高压氧对快速减压致中枢神经损伤诱发神经元凋亡的效用

目的研究成年大鼠快速减压致中枢神经系统（CNS）损伤后神经组织细胞凋亡的变化及高压氧（HBO）暴露的效用。方法SD大鼠40只，按随机数字法分为10组，每组4只，即正常对照组、安全减压组、快速减压4个组（1．0MPa暴露5．5min后快速（50S）减至常压后6，24，48，72h组）、HBO4个组（快速减压后5h给予0．25MPa HBO暴露60min）。大鼠均分别于快速减压后6，24，48和72h同期取大脑，用原位末端TUNEL法标记凋亡细胞，光学显微镜下观察形态学改变和高倍镜计数阳性细胞计算凋亡指数。结果正常对照组和安全减压组未标记出TUNEL阳性细胞；快速减压致伤动物6h组CNS组织内仅见少量散在阳性细胞；24h组凋亡指数较6h组增加（P〈0．01）；48和72h组明显增加，达到高峰（P〈0．01）；TUNEL阳性凋亡细胞主要为神经元细胞。HBO暴露组24h组神经元凋亡指数明显较快速减压组相同时间组降低（P〈0．05），48h和72h组降低更加显著（P〈0．01）。结论神经元凋亡是快速减压致CNS损伤中神经元丧失的重要形式之一：HBO暴露能够减少损伤后期的神经元凋亡，对保存神经元、改善预后起到重要作用。     

PYK2在海人酸癫痫大鼠海马神经元及小胶质细胞中的表达变化

目的 观察海人酸癫痫大鼠海马内神经元和小胶质细胞中PYK2的表达并探讨其意义。方法 建立海人酸大鼠癫痫模型，大鼠癫痫发作后8、24、72h后处死大鼠，采用免疫组化方法观察大鼠海马内小胶质细胞的活化状况，以及海马神经元和活化后小胶质细胞中PYK2的表达变化。结果 与正常大鼠相比，癫痫大鼠中PYK2的表达在癫痫发作8h后急剧下降，并随时间推移继续下降。癫痫发作24h后，海马中出现大量呈阿米巴形状、强烈表达活化型PYK2的活化型小胶质细胞；癫痫后72h，海马中出现大量有活化型PYK2强表达的“杆”状活化型小胶质细胞。结论 癫痫可致海马神经元及小胶质细胞PYK2表达变化；小胶质细胞中活化型PYK2的表达可能与小胶质细胞活化有关。     

小胶质细胞表面受体在多巴胺能神经元损伤中的作用

小胶质细胞广泛存在于中枢神经系统各区域[1],可表达多种类型的神经递质受体,通过分泌多种趋化因子和细胞因子从而与周围的免疫细胞产生相互作用。深入认识小胶质细胞表面的神经递质受体及其在小胶质细胞功能调控中的作用,将有助于深化人们对多种疾病的认识,并将进一步促进探索新的神经退行性疾病治疗手段。1小胶质细胞概述     

脊髓减压病大鼠神经细胞凋亡及神经生长因子的保护作用

目的探讨脊髓减压病对大鼠脊髓神经细胞凋亡的影响及神经生长因子的保护作用。方法SD大鼠随机分为正常对照组、安全减压组、生理盐水组和神经生长因子治疗组，建立大鼠脊髓减压病模型．于出舱后0，10，30，60，120min经蛛网膜下腔各注入20μl生理盐水或神经生长因子，在6，24，48，72h用TUNEL法标记脊髓神经细胞凋亡，免疫组织化学方法检测TNF-α蛋白表达。结果脊髓减压病大鼠出舱后6h组出现少量脊髓神经细胞凋亡及TNF—α蛋白表达，24h组阳性染色明显增强，48h组达到高峰，神经生长因子治疗后神经细胞凋亡及TNF—α蛋白表达明显减少，与生理盐水组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。TNF—α蛋白表达与神经细胞凋亡存在正相关（P〈0．05）。结论神经细胞凋亡是脊髓减压病大鼠的重要病理变化，TNF—α可能参与了脊髓减压病继发损伤，神经生长因子可以减轻脊髓减压病的神经细胞损伤。     

