川芎嗪对大鼠肝细胞凋亡的影响

目的 :采用四氯化碳 (CCl4)损伤性肝纤维化模型 ,观察川芎嗪对大鼠肝细胞凋亡的影响。方法 :雄性Wistar大鼠 40只随机分为 4组 :A组 (模型对照组 )、B组 (秋水仙碱组 )、C组 (川芎嗪组 ) ,采用 5 0 ?l4和 5 %乙醇造模 ;D组为正常对照组 ,代之以等量生理盐水。 6周末处死动物 ,用TUNEL法检测各组肝细胞凋亡情况 ,生化分析仪测定血清肝功能指标 ,比色法检测肝组织匀浆MDA、GSH Px、Hyp ,免疫组化检测肝组织TGF β1的表达。结果 :川芎嗪能改善肝纤维化大鼠的肝功能 ,降低肝组织MDA、Hyp含量 ,增加GSH Px活性 ,使肝组织TGF β1的显色指数降低 ;凋亡细胞TUNEL标记显示 :模型对照组出现典型凋亡改变 ,川芎嗪治疗组未见明显凋亡改变 ,两组比较差异有显著性意义 (P <0 0 1)。结论 :川芎嗪可抑制纤维化大鼠肝细胞的凋亡 ,这可能是其抗肝纤维化的机制之一。     

安体舒通抗肝纤维化作用实验性研究

目的　研究和评估安体舒通对实验性大鼠肝纤维化的防治作用 ,探讨其抗肝纤维化作用的可能机制。结果　将雄性Wistar大鼠 80只随机分为正常对照组 (A组 ,16只 ) ,肝纤维化模型组Ⅰ (B组 ,5 4只 ) ,安体舒通治疗组Ⅰ (C组 ,10只 ) ,采用CCl4 复合因素造模 ,治疗组于造模同时予安体舒通每日 10 0mg·kg-1·mL-1灌胃 ,6周末造模成功处死C组大鼠 ,同时随机处死A组及B组大鼠各 8只 ;对B组剩下大鼠行二次随机分组 ,分为模型对照组Ⅱ (D组 ,12只 ) ,安体舒通治疗组Ⅱ (E组 ,10只 ) ,E组于第 7周开始给予安体舒通治疗 ,10周末处死大鼠。检测大鼠肝功能 ,血清透明质酸 (HA) ,层粘蛋白 (LN) ,Ⅲ型前胶原 (PCⅢ ) ,Ⅳ型胶原 (CIV) ;免疫组化法检测肝组织基质金属蛋白酶组织抑制因子 (TIMP -1)的表达。结果　C组与B组比较 ,血清ALT、AST、HA、LN、CIV、PCⅢ均显著降低 (P <0 .0 1) ,TIMP -1活性明显降低 (0 .34± 0 .0 5vs 0 .45± 0 .0 5 ,P <0 .0 1) .E组与D组相较 ,TIMP -1活性亦有明显降低(0 .31± 0 .0 7vs 0 .42± 0 .0 6,P <0 .0 1)。结论　安体舒通对肝纤维化有一定预防作用 ,并可能通过抑制TIMP -1活性表达而促进肝细胞外基质降解     

经肝动脉化疗栓塞术对肝细胞癌细胞增殖和细胞凋亡的影响

为研究经肝动脉化疗栓塞术 (TACE)对肝细胞癌细胞增殖和细胞凋亡的影响 ,分别采用免疫组织化学方法和 TUNEL方法检测 6 5例肝细胞癌患者术后存档石蜡切片组织中增殖细胞核抗原 (PCNA)与细胞凋亡的表达情况 ,并比较二者检测结果在术前行与未行 TACE两组间有无差异。结果显示 ,术前行 TACE组 (n=18例 )的 PCNA标记指数 (35 .83± 12 .2 3%)显著低于未行 TACE组 (n=47例 ,5 9.92± 2 3.5 7%) ,P<0 .0 5 ;前者的凋亡指数 (17.6 2± 6 .87%)显著高于后者 (9.76± 3.6 4%) ,P<0 .0 5。提示 TACE不仅能抑制肝细胞癌的细胞增殖 ,而且能够诱导细胞凋亡 ,这可能是其发挥作用的重要机制之一。     

