急性胰腺炎与胰腺腺泡细胞凋亡的关系

目的：研究急性胰腺炎严重程度与胰腺泡细胞凋亡的关系。方法：建立不同严重程度的急性胰腺炎大鼠模型，通过原位末端标记法定量检测胰腺腺泡细胞凋亡率。结果：单纯水肿性胰腺炎时极少有腺泡细胞凋亡。出血坏死性胰腺炎时有腺泡细胞凋亡，且随着出血坏死程度的加重，腺泡细胞的凋亡先较快地增加后逐渐减少，细胞坏死则逐渐增多。结论：在急性单纯水肿性胰腺炎时极少有腺泡细胞凋亡。急性胰腺炎的严重程度与腺泡细胞的凋亡率在程度较轻的急性出血坏死性胰腺炎时呈正相关，而在程度较重的急性出血坏死性胰腺炎时则呈负相关。     

青蒿素诱导急性胰腺炎胰腺腺泡细胞凋亡的实验研究

目的探讨青蒿素（artemisinin）对急性胰腺炎胰腺腺泡细胞凋亡的影响,并了解是否减轻急性胰腺炎严重程度。方法腹腔内注射雨蛙素（cerulein）诱导大鼠胰腺炎模型建立,设正常对照组、胰腺炎组及青蒿素组,通过原位末端标记（TUNEL）法检测各组胰腺组织中腺泡细胞的凋亡指数,并用分光光度法检测髓过氧化物酶（MPO）活性。采用两步酶消化法分离正常大鼠胰腺腺泡细胞,离体分组培养,采用丫碇橙（AO）染色及caspase-3活性的检测,评估青蒿素对胰腺腺泡细胞凋亡的影响,并检测各组培养液中的乳酸脱氢酶（LDH）及淀粉酶（AMS）活性,评估胰腺腺泡细胞酶的释放。结果在体实验中,青蒿素组与胰腺炎组比较,胰腺腺泡细胞凋亡指数明显增高（P〈0.05）,MPO活性明显减低（P〈0.05）。体外实验中,青蒿素组胰腺腺泡细胞凋亡指数及caspase-3活性较胰腺炎组明显增高（P〈0.05）,培养液中的LDH和AMS活性也明显降低（P〈0.05）。结论青蒿素可促进大鼠急性胰腺炎胰腺腺泡细胞凋亡,减少胰酶释放及中性粒细胞激活,可减轻急性胰腺炎严重程度。     

胰腺腺泡细胞癌1例报告

胰腺腺泡细胞癌(pancreatic acinar cell carcinoma, ACC)属胰腺外分泌肿瘤,比较罕见,有关其治疗和诊断方面的信息有限,文献仅是零星的个案报道。我科近期对一例胰头占位性病变实施手术后病理证实为胰腺腺泡细胞癌,其诊治经过如下。     

紫杉醇诱导胰腺腺泡细胞凋亡与减轻急性胰腺炎严重度的研究

我们比较了几种临床常用的化疗药物，发现紫杉醇具有较强的诱导胰腺腺泡上皮细胞凋亡的能力。但是，其能否应用于急性胰腺炎时诱导胰腺腺泡细胞凋亡从而减轻胰腺炎的严重度则未见报道，现将本研究结果报告如下。     

胰腺腺泡钙超载与急性胰腺炎

对急性胰腺炎 (ａｃｕｔｅｐａｎｃｒｅａｔｉｔｉｓ ,ＡＰ)的研究已有 10 0多年的历史。然而临床上 ,ＡＰ仍是一危重病症 ,尤其重型急性胰腺炎 (ｓｅｖｅｒｅａｃｕｔｅｐａｎｃｒｅａｔｉｔｉｓ,ＳＡＰ)更是病势凶猛、死亡率高。究其原因 ,主要是其发病机制尚未阐明 ,致使相应的治疗观点摇摆不定。近年来 ,国内外对ＡＰ发病机制研究的重点已从“胰酶消化学说”、“胰腺微循环障碍学说”、“自由基损伤学说”转至“细胞因子学说”、“胰腺腺泡钙超载学说”[1] 。本文就胰腺腺泡钙超载与ＡＰ的关系研究进展综述如下。1　ＡＰ时胰腺腺泡Ｃａ2…     

