巨噬细胞外泌体源miR-223促进胃癌细胞对奥沙利铂的耐药研究

背景与目的：化疗耐药是导致胃癌患者预后不良的重要因素，阐明胃癌细胞化疗耐药的机制有助于为临床治疗提供新思路，具有重要的现实意义。探讨巨噬细胞外泌体源miR-223对胃癌细胞奥沙利铂化疗敏感性的影响及作用机制。方法：将购自中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库/中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心的胃癌细胞与巨噬细胞及其来源外泌体共培养，检测miR-223的表达水平并观察其对奥沙利铂的化疗敏感性。采用荧光显微镜观察巨噬细胞是否通过外泌体传递miR-223至胃癌细胞。采用细胞计数试剂盒-8（cell counting kit-8，CCK-8）、细胞凋亡实验观察巨噬细胞外泌体源miR-223对胃癌细胞奥沙利铂化疗敏感性的影响。采用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction，RTFQ-PCR）检测胃癌患者外周血外泌体源miR-223的表达水平，分析其与奥沙利铂耐药的关系。结果：巨噬细胞及其外泌体与胃癌细胞共培养后，胃癌细胞对奥沙利铂化疗的敏感性降低，半数抑制浓度（half inhibition concentration，IC ₅₀ ）明显升高；同时miR-223相对表达量明显增加。采用荧光显微镜观察发现，巨噬细胞通过外泌体传递miR-223至胃癌细胞。巨噬细胞外泌体源miR-223通过调控FBXW7增强胃癌细胞抗凋亡能力，促进其对奥沙利铂的耐药。奥沙利铂耐药胃癌患者外周血外泌体miR-223的表达水平显著升高。结论：巨噬细胞通过外泌体传递miR-223增强胃癌细胞对奥沙利铂的耐药，外周血外泌体源miR-223有望成为胃癌患者化疗耐药的监测指标。     

肿瘤来源外泌体抗肿瘤免疫研究进展

摘 要：外泌体为体内活细胞释放的微小囊泡,直径范围为30nm~100nm,内含蛋白质、核酸、脂质等,作为细胞间信息交换的载体。不同细胞分泌的外泌体由于其不同的微环境而发挥不同的作用。肿瘤细胞分泌的外泌体对荷瘤体的免疫调节起着重要的作用,表现为免疫促进或抑制,主要为抗肿瘤免疫。全文就肿瘤来源外泌体抗肿瘤免疫的研究进展作一综述。     

外泌体在肿瘤化疗耐药与转移中作用研究进展

摘 要：外泌体是一种由绝大多数细胞释放的、具有脂质双分子层和丰富内容物的微囊泡结构。近年来发现外泌体中不仅包含功能性蛋白,还有功能性核酸物质,这些蛋白质和核酸等在调节肿瘤微环境、促进细胞间通讯、促进肿瘤耐药与侵袭转移方面起了关键作用,参与肿瘤进程。全文主要总结了国内外有关外泌体在肿瘤化疗耐药与转移方面的研究进展,以更好地了解外泌体在促进肿瘤耐药和转移的相关机制。     

肿瘤及肿瘤基质细胞释放的外泌体对肿瘤耐药产生的影响

恶性肿瘤已成为当今严重威胁人类健康的疾病之一,存在早发现难、治愈率低和预后差等三大难点.虽然,化疗是癌症治疗的主要手段,但由此产生的耐药也是当今影响疗效的最棘手问题之一,从而使患者面对无药可用的尴尬境地.外泌体(exosomes)作为细胞间信息传递的重要通讯员,在肿瘤耐药传递方面发挥重要作用.研究发现,肿瘤细胞和肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)中的基质细胞均可分泌携带耐药相关分子(包括蛋白质和miRNAs等)的外泌体,并通过外泌体在TME中相互作用,传递耐药分子,从而增强肿瘤细胞对药物的耐受性;同时肿瘤细胞外泌体还可以介导药物外排,从而影响药效;基质细胞也可与肿瘤细胞相互作用影响肿瘤细胞对药物的敏感性.同时,这些机制的发现也为克服肿瘤耐药提供了新思路,研究表明通过去除或抑制含耐药分子的外泌体,或者通过改变外泌体的成分(减少耐药分子或增加抗耐药分子),可在一定程度上逆转耐药.本文就肿瘤及肿瘤基质细胞释放的外泌体在肿瘤耐药中的作用以及由此而来的耐药逆转的研究进展作一综述.     

