1/2)EIA双抗原夹心法与间接法检测结果的分析比较

随着艾滋病在全球蔓延,我国的HIV感染者也日益增多[1],到目前为止,对艾滋病尚无有效的治疗措施,因此建立灵敏、特异的诊断方法尤为重要.诊断HIV感染最常用的方法为检测病毒特异性抗体[2], 而抗-HIV(1/2)EIA间接法试剂在特异性、敏感度方面均存在着一些问题.国外已广泛使用双抗原夹心试剂,使检测的准确性、可靠性有了很大提高.我国已有一些厂家开始研制抗-HIV(1/2)EIA双抗原夹心法试剂.笔者用自制的抗-HIV室内质控参考品对国内外部分厂家的EIA间接法、双抗原夹心法检测试剂进行了质量评价,报告如下.     

血清盘对七家HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、TP试剂的质量评价

试剂的灵敏度和特异性直接影响到血液检测结果。目前采用的ELISA试剂盒均通过国家批批检，但在实际工作中存在批内、批间重复性差、两种试剂结果不一致的现象，这与不同试剂包被的抗原或抗体不同有关。采供血机构应对试剂的灵敏度和特异性进行评估，从而选出最佳的试剂组合，保证血液质量。笔者用血清盘对七家试剂的HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、TP检测试剂的质量进行评估。现报告如下。     

国产抗-HIV酶免双抗原夹心法试剂在血液检测中质量分析

近年来,国产抗人类免疫缺陷病毒抗体(抗 HIV)第3代双抗原夹心法酶免诊断试剂的生产,使检测的灵敏性和特异性有了很大改善,但因生产厂家工艺不同,抗原组选择包被板的差异,以及试剂的贮存运输过程的损坏,使其在应用过程中的质量有所不同。我们对5个厂家抗HIV试剂进行了质量分析,以选择适合本实验室的试剂。一、材料和方法1.试剂　5个厂家抗HIV酶免双抗原夹心法试剂盒,分别用代号I1、I2 、I3 、I4、I5表示,批号分别为:2 0 0 2 0 813、2 0 0 2 0 70 1、2 0 0 2 0 710、2 0 0 2 0 80 1、2 0 0 2 0 6 2 0。2 .参考品　抗 HIV国家参考品阴性…     

22例抗-HIV国产ELISA试剂检测假阳性报告

笔者在用国产ELISA双抗原夹心法试剂对无偿献血者的血液进行抗 -HIV检测时 ,曾检出 2 2份“阳性”样品 ,再用进口ELISA双抗原夹心法试剂复检为阴性 ,最后经送滨州市卫生防疫站用蛋白印迹技试剂检测 ,证实为假阳性 ,现将结果报告如下。1　材料与方法1.1　样品　 2 0 0 4年 8月份至 11月份无偿献血者血液标本 5 5 0 0人份 ,每份标本均采用北京金豪有限公司及北京高达有限公司生产的抗 -HIV试剂同时作抗 -HIV筛选 ,收集两种试剂检测同时“阳性”或仅一种试剂“阳性”的样品 2 2份 (0 .4 % )。1.2　试剂　国产队ELISA双抗原夹心法抗 -…     

抗-HIV不同检测方法的结果比较

目的探讨不同检测方法、不同检测试剂对献血者人类免疫缺陷病毒抗体（抗-HIV）检测结果的影响。方法采用不同试剂使用酶联免疫吸附试验（ELISA）对献血者血浆标本进行抗-HIV分析，呈反应性血浆标本采用免疫学蛋白印迹法进行确证分析。结果ELISA再次检测抗-HIV阳性率显著低于初次检测阳性率，差异有统计学意义（P〈0．01），确证试验阳性率显著低于初次检测和再次检测的阳性率，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论采用不同试剂检测抗-HIV对于保证血液安全是非常必要的。     

内源性物质对第2、3代抗-HIV ELISA初筛试验的影响

酶联免疫吸附试验(ELISA)是人类免疫缺陷病毒抗体(抗-HIV)筛选试验中最常用的方法,目前国外已有第四代产品上市,由于受抗原研制水平等因素的限制,国内使用的抗-HIV ELISA试剂仍以第2代试剂(间接法)及第3代试剂(双抗原夹心法)为主.应用这两代试剂进行HIV抗体初筛时,常常会遇到假阳性现象,尤以第2代试剂更为常见,笔者就其影响因素进行了探讨.     