游离亚油酸对胰腺腺泡细胞的影响及其机制的探讨

目的 探讨游离亚油酸对胰腺腺泡细胞的影响及其可能的机制。方法 分离胰腺腺泡细胞，分别与0．1、0．5、1．0mmol／L亚油酸共同孵育30、60、90min，测定细胞的LDH释放率，DNA片段梯度分析腺泡细胞凋亡，流式细胞仪测定细胞凋亡率，Western blot检测腺泡细胞PKC的膜转位，激光共聚焦测定细胞内钙的变化。结果腺泡细胞与亚油酸共同孵育后，台盼蓝染色显示存在细胞损伤，LDH释放率与亚油酸呈时间和剂量依赖关系。细胞总DNA凝胶电泳结果显示1．0mmol／L亚油酸可出现DNA梯状条带，证明存在细胞凋亡。同时，腺泡细胞凋亡率及PKC的膜转位率，均与亚油酸呈剂量和时间依赖关系。另外，钙离子是参与细胞损伤和PKC激活的因子之一，采用激光共聚焦方法检测腺泡细胞内钙浓度，发现其升高与亚油酸呈浓度依赖性。结论 亚油酸对胰腺腺泡细胞损伤存在剂量和时间依赖关系。游离亚油酸刺激腺泡细胞内钙升高和活化PKC诱导细胞凋亡可能是高脂血症性胰腺炎的发病机制之一。     

NICD基因转染对胰腺腺泡细胞凋亡的影响

目的 观察重组腺病毒介导的NICD基因对胰腺腺泡细胞凋亡的影响.方法 在293细胞中培养扩增重组腺病毒Ad-NICD,当细胞汇合度达到60％～70％时,用蚀斑形成实验测定其感染滴度;将该病毒感染胰腺腺泡细胞AR4-2J (48 h)通过实时定量聚合酶链反应(PCR)检测其表达.同时分对照组(未转染组)、Ad-CMV转染组、Ad-NICD转染组分别用Ad-CMV( MOI:100)和Ad-NICD( MOI:100)转染AR4-2J细胞,采用Annexin V/PI双标流式细胞术检测Ad-NICD对细胞凋亡的影响.结果 重组腺病毒Ad-NICD滴度为2.2×1010 pfu/L,病毒颗粒感染腺泡细胞可以有效地提高NICD的表达,在MOI为100时,NICD的表达量最高.Ad-NICD感染胰腺腺泡细胞后,雨蛙素诱导的细胞凋亡率为(7.32±1.67)％,与对照组(18.55±2.61)％及Ad-CMV转染组(19.76±4.28)％比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 重组腺病毒介导的NICD基因转染可以显著抑制雨蛙素诱导的胰腺腺泡细胞凋亡,这种抑制可能与急性胰腺炎的严重程度有关.     

异搏定对胰腺腺泡细胞内游离钙离子浓度的影响

目的:探讨细胞内钙超负荷在急性胰腺炎(AP)发生发展中的作用.方法:使用140只SD大白鼠胆胰管逆行加压注射4.5%牛磺胆酸钠制成AP模型,用荧光指示剂Fura-2/Am测定游离胰腺腺泡细胞内游离钙离子浓度([Ca~(2 )]i).结果:注射后2小时和3小时胰腺呈急性出血坏死性炎症早期改变,制AP模型后AP组[Ca~(2 )]i较对照组明显增高(P<0.001),AP组胰腺腺泡细胞内[Ca~(2 )]i增高值与胰腺病理变化程度呈正相关关系(r_s=0.9727,P<0.001),异搏定治疗可明显提高病鼠生存率和改善胰腺组织出血坏死程度和腺泡细胞超微结构损害.结论:胰腺腺泡细胞内钙超负荷在胆汁性急性水肿性胰腺炎向出血坏死性胰腺炎转变中起明显作用,钙通道阻滞剂异搏定可明显阻止胰腺细胞内钙离子超负荷,是其治疗急性胰腺炎的主要机理之一.     

一种简易经济的大鼠胰腺腺泡细胞分离提纯方法

为探索一种简易而经济的大鼠胰腺腺泡细胞分离、纯化的方法，笔者采用低浓度I型胶原酶溶液作为细胞分离液，经胰胆管逆行注射，然后将剪碎的胰腺组织置于细胞分离液中消化;经过过滤、离心，提取胰腺腺泡细胞的单细胞悬液。结果示平均每只Wistar大鼠可获得4×10 6~5×10 6个细胞，纯度达70%~80%，与经典方法相比差异无显著性（ P >0.05）。这种方法具有耗酶量少、技术难度小的特点，可认为是一种简易、经济的大鼠胰腺腺泡细胞分离、纯化方法。     

