从皮肤的细胞外基质(NECM)中制取可注射胶原

常规制取注射性胶原的方法是用酶降解法，经反复酸提、盐析、离心、交联等步骤，进行纯化，该法将胶原降解，酸提取分子片断，用交联剂组成可注射胶原。本法是从ＮＥＣＭ开始制取，ＮＥＣＭ已为胶原框架，因此步骤简化很多，仅需解裂胶原网状结构，酶解末端蛋白以消除特异性，最后降解成３００ｎｍ左右胶原。本法不用交联剂和稳定剂。生物原材料来源广泛，有利临床推广应用。经半年动物实验证明，本法制取的可注射胶原无排斥反应和炎性反应，也无包裹现象，半年时仍残留有部分胶原     

微量元素与细胞外基质

目的 论述微量元素对细胞外基质代谢的影响,探讨创伤愈合的生理和相关病理机制。方法 以基础研究结合相关临床资料,分析微量元素与细胞外基质代谢的关系。探讨创伤修复机制。结果 在创伤愈合过程中,微量元素通过参与酶的构成与激活、构成体内重要的载体及蛋白质成份、参与激素和维生素的合成以及调控自由基水平等功能,广泛参与到胶原蛋白和其它细胞外基质的合成、分解、沉积与重建过程中。结论 微量元素对细胞外基质的代谢起着一定的调控作用,在创伤愈合过程中发挥着重要作用。     

细胞外基质与下肢静脉曲张关系研究

静脉壁的细胞外基质维持了静脉壁正常的结构和功能。曲张静脉壁的细胞外基质中各种成分的分布和含量发生了不同程度的改变，且对静脉曲张的形成具有重要的意义。本文就曲张静脉壁的细胞外基质的改变作一综述。     

结缔组织细胞外基质的组织化学和免疫组织化学

结缔组织细胞外基质由细胞外基质蛋白和葡萄胺聚糖构成，其成分间的关系密切，研究结缔组织中细胞外基质的分布在特定的组织中的不同作用，对疾病的病因、病理及其发病机制将起到重要的作用。本文拟对结缔组织细胞外基质的研究方法、意义以及近年来的进展作一综述。     

从NECM制取的可注射性胶原的生物学评价

从ＮＥＣＭ制取可注射胶原是从大分子降解为胶原分子，因此不需要交联剂和稳定剂。溶液中仅有胶原分子，无交联剂。本实验是将可注射胶原液（１２０ｍｇ／ｍｌ）１ｍｌ注入大鼠尾部皮下组织内，共注射３０只，分三批杀死（１．５个月，３．０个月和半年），取注射部位的皮下组织作组织切片、染色（ＨＥ）、光镜观察（包括偏光显微镜）。发现三组在注射部位皮下组织内均有胶原分散存在。半年时胶原量少而且排列有序，未见包裹现象。除１．５个月少数动物皮下组织内有轻度炎性反应外，其余均未见到炎性反应。无排斥反应。局部组织无坏死现象。实验认为：本法所制可注射胶原液在半年内未发现特殊的生物学反应，胶原未完全吸收。     

从NECM制取的可注射性胶原的生物学评价

从ＮＥＣＭ制取可注射胶原是从大分子降解为胶原分子，因此不需要交联剂和稳定剂。溶液中仅有胶原分子、无交联剂。本实验是将可注射胶原液注入大鼠尾部皮下组织内，共注射３０只，分三批杀死（１．５个月，３．０个月和半年），取注射部位的皮下组织作组织切片，染色（ＨＥ）、光镜观察（包括偏光显微镜）。     

皮肤扩张条件下真皮中细胞外基质变化的研究进展

皮肤软组织扩张术是整形外科重要的治疗手段之一,主要通过机械张力作用牵张皮肤,或借助牵拉组织皮肤缺氧促进皮肤细胞增殖,获得“额外”皮肤,以满足体表皮肤软组织缺损修复的需要。但扩张后真皮变薄,严重限制了其临床应用。而真皮主要由细胞外基质和成纤维细胞构,因此,探明缺氧或机械张力作用条件下细胞外基质的合成与降解规律具有重要意义。现就扩张条件下细胞外基质的变化规律作一综述。     

