子宫内膜异位症在位内膜腺上皮细胞及基质细胞的分离培养和鉴定

目的分离培养子宫内膜异位症在位内膜组织中子宫内膜腺上皮细胞及基质细胞,建立研究子宫内膜异位症的细胞模型。方法对分泌期子宫内膜异位症在位内膜组织用混合酶消化,滤网过滤和差速梯度离心的方法分离,体外培养后通过光镜观察及免疫细胞化学、免疫荧光化学方法对分离细胞鉴定。结果分离的细胞角质蛋白阳性子宫内膜腺细胞百分率约90～95%;分离的骨架蛋白形成蛋白阳性的基质细胞百分率达90%以上。结论本研究获得较高纯度的子宫内膜腺细胞和基质细胞,成功建立了研究子宫内膜异位症的细胞模型。     

子宫内膜异位症患者治疗前后血清IL-6、IL-18、IL-1β检测的临床意义

目的：探讨了子宫内膜异位症患者治疗前后血清白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-18（IL-18）和白细胞介素-1β水平的变化及临床意义。方法：应用放免法和酶联法对38例子宫内膜异位症患者进行了血清IL-6、IL-18和IL-1β检测,并与35名正常健康人作比较。结果：在治疗前血清IL-6、IL-18和IL-1β水平均非常显著地高于正常人组（P〈0.01）,经治疗3个月后则与正常人组比较无显著性差异（P〉0.05）。结论：检测子宫内膜异位症患者血清IL-6、IL-18和IL-1β水平的变化对探讨其发病机理、预防和指导临床用药均有重要的临床价值。     

子宫内膜异位症异位内膜IL-6基因表达的研究

目的　探讨子宫内膜异位症 (内异症 )异位内膜白细胞介素 6 (IL 6 )mRNA表达的变化。方法　利用大鼠内异症动物模型 ,采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术 ,检测子宫内膜IL 6mRNA表达情况。结果　正常对照组、内异症模型组在位及异位子宫内膜IL 6mRNA的表达明显不同 ,内异症异位子宫内膜的表达高于内异症在位子宫内膜 ;正常子宫内膜IL 6mRNA的表达较前两者均低。同一时间点各组间比较差异具有显著性意义 (P <0 0 1)。结论　内异症异位内膜IL 6mRNA表达明显增加     

启动子区DNA去甲基化增强子宫内膜异位症患者子宫内膜基质细胞MMP-9的表达

目的研究子宫内膜异位症中基质金属蛋白酶9(MMP-9)基因表达的DNA甲基化调控机制。方法采用甲基化特异性PCR检测在位与异位子宫内膜组织中MMP-9 mRNA的表达,采用免疫组织化学染色检测在位与异位子宫内膜组织中MMP-9蛋白的表达。原代培养子宫内膜异位基质细胞,细胞经5-杂氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-dC)处理后,分析MMP-9基因的表达及其启动子甲基化状态。结果异位子宫内膜组织中MMP-9 mRNA和蛋白的表达高于在位子宫内膜组织。异位子宫内膜组织中MMP-9基因启动子区DNA甲基化水平低于在位子宫内膜组织。5-Aza-dC处理异位子宫内膜细胞后,MMP-9的表达水平升高,MMP-9基因启动子区出现明显的去甲基化。结论 MMP-9基因启动子区DNA去甲基化增强子宫内膜异位症患者异位内膜基质细胞中MMP-9的表达。     

lncRNA MALAT1靶向调控miR-146b-5p影响膀胱癌细胞侵袭和迁移

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)肺腺癌转移相关转录因子1(MALAT1)靶向微小RNA-146b-5p(miR-146b-5p)影响膀胱癌细胞侵袭和迁移的机制。方法:在膀胱癌BIU-87细胞中转染MALAT1 siRNA,以real-time PCR方法测定转染效果,Transwell法测定侵袭及迁移能力,Western blot法检测细胞中上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白波形蛋白(vimentin)、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)和迁移侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白表达的变化。生物信息学软件预测MALAT1与miR-146b-5p有靶向互补位点,利用双萤光素酶报告系统鉴定靶向关系。用real-time PCR方法检测下调MALAT1后BIU-87细胞中miR-146b-5p表达的变化。将MALAT1 siRNA和miR-146b-5p inhibitor共转染至BIU-87细胞中,用上述方法分析细胞侵袭、迁移及vimentin、E-cadherin和MMP-2蛋白表达的变化。结果:转染MALAT1 siRNA可明显下调BIU-87细胞中MALAT...     

