定量PCR分析HBsAg阳性肝癌患者手术前后血清HBVDNA变化

目的：明确外科手术对ＨＢｓＡｇ阳性肝癌患者乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）复制的影响。方法：以常规聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法检测了２０例ＨＢＶ血清学标志阳性肝癌患者血清中的ＨＢＶＤＮＡ；应用荧光能量转移定量聚合酶链反应（ＱＰＣＲ）测定肝癌手术切除前后病人血清中ＨＢＶＤＮＡ量的变化情况。结果：在部分肝癌病人（４０％）血清中可以检测到ＨＢＶＤＮＡ；外科手术后较手术前病人血清ＨＢＶＤＮＡ拷贝数增高（Ｐ＜０．０１）。结论：乙型肝炎病毒仍然在大部分肝癌病人体内进行着活跃的复制；外科干预在部分病人中引起病毒复制增加。     

HBV感染者外周血单个核细胞中HBV DNA的检测

目的；研究乙型肝炎毒（ＨＢＶ）感染者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）中ＨＢＶ ＤＮＡ的存在及其与血清ＨＢＶ ＤＮＡ的关系。方法：用ＰＣＲ法及斑点杂交法对５０例ＨＢｓＡｇ（＋）的感染者ＰＢＭＣｓ ＨＢＶ ＤＮＡ进行检测。同时用ＰＣＲ法检测感染者血清ＨＢＶ ＤＮＡ。结果：ＰＣＲ法和斑点杂交法分别从３５份和３２份ＰＣＭＣｓ检出率均为６０．０％左右。ＰＣＲ法检测血清ＨＢＶ ＤＮＡ阳性率为３６．０％。结论：Ｈ     

荧光定量聚合酶链反应测定乙型肝炎患者血清HBV—DNA及其意义

目的探讨荧光定量聚合酶链反应（简称 ＦＱ－ＰＣＲ）检测 ＨＢＶ－ＤＮＡ的临床意义。方法对 １１５例乙型肝炎患者的血清同时进行乙肝两对半、ＡＬＴ、ＡＳＴ及ＨＢＶ－ＤＮＡ测定。结果大三阳患者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率为 １００％,平均含量为 １０７．２３±１．６４拷贝／ｍｌ;小三阳患者血清 ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率为 ５９．６％,平均含量为 １０６．２１±１．５１拷贝／ｍｌ;两组之间的 ＨＢＶ－ ＤＮＡ含量差异有显著性。乙肝两对半全阴性 ２２例,有 ６例 ＨＢＶ－ ＤＮＡ阳性,其平均浓度为１０４．１２±１．３８拷贝／ｍｌ与大、小三阳患者的浓度差异有非常显著性。结论ＦＱ－ＰＣＲ法检测乙肝患者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ具有快速、特异、灵敏等优点,它对乙型肝炎的诊断、治疗、预防具有重要的临床意义。     

定量PCR在HBV临床研究中的应用

自 198 9年聚合酶链反应 (ＰＣＲ)技术应用于临床检测以来 ,对ＨＢＶ感染的研究提供了一种快速而敏感的有效手段。然而 ,ＰＣＲ临床应用亟待解决不能定量和污染所致的假阳性等问题。随着分子生物学的飞速发展 ,ＰＣＲ检测不仅能定性 ,且也能定量检测 ,从核酸分子杂交到定量ＰＣＲ技术检测ＨＢＶＤＮＡ ,其灵敏度和特异性不断提高。本文就目前几种ＨＢＶＤＮＡ定量检测方法及其临床应用综述如下。1　ＨＢＶＤＮＡ的定量检测方法1 1　斑点杂交法　系一种固相杂交技术。将含有ＨＢＶＤＮＡ的样本点在硝酸纤维膜上 ,再与特异性探针进行杂交 ,经…     

用聚合酶链反应检测乙肝患者血清中的HBV－DNA

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测了１１４例传染科门诊病人血清ＨＢＶ－ＤＮＡ，并与ＨＢＶ有关的血清学标志（ＨＢＶＭ）进行了比较。结果表明：在９２和ＪＨＢｓＡｇ（＋）病例中，ＰＣＲ检测ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者５０例，占５４．３４％；在２８例ＨＢｅＡｇ（＋）病例中，ＰＣＲ检测ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者２６例，占９２．８６％；在２０例ＨＢＶＭ均为阴性的病例中，ＰＣＲ检测ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者有６例，占３０．００％。证明ＰＣＲ法检测ＨＢＶ－ＤＮＡ较用ＥＬＩＳＡ法检测抗原一抗体更加灵敏、可靠。     