无荚膜隐球菌CAP64对小胶质细胞凋亡的影响

目的　观察无荚膜隐球菌CAP64对鼠小胶质细胞凋亡的影响。方法　无荚膜隐球菌CAP64与小胶质N9细胞株共孵育,用流式细胞仪检测5个不同时段N9细胞的凋亡指数。结果　2、4、8、16、24h N9细胞平均凋亡指数分别为9 33%、12 93%、15 37%、16 30%、20 5%,与空白组、灭活组凋亡指数比较,差异均有显著性(P<0 05)。结论　无荚膜隐球菌CAP64可以诱导小胶质细胞凋亡。     

放射诱导大鼠脑神经元和胶质细胞凋亡及敏感性的比较研究

目的　探讨X射线照射对大鼠脑神经元和胶质细胞凋亡的影响。方法　大白鼠分对照组及 2 ,4 ,6 ,8GyX射线照射组 ,照射后 1,2 ,4 ,6 ,12 ,2 4h分别取材进行光镜、电镜及DNA电泳观察 ,并用双标法计数凋亡的神经元数、胶质细胞数。结果　照射后鼠脑细胞系 2种细胞均产生凋亡的改变 ,胶质细胞凋亡率较神经元升高显著 (P <0 0 0 0 1) ,随着剂量的增高细胞凋亡率逐渐增多。结论　X射线能诱导鼠脑神经元和胶质细胞凋亡 ,凋亡率有剂量依赖性和时间规律性 ,其中胶质细胞最敏感。     

活化小胶质细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的疗效初探

目的 研究活性小胶质细胞移植对脊髓损伤后大鼠运动功能恢复的作用.方法 选用成年雌性Wistar大鼠40只,随机分为4组,前两组为运动功能观察组,采用自制改良Allen脊髓打击装置打击脊髓,建立中度脊髓损伤的动物模型,分成移植组和对照组,每组10只.后两组为组织学观察组,用相同方法制作动物模型,也分为移植组与对照组,每组10只.在动物模型制作早期进行新生大鼠小胶质细胞的培养、分离以及纯化,并对小胶质细胞进行鉴定和细胞纯度的测定.移植组术后7 d再次暴露损伤部位,微量注射器以损伤部位为中心注射移植活化小胶质细胞悬液.而对照组不移植.运动功能观察组分别在移植后第1天、第1,2,3,4周对大鼠进行运动功能评分;组织学观察组在相同时相点进行Naoumenko及Feigin小胶质细胞石蜡切片染色,每个时间点移植组和对照组每组随机抽取两只大鼠取材切片,镜下观察并计数小胶质细胞.对所得数据进行统计学分析.结果 术后1,2,3,4周,对照组与移植组随时间延长BBB评分均逐渐升高,移植组术后2,3,4周后肢运动功能评分较对照组明显升高(P＜0.05);Naoumenko-Feigin染色计数,移植组比同期对照组阳性细胞数显著增多(P＜0.05).结论 小胶质细胞移植可促进脊髓损伤大鼠后肢运动功能的恢复.     