子宫内膜异位症患者腹腔液白介素13浓度与异位内膜种植关系的研究

目的　探讨腹腔液白细胞介素 - 13与子宫内膜异位症发病机制的相关性。方法　收集近一年子宫内膜异位症和良性卵巢肿瘤患者腹腔液 ,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法 (ELISA)测定IL - 13浓度。结果　内膜异位症腹腔液中IL- 13的浓度明显低于对照组腹腔液中浓度。两组间比较P <0 .0 1,具有显著性差异。结论　内膜异位症腹腔液中IL - 13的浓度降低 ,对巨噬细胞抑制作用降低 ,可能与内异症免疫发病机制有关。     

子宮内膜异位症在位内膜腺上皮细胞及基质细胞的分离培养和鉴定

目的 分离培养子宫内膜异位症在位内膜组织中子宫内膜腺上皮细胞及基质细胞,建立研究子宫内膜异位症的细胞模型.方法 对分泌期子宫内膜异位症在位内膜组织用混合酶消化,滤网过滤和差速梯度离心的方法分离,体外培养后通过光镜观察及免疫细胞化学、免疫荧光化学方法对分离细胞鉴定.结果 分离的细胞角质蛋白阳性子宫内膜腺细胞百分率约90～95%;分离的骨架蛋白形成蛋白阳性的基质细胞百分率达90%以上.结论 本研究获得较高纯度的子宫内膜腺细胞和基质细胞,成功建立了研究子宫内膜异位症的细胞模型.     

miR-556-3p通过靶基因SASH1调控子宫内膜癌细胞的活力、迁移和侵袭

目的:研究微小RNA-556-3p(miR-556-3p)是否通过靶向SASH1基因调控子宫内膜癌细胞的活力、迁移和侵袭。方法:采用RT-qPCR和Western blot检测miR-556-3p和SASH1的mRNA和蛋白在子宫内膜癌组织中的表达。向子宫内膜癌Ishikawa细胞转染anti-miR-556-3p或pcDNA-SASH1,采用MTT法检测细胞活力,Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭能力,Western blot检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、p21、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9蛋白的表达。StarBase预测和双萤光素酶报告实验分析miR-556-3p和SASH1的靶向关系。将anti-miR-556-3p和si-SASH1共转染Ishikawa细胞,采用上述方法检测其对细胞活力、迁移和侵袭能力的影响。结果:与癌旁组织比较,子宫内膜癌组织中miR-556-3p的表达量显著增加,SASH1的mRNA和蛋白表达量显著减少(P<0.05)。抑制miR-556-3p表达或使SASH1过表达显著降低Ishikawa细胞活力、迁移细胞数、侵...     

子宫内膜异位症患者NK细胞和γδT淋巴细胞分析

目的：探讨子宫内膜异位症患者外周血、腹腔液中NK细胞和γδT淋巴细胞的数量和杀伤功能。方法：取15例子宫内膜异位症患者的外周血和腹腔液,用荧光染色法、流式细胞术和酶标法等测定NK和γδT细胞的数量和杀伤功能。取10例非内异症者外周血和腹腔液作为对照。结果：1．与对照组相比,病例组外周血和腹腔液中的NK细胞数量无明显改变,γδT细胞数量在外周血中无明显差异,但在腹腔液中明显增加（P＜0．05）。病例组中外周血和腹腔液之间NK和γδT细胞数量均有差异,表现为腹腔液中两种细胞所占的百分比明显增高（P＜0．05）。2．病例组与对照组相比,除外周血的γδT细胞外,外周血的NK细胞及腹腔液的NK和γδT细胞的功能均明显下降（P＜0．05）。同一个体中,病例组腹腔液中的NK和γδT细胞的功能比外周血中的明显降低（P均＜0．05）。结论：内异症患者NK和γδT细胞杀伤功能的下降可导致机体清除异位子宫内膜细胞的功能下降,其改变可能在子宫内膜异位症发病过程中起一定的作用。     