荧光定量PCR技术在检测HCV—RNA中的应用

目的 评价荧光定量ＰＣＲ技术测定ＨＣＶ－ＲＮＡ水平的价值,探讨ＰＢＭＣ中检出ＨＣＶ－ＲＮＡ的意义。方法 采用荧光定量ＫＲ及ＲＴ－ＰＣＲ技术同时检测８７例血液透析患者的血清和淋巴细胞中ＨＣＶ－ＲＮＡ。结果血清、淋巴细胞中ＨＣＶ－ＲＮＡ的荧光定量ＰＣＲ检出率（４９．４％、６９．０％）,分别高于相应标本中ＨＣＶ－ＲＮＡ的ＲＴ－ＰＣＲ阳性率（３３．３％、３５．６％）（Ｐ ＜０．０５）。血清、淋巴细胞中同时检出ＨＣＶ－ＲＮＡ的一致率,荧光定量ＰＣＲ法（３１．０％）显著高于ＲＴ－ＰＣＲ定性法（６．９％）（Ｐ＜０．００１）． 荧光定量ＰＣＲ法,淋巴细胞中ＨＣＶ－ＲＮＡ检出率高于血清（Ｐ＜０．０１）。结论 与 ＲＴ－ＰＣＲ相比,荧光定量ＰＣＲ技术检测 ＨＣＶ－ＲＮＡ敏感性较高,对ＰＢＭＣ内ＨＣＶ－ＲＮＡ检测有利于提高ＨＣＶ检测的阳性率。     

385例HBsAg阳性人群中HBV-DNA、HBeAg、抗-HBC的分布情况

测定血清中ＨＢＶ -ＤＮＡ是目前诊断乙型肝炎、判断ＨＢＶ复制和评价肝脏病变及预后的重要指标 ,采用ＰＣＲ法检测ＨＢＶ -ＤＮＡ能更准确、更敏感地反映ＨＢＶ的复制情况 ,而抗 -ＨＢＣ及ＨＢｅＡｇ阳性则标志病毒复制 ,血清有很强的传染性。本文用ＰＣＲ法检测了 385例ＨＢｓＡｇ阳性人群中的血清ＨＢＶ -ＤＮＡ ,以及用ＥＬＩＳＡ法测定其ＨＢｅＡｇ及抗 -ＨＢＣ ,现将结果报告如下。1　材料和方法1.1　病人资料　 385例系本院门诊检查中ＥＬＩＳＡ法查出的ＨＢｓＡｇ阳性之人群 ,其中男性 2 6 3例 ,女性 12 2例。1.2　主要仪器　ＰＣＲ…     

PCR检测HBV—DNA及其临床意义探讨

应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）检测肝炎患者血清中的乙肝病毒ＤＮＡ（ＨＢＶ－ＤＮＡ），以探讨ＰＣＲ技术在乙肝病毒感染诊断中的应用，及ＨＢＶ－ＤＮＡ与血清ＨＢＶ标记ＨＢＶ－Ｍ之间的关系。结果表明１１５例ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率与ＨＢＶ活动复制情况相一致，认为ＰＣＲ方法灵敏度高，特异性强，为早期发现病人的ＨＢＶ的隐性感染提供了可靠的手段。     

PCR检测乙肝病人肝组织和血中HBVDNA

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）结合地高辛素标记的乙肝病毒ＤＮＡ探针（ＨＢＶＤＮＡ－Ｄｉｇ）杂交技术检测了４９份乙型肝炎患者的肝组织标本和４６份血清标本中的ＨＢＶＤＮＡ。结果表明：ＰＣＲ检出乙肝病人肝组织和血清中ＨＢＶＤＮＡ阳性率比斑点杂交高（Ｐ＜０．０５）。在２１例同时检测了肝组织和血清中ＨＢＶＤＮＡ的病人中，肝组织ＨＢＶＤＮＡ阳性率为５７．１％（１２／２１）；血清阳性率为６１．３％（１３／２１）；两者总阳性率为８０．９％（１７／２１），说明用ＰＣＲ同时检测肝组织和血中ＨＢＶＤＮＡ，可明显提高ＨＢＶＤＮＡ的检出率。     

