TSG101在肺癌组织和细胞系中的表达及意义

背景和目的在小鼠NIH3T3成纤维细胞中通过随机纯合子敲除法证实,破坏肿瘤易感基因TSG101(Tumor Susceptibility Gene101)导致裸鼠的自发性肺转移性肿瘤,从而TSG101作为侯选的肿瘤抑制基因被认识。随后,越来越多的研究证实TSG101并非是严格意义上的肿瘤抑制基因,在原发乳腺癌并没有检测到基因内部的序列的丢失或异常,相反发现存在异常的TSG101选择性剪接体。本研究目的旨在研究肺癌细胞系和组织中TSG101的表达情况,分析TSG101及异常的TSG101选择性剪接体在肺癌的发生发展过程中可能所起的作用。方法采用免疫组织化学方法(SP法)检测79例肺鳞癌和肺腺癌组织及相应癌旁正常肺组织中TSG101的表达情况。采用RT-PCR实验分析,检测出在7种肺癌细胞系中野生型和异常剪接转录产物表达情况。采用WesternBlot方法检测肺癌细胞系中蛋白质表达情况。结果TSG101在肺鳞癌和肺腺癌中的蛋白水平显著低于其在相应正常肺组织中的表达。七种细胞系中普遍存在由于异常的选择性剪接而缩短的TSG101转录产物,和野生性转录产物同时表达。通过统计学分析发现在小细胞肺癌细胞系中存在更多的异常的转录产物。通过WesternBlot分析同样发现小细胞肺癌细胞系同样与其他非小细胞肺癌细胞系在蛋白水平上存在差异。结论尽管在非小细胞肺癌中作为侯选的肿瘤抑制因子,但是普遍存在的TSG101异常转录产物也许和肺癌的类型相关,可作为肺癌恶性进展的生物学标志。     

肿瘤易感基因101在胃癌细胞中的表达及意义

目的　探讨肿瘤易感基因 10 1(TSG10 1)在不同胃癌细胞系中的表达及其意义。方法　采用巢式RT PCR、DNA重组技术和Westernblot等方法从mRNA和蛋白水平检测TSG10 1的表达。结果　在 7株胃癌细胞系中均有野生型TSG10 1表达 ,经测序分析无基因突变 ;此外 ,尚存在 1个 2 88bp的剪接变异体 ;在胃癌细胞系MKN4 5、SGC790 1及其耐药亚系SGC790 1/VCR和SGC790 1/ADR中 ,还发现 1个 874bp的剪接变异体 ;并发现野生型TSG10 1在SGC790 1/VCR和SGC790 1/ADR中的表达较亲本细胞SGC790 1增高。结论　TSG10 1及其剪接变异体的表达在胃癌细胞系中常见 ,野生型TSG10 1可能参与了胃癌多药耐药的发生。     

肺癌中TSG101蛋白与Notch3受体表达的相关性

背景与目的 TSG101蛋白是内吞分选通路的重要因子,该通路的异常会减少果蝇中Notch受体的降解,导致此受体信号对细胞分化、发育调节的紊乱.在哺乳动物中,Notch受体家族中的3亚型与肺组织发育及肺癌发生密切相关.本实验的目的是初步探讨在人类肺癌中,TSG101蛋白与Notch3受体之间的表达是否也存在关联.方法 分别采用Western blot和免疫组化sP法检测TSC101蛋白与Nowh3受体在肺癌组织、细胞系中的表达.并应用抗体封闭TSG101蛋白功能后观察Notch3受体的表达变化.结果 TSG101蛋白在肺癌中比正常肺组织表达减少,而Notch3受体在肺癌中比正常肺组织表达则增多,此变化均与肺癌的分化及淋巴结转移相关.当用抗体封闭肺癌细胞系中TSG101蛋白功能时,Notch3受体检测水平呈上升变化.结论 肺癌中TSG101蛋白表达下调,与Notch3受体检测水平七升有相关性.     

TSG101与P21及P300/CBP在肺鳞癌和肺腺癌中的表达及意义

背景与目的 在成纤维细胞3T3随机突变试验中证实肿瘤易感基因TSG101(tumor susceptibility gene 101)是一个潜在的肿瘤抑制基因.本研究的目的旨在探讨TSG101在肺鳞癌和肺腺癌组织中的表达,以及与性别、年龄、肿瘤大小、组织类型、肿瘤分化、分期、淋巴结转移的关系,分析其与P21及P300/CBP是否存在相关性.方法 采用免疫组织化学方法(SP法)检测79例肺鳞癌和肺腺癌组织及相应癌旁正常肺组织中TSG101、P21及P300/CBP的表达情况,并结合临床病理资料进行分析.采用Western blot方法检测TSG101在26例肺癌及其在相应正常肺组织中蛋白的表达情况.结果 TSG101、P21及P300/CBP在肺鳞癌和肺腺癌组织中的表达率分别为59.49%、60.76%及56.96%,TSG101的表达与P21、P300/CBP的表达呈显著正相关.TSG101、P21及P300/CBP在中高分化肺癌中的表达显著高于低分化肺癌(P均＜0.05);不伴有淋巴结转移的肺癌组织中TSG101、P21及P300/CBP的表达显著高于伴有淋巴结转移者(P＜0.05).TSG101在肺鳞癌和肺腺癌中的蛋白水平显著低于其在相应正常肺组织中的表达.结论 TSG101、P21及P300/CBP的表达与肺鳞癌和肺腺癌组织的分化、转移密切相关,且三者在肺癌中的表达呈显著正相关,可作为评价肺癌浸润、转移的生物学标志.