减压性损伤大鼠脑脊液对离体小胶质细胞肿瘤坏死因子-α的影响

目的观察气压性中枢神经损伤动物脑脊液（cerebrospinal fluid，CSF）对离体小胶质细胞的刺激作用，探讨小胶质细胞激活参与气压性中枢神经损伤的机制。方法极快速减压制备气压性中枢神经损伤大鼠模型，收集致伤后或高压氧（hyperbaric oxygen，HBO）处理后的动物CSF，分别以正常动物CSF、致伤动物CSF、HBO动物CSF和／或基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMPs）阻断剂GM6001为条件介质刺激新生的SD大鼠大脑皮层原代培养小胶质细胞。用流式细胞分析术检测肿瘤坏死因子-α（mTNF—α）、肿瘤坏死因子-α转换酶（TNF—α convertingenzyme，TACE）含量的变化，L929细胞毒性实验测定上清内可溶性TNF—α（sTNF—α）的生物活性。结果致伤组和HBO组sTNF—α均较对照组显著增加（P〈0．01，P〈0．05），HBO组比致伤组显著减少（P〈0．01），增加GM6001处理后的结果与对照组间的差异均无统计学意义（P〉0．05）；致伤组小胶质细胞表面的mTNF—α蛋白比对照组增加了约2．35倍，HBO组与致伤组无明显差异，GM6001显著增加致伤组的mTNF-α，但对HBO组的作用不明显；致伤组小胶质细胞表面的TACE蛋白总量比对照组增加2.98倍，HBO组比致伤组降低1.97倍。结论极快速减压损伤动物CSF中存在大量刺激小胶质细胞反应的活性物质，刺激小胶质细胞TNF—α和TACE的合成，增加sTNF—α的分泌，可起到继发损伤作用。HBO治疗可以减少极快速减压致伤动物CSF中小胶质细胞刺激物的含量，起到神经元保护作用。TACE在小胶质细胞分泌TNF—α中起重要作用。GM6001可以通过减少小胶质细胞TNF—α的分泌，在改善小胶质细胞激活诱导的继发性损伤中与HBO起协同作用。     

胶质细胞源性神经营养因子对大鼠脊髓损伤后前角神经元的保护作用

目的　研究胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)对大鼠脊髓损伤后前角运动神经元的保护作用。　方法　雄性SD大鼠 4 5只随机分为等渗盐水组、GDNF组、神经生长因子 (NGF)组 ,每组 15只 ,采用改良Nystr¨om法后路压迫大鼠胸段脊髓模型 ,经蛛网膜下腔局部注射GDNF(1μg μl,10 μg d) 1周。伤后 1,2 ,4周应用尼氏染色、酶组织化学染色方法观察前角运动神经元存活数目及胆碱酯酶 (CHE)和酸性磷酸酶 (ACP)的变化。　结果　脊髓损伤后第 1,2周 ,GDNF组前角运动神经元存活数目 [(2 1.4± 3.8,2 0 .7± 3.6 )个 前角视野 ]明显多于等渗盐水对照组的 (17.3± 2 .8,16 .5± 3.0 )个 前角视野 (P <0 .0 1) ;GDNF组前角运动神经元中CHE灰度值 (6 5 .2± 2 3.8,98.7±31.6 )低于等渗盐水组 (94 .5± 35 .2 ,12 5 .6± 4 1.6 ) (P <0 .0 1) ;ACP灰度值 (74 .2± 2 5 .7,6 8.6±30 .6 )高于等渗盐水组 (5 8.5± 18.2 ,4 9.6± 2 1.6 ) (P <0 .0 1)。　结论　外源性GDNF能保护脊髓不完全性损伤后引起的运动神经元损害。     

体外培养大鼠胚胎脊髓神经元损伤前后的凋亡变化

目的研究体外培养脊髓神经元损伤前后的凋亡变化,进一步探讨中枢神经损伤的分子机制。方法取孕14天的Wistar大鼠脊髓神经元进行培养,划痕损伤神经元突起,对神经元损伤前后的凋亡变化进行观察。结果损伤前后体外培养脊髓神经元凋亡数量有明显差异,损伤前几乎未见凋亡的神经元,损伤后1天凋亡神经元最多,损伤后3天凋亡神经元也明显增多,损伤后5天凋亡神经元呈明显下降的趋势,损伤后7天凋亡神经元又开始增多。结论了解体外培养脊髓神经元损伤前后细胞凋的规律,为脊髓神经元损伤后给予干预措施的实验研究奠定了基础。     

N-乙酰半胱氨酸对快速上浮脱险致减压病大鼠心肺组织的影响

目的：研究N－乙酰半胱氨酸（ NAC）对快速上浮脱险致减压病大鼠心肺组织的影响。方法雄性SD大鼠80只,随机分为4组,每组20只。实验组于进舱前1 h通过腹腔注射NAC溶液（注射剂量分别为250、500和1000 mg／kg）,对照组于进舱前1 h腹腔注射相同体积生理盐水。压缩空气以指数速率2t／7加压至1．5 MPa,停留4 min后匀速减压至常压出舱。出舱后即观察大鼠行为学表现并统计存活率,出舱后0．5 h活杀大鼠,取心、肺组织,观察其病理变化。结果 NAC 500 mg／kg组大鼠存活率（90％）显著高于对照组（65％）（P＜0．05）;对照组大鼠肺泡结构大面积破坏融合,肺泡腔内可见红细胞渗出;心肌纤维水肿、变性,断裂明显。而NAC组大鼠肺泡壁增厚程度和心肌纤维水肿程度均较对照组轻微。结论 NAC可通过减轻大鼠心肺组织的损伤和炎症预防快速上浮脱险所致减压病的发生。     