子宫内膜异位症相关卵巢癌的发病机制研究

子宫内膜异位症相关卵巢癌(EAOC)与其他类型卵巢癌相比,有发病年龄早,一般50岁左右,病变期别较早,且预后很好等特点,目前关于EAOC发病机制的研究尚未定论.但有专家提出,子宫内膜异位症(EMs)增加了卵巢子宫内膜样癌和透明细胞癌的发生风险.EAOC的发生可能与ARID1A、HNF、miRNAs等基因突变,雌激素和氧化应激等因素密切相关.     

基质金属蛋白酶及其抑制剂在子宫内膜异位症中的研究进展

经血逆流是腹腔子宫内膜异位症的主要发病机制之一，子宫内膜植入其他组织的过程需要细胞外基质的降解，基质金属蛋白酶是降解细胞外基质的重要酶类。近年来研究表明，基质金属蛋白酶及其抑制剂的异常表达在子宫内膜异位症的发生和发展过程中起着重要作用。     

子宫内膜异位症免疫机制研究进展

子宫内膜异位症（endometriosis,EMT）是指具有生长功能的子宫内膜出现子宫腔以外的其他部位。它虽然是一种良性病变但是却具有恶性肿瘤的种植和转移能力,它所引起的慢性盆腔痛、痛经和不孕等严重影响了广大妇女的健康和生活质量。1921年,Sampson首先提出种植学说,虽然被大多人接受,但是它不能解释为什么70%～90%的妇女有经血逆流,而只有10%～15%的妇女形成EMT这一现象。近年来国内郎景和等人提出了＂在位内膜决定论＂。Gazvani R等人的研究也提出：可以肯定的是经血倒流的子宫内膜只有在免疫发生改变的基础上才产生内异症。近年来发现EMT的发生与免疫系统的异常有关,现在有越来越多的学者认为免疫调节在EMT的发生、发展各环节中起到了重要的作用。本文就免疫机制在内异症中的研究进展加以综述。     

lncRNA HCG18调节miR-3619-5p/ITGB2轴对乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响

目的 探讨长链非编码RNA(lnc RNA)人类白细胞抗原复合体18(HCG18)能否通过调控微小RNA(mi R)-3619-5p/整合素β2(ITGB2)轴参与乳腺癌细胞的迁移和侵袭。方法 体外培养人乳腺癌MCF-7细胞系及人乳腺上皮MCF-10A细胞系,qRT-PCR和Westernblot检测lncRNAHCG18、miR-3619-5p、ITGB2的表达水平;Starbase数据库预测lncRNA HCG18、ITGB2与miR-3619-5p的结合位点;利用转染技术将MCF-7细胞分为Control组、si-NC组、siHCG18组、si-HCG18+inhibitor NC组、si-HCG18+miR-3619-5p inhibitor组、miR-NC组、miR-3619-5p mimics组、miR-3619-5p mimics+pcDNA-NC组、miR-3619-5p mimics+ITGB2组,qRT-PCR和Western blot技术检测各组lncRNA HCG18、miR-3619-5p与ITGB2的表达水平,CCK-8、细胞划痕和Transwell实验分别...     

子宫内膜异位症患者细胞和体液免疫的观察

近年来子宫内膜异位症（简称内异症）的发生率呈不断增加趋势［１，２］，现已成为生育期妇女的常见病，严重影响着妇女的身心健康和生育机能。但目前关于内异症的病因及其发病机理尚不完全清楚。为探讨免疫学因素在内异症发病中的作用，我们对５０例内异症患者的外周血的...     