第二代与第三代抗-HIV检测试剂的比较

第二代抗 -HIV检测试剂采用 ELISA间接法 ,而第三代抗 -HIV检测试剂采用 ELISA双抗原夹心法。本站从 2 0 0 1年 1 0月起 ,停用第二代试剂 ,全部采用第三代试剂。通过 2 0 0 1年全年的标本检测、室内质控及室间质评工作 ,认为第三代试剂与第二代试剂相比 ,在灵敏度、特异性上都有很大提高。现将抗 -HIV试剂的使用情况报告如下。材料与方法1　试剂来源　抗 -HIV第二代、第三代试剂均购自厦门新创科技有限公司和北京万泰生物药业有限公司。试剂均经中国药品生物制品检定所批批检定合格 ,并在有效期内使用。2　标本及质控血清来源　标…     

京津冀血站实验室抗-HIV检测不合格情况分析

目的了解京津冀地区血站血液筛查实验室(简称血站实验室)无偿献血者血液标本抗-HIV检测不合格情况及不同血站实验室抗-HIV检测能力的差异及其影响因素。方法本实验室以电子邮件形式向京津冀15家血站实验室发放并收集调查问卷,内容包括2018年1月～12月各血站实验室抗-HIV ELISA不合格率和确证(WB)阳性结果(数据),本实验室负责数据汇总和确认,应用SPSS22.0统计学软件做统计学分析。结果 1)京津冀地区15家血站实验室的抗-HIV ELISA不合格率(6.77/万～35.71/万)和确证阳性率(0.60/万～3.56/万)均差异较大(P0.05);2)8种检测试剂抗-HIV ELISA不合格率和确证阳性率均差异明显(P0.01),进口4代试剂的灵敏度均高于国产(3代和4代)试剂,其中试剂R5(进口4代)的抗HIV ELISA不合格率最高(19.08/万);3)R1、R2、R3、R5、R7共5种试剂在不同血站实验室间的抗-HIV ELISA不合格率差异明显(P0.05),R4、R6、R8共3种试剂在不同血站实验室间的抗-HIV ELISA不合格率没有明显差异(P0.05)。4)除H、J、M实验室外,其余各实验室使用不同试剂抗-HIV ELISA不合格率差异明显(P0.05)。采用进口+国产试剂组合的实验室除O外,其余实验室均为进口试剂抗-HIV ELISA不合格率明显高于国产试剂(P0.05),采用国产3代+国产4代试剂组合的实验室中62.5%(5/8)实验室不同试剂间检测不合格率差异明显(P0.05)。5)15家实验室抗-HIV ELISA单试剂检测阳性率(62.02%～95.45%)差异较大(P0.001),A实验室单试剂检测阳性率最低62.02%(160/258)。结论京津冀地区各血站实验室抗-HIV检测能力存在较大差异,其中所使用的检测试剂的不同是造成差异的主要因素,实验室内的其他因素如人员、仪器和检测策略对抗-HIV检测效果也有较大影响,仍需推动京津冀地区血站实验室血液检测质量同质化进程。     

4120例无偿献血者HIV抗体检测结果调查分析

本文用抗-HIV(双抗原夹心法)酶联免疫吸附试验(EIA)试剂对4120份无偿献血者血清样品筛检，发现1例抗HIV初筛结果阳性，阳性率为0.02％。对21份抗HIV检测OD值呈灰区的样品跟踪调查复试，结果无1例在不同时间复试中OD值出现高于Cut off值的献血者。     

四川地区供血浆者病毒指标筛查结果与确认试验的对比分析

目的通过比较ELISA法筛查供血浆者血浆HBs Ag、抗-HCV、抗-HIV结果和确认试验结果,分析不同检测值标本的确认阳性符合率。方法采用进口ELISA试剂,HBs Ag采用中和试验法进行确认、抗-HCV和抗-HIV采用重组免疫印迹法对ELISA筛查阳性标本208份进行确认,确认试验结果为不确定的标本采用NAT法检测,将2者结果进行对比分析。结果国产和进口ELISA试剂检测HBs Ag、抗-HCV、抗-HIV的确认阳性符合率分别为92.86%、94.74%和85.71%,3者比较差异无统计学意义(P0.05)。结论对国产ELISA检测试剂用于供血浆者HBs Ag、抗-HCV、抗-HIV 3项检测的效果进行了科学评价,为假阳性供血浆者管理及ELISA检测试剂的选择提供了试验依据。     