恶性肿瘤来源外泌体在巨噬细胞M2极化中作用的研究进展

外泌体是纳米(30~150 nm)膜结合囊泡,内部包含多种生物活性物质,如脂质、蛋白质、mRNA以及非编码RNA等,在正常和病理条件下几乎所有细胞都可以分泌。研究发现肿瘤细胞可通过分泌外泌体将核酸、蛋白质等生物活性分子传递给受体细胞,改变受体细胞的表型或功能,进一步改变肿瘤微环境而影响肿瘤的进展。本文根据研究进展对肿瘤细胞外泌体在改变巨噬细胞表型方面所发挥的作用进行简要的介绍。     

肿瘤与免疫细胞通过外泌体相互作用的研究进展

摘 要：外泌体是一种所有细胞均可分泌的由内吞而形成的一种双层膜的囊泡。肿瘤细胞来源的外泌体(TEXs)作为肿瘤微环境的重要组成部分,能够通过抑制或改变免疫细胞对癌细胞的免疫反应、促进肿瘤生长和转移。同时,免疫细胞也可以感受来自于TEXs的刺激,进而对肿瘤的生长产生影响。因此,肿瘤细胞与免疫细胞之间的相互作用,决定了机体肿瘤发生发展的进程,而外泌体在此过程中发挥了重要作用。全文就肿瘤细胞与免疫细胞通过外泌体进行相互作用的研究进行总结,以进一步揭示外泌体在肿瘤免疫调节过程中发挥的作用,并为其在疫苗、制药、生物治疗等相关领域的应用及产品开发提供参考。     

肿瘤外泌体的提取与鉴定

外泌体是由各种细胞产生的囊泡样结构,包含蛋白质、脂质、遗传物质如mRNA、miRNA等,能参与到肿瘤的发生、发展、侵袭、转移中。外泌体对于肿瘤的早期诊断、治疗、预后检测均有重要的作用。根据其生物学特性,外泌体可以在体液中检测到,本文就外泌体的收集、提取及鉴定外泌体的方法进行概述。     

肿瘤来源外泌体在诱导肿瘤相关成纤维细胞生成中作用的研究进展

在肿瘤微环境（TME）中,肿瘤来源外泌体（TDE）可被成纤维细胞摄取,并诱导后者分化为肿瘤相关成纤维细胞（CAF）,而CAF又可通过多种机制促进肿瘤的发展。了解TDE诱导CAF形成的作用机制,对基于TME理念的靶向治疗具有重要意义。目前,绝大多数研究均是采用超速离心或试剂盒提取等方法从人源性肿瘤细胞中提取TDE,将其与成纤维细胞进行共培养,再通过检测α-平滑肌肌动蛋白和成纤维细胞活化蛋白等特征蛋白的表达以鉴定CAF。进一步机制研究发现,TDE所携带的某些蛋白或miRNA可通过转化生长因子-β/SMAD、肿瘤坏死因子-α/核因子-κB、细胞外调节蛋白激酶1/2/血管细胞黏附蛋白-1和Ras超家族三磷酸鸟苷激酶-35/MMP1/MMP3等多条通路促进CAF的生成,其结果是促进肿瘤细胞的增殖和迁移、破坏细胞外基质成分、促进微血管生成,以及提高小鼠体内的成瘤能力。     

外泌体miRNA在黑色素瘤转移和耐药中的作用

转移和耐药的发生是黑色素瘤逃脱靶向化疗药物毒性伤害的主要方式,也是导致临床靶向治疗失败和病情复发的最重要因素。外泌体是由细胞分泌的外囊泡,内含微小RNA（miRNA）、mRNA、小分子蛋白等多种生物活性物质,在肿瘤进展、诊断等方面发挥重要作用。外泌体miRNA通过协助黑色素瘤细胞穿过基底膜,诱导上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）,促进转移前微环境建立,参与黑色素瘤转移。同时在化疗药物治疗过程中,外泌体miRNA通过进入黑色素瘤细胞中重新激活MAPK/PI3K信号通路,进而导致耐药产生。因此,探究外泌体miRNA在黑色素瘤转移和耐药过程中的功能和机制作用对于提高和改善癌症患者的治愈率和预后状态具有重要意义。     

