癌相关成纤维细胞在非小细胞肺癌进展中的作用

癌相关成纤维细胞(Cancer-associated fibroblasts, CAFs)是基质和相关肿瘤微环境中的主要成分,在非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer, NSCLC)的发生发展过程中发挥重要的作用。研究表明,CAFs通过分泌多种类型的细胞因子、趋化因子、生长因子和细胞外基质蛋白,参与调控癌细胞的增殖、侵袭、转移和对化疗药物的耐药性。本文将从CAFs的来源、活化机制及其在NSCLC发生发展过程中的作用进行综述,以深入了解NSCLC进展机制并为其治疗提供新思路。     

炎症癌相关成纤维细胞介导结直肠癌细胞耐药的机制研究

背景与目的：结直肠癌（colorectal cancer,CRC）是常见的消化系统恶性肿瘤之一,但是其产生肿瘤耐药的机制仍不清楚。肿瘤微环境（tumor microenvironment,TME）,尤其是其中的癌相关成纤维细胞（cancer-associated fibroblast,CAF）,在肿瘤的发生、发展及耐药过程中都发挥重要作用。本研究旨在探讨炎症CAF(inflammatory CAF,iCAF)对CRC细胞耐药的影响及可能的分子机制。方法：提取来自上海中医药大学附属普陀医院（2022年8月——2022年9月）诊治的CRC患者并经手术切除的CRC组织以获得原代CAF[获得上海中医药大学附属普陀医院伦理委员会批准,编号：PTEC-A-2023-5(S)-1],按照CAF的表面标志物血小板源性生长因子受体α(platelet derived growth factor receptor alpha,PDGFRA)对原代细胞进行分选,筛选出iCAF。使用不添加血清的培养基分别对人结肠成纤维细胞（human intestinal fibroblast,HIF）和iCAF进行培养以获...     

Dickkopf家族蛋白在非小细胞肺癌中的作用机制和治疗应用的研究进展

非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)占所有肺癌的80%~85%,是全世界发病率和致死率极高的恶性肿瘤。最初NSCLC对现有治疗的反应良好,但最终还是产生了耐药性。因此,有必要探索有效且新颖的治疗方法。随着对NSCLC研究的深入,发现Dickkopf家族蛋白(DKKs)的信号传导在NSCLC发展中扮演重要角色,DKKs是Wnt/β-catenin信号通路的重要调节因子,并与NSCLC细胞增殖、转移和侵袭密切相关。本文主要介绍了DKKs家族成员在NSCLC中的作用机制,讨论了DKKs在NSCLC治疗中的潜力,为进一步防治NSCLC提供了新思路。     

TC-1与VEGF在非小细胞肺癌肿瘤组织和淋巴结组织中表达及相关性研究

目的：检测TC-1蛋白和VEGF蛋白在NSCLC中的表达,分析二者表达的相关性及其与Wnt/β-Catenin通路的调控的相关性,为进一步研究TC-1基因在NSCLC中的作用及其机制提供依据。方法：采用免疫组化EnVinsion方法检测TC-1蛋白和VEGF蛋白在95例NSCLC中的表达,统计学分析表达差异性和蛋白间的相关性。结果：免疫组化结果显示TC-1阳性表达主要位于胞浆中和部分胞核,VEGF阳性表达主要位于胞浆中。TC-1、VEGF蛋白在鳞癌、腺癌中高表达,与相应正常组织表达相比差异显著（P﹤0.01）。TC-1、VEGF在NSCLC（鳞癌、腺癌）TNM不同分期的表达强度经检验差异性显著（P=0.014;P=0.011）。有淋巴结转移原发灶TC-1、VEGF蛋白的阳性率为90.57%（48/53）、92.45%（49/53）,无淋巴结转移原发灶阳性率为38.09%（16∕42）、28.57%（12/42）,经spearman秩相关检验差异性非常显著（P=0.000;P=0.016）。TC-1、VEGF在NSCLC中的表达率和阳性强度存在相关性（P=0.000）,相关系数rs=0.691。结论：TC-1在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中高表达,TC-1表达高低与NSCLC总的分期、淋巴结转移与否相关;TC-1与VEGF蛋白在NSCLC及NSCLC与淋巴结转移原发灶中的表达存在很好的相关性,而VEGF基因是Wnt/β-Catenin通路的靶基因,提示TC-1蛋白可能与Wnt/β-Catenin通路的调控存在相关性。     