肿瘤坏死因子α及caspase-3表达与暴发性肝衰竭细胞凋亡

目的　研究肿瘤坏死因子α(TNFα)与caspase 3表达在实验性暴发性肝衰竭 (FHF)中对肝细胞凋亡的作用。方法　用脂多糖和D 氨基半乳糖制备FHF小鼠模型 ;ELISA和逆转录PCR法检测血清TNFα水平及肝组织TNFαmRNA表达 ;原位杂交法检测肝组织内caspase 3表达 ;DNA琼脂糖凝胶电泳和末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记 (TUNEL)检测肝细胞凋亡。结果　用药后 2h开始 ,TNFαmRNA表达增加 ( 0 91± 0 75 ,正常值 0 32± 0 10 ) ,血清TNFα水平升高 [( 32 0 5 0± 86 5 7)ng/L ,正常值 ( 16 6 6± 7 0 1)ng/L],caspase 3少量表达 ;8h后 ,血清ALT和总胆红素 (TBil)水平显著增加 [分别为 ( 5 6 0 6 6± 6 0 2 0 )U/L和 ( 16 3 6 6± 34 5 1) μmol/L ,正常值为 ( 2 3 5 6± 8 0 3)U/L和 ( 14 90± 4 80 ) μmol/L],caspase 3表达至最高峰 ,并出现典型的肝细胞凋亡改变 ;12h后 ,血清ALT和TBil水平达最高峰 ,caspase 3表达较 8h减少 ,肝细胞坏死和凋亡同时存在。抗TNFα单抗阻断试验后 ,肝细胞凋亡和坏死明显减轻 ,TUNEL和caspase 3表达显著减少。 结论　TNFα有促进肝细胞凋亡与坏死作用 ,肝细胞凋亡与caspase 3的激活有关 ,在时间上肝细胞凋亡先于坏死。     

硫化氢通过p38MAPK信号通路对肝纤维化大鼠肝细胞增殖、凋亡的影响

目的:探讨硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)对肝纤维化大鼠肝细胞增殖、凋亡的调节作用以及P-p38丝裂原活化蛋白激酶(p38mitogen-activated protein kinase,p38MAPK)蛋白的表达的影响.方法:用四氯化碳诱导肝纤维化SD大鼠模型,将提取的肝纤维化大鼠肝细胞分组:对照组、H2S组(对照组基础上加H2S的供体N a H S至最适浓度)、S B组(对照组基础上加SB203580至最适浓度)、SB+H2S组(对照组基础上加Na HS、SB203580至最适浓度).M T T法检测N a H S及S B203580对肝纤维化大鼠肝细胞的增殖、增殖抑制率的影响;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测肝纤维化大鼠肝细胞凋亡率;Western blot技术检测P-p38MAPK蛋白在各组中的表达水平.结果:与对照组相比,低浓度H2S(50μmol/L)促进肝纤维化大鼠肝细胞增殖明显(P=0.000),对肝纤维化大鼠肝细胞凋亡无影响;SB203580可抑制肝纤维化大鼠肝细胞的增殖,伴随药物浓度的升高细胞存活率降低(P=0.000),并诱导肝纤维化大鼠肝细胞凋亡(P=0.000);P-p38MAPK蛋白在各组中均有表达,H2S组表达水平高于对照组(P=0.000),SB组、SB+H2S组与对照组、H2S组相比,P-p38MAPK蛋白的表达量均减少(均P=0.000).结论:低浓度H2S对肝纤维化大鼠肝细胞凋亡无诱导作用,但能通过激活p38MAPK信号转导通路促进其细胞增殖.     