牛磺胆酸钠混合大肠杆菌逆行胰管注射法建立感染性坏死性胰腺炎大鼠模型

目的建立一个稳定可靠的感染性坏死性胰腺炎大鼠模型,为深入研究感染性坏死性胰腺炎的病理生理、病变转归以及探索新的治疗方法提供动物模型载体.方法46只SD大鼠随机分成5组：牛磺胆酸钠逆行胰管注射组、大肠杆菌逆行胰管注射组,牛磺胆酸钠混合不同浓度大肠杆菌（浓度分别为103个/ml、104个/ml和105个/ml,混合液为实验即时配制）逆行胰管注射组,注射量为0.1 ml/100 g体重,注射速度为0.2 ml/min.观察8 h,记录生存率;存活者8 h后活杀,抽血测定血清淀粉酶,并取胰腺组织行病理学检查和细菌培养.结果单纯牛磺胆酸钠逆行胰管注射能建立坏死性胰腺炎模型,其中胰腺组织细菌培养阳性率为12.5%（1/8）;单纯大肠杆菌逆行胰管注射不仅不能建立坏死性胰腺炎模型,而且胰腺组织细菌培养阳性率为0（0/8）;牛磺胆酸钠混合大肠杆菌逆行胰管注射能够建立感染性坏死性胰腺炎模型,大肠杆菌浓度为103个/ml组、104个/ml组、105个/ml组胰腺组织细菌培养率分别为60%、100%、100%,而8 h存活率分别为100%、100%、70%.结论（1）大肠杆菌浓度为104个/ml和牛磺胆酸钠浓度为5%的混合液,按0.1 ml/100 g体重的量经胰管逆行注射（注射速度为0.2 ml/min）可建立稳定可靠的感染性坏死性胰腺炎大鼠模型.（2）该方法导致感染性坏死性胰腺炎发生的可能机制为：牛磺胆酸钠导致胰腺组织发生出血、坏死,并引起胰腺组织抵抗细菌定植能力下降;同时,坏死的胰腺组织给细菌提供了良好的生长环境;此外,胰腺组织发生细菌感染与入侵的细菌量有正相关关系.     

Sonographic features of liver metastases from pancreatic glucagonoma and acinar cell carcinoma

The previously unreported ultrasonographic (US) features of liver metastases of pancreatic glucagonoma and of pancreatic acinar cell carcinoma are described. They present as complex masses with hyperechoic solid component, containing echo-free cystic areas; these sonographic features markedly differ from the echo-poor US pattern of the much more common metastases of pancreatic ductal carcinoma. Survival from diagnosis of liver metastases was 45 months in the patient with pancreatic glucagonoma and 23 months in the patient with acinar cell carcinoma. These survivals were much longer than the expected survival of patients with pancreatic ductal carcinoma metastatic to the liver. The US finding of highly reflective lesions in the liver, containing echo-free cystic areas, should alert one that the primary pancreatic tumor has a histotype different from ductal carcinoma. Such US findings could affect the decision to resect the pancreatic tumor and its liver metastases, if histology confirms a malignancy less aggressive than ductal carcinoma.     

胰腺腺泡细胞癌的临床及病理特点分析

目的：分析探讨胰腺腺泡细胞癌的临床及病理特点。方法：回顾性分析北京协和医院10年来诊治的胰腺腺泡细胞癌病例资料。结果：共收集有完整资料的病人6例,临床多表现为腹痛、体重减轻、背痛及恶心呕吐等。肿瘤位于胰头2例,钩突1例,胰体／尾3例。切除标本的主要病理特点为,肿块直径均较大,平均7．00cm×5．92cm×5．00cm,3例有完整包膜,肿块质地韧,多为实性;免疫组化指标细胞角蛋白（AE1／AE3）、抗胰蛋白酶（α-AT）及抗糜蛋白酶（α-ACT）均呈阳性,人嗜铬蛋白A（CgA）为阴性。pTNM分期Ⅱ期2例,Ⅲ期1例,Ⅳ期3例。术后病人平均随访60个月,平均生存期为（32±8）个月。结论：胰腺腺泡细胞癌具有特殊的临床表现和特钲性病理形态学改变．免疫组化以AE1／AE3、α-AT及α-ACT等腺泡细胞标记物表达为主。     

大鼠急性胰腺炎胰腺细胞凋亡改变的实验研究的实验研究

目的 :了解急性胰腺炎 (AP)发病过程中胰腺腺泡细胞凋亡情况。方法 :将 48只SD大鼠随机分为两组 (胰腺炎组和假手术组 ) ,每组 2 4只。经十二直肠行胆胰管逆行加压注射 4%牛磺胆酸钠 ,诱导大鼠AP模型 ,于术后 3小时、6小时、12小时和 2 4小时分批处死动物 ,应用末端脱氧核苷酸转换酶 (TdT)介导的末端标记 (TUNEL)方法检测胰腺组织中的腺泡细胞凋亡。结果 :假手术组胰腺组织中存在极少量的凋亡细胞 ,数量相对恒定 ,与时间无关 ;胰腺炎组术后病变加重 ,胰腺凋亡细胞明显增多 ,3小时、6小时、12小时凋亡指数均明显高于假手术组 (P <0 .0 1) ,术后 2 4小时接近假手术组水平。结论 :急性胰腺炎胰腺存在腺泡细胞凋亡的改变 ,胰腺细胞凋亡可能是急性胰腺炎病变过程中的一个重要特征     