非小细胞肺癌组织成纤维细胞P-gp的表达及意义

目的:研究非小细胞肺癌组织中成纤维细胞P-gp的表达与临床病理特征的关系,探讨其对患者术后早期复发或远处转移的影响。方法:应用Max VisionTM快捷免疫组化检测48例非小细胞肺癌组织和10例非癌肺组织中成纤维细胞P-gp的表达,随访患者并研究其表达水平与术后早期复发的相关性。结果:非小细胞肺癌组织中成纤维细胞P-gp的表达阳性率为70.8%,明显高于非癌肺组织(P<0.01);成纤维细胞P-gp的表达与患者年龄、肿瘤分化程度、临床分期和有无淋巴结转移有关(P<0.05);与患者性别、大小和肿瘤组织类型无关(P>0.05),P-gp阳性患者术后1年内复发或远处转移率明显高于P-gp阴性患者。结论:P-gp参与了肿瘤细胞的耐药性的形成,肿瘤组织成纤维细胞P-gp的表达水平在患者术后早期复发及远处转移中具有重要意义。     

Wnt/β-catenin信号通路在非小细胞肺癌中作用的研究进展

Wnt/β-catenin信号通路在胚胎发育和细胞增殖、分化等生理过程中扮演着重要角色,同时它在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)的肿瘤干细胞(cancerstemcell, CSCs)的维持、血管生成和上皮间充质转化(epithelial-mesenchymaltransition, EMT)中起着至关重要的作用。有多项研究证实Wnt/β-catenin信号通路在NSCLC中被显著激活,随着对Wnt/β-catenin信号通路的研究,靶向Wnt/β-catenin信号通路疗法在NSCLC的治疗中取得了显著成效。本文对Wnt/β-catenin信号通路在NSCLC发生和发展中的作用以及治疗研究进行概述。     

BRCA1通过Wnt/β-catenin通路对非小细胞肺癌H1650细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的:探讨人乳腺癌易感基因1 (breast cancer susceptibility gene 1,BRCA1)通过Wnt/β-catenin通路对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)H1650细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法:采用WB法和qPCR法检测NSCLC细胞系A...     

血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的：探讨血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)在非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及临床意义。方法：应用免疫组织化学方法检测96例NSCLC组织中VEGF、bFGF蛋白水平的表达，其中36例应用RT－PCR技术检测上述基因mRNA表达。结果：NSCLC中VEGF mRNA主要表达分泌性VEGF121和VEGF165，阳性率分别为69．5％（25／36）和41．7％（15／36），bFGF mRNA阳性率为52．8％（19／36）；免疫组化显示VEGF、bFGF阳性表达率分别为55．6％（20／36）和58．3％（21／36），二者之间呈正相关（P＝0．002）；VEGF、bFGF表达与患者年龄、性别、病理类型、分化程度、TNM分期、肿瘤转移、生存期等临床资料之间无统计学意义。结论：VEGF、bFGF在NSCLC血管形成中起重要作用，且二者具有协同作用。     

成纤维细胞活化蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义

目的： 检测人非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）组织中成纤维细胞活化蛋白（fibroblast activation protein,FAP）mRNA的表达,探讨FAP mRNA与NSCLC临床特征及预后之间的关系。 方法： 2004年6月至2006年12月选取天津医科大学附属肿瘤医院组织库中247例NSCLC患者瘤组织标本和对应的48例癌旁组织标本,患者随访至2011年12月1日。采用实时荧光PCR检测NSCLC组织和正常肺组织中FAP mRNA。临床病理参数与FAP mRNA相对表达量的相关性分析采用Mann-Whitney U检验,以Kaplan-Meier法绘制生存曲线,用log-Rank检验比较患者的生存差异,采用Cox回归模型评估独立的预后因素。 结果： FAP mRNA在NSCLC组织中过表达。NSCLC组织中FAP mRNA表达水平与NSCLC患者KPS评分成正相关（P<0.05）,而与肿瘤原发部位、肿块大小、淋巴结转移、临床分期、组织学类型等其他病理特征无明显关系（P>005）。高表达FAP mRNA 的NSCLC患者与低表达者相比,中位总生存时间（overall survival,OS）无明显差异（43 vs 39个月,P>0.05）。进一步以组织学类型分层分析显示,肺腺癌患者FAP mRNA表达量与临床分期成负相关（P=0.031）,与KPS评分成正相关（P=0.041）。高表达FAP mRNA的肺腺癌患者与低表达者相比,中位OS时间显著延长（42 vs 26个月,P<005）,多因素分析进一步证实FAP mRNA表达是影响肺腺癌患者预后的独立因素。 结论： FAP在NSCLC组织中高表达,FAP mRNA高表达与肺腺癌的临床分期呈负相关,并与肺腺癌患者的预后密切相关。     