扑热息痛引起肝细胞损害的机制

目的:探讨肝细胞凋亡在扑热息痛(acetaminophen, AAP)肝损害中作用．方法:建立SD大鼠AAP肝损害模型;分别于给药后3,6,12,24 h处死大鼠,AAP组和对照组测定血清ALT水平,HE染色光镜下观察肝脏病理改变,原位末端标记(TUNEL)法和透射电镜检测肝细胞凋亡．结果:AAP组各时间点血清ALT(nkat／L)水平均显著高于对照组(3,6,12,24 h:1167±151 vs587±89,2154±255vs573±76,4221± 929vs751±82,13 203±1393 vs 780±161, P<0．01),随时间进行性升高,24 h达高峰; AAP组可见不同程度肝细胞坏死,随时间进行性加重,24 h达高峰,对照组未见肝细胞坏死; AAP组中央静脉周围可见大量凋亡细胞,12 h 达高峰,对照组罕见凋亡细胞,AAP组各时间点肝细胞凋亡指数(AI)均显著高于对照组 (3,6,12,24 h:13．1％±2．9％vs 1．8％±0．5％, 24．8％±5．3％vs 1．7％±0．5％,40．4％±3．7％vs 2．0％±0．4％,35．3％±3．5％vs1．92％±0．3％, P<0．01);透射电镜下观察,AAP组可见明显的肝细胞凋亡现象,12 h最易见到,对照组肝组织超微结构基本正常．结论:AAP肝损害过程中同时存在肝细胞坏死和凋亡,早期(给药后12 h内)以凋亡为主, 后期(给药后24 h)以坏死为主．     

对正常肝细胞、不典型增生、肝癌和癌旁肝细胞的ICM-DNA定量研究

目的；通过四组肝细胞的DNA含量检测，探索肝细胞癌的恶性证据。方法；采用图像细胞分析术和DNA组织化学染色。结果：不典型增生组和正常肝细胞的DNA指数和DNA倍体等无明显差别，但肝细胞癌组的NDA指数、异倍体非整倍体和DNA含量均高于不典型增生组(P<0．001)，两组的-↑x±s依次分别为1．34±0．43与0.67±0．18、60．44±20．34与17．63±3．93、48．55±14．7与13．13±3．4及12．85±3．45与6．0±0．64pg。肝细胞癌组中的2C、3-4C和5C百分率与不典型增生组也有显著差异(P<0．05～0．001)，其值依次分别为19．17±15．95与83．6±2．50、61．86±12．19与11．53±1．99及14．23±10．7与2．28±1．08。10例癌旁肝细胞组病例中5例DNA指数、非整倍体比例均近似肝细胞癌组。结论：图像细胞分析术的DNA定量检测有助于区别良恶性肝细胞。     

细胞凋亡与细胞增殖在人肝细胞癌中的表达和意义

目的：为了解人肝细胞癌中细胞凋的形态与分布规律，探索细胞凋亡标记率和增殖标记率与肝细胞癌组织学分级的关系。方法：对21例人肝细胞癌和17例慢性肝病分别作TUNEL标记和PCNA免疫组化检测，采用图像细胞仪作阳性细胞计数。结果：(1)细胞核染色质浓缩、边聚、胞浆嗜酸性变及核周空晕与TUNEL标记有极好的相关性：(2)凋亡细胞多呈弥散分布，以癌坏死区周围多见，包膜浸润处少见；(3)增殖细胞和凋亡细胞率与肝癌组织学分级呈正相关，Ⅲ级组肝细胞癌中增殖细胞率为278±6．4高于Ⅱ级组141±35(P<0．01)，又高于Ⅰ级组7．4±0．8(P<0.001)，Ⅲ级组肝细胞癌中凋亡细胞率为21±0．97高于Ⅱ级组0.92±O.26(P<0.05)，又高于Ⅰ级组0．45±0.08(P<0．001)(4)包膜浸润和门脉癌栓组凋亡细胞率和增殖细胞率均高于无包膜浸润和门脉癌检组结论：本研究提示细胞凋亡和细胞增殖与肝细胞癌组织学分级、包膜浸润和门脉癌检密切相关。     

