P2嘌呤受体在内耳中的分布特性和功能

在听觉系统中,外源性三磷酸腺苷(ATP)除作为耳蜗活性物质外,还可作为神经递质或调质,参与Corti器内感觉毛细胞及支持细胞的各种生理功能,从而产生一系列效应,调节耳蜗听觉生理功能;ATP的这种作用主要是通过P2嘌呤受体介导的信号传导完成的,现就P2嘌呤受体在内耳的分布特点及介导的信号传导在耳蜗听功能中的生物学作用作一综述.     

P2嘌呤受体在大鼠耳蜗发育中的差异表达及其意义

三磷酸腺苷作为一种重要的神经递质,参与耳蜗内各种细胞的生理功能,并可通过P2嘌呤受体介导的信号转导发挥作用.现就P2嘌呤受体介导的信号转导、在不同发育阶段大鼠耳蜗中的差异表达及其在耳蜗发育中的作用进行介绍,以期为研究耳蜗发育机制提供新的思路和方法.     

耳蜗中的ATP和一氧化氮/环磷酸鸟苷途径

三磷酸腺苷(ATP)和一氧化氮/环磷酸鸟苷途径(NO/cGMP pathway)都存在于耳蜗中并且是耳蜗生理功能的重要调节因子。ATP通过与细胞膜上的嘌呤能受体结合提高细胞内的Ca~(2+)浓度。NO/cGMP途径可以降低细胞内的Ca~(2+)浓度,而这个途径的关键酶一氧化氮合成酶(nNOS和eNOS)可以在Ca~(2+)和钙调蛋白(CaM)结合的条件下被激活,这提示我们:在耳蜗中这两种调节因子之间可能有一定的关系。本文通过对文献的复习,综述了这两种调节因子在耳蜗中的作用,并且提示人们综合而全面地认识它们之间以及它们与耳蜗生理功能之间的相互关系。     

耳蜗螺旋神经节细胞的电生理实验研究现状

耳蜗螺旋神经节细胞(spiral gaaglion cell，SGC)，可将毛细胞的信号传向听觉中枢，在听觉信息的传导中起着极其重要的作用。目前，应用全细胞记录膜片钳技术，证实了SGC细胞膜上可表达多种离子通道，如电压门控离子通道，ATP控制的离子通道，神经递质受体介导的离子通道等，而各种病理状态下的SGC均伴有某些特定离子通道的电变化。对这些电变化的研究，将为我们在细胞和分子水平上诊断和治疗许多由内耳疾病所导致的耳聋和听力障碍提供可能。     

应用LsAB技术显示五羟色胺受体亚型1A在小鼠螺旋神经元上的分布

目的显示五羟色胺（serotonin,5-HT）受体亚型1A在螺旋神经元上的分布。方法采用出生后3～6天的乳小鼠耳蜗进行冰冻切片,应用酶标链亲和素-生物素（labeled streptavidin-biolin technique,LsAB）技术显示五羟色胺受体亚型1A在螺旋神经元上的分布。结果实验组的乳鼠耳蜗螺旋神经元的细胞膜显示阳性信号,阴性对照组的乳鼠耳蜗螺旋神经元的细胞膜上未发现阳性信号。结论五羟色胺受体亚型1A存在于耳蜗螺旋神经元的细胞膜上,推测当毛细胞释放兴奋性神经递质引起螺旋神经元兴奋时,五羟色胺作为神经递质对螺旋神经元的听觉传导活动起着重要的调节作用。     

耳蜗螺旋神经节细胞的电生理实验研究现状

耳蜗螺旋神经节细胞(spiral gaaglion cell,SGC),可将毛细胞的信号传向听觉中枢,在听觉信息的传导中起着极其重要的作用.目前,应用全细胞记录膜片钳技术,证实了SGC细胞膜上可表达多种离子通道,如电压门控离子通道,ATP控制的离子通道,神经递质受体介导的离子通道等,而各种病理状态下的SGC均伴有某些特定离子通道的电变化.对这些电变化的研究,将为我们在细胞和分子水平上诊断和治疗许多由内耳疾病所导致的耳聋和听力障碍提供可能.     