长链非编码RNA PVT1调控miR-551通过Wnt信号通路对卵巢癌迁移和侵袭的影响

目的:探讨长链非编码RNA PVT1在卵巢癌组织中的表达情况及其在卵巢癌细胞迁移和侵袭过程中的作用及机制。方法:q PCR检测卵巢癌和正常卵巢组织及不同卵巢癌细胞中PVT1的表达情况;Transwell侵袭实验和细胞划痕实验分别检测沉默PVT1后卵巢癌细胞侵袭和迁移能力的变化;双萤光素酶报告基因检测PVT1与微小RNA(miR)-551的相互作用;Transwell侵袭实验和细胞划痕实验分别检测沉默PVT1后miR-551-inhibitor对卵巢癌细胞侵袭和迁移能力的影响;Western blot法检测沉默PVT1后Wnt信号通路相关蛋白的表达情况。裸鼠皮下成瘤实验检测沉默PVT1对卵巢癌成瘤重量及体积的影响。结果:与正常卵巢组织相比,卵巢瘤组织中PVT1表达明显增高(P0.05);卵巢癌细胞株ES-2中PVT1表达水平最高(P0.05);沉默PVT1可以抑制卵巢癌细胞侵袭和迁移能力;PVT1能与miR-551的位点特异性结合;沉默PVT1后,miR-551-inhibitor可以促进卵巢癌细胞侵袭和迁移能力;沉默PVT1后Wnt信号通路蛋白的表达相应下调;与阴性对照组相比,PVT1-siRNA组荷瘤小鼠肿瘤体积和重量都明显减小(P0.05)。结论:PVT1在卵巢癌发生发展过程中起重要作用,它可以靶向调节miR-551,通过Wnt信号通路调控卵巢癌细胞的侵袭和迁移能力。     

子宫内膜异位症中基质金属蛋白酶及其抑制剂表达的探讨

基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制剂(TIMP)在子宫内膜异位症的发生发展过程中具有重要作用。MMPs及TIMP与细胞外基质的相互作用,使得异位子宫内膜得以在子宫腔外生存,从而引发机体一系列病理生理改变。MMPs/TIMP的比例失衡是促使子宫内膜异症形成的关键因素之一。     

MiR-17-5p在子宫内膜异位症间质细胞中的表达及其对基质金属蛋白酶-2的影响

目的:探讨miR-17-5p在子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)间质细胞中的表达及其对基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)的影响.方法:MiRNA芯片筛选EMs异位子宫内膜组织中差异表达的miRNA,qRT-PCR验证EMs异位、在位子宫内膜组织和子宫...     

lncRNA XLOC006926抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的研究

目的探讨lnc RNA XLOC006926调控肝癌细胞增殖和转移机制,结合肝癌患者临床病理特征,分析其临床意义。方法利用实时荧光定量PCR方法检测lnc RNA XLOC006926在肝癌细胞系及肝癌患者配对(癌、癌旁)组织(n=88)中的表达水平。进一步通过CCK-8、克隆形成、划痕及transwell实验检测过表达或抑制lnc RNA XLOC006926对细胞增殖、迁移和侵袭的影响,同时结合临床信息统计分析其与临床病理特征及患者预后的相关性。结果 lnc RNA XLOC006926在肝癌细胞及肝癌组织中的表达显著降低,过表达lnc RNA XLOC006926后肝癌细胞增殖、迁移和侵袭能力降低,相反抑制lnc RNA XLOC006926后肝癌细胞增殖、迁移和侵袭能力增强。结合患者临床信息分析,lnc RNA XLOC006926的表达量与肿瘤大小(P=0.007)、PVTT(P=0.024)具有显著相关性,其低表达预示着预后较差。结论 lnc RNA XLOC006926在肝癌发生发展中发挥了重要作用,参与调节肝癌细胞的增殖及迁移,有望成为肝癌发生发展的生物标志物和肝癌预防治疗的新靶点。     

细胞凋亡与子宫内膜异位症的关系

越来越多的证据表明,子宫内膜异位症患者与正常人子宫内膜存在许多不同之处,表现为内异症患者的子宫内膜细胞粘附、侵袭和血管形成能力明显增强,使之具有异位种植和生长的能力,在内异症的发生和发展中起重要作用。最近研究表明,子宫内膜细胞自发性凋亡减弱和对凋亡信号不敏感,可能是内膜细胞具有异位种植和生长能力的重要因素。本文将细胞凋亡在正常子宫内膜周期变化中的作用,以及对子宫内膜异位症发生发展的影响作一综述。