Wnt蛋白生成抑制剂2对非小细胞 肺癌细胞迁移与侵袭能力的影响

目的：探讨Wnt蛋白生成抑制剂2（the inhibitor of Wnt production 2,IWP2）对非小细胞肺癌细胞迁移与侵袭能力的影响。方法：体外培养非小细胞肺癌H1299和95C细胞,分为对照组（无血清培养基）及实验组（应用10 μmol/L IWP2处理24或48 h）。采用划痕实验和未铺Matrigel胶的Transwell迁移实验检测IWP2对细胞迁移能力的影响;铺有Matrigel胶的Transwell侵袭实验检测IWP2对细胞侵袭能力的影响;Western blot实验检测IWP2对非小细胞肺癌细胞中β-catenin及上皮间充质转化（EMT）相关蛋白ZEB1、Snail表达的影响。结果：划痕实验结果显示,经10 μmol/L IWP2处理24 h后,与对照组比较,实验组H1299和95C细胞的划痕愈合面积均明显降低（P < 0.01）;在Transwell迁移实验中,实验组过膜细胞数明显降低（P < 0.01）;Transwell侵袭实验结果显示,实验组细胞表现出更低的侵袭能力（P < 0.01）。Western blot结果表明,H1299和95C细胞在经IWP2作用后,与对照组比较,β-catenin的表达水平分别降低41.3%和36.1%（P均 < 0.01）;IWP2也抑制了EMT相关蛋白ZEB1、Snail的表达,与对照组比较,实验组H1299和95C细胞中,ZEB1的表达水平分别降低51.8%和40.9%,Snail表达水平分别降低43.2%和30.7%,差异均具有统计学意义（P均 < 0.01）。结论：IWP2抑制β-catenin的表达并抑制非小细胞肺癌细胞发生EMT,从而降低细胞的迁移与侵袭能力。     

肿瘤相关成纤维细胞促进肺癌细胞表达PD-L1

背景与目的 肿瘤相关成纤维细胞(tumor-associated fibroblasts,TAF)是肿瘤微环境的重要组成部分,可抑制免疫细胞的功能.在肿瘤免疫中CD8+T细胞发挥重要的作用,T细胞膜表面程序性死亡因子1(programmed death factor 1,PD-1),与其配体PD-L1(programmed death factor ligand 1,PD-L1)结合对T细胞的激活起负调节作用.本研究旨在探讨TAF对肺癌细胞PD-L1表达的影响.方法 我们以肺癌细胞株H1975、H520和TAF细胞进行Transwell非接触式共培养48 h的H1975、H520细胞为实验组,单独培养的H1975、H520细胞为对照组,两组培养条件一致.倒置显微镜计数实验组和对照组H1975、H520细胞数、流式细胞仪分别检测实验组和对照组肺癌细胞PD-L1的蛋白表达率、RT-PCR分别检测实验组和对照组肺癌细胞PD-L1 mRNA的表达.结果 每100μm2细胞计数,H1975细胞实验组为(46±21)个,对照组为(16±5)个(P<0.05);H520细胞实验组为(38±10)个,对照组为(12±5)个(P<0.05).PD-L1蛋白表达率,H1975细胞实验组为(20.93%±3.54%),对照组为(12.58%±2.52%)(P<0.05);H520细胞实验组(19.26%±3.04%),对照组为(11.60%±2.65%)(P<0.05).mRNA表达水平,H1975细胞实验组为(16.45±1.25)pg/mL,对照组为(7.78±1.27)pg/mL(P<0.05);H520细胞实验组为(15.38±2.02)pg/mL,对照组为(7.20±1.58)pg/mL(P<0.05).结论 TAF促进肺癌细胞株H1975、H520的生长,增强细胞株PD-L1表达.     