听觉中枢各因子与听力损伤的关系

耳蜗为重要的听觉感受和传导器官,其损伤后将影响声音信号感受及传导,改变外周听觉传导通路,从而导致听觉中枢产生一系列病理生理改变。本文综述了细胞生长因子、神经营养因子、兴奋性和抑制性氨基酸、原癌基因、抑癌基因等,在耳蜗损伤后,在听觉中枢中表达的变化。但这些因子在     

GABAB受体对位听神经脑干传入通路神经活动的影响

目的本实验旨在探讨GABA能神经递质及GABA。受体对电刺激位听神经传人脑干通路兴奋性变化的影响。方法使用出生后0～5d的ddy／ddy小鼠制备脑干切片。脑片经电压敏感染料NK3041染色，电刺激与脑片相连的位听神经残端，使用16×16像素的硅光电二极管阵列测量膜电位变化引起的电压敏感染料吸光度的改变。观察GABA及GABAB受体拮抗剂2-Hydroxysaclofen（saclofen）对神经活动的影响，使用ARGUS-50/PDA软件分析实验数据。结果多部位的光学记录方法显示了从位听神经到耳蜗核和前庭核兴奋性传导的时间-空间分布。神经活动可用电位或色彩的改变显示。每一个像素记录的电信号由快的峰电位样反应和慢反应组成。抑制性神经递质GABA可降低快的峰电位样反应及慢反应的幅度；GABA。受体拮抗剂saclofen能够部分逆转GABA的作用，随着saclofen（50μmol/L～100μmol/L）的浓度增加，在耳蜗核及小脑可引起去极化电位增强及后超极化电位。结论电刺激位听神经在脑干传入通路可引起兴奋性神经活动，GABA及saclofen对诱发的神经活动有调节作用，提示GABA及GABA。受体在听觉传入通路和小脑担负重要的生理功能。     

耳蜗血管纹缘细胞三磷酸腺苷释放机制

三磷酸腺苷（adenosine triphosphate,ATP）被认为是耳蜗中一种重要的信号分子,可以作为共同递质和（或）神经调节物质发挥耳蜗的各种生理功能。目前已证实新生大鼠耳蜗血管纹缘细胞内的ATP囊泡为溶酶体,可以释放ATP。然而,缘细胞释放ATP的机制还未完全阐明,本文结合国内外文献就耳蜗缘细胞中ATP释放机制的研究现状做一综述。     

α-氨基羟甲基噁唑丙酸受体与听觉神经系统

α-氨基羟甲基噁唑丙酸（AMPA）受体是脊柱动物中枢神经系统一类主要的兴奋性神经递质受体,在中枢神经系统的信号传导、神经发育以及突触的可塑性等方面都起着至关重要的作用.本文阐述了AMPA受体在听觉神经系统中的分布、生物学特征及和它在听觉神经系统发育、突触传递过程中所起的作用.     

457耳蜗传出神经系统与听觉调控活动

随着对听觉系统研究的逐步深入，耳蜗传出神经系统－橄榄耳蜗束对耳蜗听觉的调控作用日益受到重视，本综述了有关橄榄耳束的解剖和生理功能的研究结果。     

DR5在GJB2基因条件敲除小鼠耳蜗表达分布及年龄相关性变化

目的研究GJB2基因条件敲除（cCx26Pax2Cre）小鼠耳蜗DR5表达情况，探讨GJB2基因突变导致耳聋的机制。方法 cCx26Pax2Cre小鼠为实验组，BALB/C小鼠为对照组，分别取P8、P12和P21时小鼠耳蜗行冰冻切片，利用荧光标记免疫组织化学方法和激光共聚焦显微镜技术观察死亡受体5（death receptor，DR5）蛋白在耳蜗的表达情况，用Image Pro Plus 6.0计算平均光密度值，SPSS 18.0进行统计分析。结果 P8时DR5主要表达在柯蒂氏器外侧的支持细胞、耳蜗外侧壁Ⅱ型纤维细胞、盖膜，随着日龄的增加，表达逐渐向内侧延伸到内侧支持细胞，P12和P21时还出现了螺旋缘、毛细胞、螺旋神经节细胞、螺旋凸DR5表达阳性，而且表达强度随日龄增加而逐渐变强。在野生小鼠DR5也有表达但较弱。与野生型小鼠相比， cCx26Pax2Cre小鼠耳蜗蜗轴螺旋管内神经纤维DR5表达的光密度值明显增大，经统计学分析两者具有显著性差异（P＆lt;0.05）。结论 cCx26Pax2Cre小鼠缝隙连接功能异常，可能导致耳蜗细胞出现葡萄糖短缺，导致三磷酸腺苷（adenosine-triphosphate， ATP）不足，引起DR5的表达上调，直接激活凋亡的死亡受体途径，或间接激活线粒体通路使凋亡信号进一步放大，导致耳蜗细胞凋亡的发生，最终引起cCx26Pax2Cre小鼠听力下降。     

耳蜗钾循环中Na—K-2C1与听觉生理关系的研究进展

耳蜗钾循环对维持正常听觉生理功能具有重要作用。耳蜗钾循环途径中涉及诸多离子通道，本文就其中的Na—K-2C1联合转运子（NKCC）-1与听觉生理关系的研究进展综述如下。     

耳蜗核受体移植与老年性聋

随着分子生物学技术在耳科学领域的应用，感音性聋与中枢听觉核团细胞神经递质受体结构与功能变化的关系成为人们所关注的新课题。本综述了近年来发展耳蜗核存在的几种神经递质受体，并探讨了受体移植在老年性聋发生机理研究中的作用。     