复杂压力暴露条件下从失事潜艇快速上浮脱险后余氮张力的初步探讨

目的 探讨失事潜艇艇员在高压下暴露并从失事潜艇快速上浮脱险后体内余氮张力的计算方法.方法 对失事潜艇脱险过程进行分解,采用微积分等方法,建立脱险艇员出水时体内氮张力值的理论计算公式,并将此氮张力值换算成相对饱和深度.结果 建立的理论计算公式可以计算在7、12 m饱和后,在不同深度脱险时体内余氮张力值对应的相对饱和深度.结论 本研究建立的理论计算公式可为减压病的预测提供参考,为分析复杂压力暴露后快速上浮脱险方法的安全性提供理论依据.     

脊髓型减压病大鼠脊髓组织内NGF和Trk A的蛋白表达

目的 观察大鼠脊髓减压病后脊髓组织内神经生长因子（NGF）及其受体酪氨酸激酶A（Trk A）蛋白表达随疾病进程的变化过程，探讨减压病脊髓损伤后自身的神经保护机制。方法 采用1.0MPa暴露5.5min后极快速减压的方法制备SD大鼠脊髓减压病模型，在出舱0，6，24，48，72h应用免疫组织化学染色和半定量图象分析方法检测脊髓组织NGF及其受体Trk A的蛋白表达。结果 极快速减压后6h开始有少量NGF和Trk A蛋白表达，在24h表达明显增强并达到高峰，此后Trk A表达逐渐减弱，NGF表达直到72h仍比基础值明显增加。结论减压病脊髓损伤诱导了脊髓神经元和胶质细胞的NGF及其受体的合成，提示脊髓型减压病在损伤神经组织的同时也激活了自身的神经保护机制，通过Trk A受体途径NGF可能在保护受损神经细胞中起作用。     

高空减压病诊断和治疗进展

目的 介绍国内外高空减压病(ADS)诊断和治疗进展情况,以期能对提高ADS临床处置水平有所帮助.资料来源与选择国内外该领域的相关文献.资料引用引用国内外参考文献26篇.资料综合减压病缺乏特异性的客观诊断指标,症状学表现仍是减压病诊断的主要依据,但不同要素的重要性不同.由于神经组织易产生原发性气泡,故静脉气泡尚不能作为预测神经型ADS的有效指标.对卵圆孔未闭在ADS发病中的作用值得临床航空医学工作者进行更多的研究.单纯连续呼吸纯氧对ADS的治疗有一定作用,但对实际作战飞行条件下发病者治疗效果的评价还需要慎重考虑.加压治疗方案的改进主要是考虑降低治疗压力和减少治疗时间.针对一些延迟治疗的病例,对现行的美国海军加压治疗方案尚需进一步完善.结论 虽然大多数ADS能够完全治愈,但由于一些延迟治疗的以及神经型ADS有可能遗留难治性的后遗症,因此在诊断和治疗方面仍需给予充分重视.造成ADS诊断技术停滞不前的主要原因是对ADS基础研究的缺乏,只有深入认识生物体内气泡生成和气泡引起一系列病理变化的细节才能为ADS的诊断和治疗提供更加有效的方法.     