MUC-1癌症疫苗治疗非小细胞肺癌的研究进展

肺癌是全球癌症死亡的主要原因,仍是肿瘤科最大的挑战之一。尽管早期手术、放化疗和靶向治疗等治疗方式不断改进,使约20%的患者有根治性治疗的机会,但肺癌患者的5年生存率仍仅有15%。随着肿瘤免疫治疗研究的不断发展,发现癌症疫苗通过激活T、B淋巴细胞,增强免疫应答来清除肿瘤细胞,从而达到治疗癌症的目的。对于靶向黏蛋白-1（MUC-1）抗原表位的疫苗已经进行大量的临床研究,并取得了突破性进展。本文将围绕MUC-1疫苗治疗非小细胞肺癌（NSCLC）的研究进展作一综述。     

Wnt/β-catenin信号通路对非小细胞肺癌NCI-H23细胞干性的调控作用

目的 探讨Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路对非小细胞肺癌NCI-H23细胞干性的调控作用。方法 以非小细胞肺癌NCI-H23细胞为对象,以糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）抑制剂（CHIR-99021）和β-catenin siRNA为干预剂,分别采用噻唑蓝比色法、体外干细胞成球培养、划痕实验及免疫印迹法检测其增殖能力、体外成球能力和迁移能力方面的改变。结果 CHIR-99021作用24 h 后NCI-H23细胞的增殖能力、干细胞成球率均明显提升,与对照组的差异均有统计学意义 （P＜0.05）,划痕愈合时间缩短。CHIR-999021干预后的NCI-H23细胞、NCI-H23干细胞中,GSK-3β磷酸化显著降低,增殖细胞核抗原、CD133、乙醛脱氢酶1A1、Nanog、基质金属蛋白酶-2表达增加。β-catenin siRNA沉默β-catenin后NCI-H23中 CD133、乙醛脱氢酶1A1和Nanog表达减少,干细胞成球率也较对照组降低（P＜0.05）。结论Wnt/β-catenin通路参与了非小细胞肺癌NCI-H23细胞干性调节,这对于非小细胞肺癌的防治有一定价值。     

Vacquinol-1对非小细胞肺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨Vacquinol-1对非小细胞肺癌细胞系A549、NCI-H1299细胞增殖和凋亡的影响及可能机制。方法:以不同浓度的Vacquinol-1作用于A549和NCI-H1299细胞,应用CCK-8法检测其对细胞增殖能力的影响;以半数致死浓度（half maximal inhibitory concentration,IC50）作用于细胞,流式细胞术Annexin V/PI双染色法检测细胞的凋亡情况;Western blotting法检查凋亡相关蛋白Caspase-3、Bcl-2和Bax表达的变化情况。结果:CCK-8结果显示Vacquinol-1能显著抑制A549、NCI-H1299细胞的增殖能力;并且流式细胞术检测结果显示Vacquinol-1能诱导A549、NCI-H1299细胞的凋亡;Western blotting结果显示Vacquinol-1促进A549、NCI-H1299细胞Caspase-3、Bax的表达,抑制Bcl-2的表达。结论:Vacquinol-1能够抑制非小细胞肺癌细胞的增殖,并且通过激活线粒体通路诱导细胞凋亡。     

影响晚期非小细胞肺癌预后的相关因素分析

目的:探讨影响晚期非小细胞肺癌(NSCLC)预后的相关因素,为NSCLC的治疗提供参考.方法:对72例ⅢA～Ⅳ期NSCLC患者的临床资料进行回顾性分析,对晚期NSCLC预后的相关因素进行Logistic回归分析,筛选影响晚期NSCLC预后的相关因素.结果:单因素分析结果显示,KPS评分、临床分期、放化疗方式、手术与否与晚期NSCLC预后有关,x2值分别为15.421、4.676、33.124和8.932,P值分别为0.000、0.032、0.000和0.003;多因素Logistic回归法分析表明,放化疗方式、KPS评分是晚期NSCLC预后的独立因素,RR分别为2.339 37和2.136 42,P<0.05.结论:KPS评分、放疗和化疗结合方式是影响晚期NSCLC患者生存的独立预后因素,对这2个因素加以重点评估和合理控制,可为晚期NSCLC患者治疗方法选择以及预后判断提供可靠的指标.     