套式PCR技术检测肝细胞癌患者血清HBV DNA

应用套式聚合酶链反应（套式ＰＣＲ）技术检测了１６例肝细胞癌（ＨＣＣ）患者血清中ＨＢＶＤＮＡ，并与ＰＣＲ结合Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交（ＰＣＲ－ＳＢＨ）的方法作了比较。２种方法灵敏度均可达１０￣（－５）ｐｇ。套式ＰＣＲ无需制备探针，试验周期短，更适于推广。１６例ＨＣＣ患者检出ＨＢＶＤＮＡ９例（５６．２５％）。ＨＢｓＡｇ阳性组９例检出４例，ＨＢｓＡｇ阴性组４例检出２例。３例未测ＨＢＶ血清标记物均检出ＨＢＶＤＮＡ。结果表明ＨＣＣ患者血清中仍有ＨＢＶＤＮＡ低水平复制，仍具传染性。     

应用PCR和ELISA两种方法检测HBV的对比分析

用ＰＣＲ和ＥＬＩＳＡ两种方法同时检测了３９７例含有ＨＢＶ．ＤＮＡ免疫标志物一项以上阳性的乙肝病人血清和５０例正常人血清，结果在３９７例具有一项以上阳性的ＨＢＶ免疫标志物血清中，有１８６例在ＰＣＲ法检出ＨＢＶ．ＤＮＡ阳性，为４６．９％，正常人全部为阴性，按ＨＢＳＡｇ阴性，阳性分组，则ＨＢＳＡｇ阳性２９９例，ＰＣＲ检出ＨＢＶ．ＤＮＡ阳性１７１例，阳性率为５７．２％，ＨＢＳＡｇ阴性９８例，ＰＣＲ检出ＨＢ     

PCR检测血清HBV—DNA与其血清HBVM关系的探讨

作者利用ＰＣＲ技术检测了血清中的ＨＢＶ—ＤＮＡ并探讨了血清中ＨＢＶ—ＤＮＡ与ＨＢＶＭ之间的关系。发现有些传统上的血清学检测已不能准确地反映血清中ＨＢＶ—ＤＮＡ的实际情况，作者认为应该用更灵敏的ＰＣＲ技术去做出诊断及评价     

乙型病毒性肝炎的基因诊断

对１２０例乙肝病毒（ＨＢＶ）感染者血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ用ＰＣＲ技术进行检测，结果表明，ＰＣＲ法的敏感性阳性检出率７５．８％，明显高于ＥＬＩＳＡ法（ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和ＨＢＣＡｂ）的阳性率分别为６１％、３８％和６２％）；ＰＣＲ检测ＨＢｓＡｇ和ＨＢＡｂ一血清的ＨＢＶ－ＤＮＡ，阳性率分别为２６％、５２％和２４％，ＰＣＲ检测三者均为阳性血清的ＨＢＶ－ＤＮＡ，阳性率为１００％慢性迁延肝炎、慢性活动性肝炎     

PCR检测血清HBV—DNA与其血肖HBVM关系的探讨

作者利用ＰＣＲ技术检测了血清中的ＨＢＶ－ＤＮＡ并探讨了血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ与ＨＢＶＭ之间的关系。发现有些传统上的血清学检测已不能准确地反映血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ的实际情况，作者认为应该更灵敏的ＰＣＲ技术去做出诊及评价。     

聚合酶链反应和原位杂交检测成人肾炎肾组织HBV DNA

目的 探讨乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染与成人肾小球肾炎（肾炎）之间的联系,及研究ＨＢＶ对肾脏的致病作用。方法 应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和原位杂交（ＩＳＨ）技术检测３９例血清ＨＢＶ标志物阳性的成人肾有活检组织ＨＢＶ ＤＮＡ的存在状态。结果 用ＰＣＲ法测定肾活检组织抽提物ＨＢＶ ＤＮＡ１７／３９例阳性（４３．６％）,其中５例ＰＣＲ阳性者再且地高辛素标记的ＨＢＶ ＤＮＡ探针原位杂交,测定肾活检石腊包埋切     