骨组织工程中细胞外基质材料的选择

成骨细胞种植的细胞外基质材料的选择是骨组织工程研究中的关键环节 ,也是限制骨组织工程研究进一步发展的主要因素之一。理想的骨组织工程细胞外基质材料的要求有[1,2 ] :( 1)良好的生物相容性 :除满足生物医用材料的一般要求 ,如无毒、不致畸等之外 ,还要利于种子细胞粘附、增殖 ,降解产物对细胞无毒害作用 ,不引起炎症反应 ,甚至利于细胞生长和分化。 ( 2 )良好的生物降解性 :基质材料在完成支架作用后应能降解 ,降解率应与组织细胞生长率相适应 ,降解时间应能根据组织生长特性作人为调控。 ( 3)具有三维立体多孔结构 :基质材料可加工成…     

脱细胞异体真皮基质皮下移植后胶原的动态变化

目的　探讨脱细胞异体真皮基质 (ADM)移植后胶原的变化情况。方法　将异体ADM移植于SD鼠皮下 ,测定移植后ADM中胶原的含量及Ⅰ、Ⅲ型胶原的比例。结果　异体ADM移植后胶原含量及Ⅰ、Ⅲ型胶原比例无明显变化。结论　异体ADM是一种良好的软组织填充材料。     

输尿管细胞外基质的研制

目的：探讨输尿管细胞外基质（ECM)的制备方法。方法：采用正交设计方法[L9(3^4)].取19只兔的输尿管19条,其中9条被分成27段,按正交设计随机分为9组行脱细胞处理。所有试验重复3次。经脱细胞处理后,采用苏木素-伊红（HE)染色及计算机图像分析对基质进行残余细胞成分计数,统计分析获得最佳方法（A3B2C3)。另10条输尿管采用最佳方法制备成输尿管ECM并用于输尿管缺损修复实验,分别于修复术后1、4及16周取材分析缺损修复处组织再生情况。结果：各组脱细胞后残余细胞成分量均不相同,但第7、9组均未发现细胞残余成分,采用最佳方案制备的输尿管ECM经扫描电镜分析未发现细胞残片。缺损修复实验后1周移行上皮细胞爬满基质内表面;术后4周可见基质内细胞成分明显增多,但较正常组织稀疏,排列不规则;16周,取材的组织学分析表明细胞外基质替代部分组织再生状况良好。结论：制备输尿管细胞外基质的最佳方案是A3B2C3,即在输尿管脱细胞处理过程中采用0.4％胰蛋白酶、1.0％甲醛 0.2%戊二醛、40U/mlDNase.     

细胞外基质、基质金属蛋白酶和ARDS

细胞外基质(ECM)是位于细胞之间的主要由胶原等大分子物质组成的一个动态网状结构，在细胞的增殖、迁移、分化及炎症反应过程中发挥了重要作用。基质金属蛋白酶(MMPs)是一组含锌离子的蛋白水解酶，可由多种细胞分泌，参与对ECM的降解。近年来研究表明MMPs与ARDS的发生、发展有密切联系。本文就细胞外基质、基质金属蛋白酶与ARDS之间的联系作一综述。     

细胞外基质与膀胱肿瘤转移

膀胱肿瘤转移是一个复杂的过程,涉及许多调节机制,其中细胞外基质(ECM)与膀胱肿瘤转移的关系极为密切.ECM主要包括胶原、非胶原糖蛋白(如纤维连接蛋白和层黏连蛋白)、弹性蛋白、蛋白聚糖及氨基聚糖.肿瘤细胞对ECM的黏附与降解是膀胱肿瘤转移的重要过程.研究膀胱肿瘤细胞与ECM的相互关系是肿瘤转移研究的一个重要方向.本文综述了细胞外基质在膀胱肿瘤浸润转移过程中的作用机制及其临床意义.     

