软肝宁煎剂对肝纤维化大鼠防治作用的实验研究

目的观察软肝宁煎剂防治肝纤维化的作用并探讨其作用机制。方法采用CCl4复合因素诱导Wistar大鼠建立肝纤维化模型,设正常对照组、肝纤维化模型组、软肝宁煎剂预防组和软肝宁煎剂治疗组。实验结束后分别测定各组大鼠的肝脏指数和肝功能：ALT、AST,肝纤维化指标,透明质酸（HA）,并作肝组织病理学检测及肝组织中转化生长因子（TGF—β1）免疫组化染色。结果1．软肝宁煎剂预防组、治疗组与模型组肝纤维化大鼠组织学比较有显著性差异（P〈0．05,P〈0．01）;2．在肝脏指数方面：预防组与模型组比较有显著性差异（P〈0．05）,而治疗组无明显差异;3．软肝宁煎剂能明显降低大鼠血清中ALT、AST和大鼠肝脏组织中HA的含量,与模型组比较有显著性差异（P〈0．01）;4．软肝宁煎剂预防组和治疗组与模型组比较,明显抑制了TGF—β1的表达。结论软肝宁煎剂可通过保护肝细胞,减轻肝细胞损伤,促进ECM的降解,减少细胞因子TGF—β1的产生及释放来防治大鼠肝纤维化的发生和发展。     

酪酪肽对重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织NO生成及iNOS表达的影响

目的:研究酪酪肽对重症急性胰腺炎(SAP)胰腺组织NO生成及iNOS表达的影响. 方法:将SD大鼠40只随机均分成SAP组和治疗组,两组均给60 g/L左旋精氨酸腹腔内注射建立SAP模型. 治疗组在第1次注射左旋精氨酸后立即皮下注射酪酪肽(0.8 pmol/g),此后每次间隔4 h,共10次;SAP组接受同剂量的生理盐水. 开始造模后48 h取胰头组织制成匀浆液,用硝酸还原酶法测定NO含量;取胰尾组织用于免疫组化观察iNOS. 结果:SAP组胰腺iNOS的高表达率为0.90,NO含量为(68±3)μmol/g,治疗组iNOS为0.10,NO为(22±5)μmol/g,两组比较均有显著性差异(P均＜0.05). 结论:酪酪肽对SAP有治疗保护作用,这种治疗作用的机制可能与其降低胰腺NO生成及iNOS活性表达有关.     

八味护肝胶囊对酒精性肝纤维化大鼠模型的影响

目的探讨八味护肝胶囊对酒精性肝纤维化（ALF）大鼠模型的保护作用及其作用机制。方法将雄性Wistar大鼠随机分为4组：正常对照组、模型组、八味护肝胶囊组、益肝灵胶囊组。用烈性酒灌胃方法制备ALF大鼠模型。于16周末检测各组大鼠肝功能指标、肝纤维化指标及肝纤维化血清转化生长因子β1（TGF—β1）、金属蛋白酶组织抑制剂1（TIMP1）。结果与模型组比较,八味护肝胶囊组大鼠血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总蛋白（TP）、透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）、IV型胶原（CW）及TGF—β1、TIMP1明显降低（P〈0．01）。结论八味护肝胶囊对酒精性肝纤维化大鼠有较好的治疗作用;对TGF—β1、TIMP1的抑制作用可能是其治疗酒精性肝纤维化的机制之一。     