PCR检测乙肝病人肝组织和血中HBVDNA

有用聚合酶链反庆（ＰＣＲ）结合地高辛素标记的乙肝病毒ＤＮＡ探针（ＨＢＶＤＮＡ－Ｄｉｇ）杂交技术检测了４９例乙型肝炎患者的肝组织标本和４６份血清标本中的ＨＢＶＤＮＡ。结果表明：ＰＣＲ检出乙肝病人肝组织和血清中ＨＢＶＤＮＡ阳性率比为杂交高（Ｐ〈０．０５）。在２１例同时检测了肝组织和血清中ＨＢＶＤＮＡ的病人中，肝组织ＨＢＶＤＮＡ一率为５７．１％；血清阳性率为６１．３％；两者总阳性率为８０．９％，说明ＰＣ     

用聚合酶链反应检测乙肝患者血清中的HBV—DNA

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测了１１４例传梁科门诊病人血清ＨＢＶ－ＤＮＡ，并与ＨＢＶ有关的血清学标志（ＨＢＶＭ）进行了比较。结果证明ＰＣＲ法检测ＨＢＶ－ＤＮＡ较用ＥＬＩＳＡ法检测抗原－抗体更加灵敏、可靠。     

应用PCR技术检测慢性乙肝病毒性肝病血清及外周血单个核细胞中HBV－DNA

本文应用多聚酶连反应（ＰＣＲ）技术检测了１０４例慢性乙肝病毒性肝病患者血清及外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中ＨＢＶ－ＰＮＡ，并与放免法进行了比较。结果显示，ＰＣＲ检测结果更能客观地反应ＨＢＶ在体内存在的状态，在外周血单个核细胞中有ＨＢＶ感染；１０４例慢性肝病患者外周血单个核细胞中ＨＢＶ－ＤＮＡ的检出率为２８．８％，而血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ阴性的２０例患者有７例ＰＢＭＣ中检测出ＨＢＶ－ＤＮＡ，占３５％。因此，在检测血清ＨＢＶ标志物及ＨＢＶ－ＤＮＡ的同时检测ＰＢＭＣ中的ＨＢＶ－ＤＮＡ可进一步防止ＨＢＶ传播与输血后肝炎的发生。     

PCR技术检测HBV DNA对降低输血后肝炎发病率的研究

本文对５８例输血后肝炎（ＰＴＨ）及５１例正常健康供血员，应用ＰＣＲ技术检测血清中ＨＢＶＤＮＡ。其结果为５８例ＰＴＨ中５０例ＨＢＶＤＮＡ阳性，占８６．２％；５１例健康供血员中７例ＨＢＶＤＮＡ阳性，占１３．７％；说明目前对供血员常规的检测方法ＲＰＨＡ、ＲＩＡ、ＥＬＩＳＡ等尚不敏感，只能检测出ｐｇ级以上的ＨＢＶＤＮＡ，尚不能完全清除混入的ＨＢＶ携带者。ＰＣＲ技术高度敏感，可检测出ｆｇ级ＨＢＶＤＮＡ，相当于血清感染最低限度，用此方法筛检供血员，对确保血源质量，降低输血后肝炎的发病率有其重要社会意义。     

PCR与ELISA法检测乙肝血清标志物对比分析

用ＰＣＲ技术检测４８例肝病患者，５５例非肝病患者血清ＨＢＶＤＮＡ，ＥＬＩＳＡ法检测其血清五项标志物，肝病组ＰＣＲ阳性率为３１．３％，非肝病组ＰＣＡ阳性率为１１．４％。ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｂ阳性组ＨＢＶ－ＤＮＡ１００％阳性；ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｂ阳性、ＨＢｅＡｂ阳性或阴性组ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性５０％；单项ＨＢｓＡｂ阳性组ＨＢＶＤＮＡ阳性２０％；五项标志物全阴ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性４．７％。结果表明，ＰＣＲ技术特异性强、敏感度高，但两种方法各有所长，不宜取代。