外泌体在乳腺癌耐药方面的研究进展

摘 要：外泌体是从正常细胞和肿瘤细胞中释放出来的膜源性小泡,可介导细胞间的物质交换和信息交流。越来越多的研究表明,外泌体在乳腺癌耐药过程中发挥重要作用,并且可作为预测、监测疗效的候选标志物以及逆转耐药的潜在靶点或载体。全文对外泌体在乳腺癌耐药方面及其在乳腺癌诊疗中的临床应用研究进展进行总结。     

癌相关成纤维细胞外泌体通过抑制铁死亡促进前列癌恶性侵袭

目的 研究癌相关成纤维细胞(CAFs)外泌体通过抑制铁死亡对前列腺癌细胞增殖和侵袭能力的影响。方法 原代培养源于人前列腺癌基质CAFs及癌旁基质NFs(正常成纤维细胞),超速离心法提取CAFs外泌体(CAFs-exo)和NFs外泌体(NFs-exo),并通过透射电镜和Western blot进行鉴定。将外泌体分别和前列腺癌22rv1细胞和PC-3细胞共培养,观察细胞增殖、迁移和侵袭能力变化,检测细胞活性氧(ROS)水平、铁死亡及其相关蛋白表达。结果 CAFs高表达α-SMA、FAP和FSP-1。与NFs-exo相比,CAFs-exo可促进22rv1细胞和PC-3细胞增殖及迁移、侵袭(P<0.05),并抑制脂质ROS累积和细胞死亡,铁死亡相关蛋白呈现GPX4表达增高和NRF2、ACSL4水平下调,迁移相关蛋白N-cadherin水平增高而E-cadherin表达下调。结论 CAFs外泌体可以通过抑制铁死亡促进前列腺癌细胞增殖和侵袭。     

外泌体在非小细胞肺癌中的研究进展

肺癌发病率和死亡率位居世界癌症前列。超过80%的肺癌为非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC),大多数患者在最初就诊时已出现局部进展或转移性疾病。外泌体是一种膜结合纳米囊泡,由活细胞释放,含有多种生物分子,如蛋白质、RNA、代谢物,甚至是药理化合物。外泌体广泛地分布于体液中,包括血浆、唾液、母乳、脑脊液等。越来越多的证据表明,外泌体在NSCLC的发生、微环境、治疗和耐药等方面发挥着重要作用。在这篇综述中,我们将对NSCLC来源的外泌体在肿瘤生长、转移、免疫应答和耐药等方面的作用进行综述。最后,我们将展望外泌体在非小细胞肺癌中的临床价值。     

前列腺癌LNCaP-AI+F细胞外泌体促进基质细胞WPMY-1 功能活化

[摘要] 目的：探讨前列腺癌外泌体对基质细胞WPMY-1 迁移和侵袭能力的影响及其作用机制。方法：超速离心法提取前列腺癌LNCaP-AI+F细胞上清中的外泌体,电镜观察外泌体的典型形态结构,Zetaview 检测外泌体的粒径分布,Wb鉴定外泌体标志蛋白及其他相关蛋白。将WPMY-1 细胞与前列腺癌外泌体（40 μg/ml）共孵育后,激光共聚焦显微镜观察WPMY-1 细胞对PKH67 标记的外泌体的摄取情况,Transwell 实验检测WPMY-1 细胞迁移和侵袭能力,qPCR检测IL-8、PDGFB和MMP9 等三种肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblast,CAF)分子表达水平,Wb检测EGFR和ERK1/2 蛋白磷酸化水平。结果：电镜下可观察到典型茶托状外泌体结构,外泌体粒径分布集中在100 nm左右,其标志蛋白CD63 和ALIX的表达证实了所提取颗粒为外泌体。此外,外泌体还表达EGFR、HER2 和SRC 等三种与前列腺癌进展相关的蛋白。WPMY-1 细胞与外泌体共孵育后,共聚焦显微镜下可看到该细胞摄取大量外泌体,明显促进WPMY-1 细胞的迁移和侵袭能力（均P<0.01）;与对照组比较,外泌体（40 μg/ml）处理后WPMY-1 IL-8、PDGFB及MMP9 表达水平增高（P<0.05 或P<0.01）;且外泌体促进了WPMY-1 细胞EGFR和ERK1/2 的磷酸化（P<0.01）。结论：前列腺癌细胞可通过外泌体作用于基质细胞WPMY-1,使其高表达多种CAF 相关分子,促进EGFR 和ERK1/2 的磷酸化,增强其迁移和侵袭能力。     