红景天甙对肝纤维化大鼠Samds基因表达的影响

目的: 观察红景天甙对肝纤维化大鼠TGFβ-Smad通路的影响.方法: CCl4诱导大鼠肝纤维化,以红景天甙水溶液干预性治疗,Masson染色观察肝组织胶原沉积;ELISA法检测大鼠血清TGFβ1水平;原位杂交(in situ hybridization,ISH)和免疫组化(immunohistochemistry,IH)检测大鼠肝组织Smads表达情况.结果: 红景天甙干预性治疗使肝纤维化大鼠血清TGFβ1水平明显下降[(53.4±19.5) vs (88.7±22.8) mg/L, P<0.05],肝脏胶原占肝组织面积比例减少为(0.041±0.011)[模型组(0.167±0.052),P<0.05];治疗组肝脏Smad 4蛋白表达阳性率降低为(0.023±0.008)[模型组(0.137±0.090),P<0.01],Smad 4 mRNA阳性率降低为(0.233±0.018)[模型组(0.741±0.091),P<0.01];Smad 7蛋白阳性率增加为(0.067±0.010)[模型组(0.019±0.002),P<0.05],Smad 7 mRNA阳性率增加为(0.198±0.011)[模型组(0.074±0.012),P<0.01];肝组织Smads蛋白表达与Smads mRNA水平变化一致.结论: 红景天甙防治可显著降低肝纤维化大鼠血清TGFβ1水平,减少肝脏胶原沉积,抑制肝脏Smad 4表达及促进Smad 7 mRNA表达,从而减弱了由TGFβ1介导的肝纤维化信号,可能是其发挥抗肝纤维化作用的分子机制之一.     

苦胆草对斯氏狸殖吸虫致大鼠肝纤维化中TIMP-1表达的影响

目的:探讨苦胆草对斯氏狸殖吸虫肝纤维化大鼠肝脏TIMP-1表达的影响. 方法:将42只SD大鼠随机分为正常组,模型组,γ-干扰素组和苦胆草组.用斯氏狸殖吸虫感染大鼠制备肝纤维化模型,12周后取肝脏用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测肝组织中TIMP-1 mRNA的表达. 结果:与正常组比较,模型组大鼠肝组织TIMP-1 mRNA显著升高(P<0.05);与模型组比较,γ-干扰素组和苦胆草组大鼠肝组织TIMP-1 mRNA的表达显著降低(P<0.05). 结论:苦胆草的抗肝纤维化作用可能与其降低TIMP-1表达有关.     

TGF—β1在肝纤维化大鼠肝组织中的表达及其生物学意义

目的：通过研究大鼠肝纤维化模型肝组织中转化生长因子β1(Transforming growth factor β1,TGF－β1)的表达和分布规律，初步探讨TGF－β1在肝纤维化发病机制中的作用。方法：雄性SD大鼠32只，体重250－300克，皮下注射CCl4制备大鼠肝纤维化模型，分别于注射CCl4后1，4，8周处理动物，采用免疫组织化学方法检测肝组织中TGF－β1的表达及分布。结果：TGF－β1主要表达于肝脏间质组织中。CCl4注射诱导后，大鼠肝组织中TGF－β1的表达较正常对照明显增强（P＜0．01）。且CCl4注射1、4、8周组肝组织中TGF－β1的表达强度呈明显的逐级递增的趋势（P＜0．01）。结论：TGF－β1的表达水平与大鼠肝纤维化严重程度呈显正相关，可能与肝纤维化的发生发展有关。     

下瘀血汤抗大鼠肝纤维化的作用及其机制

目的探讨下瘀血汤抗肝纤维化的作用及其机制。方法采用CCl4诱发大鼠肝损伤,观察下瘀血汤对肝纤维化模型大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、白蛋白含量(Alb)的影响及光镜下肝组织病理学变化;用免疫组化法观察其对TGFβ1、α-SMA表达的影响。结果与模型组比较,下瘀血汤组肝组织中TGFβ1、α-SMA的表达明显减少,ALT、AST活性降低,肝纤维组织增生明显减少。结论下瘀血汤可有效拮抗大鼠肝纤维化;其机制可能是抑制肝纤维化组织TGFβ1的表达。     