GABAB受体对位听神经脑干传人通路神经活动的影响

目的 本实验旨在探讨GABA能神经递质及GABAB受体对电刺激位听神经传入脑干通路兴奋性变化的影响.方法 使用出生后0～5 d的ddy/ddy小鼠制备脑干切片.脑片经电压敏感染料NK3041染色,电刺激与脑片相连的位听神经残端,使用16×16像素的硅光电二极管阵列测量膜电位变化引起的电压敏感染料吸光度的改变.观察GABA及GABAB受体拮抗剂2-Hydroxysaclofen(saclofen)对神经活动的影响,使用ARGUS-50/PDA软件分析实验数据.结果 多部位的光学记录方法显示了从位听神经到耳蜗核和前庭核兴奋性传导的时间-空间分布.神经活动可用电位或色彩的改变显示.每一个像素记录的电信号由快的峰电位样反应和慢反应组成.抑制性神经递质GABA可降低快的峰电位样反应及慢反应的幅度;GABAB受体拮抗剂saclofen能够部分逆转GABA的作用,随着saclofen(50μmol/L～100μmol/L)的浓度增加,在耳蜗核及小脑可引起去极化电位增强及后超极化电位.结论 电刺激位听神经在脑干传人通路可引起兴奋性神经活动,GABA及saclofen对诱发的神经活动有调节作用,提示GABA及GABAB受体在听觉传人通路和小脑担负重要的生理功能.     

人工耳蜗植入的手术技术

人工耳蜗的作用是刺激听神经，在大脑形成听觉信号。使用这种技术的前提是听觉神经的通路是完整的，已经失去功能的耳蜗用于安放刺激电极（图1，2）。     

耳蜗钾循环中Na-K-2Cl与听觉生理关系的研究进展

耳蜗钾循环对维持正常听觉生理功能具有重要作用.耳蜗钾循环途径中涉及诸多离子通道,本文就其中的Na-K-2Cl联合转运子(NKCC)-1与听觉生理关系的研究进展综述如下.     

多巴胺对豚鼠耳蜗谷氨酸受体NMDA NR_1和NMDA NR_(2A)的调节作用

目的观察豚鼠耳蜗谷氨酸受体NMDANR1和NMDANR2A与多巴胺调节作用的相关性,探讨多巴胺在内毛细胞下突触复合体中的作用机制。方法选用杂色豚鼠40只,随机分组,每组10只．分别以右耳行全耳蜗灌流人工外淋巴液和不同浓度的多巴胺,并以人工外淋巴液灌流组的对侧耳蜗作为正常对照组,则共为5组（每组10耳）：①正常对照组;②人工外淋巴液组;③10mmol／L多巴胺组;④30mmol／L多巴胺组;⑤50mmol／L多巴胺组。在灌流前、灌流0、1、2h同时记录各组动物耳蜗电图,应用半定量RT—PCR的方法,观察各组间谷氨酸受体NMDANR1和NMDANR2A的mRNA表达量是否有差异。结果多巴胺对豚鼠4000Hz耳蜗复合动作电位产生抑制作用,使其阈值升高,且这种抑制作用呈现明显的量效依赖关系。与正常对照组和人工外淋巴液组比较,其余三组谷氨酸受体NMDANR1的mRNA表达量明显减少（P〈0．05）,NMDANR1的表达量与灌流多巴胺的浓度呈现明显的浓度剂量依赖关系;谷氨酸受体NMDANR2A的mRNA表达量在各组间差异均无统计学意义（P〉0．05）,随着灌流多巴胺浓度的增加,NMDANR2A的表达量没有明显变化。结论多巴胺可通过减少谷氨酸受体NMDANR1的量来实现对听觉通路抑制的作用,而谷氨酸受体NMDANR2A不参与多巴胺的抑制作用。     

突触内吞关键蛋白Dynamin在小鼠耳蜗内毛细胞中的表达研究

目的研究生理情况下Dynamin各亚型在小鼠耳蜗内毛细胞(IHC)的表达分布特点,为探讨其在毛细胞内可能发挥的生理功能以及与听信号传导的关系做铺垫。方法取成年小鼠耳蜗基底膜行免疫荧光染色,激光共聚焦显微镜观察Dynamin各亚型表达及定位分布情况。结果 Dynamin各亚型在小鼠耳蜗内毛细胞中均有表达。其中,Dyna-min-1表达于整个内毛细胞内,Dynamin-2点状分布在内毛细胞胞质,Dynamin-3高表达于内毛细胞核下近螺旋神经节区域。结论网格蛋白介导内吞过程是毛细胞内吞作用的重要机制,作为该过程中的关键蛋白,Dynamin各亚型在耳蜗内毛细胞中均有表达,提示Dynamin在内毛细胞中可能发挥着重要的生理功能。