Ⅰ型胶原负载骨髓基质细胞修复兔膝关节软骨缺损

目的探讨同种异体骨髓基质细胞(MSCs)-Ⅰ型胶原复合移植修复关节软骨缺损的疗效。方法构建Ⅰ型胶原支架,将体外培养的兔MSCs吸附于该支架上培养,检测支架对MSCs的吸附及增殖的影响,再移植于兔膝关节全层软骨缺损处,分批取材,进行大体、组织学观察。结果MSCs在Ⅰ型胶原支架内贴附良好,分泌胞外基质,MSCs-胶原复合移植组软骨缺损处在术后12周为透明软骨样修复,空白对照组为纤维瘢痕样修复。结论Ⅰ型胶原支架与MSCs相容性良好,MSCs-胶原复合移植可达到透明软骨样修复软骨缺损。     

肾结石肾小球病变中细胞外基质变化的研究

应用免疫组织化学ＳＰ法和计算机图像分析系统对１７例肾结石肾小球病变标本细胞外基质中Ⅳ型胶原、纤粘连蛋白（ＦＮ）和层粘连蛋白（ＬＮ）的变化进行定量分析。结果发现硬化的肾小球中Ⅳ型胶原、ＦＮ和ＬＮ均较正常增多，且以Ⅳ型胶原增多为显著，说明肾结石肾小球硬化的发生与细胞外基质的过量积累有关，另外，我们还发现在肾小球、肾小管上皮细胞及间质细胞中有ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达，提示肾结石肾小球病变是一种与局部免疫因素     

可注射性人胎盘胶原豚鼠皮内、皮下注射实验研究

目的 研究可注射性人胎盘胶原的理化性质及临床应用特点.方法 将实验豚鼠随机分为两组,并将浓度为8mg/ml及30mg/ml的两种胶原分别注于两组豚鼠的皮下和皮内,以生理盐水作对照.实验鼠分别在注射后1、3、5、7、14、28、49、91、196天作大体观察和组织切片观察.结果 显示可注射性人胎盘胶原不引起明显的过敏反应及炎症反应.注入宿主皮内后,能较长期稳定留存,并逐步被宿主的自身胶原替代,共同进入宿主的生命代谢过程.它还能使真皮的胶原纤维增加,真皮增厚,延缓了真皮的衰老.结论 可注射性人胎盘胶原在整形美容外科中作为改善皮肤衰老中出现的皱褶及修复皮肤浅表凹陷性缺损具有实用价值.     

脱细胞胆管细胞外基质替代胆总管缺损的研究

目的 探讨脱细胞胆管细胞外基质（ECM）的制备方法及其替代胆总管缺损的可行性。方法 采用4因素3水平9次实验的正交设计[L9（3^4）]，切取活体犬的肝外胆管39段，每段长1cm，其中27段按正交设计随机分为9组行脱细胞处理，试验重复3次。采用苏木素．伊红（HE）染色及计算机图像分析对ECM进行残余细胞成分计数，进行极差分析及方差分析，获得制备ECM的最佳方案。另12段胆管按最佳方案制备成ECM并用于同种异体胆总管缺损修复实验。分别于术后2、4、12及24周取材观察缺损修复处组织再生情况。结果脱细胞后第7、9组未发现残余细胞，ECM富含胶原，第9组胶原呈立体交叉交联。移植术后2周，ECM内膜面见少量单层上皮细胞，有血管长入其中，ECM中有少量成纤维和平滑肌细胞，吻合口处有较多炎性细胞浸润；4周ECM管腔被上皮细胞覆盖，排列整齐，ECM中有较多成纤维和少量平滑肌细胞，吻合口有少量炎性细胞浸润；12周吻合痕迹消失，ECM中有较多成纤维、平滑肌细胞和少量纤维细胞；24周ECM中有以平滑肌细胞和纤维细胞为主，少量成纤维细胞，结构近似正常。结论制备ECM中3个关键条件的最佳水平为A383C3，即在胆管脱细胞处理过程中采用0．4％胰蛋白酶、1．0％叠氮二苯基磷（DPPA）、40U／ml DNA酶。所得ECM应用于犬同种异体胆总管端端吻合修补，效果满意。