己酮可可碱对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织MMP-9、TGFβ1表达的影响

目的研究己酮可可碱(PTX)对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)肝组织基质金属蛋白酶9(MMP-9)、转化生长因子β1(TGFβ1)表达的影响。方法高脂饮食法建立大鼠NASH模型,取SD大鼠40只,分为对照组、12周模型组、16周模型组和PTX治疗组,每组10只。采用改良Masson三色染色检测肝纤维化面积,免疫组织化学方法检测肝组织MMP-9、TGFβ1的表达以及分布。结果免疫组织化学方法检测结果显示,与对照组相比,12周、16周模型组和PTX治疗组肝组织MMP-9的表达量明显升高(P<0.05);16周模型组和PTX治疗组TGFβ1的表达量亦明显升高(P<0.05);与16周模型组相比,PTX治疗组TGFβ1表达量显著降低(P<0.05)。检测肝纤维化面积,12周、16周模型组和PTX治疗组的面积均大于对照组(P<0.05)。且16周模型组面积大于12周模型组(P<0.05)。PTX治疗组面积较16周模型组下降(P<0.05)。结论PTX可降低TGFβ1的表达,改善肝纤维化面积,提示PTX对实验性NASH具有治疗作用。PTX对MMP-9的表达无影响。     

健肝颗粒对大鼠肝纤维化组织中TGF-β1和NF-kB mRNA表达的影响

目的探究健肝颗粒抗肝纤维化的作用机制。方法选取100只雄性SD大鼠,随机分组后以四氯化碳腹腔内注射建立大鼠肝纤维化模型,造模后施以由低、中、高剂量健肝颗粒,以秋水仙碱为阳性对照。行苏木素-伊红、Masson染色,免疫组织化学染色检测肝组织转化生长因子β1(TGFβ1)、RT-PCR法检测肝组织中核因子-kB(NF-kB)mRNA的表达。结果健肝颗粒能降低大鼠肝纤维化病理评分,改善肝纤维化病理损伤;降低炎症因子TGFβ1、NF-kB mRNA在肝组织中的表达,尤其以低剂量健肝颗粒组效果明显(P<0.01)。结论健肝颗粒组能有效改善大鼠肝纤维化的病理改变;减少TGFβ1、NF-kB mRNA表达可能是其相关作用机制。     

酪酪肽对实验性重症急性胰腺炎大鼠的作用

目的:通过检测血清一氧化氮(NO),诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)及超氧化物歧化酶(SOD)水平,研究酪酪肽(PYY)对重症急性胰腺炎大鼠的作用。方法:健康雄性SD大鼠40只,体重250～300g。随机分成胰腺炎组(20只)和治疗组(20只)两组,实验前大鼠禁食12h,自由饮水。两组大鼠均分3次腹腔内注射6%l-精氨酸溶液(3×1.5mg/g),中间间隔1h。治疗组大鼠在第1次腹腔内注射精氨酸后立即皮下注射酪酪肽(0.8pmol/g体重),此后每间隔4h皮下注射1次,共注射10次。将实验大鼠分别在造模后48h作血清NO,iNOS及SOD测定。结果:酪酪肽治疗组血清NO及iNOS明显低于重症急性胰腺炎组,而血清SOD明显高于重症急性胰腺炎组。结论:酪酪肽对重症急性胰腺炎的保护治疗作用可能与降低血清NO含量,抑制iNOS活性,提高SOD活性有关。     

新生大鼠胃肠道组织Ghrelin、PYY mRNA和蛋白及其下丘脑中受体mRNA的表达

目的观察新生大鼠胃肠道组织Ghrelin、酪酪肽（PYY）mRNA和蛋白以及两者位于下丘脑的受体mRNA的表达变化,并探讨其与胃肠道成熟程度的关系。方法选取0日龄和7日龄的新生大鼠各10只,分别采用Real-timePCR法和免疫组织化学法测定胃底组织GhrelinmRNA和蛋白、结肠组织PYYmRNA和蛋白、下丘脑Ghrelin和PYY受体mRNA的表达。结果 0日龄大鼠胃底Ghrelin mRNA表达高于7日龄大鼠（P〈0.05）,结肠PYYmRNA表达则低于7日龄大鼠（P〈0.01）。0日龄大鼠胃肠道Ghrelin和PYY蛋白表达均高于7日龄大鼠（P〈0.05）。0日龄与7日龄大鼠下丘脑Ghrelin和PYY受体mRNA的表达比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论未成熟胃肠道组织Ghrelin和PYY蛋白合成分泌增加,起到促进胃肠道发育成熟的作用;而PYYmRNA与蛋白质表达的不平行状态提示该基因表达调控可能具有多样性。     