不同细胞来源外泌体对肿瘤微环境的重塑作用

囊泡转运是细胞间沟通的重要方式。随着蛋白质组学、代谢组学、RNA组学等多组学联合研究的发展和进步,研究人员发现外泌体是细胞间通讯的重要信号转导媒介和介质。外泌体携带大量生物活性分子,对细胞生物学功能的发挥具有重要的调控作用,影响肿瘤细胞的特性。越来越多的证据表明,外泌体的功能与其来源的细胞及其内含物成分密切相关。肿瘤来源外泌体以自分泌和旁分泌的方式诱导癌细胞和基质细胞生理功能和代谢状态的改变,基质细胞来源外泌体参与建立、支持和营养肿瘤细胞的肿瘤微环境,并且不同免疫细胞来源外泌体可能呈现截然相反的功能。本文就不同细胞来源外泌体在肿瘤微环境中的作用和机制进行综述,为外泌体在肿瘤诊断、治疗及预后评估中的应用提供参考。     

外泌体蛋白相关肿瘤标志物研究进展

肿瘤早期诊断是其预防和治疗的关键,有效的肿瘤标志物是肿瘤早期诊断的重要手段之一.肿瘤细胞能够分泌外泌体(exosomes),其在电镜下呈杯状,直径30～150 nm,被脂质双分子层包围,广泛存在于各种体液中.外泌体内容物包括蛋白质、短肽链、脂质、核苷酸等,其中外泌体蛋白可作为潜在的肿瘤诊断标志物.与活体组织样本检测相比...     

外泌体介导肿瘤产生化疗耐药的机制

在肿瘤的治疗中,耐药是一个严峻的挑战。外泌体是细胞释放的直径为40～150 nm的膜状囊泡,通过传递mRNAs、miRNAs、DNA和蛋白质介导细胞间的通讯,从而导致耐药。它们通过向药物敏感细胞转移药物转运体,传递抗凋亡信号或增加DNA修复等方式介导治疗耐药性。更好地了解外泌体介导肿瘤产生化疗耐药的机制,有助于发现新的治疗靶点和改进现有的抗肿瘤策略。     

外泌体装载的微小RNA及其在肿瘤中的作用

外泌体中含有多种脂质、蛋白质、微小RNA(miRNA)等成分,并能将其装载的物质运输至受体细胞而发挥生物学作用.外泌体装载的miRNA在肿瘤发生发展中发挥重要作用,与肿瘤的生长、转移、抗药性、免疫调节密切相关.外泌体及其装载的miRNA可以作为肿瘤转移和预后的参考指标,并为肿瘤的治疗提供新的靶点.     

癌相关成纤维细胞来源的外泌体在肺恶性肿瘤中的研究进展

肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)是分布在肿瘤细胞周围的动态网络,癌相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)作为肿瘤微环境中的一部分,不但与正常成纤维细胞密切相关,而且可以分泌多种物质(包括外泌体)参与肿瘤微环境的调控.外泌体不仅与肺恶性肿瘤...     

外泌体环状RNA在前列腺癌中的研究现状

环状RNA(circular RNA,circRNA)是一种具有共价闭环结构的非编码RNA,可在肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭和耐药等多种生物学过程中发挥重要的调控作用。外泌体是一种细胞外囊泡,参与细胞间的物质运输和信息传递,能够携带脂质、蛋白质和核酸等多种生物活性分子。外泌体中circRNA富集且稳定存在,外泌体来源的circRNA在泌尿系统恶性肿瘤的早期诊断、病情进展及预后评估中发挥重要作用。本文就circRNA的生物学特性和功能及外泌体circRNA在前列腺癌中的研究现状进行综述。     

肿瘤相关成纤维细胞来源外泌体miRNA对结直肠癌发展的促进作用研究进展

肿瘤相关成纤维细胞(CAF)是结直肠癌(CRC)肿瘤微环境的重要组成部分.CAF与肿瘤细胞相互作用分泌各种趋化因子和细胞因子,促进了肿瘤的发生和发展.随着CAF的深入了解,发现CAF所释放的外泌体miRNA在CRC发病机制中发挥重要作用.外泌体miRNA可调控相关靶基因表达,调控肿瘤细胞增殖、干性、转移和治疗抵抗.并且异常表达的miRNA也有望为CRC的诊断及治疗提供参考.本文就CAF外泌体miRNA在肿瘤微环境中对CRC的影响作一综述,以期为深入探究CAF在CRC中的作用提供新的线索.