模拟150 m不安全快速上浮脱险致减压病大鼠肺组织白细胞介素-10和白细胞介素-13表达的变化

目的 研究模拟150 m不安全快速上浮脱险致减压病(decompression sickness,DCS)大鼠肺组织抗炎因子白细胞介素(interleukin,IL)-10、IL-13表达的变化规律.方法 模拟150 m不安全快速上浮脱险处理后0.5、3、6、12、24 h对大鼠肺组织IL-10、IL-13 mRNA表达水平及蛋白分子含量变化进行检测,并与常压空气对照组对比.结果 与对照组比较,模拟150m不安全快速上浮脱致DCS大鼠肺组织IL-10 mRNA水平在0.5h显著升高(2.104 4±0.361 5,P=0.026);IL-13 mRNA表达在0.5h(15.030 2±2.371 5,P=0.014)和3 h(2.459 8±0.419 1,P=0.018)显著增高.肺组织IL-10含量虽然在0.5h与常压空气对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05),但其他各时间点均出现了不同程度的升高,且差异均有统计学意义(P=0.000);IL-13含量在0.5h和3h先降低,在6h和12 h再恢复接近正常水平,24h又降低,3h(P=0.028)、24 h(P =0.008)与常压空气对照组比较差异有统计学意义,6 h(P=0.041)、12 h(P =0.025)与24 h比较差异也具有统计学意义.结论 模拟150 m不安全快速上浮脱险致DCS大鼠肺损伤后,24 h内可导致肺组织IL-10 mRNA水平和IL-10、IL-13含量发生显著改变,具体机制有待进一步研究.     

大鼠脑缺血后神经元中PYK2及 p38MAPK的活化及其意义

目的观察大鼠局部脑缺血后缺血区神经元中PYK2及p38MAPK的表达并探讨其意义。方法建立大鼠局部脑缺血模型,在缺血后15、30和60min时处死大鼠,采用免疫组化方法观察大鼠缺血区神经元中PYK2及p38MAPK的表达变化。结果正常大鼠皮层仅有微量活化型PYK2和活化型p38MAPK表达。缺血15min后,皮层神经元可见活化型PYK2强免疫阳性标记,这些有活化型PYK2表达的神经元亦呈p38MAPK免疫阳性。缺血区神经元中活化型PYK2和活化型p38MAPK免疫标记在缺血30min时达到最强,60min时开始减退。结论缺血可以诱发神经元中PYK2活化,既而通过p38MAPK信号转导通路介导神经元对缺血的应急反应。     

黄芪对快速加减压大鼠急性肾损伤的保护作用

目的 探讨黄芪对快速加减压大鼠急性肾损伤的保护作用及其机制.方法 选用健康雄性SD大鼠54只,随机分为3组:(1)对照组(C组)18只,不进行任何处理;(2)快速加减压组(F组)18只,进行快速加减压处理;(3)黄芪预处理组(H组)18只,快速加减压前用10 g/kg黄芪注射液灌胃.分别于快速加减压1、2、12 h后检测血清肌酐(SCr)、肾组织SOD、肾组织丙二醛(MDA),观察快速加减压1 h后.肾组织的病理变化.结果 F组和H组每个时间点SCr水平高于C组(P<0.01),组内2 h SCr水平均高于1、12 h(P<0.01);H组SCr水平在相应时点低于F组(P<0.01);F组和H组每个时间点肾组织MDA水平高于C组(P<0.01),组内2 h水平均高于1、12 h(P<0.01);H组在相应时点低于F组(P<0.01);F组和H组每个时间点肾组织SOD水平低于C组(P<0.01),组内2 h水平均低于1、12h(P<0.01),H组在相应时点高于F组(P<0.01).结论 黄芪对快速加减压后肾脏损伤具有保护功能,其机制可能是减少了体内MAD的产生和SOD的消耗.     

高血压病患者外周血淋巴细胞凋亡的检测及其价值

目的　探讨高血压病患者外周血淋巴细胞凋亡的检测方法及其临床价值。方法　采用TUNEL原位细胞凋亡检测技术对 3 0例高血压病患者及 3 0例正常健康对照人群外周血淋巴细胞进行检测。结果　两组中外周血淋巴细胞均有凋亡发生 ,但高血压病组外周血淋巴细胞凋亡例数明显高于正常对照组 (P <0 0 5 ) ,且淋巴细胞凋亡阳性率也高 (P <0 0 5 )。结论　高血压病患者外周血淋巴细胞凋亡可能与高血压病的发生、发展及进程有关。