新生大鼠胃肠道组织Ghrelin、PYY mRNA和蛋白及其下丘脑中受体mRNA的表达

目的 观察新生大鼠胃肠道组织Ghrelin、酪酪肽(PYY) mRNA和蛋白以及两者位于下丘脑的受体mRNA的表达变化,并探讨其与胃肠道成熟程度的关系.方法 选取0日龄和7日龄的新生大鼠各10只,分别采用Real-time PCR法和免疫组织化学法测定胃底组织Ghrelin mRNA和蛋白、结肠组织PYY mRNA和蛋白、下丘脑Ghrelin和PYY受体mRNA的表达.结果 0日龄大鼠胃底Ghrelin mRNA表达高于7日龄大鼠(P<0.05),结肠PYY mRNA表达则低于7日龄大鼠(P<0.01).0日龄大鼠胃肠道Ghrelin和PYY 蛋白表达均高于7日龄大鼠(P<0.05).0日龄与7日龄大鼠下丘脑Ghrelin和PYY受体mRNA的表达比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 未成熟胃肠道组织Ghrelin和PYY蛋白合成分泌增加,起到促进胃肠道发育成熟的作用;而PYY mRNA与蛋白质表达的不平行状态提示该基因表达调控可能具有多样性.     

双歧杆菌对2型糖尿病大鼠血浆酪酪肽和胰岛素抵抗的影响

目的观察双歧杆菌对2型糖尿病（T2DM）大鼠血浆酪酪肽（PYY）和胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）的影响。方法30只周龄为9周SD雄性大鼠链脲佐菌素（STZ）造模后,根据双歧杆菌灌胃剂量分成4组:正常对照组（N组）、糖尿病组（T2DM组）、高剂量组和低剂量组,双歧杆菌连续灌胃6周后,测所有大鼠空腹血糖（FBS）,处死后取血浆检测PYY、糖化血红蛋白（HbA1c）、空腹胰岛素（FINS）、血脂,计算HOMA-IR,比较4组大鼠上述指标的差异。结果高剂量组和低剂量组HbA1c、FBS、FINS、HOMA-IR和三酰甘油低于T2DM组（P < 0.01）,但高于N组（P < 0.05~P < 0.01）;高剂量组和低剂量组PYY高于T2DM组（P < 0.01）,但低于N组（P < 0.01）,高剂量组和低剂量组上述指标差异均无统计学意义（P>0.05）,PYY和HOMA-IR呈负相关（r=-0.783,P < 0.01）。结论双歧杆菌可以降低T2DM大鼠HbA1c、FBS、FINS、TG和HOMA-IR,升高PYY。     

玉米肽和有氧运动对肥胖大鼠血浆Glucagon、MCP-1、PP和PYY水平的影响

目的 通过观察玉米肽和有氧运动对肥胖大鼠血浆内胰高血糖素（Glucagon）、单核细胞趋化蛋白-1 （monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1）、胰多肽（Pancreatic polypeptide,PP）和酪酪肽（Peptide YY,PYY）水平的影响,探讨其减控大鼠体质量的可能激素相关机制.方法 雄性SD大鼠150只,随机选取15只作为普通饲料组（C组）,给予普通饲料,其余135只给予高脂饲料以建肥胖模型.8周后将40只雄性肥胖大鼠随机分为肥胖对照组（OC组）、酪蛋白组（Cas组）、玉米肽组（CP组）、运动组（OE组）和玉米肽运动组（OEC组）,其中OE组和OEC组进行4周的有氧运动.使用ELISA方法检测血浆中Glucagon、MCP-1、PP和PYY水平.结果 建模成功后经过4周干预,OC组大鼠体质量显著高于C组,OE组和OEC组大鼠体质量与OC组相比显著降低.OC组大鼠血Glucagon水平与C组无显著差异,CP组大鼠血Glucagon水平与OC组相比显著降低.OC组大鼠血MCP-1水平显著高于C组,CP组、OE组和OEC组与OC组大鼠血MCP-1水平相比显著降低.OC组大鼠血PYY水平均显著低于C组,OEC组大鼠血PYY水平显著高于OC组和CP组;各组大鼠间血PP水平均无显著性差异.结论 单纯服用玉米肽可以降低肥胖大鼠血Glucagon和MCP-1水平.玉米肽结合有氧运动可降低肥胖大鼠体质量以及血液内的MCP-1水平,并提高肥胖大鼠血液内PYY水平.     