lncRNAPCGEM1对肺癌A549细胞恶性生物学行为的影响及其作用机制

目的：探讨长链非编码RNA（long-chain noncoding，lncRNA）PCGEM1 对肺癌A549 细胞恶性生物学行为的影响及其作用机制。方法：收集2016 年3 月至2018 年5 月湖北医药学院附属太和医院胸外科接受手术治疗的62 例肺癌（lung cancer，LC）患者癌组织及相应的癌旁组织标本，并用以上组织构建LC组织芯片。用qPCR检测lncRNA PCGEM1 及miR-148a 在LC组织相应的癌旁组织及LC细胞株中的表达。构建lncRNA PCGEM1 沉默细胞系A549-siPCGEM1 和阴性对照A549-NC，并以A549 细胞作为空白对照（Control 组），用MTT和平板克隆实验检测敲减PCGEM1 对A549 细胞增殖能力的影响，Transwell 和划痕实验检测敲减PCGEM1 对A549 细胞侵袭和迁移能力的影响。使用生物信息学网站StarBase 预测可互补结合PCGEM1的miRNA，再根据Targetscan 网站预测相应可靶向结合miRNA的基因；Western blotting 实验检测TGF-β2/Smad2 信号通路蛋白表达情况。结果：在LC组织中PCGEM1 的表达水平高于癌旁组织而miR-148a 的表达量明显低于癌旁组织（均P<0.05），PCGEM1 在5 种LC细胞株中的表达明显高于人肺成纤维细胞HLF-02（均P<0.05），且以A549 细胞中表达最高。敲减PCGEM1 后，与Control 组和A549-NC 组比较，A549-siPCGEM1 组A549 细胞增殖、侵袭和迁移能力显著降低（均P<0.05）。StarBase 和Targetscan 网站预测结果显示，PCGEM1 可与miR-148a 互补结合，miR-148a 与TGF-β2 存在靶向结合位点。与Control 组和A549-NC组比较，A549-siPCGEM1 组中miR-148a 表达明显升高，TGF-β2 及p-Smad2 蛋白的表达明显降低（均P<0.05）。结论：lncRNA PCGEM1在LC组织和细胞株中高表达，高表达的PCGEM1 可通过下调miR-148a 水平强化TGF β2/Smad2 信号通路，从而促进A549 细胞恶性生物学行为的进展。     

SCRN1在口腔鳞状细胞癌肿瘤相关成纤维细胞中的表达及对HSC3细胞株生物学特性的影响

目的:探究胞吐作用相关蛋白(SCRN1)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)中的表达及对CAFs分泌MMP2功能的影响,进一步研究CAFs对HSC3细胞株迁移、侵袭能力的影响。方法:通过免疫组织化学染色(IHC)检测SCRN1在OSCC组织及癌旁组织中的表达。原代培养、分离、纯化、验证正常成纤维细胞(NFs)和CAFs,用免疫细胞化学染色法(ICC)、蛋白免疫印迹(WB)、qRT-PCR检测NFs、CAFs中SCRN1的表达情况。CCK-8、Transwell实验检测NFs、CAFs及CAFs-shSCRN1增殖、迁移及侵袭能力。收集NFs、CAFs上清并用ELISA和明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶2(MMP2)水平及活性,然后分别与HSC3细胞株共培养,探究两种上清共培养对HSC3细胞株迁移、侵袭能力的影响。沉默CAFs的SCRN1基因后,收集CAFs、CAFs-shSCRN1和CAFs-Vector上清并检测MMP2水平及活性,然后分别与HSC3共培养,探究三种上清培养条件对HSC3细胞株迁移、侵袭能力的影响。结果:SCRN1在OSCC组织中阳性表达率及表达水平...     

PD-1信号通路在非小细胞肺癌中的研究进展

摘 要：近年来,对于程序性死亡因子-1（programmed death-1,PD-1）与肿瘤免疫逃逸关系的研究已越来越深入,尤其是对以PD-1信号通路为靶点的临床肿瘤治疗研究取得了令人瞩目的进步。全文对PD-1及其信号通路的理论基础、临床前证据及以PD-1通路为靶点在NSCLC中治疗研究进展进行综述,并对其应用前景进行展望。