京津冀血站实验室抗-HIV检测复检符合率分析

目的分析京津冀血液筛查实验室(简称血站实验室)2018年的抗-HIV ELISA检测复检率及复检符合率情况,探究各实验室抗-HIV试剂及系统的稳定性和其影响因素,为实现京津冀血站实验室同质化建设提供依据。方法通过填报调查问卷的形式,收集2018年全年京津冀地区15家血站实验室各月试剂使用情况,抗-HIV检测的标本数,每种试剂需进行重复检测标本数量和ELISA重复检测为反应性标本数量,进行比较分析。结果 1) 2018年京津冀15家血站实验室的抗-HIV检测复检符合率有统计学差异(P0.05);2)不同复检策略的实验室抗-HIV复检符合率存在统计学差异(P0.05);3)不同规模实验室抗-HIV检测复检符合率无统计学差异(P0.05);4)8种抗-HIV检测试剂的复检符合率差异有统计学意义(P0.05);5)试剂R1, R5, R8在不同实验室检测抗-HIV复检符合率无统计学差异(P0.05),其余试剂各实验室间差异有统计学意义(P0.05);6)实验室B, C, E, F, G, N使用2-3种试剂检测的抗-HIV复检符合率差异有统计学意义(P0.05),其余各实验室试剂间复检符合率无统计学差异。结论 2018年京津冀地区15家血站实验室抗-HIV检测复检符合率差异有统计学意义,除使用试剂本身的差异外,实验室内的其他因素对其也有较大影响,各实验室在抗-HIV检测中存在的问题及改进方法有待进一步研究和探讨。     

桂林市无偿献血者抗-HIV检测结果分析

目的分析桂林市无偿献血者抗-HIV检测情况,为保证输血安全提供依据。方法对桂林市2010年53 138例次无偿献血者抗-HIV初筛试验及确认试验结果进行分析。结果进口试剂和国产试剂均为初筛反应性的5例标本,经确认试验均为确认阳性。进口试剂初筛反应性而国产试剂初筛阴性的25例标本,经确认试验有1例为确认阳性。结论对无偿献血者抗-HIV检测最好是使用国产和进口2种试剂,有利于提高抗-HIV检测的准确性,保证血液质量。     

成都市136531名无偿献血者血液标本检测结果分析

目的了解本市献血者人群ALT、HBsAg、抗-HCV、抗-TP、抗-HIV的不合格率,分析所用两种酶免试剂检测的阳性率的差异。方法采用两种试剂检测成都市136 531名无偿献血者的血液标本ALT、HBsAg、抗-HCV、抗-TP、抗-HIV,对得到的不合格率进行统计学分析。结果本市献血者的5项指标不合格率为HBsAg>抗-HCV>ALT>抗-TP>抗-HIV;HBsAg、抗-HCV和抗-HIV采用两种试剂检出的阳性率差异有统计学意义(P<0.01),抗-TP的差异无统计学意义(P>0.01)。结论在灵敏度达到要求的情况下应尽量选择特异性高的试剂,减少血液浪费。     

双抗原夹心法检测抗-HIV(1+2)

抗-HIV（1+2）初筛试验大多采用间接ELISA方法,但存在部分假阳性反应。笔者以确证试验蛋白印迹法（WB）结果作对照,采用双抗原夹心法检测抗-HIV（1+2）确证阳性和初筛试验结果灰区标本,结果显示,双抗原夹心法检测抗-HIV（1+2）比间接ELISA法具有更好的准确性,更适用于抗-HIV（1+2）的初筛检测,缩短了窗口期,提高了对感染后的检出率,对于HIV感染者的早期发现,鉴别诊断具有重要的意义。现报告如下。 1 材料与方法 1.1 标本取自1995年以来本站初筛阳性的标本,其中结果不确定标本60份,确证阳性结果14份;总后卫生部及卫生部临床检验中心抗-HIV（1+2）室间质评血清40份（预期结果阳性22份,阴性18份）;抗-HIV（1+2）4Ncu/ml定值血清,由卫生部临床检验中心提供。 1.2 检测试剂间接ELISA初筛采用K、X、J 3个厂家的试剂;双抗原夹心ELISA初筛采用W及A厂家试剂。确证试验由江苏省AIDS确认中心实验室采用蛋白印迹方法（WB）检测。 1.3 实验方法各项实验均严格按照操作说明书进行。对于初筛阳性的样本,再次进行重复检测,复检时除原检测试剂外,尚需同时选择另一种初筛试剂予以复检,如均呈阳性或有一份阳性,该标本送确证实验室进一步做确证实验。 1.4 仪器设备 Perkin Elmer960型PCR分析仪（U.S.A）,GBS 全自动洗板机（U.S.A）,CliniBio 128型全自动绘图酶标仪（Australia）。     