肝纤维化大鼠TGF-β1与TIMP-1 mRNA的表达及补肾柔肝方的治疗作用

目的:探讨中药复方补肾柔肝方对二甲基亚硝胺(dimethylnitrosamine,DMN)诱导大鼠肝纤维化后肝脏组织金属蛋白酶抑制因子1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)和转化生长因子β1(transforming growth factor-beta 1,TGF-β1)的影响,以了解其对肝纤维化的治疗作用和分子机制.方法:雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组、模型组和治疗组,对模型组和治疗组运用DMN诱导大鼠肝纤维化.治疗组在造模4周后给予补肾柔肝方灌胃,剂量10 g·kg-1·d,共治疗4周.第8周末处死全部大鼠,对肝组织进行HE和天狼猩红染色观察,并采用RT-PCR半定量方法,检测大鼠肝组织TIMP-1及TGF-β1mRNA的表达水平.结果:肝组织病理学研究结果显示DMN可以成功诱导大鼠肝纤维化,模型组肝组织TIMP-1和TGF-β1mRNA表达明显增强,中药复方治疗组与模型组相比明显减弱,而正常对照组表达较少.结论:TIMP-1与TGF-β1mRNA的表达与肝纤维化的发生密切相关,中药复方补肾柔肝方对肝纤维化大鼠肝组织TIMP-1及TGF-β1具有明显的抑制作用,可达到抗肝纤维化的作用.     

干扰素α治疗慢性乙型肝炎患者肝纤维化的实验研究

目的 观察干扰素α对慢性乙型肝炎（乙肝）患者肝组织纤维化程度的影响。方法选取病理诊断为S3-S4期的16例乙肝患者,干扰素治疗期前后3次进行肝组织炎症程度及纤维化程度病理分析，免疫组化检测肝组织TGF-β1蛋白、Fas及HBcAg抗原,TUNEL方法观察肝细胞凋亡情况。同期检测血清肝纤维化指标及肝功能。结果在S3-S4期，患者Fas、TGF-β1显著表达，肝细胞的DNA损伤严重。干扰素α治疗3个月后Fas抗原、TGF-β1表达程度显著下降（P〈0．05）；细胞凋亡程度减轻（P〈0．05）；肝组织HBcAg表达程度无显著改变；连续6～9个月治疗后，肝组织炎症及纤维化程度逐渐改善（P〈0．05），血清肝纤维化指标及肝功能水平与治疗前差异显著。结论干扰素仪能显著改善S3-S4期患者肝细胞凋亡和肝组织纤维化程度，但需持续治疗。     