胰岛素促进胰腺癌细胞SW1990吸收钠离子机制的研究

目的为解释新发糖尿病合并胰腺癌预后差的现象,本研究拟探讨胰岛素影响胰腺癌细胞钠代谢的分子机制。方法在高糖DMEM中培养胰腺癌细胞SW1990,用不同浓度胰岛素刺激细胞,在不同时间检测培养上清中Na＋浓度,分析Na＋随胰岛素浓度和时间变化的规律。同时检测胰岛素对血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1（SGK1）的影响,并分析其中的信号通路。结果胰岛素刺激SW1990细胞后,培养上清中Na＋浓度下降（P〈0.05）,SGK1蛋白表达量增加（P〈0.05）,且Na＋浓度的下降幅度与SGK1蛋白水平相关（r=0.715,P〈0.01）;胰岛素处理后乙酰化修饰关键基因CREBBP和EP300表达明显上调（P〈0.05）。结论胰岛素可促进胰腺癌细胞吸收钠离子,与SGK1基因的表达水平相关,其中乙酰化修饰可能发挥一定作用。     

胰腺腺泡细胞癌的诊断及外科治疗

目的 分析总结胰腺腺泡细胞癌临床特点,探讨其诊断方法及外科治疗策略.方法 总结2002年1月至2012年1月接受手术治疗的胰腺腺泡细胞癌患者的临床资料,对其临床表现、诊断、治疗、预后进行分析.结果 共收集到具有完整病例资料的胰腺腺泡细胞癌患者6例,其中男性3例,女性3例;年龄30～ 63岁,平均年龄47.8岁.6例患者中,腹痛、消瘦、背痛、恶心、呕吐为其主要临床表现.2例患者CA19-9及CA24-2明显升高.CT、MRI及DSA为主要影像学诊断手段,但术前无1例诊断为胰腺腺泡细胞癌,均为术后病理证实.手术切除率相对较高,但手术时间长、术中出血量大及可能联合多器官切除.术后平均随访60个月,平均生存期为(32±8)个月.结论 胰腺腺泡细胞癌的临床特点及生物学行为有别于导管腺癌,其一些相对特殊的临床表现及影像学改变有助于术前定性诊断.该疾病手术切除率高,预后较好,治疗应持积极态度.     

急性胰腺炎腺泡细胞损伤机制研究进展

急性胰腺炎（AP）是胰腺的炎症性疾病,由于发病机制尚未完全阐明,临床对重症AP仍缺乏有效的治疗方法。目前认为,钙超载、酶原异常活化、内质网应激、自噬、线粒体损伤及炎症反应与胰腺腺泡细胞损伤关系密切,现就其研究进展进行综述。     

游离亚油酸对胰腺腺泡细胞的影响及其机制的探讨

目的探讨游离亚油酸对胰腺腺泡细胞的影响及其可能的机制。方法分离胰腺腺泡细胞,分别与0.1、0.5、1.0mmol/L亚油酸共同孵育30、60、90min,测定细胞的LDH释放率,DNA片段梯度分析腺泡细胞凋亡,流式细胞仪测定细胞凋亡率,Westernblot检测腺泡细胞PKC的膜转位,激光共聚焦测定细胞内钙的变化。结果腺泡细胞与亚油酸共同孵育后,台盼蓝染色显示存在细胞损伤,LDH释放率与亚油酸呈时间和剂量依赖关系。细胞总DNA凝胶电泳结果显示1.0mmol/L亚油酸可出现DNA梯状条带,证明存在细胞凋亡。同时,腺泡细胞凋亡率及PKC的膜转位率,均与亚油酸呈剂量和时间依赖关系。另外,钙离子是参与细胞损伤和PKC激活的因子之一,采用激光共聚焦方法检测腺泡细胞内钙浓度,发现其升高与亚油酸呈浓度依赖性。结论亚油酸对胰腺腺泡细胞损伤存在剂量和时间依赖关系。游离亚油酸刺激腺泡细胞内钙升高和活化PKC诱导细胞凋亡可能是高脂血症性胰腺炎的发病机制之一。