97835例献血者传染性指标检测结果的不重合性分析

目的分析和探讨无偿献血者标本中传染性指标的2次ELISA法检测结果不重合的情况,为试剂选择及献血者筛选策略的制定提供依据。方法选取本血站2013年1月~2015年11月97 835例无偿献血者标本,采用ELISA法检测HBsAg、抗-HCV、抗-HIV(1+2)和抗-TP四项传染性指标,对2次检测不合格标本中由单试剂检测不合格的结果进行统计分析。结果 97 835例标本中,抗-HIV(1+2)和抗-HCV的不重合率最高,抗-TP的不重合率最低。结论试剂选择应进行筛选与组合,将不同试剂间不重合率的比对纳入试剂筛选的重要指标。     

抗-HIV酶联免疫检测的HOOK效应及对策

目的 探讨ELISA双抗原夹心法检测抗-HIV HOOK效应及对策。方法 分别使用双抗原夹心一步法、双抗原夹心二步法检测抗-HIV阳性高值标本及倍比稀释后的标本,比较结果的差异。结果 双抗原夹心一步法的HOOK效应十分明显,双抗原夹心二步法无此现象。结论 双抗原夹心二步法是减少HOOK效应的有效方法。血站系统检测HIV抗体时,至少应选用一种二步法试剂,以避免HOOK效应造成的强阳性标本漏检。     

酶免法检测抗-HIV假阳性结果的消除

目前检测抗-HIV主要采用酶免法(ELISA法)，国内外大多数诊断试剂厂家生产的抗-HIV诊断试剂已由过去的间接法检测抗体改为双抗原夹心法。国产诊断试剂虽经国家生物制品检定所检定合格，试剂的可靠性和准确性明显提高，但仍存在着假阳性现象，这主要是由于血清标本中存在的自身抗体等多种因素对ELISA夹心法检测抗体试     

血站实验室室间质评使用试剂与检测符合率的分析

目的通过分析深圳市血液中心参与全国范围室间质评结果,了解不同室间质评项目与试剂、检测方法的关联性,便于在工作中查找存在的问题,提高检测质量。方法对澳大利亚国立血清学参比实验室(NRL)2013年第3次血清学酶联免疫检测(酶免)与核酸检测室间质评回报结果,及卫生部临检中心2013年全年血清学酶免检测室间质控评价进行汇总统计,分析与比较各检测项目试剂使用情况、各类试剂检测符合率及假阳或假阴性率。结果在NRL HBs Ag、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP血清学检测室间质评中,包括电化学发光技术在内的A公司试剂为使用最多的国外试剂,W公司试剂为使用最多的国产试剂;W公司试剂检测HBs Ag的符合率稍高于A公司,抗-HCV检测试剂符合率最好的为O公司和W公司,其次为A公司;而在抗-HIV方面,使用量最大的是B公司和A公司,但符合率却较低。在核酸检测方面,R公司试剂的假阳或假阴性率均高于N公司试剂。在卫生部2013年第3次室间质评数据可以看出,大部分实验室对HBs Ag、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP(特异性抗体)等项目的检测选用了X公司和W公司生产的试剂。回顾性分析检测全年HBs Ag、抗-HCV、抗-HIV的数据,抗-HIV的检测假阳性率显著高于其他3个项目。结论通过本次全国室间质评回报结果分析,获得参评单位总体检测情况的重要数据,为提高检验质量及血液安全提供数据基础,室间质评值得进一步开展。