地顶孢霉菌丝体对免疫性肝纤维化大鼠的保护作用及其可能机制的研究

目的探讨地顶孢霉菌丝体(AMM)对猪血清诱导的免疫性肝纤维化大鼠的保护作用及机制。方法健康成年SD大鼠90只,随机分为空白对照组、模型组、秋水仙碱组(Col 0.1 mg/kg)、AMM组(700、350、175 mg/kg)。除空白对照组腹腔注射等量的生理盐水外,其余各组分别腹腔注射猪血清0.5 ml/只,每周2次,连续18周,建立肝纤维化模型。并于造模之日起,AMM组和Col组灌胃给药,空白对照组和模型组分别给予等量蒸馏水。VG染色观察AMM对肝脏病理形态学影响;测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性及肝脏匀浆中羟脯氨酸(Hyp)的含量;ELISA法测定血清中转化生长因子β1(TGF-β1)的含量;免疫组化和Western blot法检测大鼠肝脏组织TGF-β1蛋白表达水平。结果 VG染色显示,与模型组比较,AMM(700、350 mg/kg)组肝组织胶原面积明显减少,TGF-β1和Hyp含量均显著降低(P<0.05,P<0.01);免疫组化和Western blot结果显示,AMM(700、350 mg/kg)明显下调TGF-β1表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论 AMM能有效抗免疫性肝纤维化,其机制可能与下调肝纤维化大鼠中升高的TGF-β1的表达和分泌有关。     

加味桃核承气汤对肝纤维化大鼠TGF-β1蛋白表达的影响

[目的]观察加味桃核承气汤对四氯化碳肝纤维化大鼠肝组织转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白表达的影响。[方法]用四氯化碳诱导大鼠肝纤维化模型,研究分组为正常对照组、模型对照组、加味桃核承气汤高、中、低剂量治疗组和秋水仙碱对照组;灌胃给药,疗程8周;用免疫组化技术检测肝组织TGF-β1的蛋白表达;检测血清ALT、AST水平;用苦味酸-天狼红胶原染色方法进行半定量肝纤维化计分(SSS)。[结果]高、中、低剂量组及秋水仙碱组的TGF-β1的表达水平均低于模型对照组;经加味桃核承气汤治疗后血清ALT、AST水平及肝纤维化SSS计分显著下降。[结论]加味桃核承气汤可抑制肝纤维化大鼠TGF-β1的表达,达到抗肝纤维化作用。     

BMP-7在大鼠肝纤维化组织中的动态表达和意义

目的探讨大鼠肝纤维化组织中骨形态发生蛋白7(bone morphogenetic protein-7,BMP-7)的表达趋势及意义。方法采用腹腔内注射二甲基亚硝胺(DMN)构建大鼠肝纤维化模型,造模后4天、1、2、4、6、8周分别检测血清ALT、AST、ALB的变化,同时取肝组织用半定量RT-PCR方法检测BMP-7 mRNA的表达。采用HE染色及Masson三色染色,光学显微镜下观察肝组织损伤情况。采用单因素方差分析进行多组均数间的比较。结果肝纤维化模型组血清ALT、AST明显升高,ALB明显下降。BMP-7 mRNA在对照组大鼠和肝纤维化模型组大鼠肝组织中均有表达。与对照组相比,肝纤维化模型组4天时BMP-7mRNA表达显著减少(P<0.05)。1～2周与对照组差别无显著性(P均>0.05),1周与4天比较差异无显著性(P>0.05),2周与4天比较显著升高(P<0.05)。4周较对照组显著升高,达高峰(P<0.05)。6周较对照组显著升高(P<0.05),较4周下降(P<0.05)。8周较6周有显著下降(P<0.05),与对照组无显著差异(P>0.05)。结论 BMP-7 mRNA在正常SD大鼠肝脏有表达,在肝纤维化大鼠肝组织中的表达呈动态改变,在炎症早期表达减少,随着肝纤维化进展,表达增加,在肝纤维化后期表达减少,提示BMP-7参与肝纤维化的发生、发展过程。     

Interaction of Dietary Composition and PYY Gene Expression in Diet-induced Obesity in Rats

Dietary obesity ,induced by exposure to highfat food,is the rodent model that most closely re-sembles human obesity . Comparing rats that areresistant or prone to diet-induced obesity serves thedual purpose of illustrating the molecular adapta-tions that prevent obesity and identifying genesthat become dysregulated by high fat diets .Neuropeptide Y ( NPY) and peptide YY(PYY) are closely related polypeptides which arecomposed of 36 amino acides and share considera-ble homology . While NPYa…