肝细胞生长因子抗大鼠肝纤维化作用及其机制的探讨

目的研究肝细胞生长因子(HGF)对实验性肝纤维化大鼠的基质金属蛋白酶13(MMP-13),抑制因子1(TIMP-1),转移生长因子β1(TGFβ-1)表达的影响,探讨HGF抗肝纤维化作用的可能机制。方法清洁级wistar大鼠30只,建立CCL4综合因素诱导的大鼠肝纤维化模型,造模2周后大鼠随机分为3组,每组10只正常对照组(A组),HGF治疗组(B组),模型对照组(C组),B组给予HGF治疗。治疗6周后处死全部大鼠,取血清检测肝纤维化指标,采用HE染色及VG染色观察大鼠肝纤维化程度,免疫组化法检验肝组织MMP-13,TIMP-1,TGFβ-1的表达。结果治疗组肝纤维化血清学指标较模型组有一定程度改善(P值<0.05)。HE染色及VG染色显示HGF治疗组(B组)较模型对照组(C组)在形态学及纤维形成方面均有显著性差异(P值<0.05)。B组与C组比较MMP-13活性升高(0.173±0.030vs0.120±0.049,P<0.05);TIMP-1活性降低(0.159±0.047vs0.0229±0.062,P<0.05);TGFβ-1活性降低(0.190±0.040vs0.235±0.028,P<0.05)。结论肝细胞生长因子可能通过促进MMP-13的活性或抑制TGFβ-1,TIMP-1活性而发挥抗肝纤维化的作用。     

Survivin在原发性肝细胞癌中的表达及意义

目的　Survivin是凋亡抑制蛋白中的一种 ,选择性地表达于恶性肿瘤组织。该文研究Sur vivin基因在原发性肝细胞癌中的表达及生物学意义。方法　收集 2株肝细胞癌细胞株 ,4 0例原发性肝癌组织标本及相应的癌旁组织 ,以Westernblotting法检测Survivin蛋白表达 ;半定量RT PCR法检测SurvivinmRNA表达 ;肝癌细胞凋亡指数采用原位末端标记法检测。结果　 2株肝癌细胞株和 85 % (34例 )的肝癌组织表达Survivin蛋白和mRNA ,而癌旁组织内无一例阳性表达。Survivin蛋白表达的阳性率在肝内转移组为 93.5 % ,显著高于肝内无转移组 (5 5 .6 % ,P <0 .0 5 ) ;在门静脉癌栓浸润组为 92 .8% ,显著高于无门静脉癌栓浸润组 (6 6 .7% ,P <0 .0 5 )。RT PCR显示 ,2株肝癌细胞株和 85 .0 % (34例 )的肝癌组织表达SurvivinmRNA ,与Westernblotting的结果一致 ,SurvivinmRNA的表达水平在肝内转移组 (1.10 5± 0 .396 )和门静脉癌栓浸润组 (1.137± 0 .4 0 4 )中 ,显著高于肝内无转移组 (0 .5 72± 0 .0 82 )和无门静脉癌栓浸润组 (0 .6 2 7± 0 .12 2 ,P <0 .0 5 )。所有肝癌组织标本中均可检测到凋亡细胞 ,但Survivin表达阳性组的凋亡指数 (1.15 2 %± 0 .32 6 % )显著低于Survivin表达阴性组 (4.5 0 2 %± 0 .830 % ,P <0 .0 5     

State of knowledge of helminth fauna of freshwater fishes of Poland

A total 89 fish and lamprey species has been recorded from Polish freshwater habitats. Twenty-seven of them (30.3%) have not been surveyed for parasitic helminthes. Some of the latter fishes are either rare or not easily accessible. Other live only in specific habitats in scattered localities. An important obstacle for studying parasite faunas of some fishes may be their status on an endangered species. Among the non-surveyed fishes, are those which have been relatively recently introduced to Poland or migrated there on their own. The present paper attempts to review all hitherto not studied helminthologically fish species, their habitats, localities and current protection status.     

高血压降压治疗目标的再认识

根据传统的高血压水平的定义,1993年WHO高血压治疗指南提出血压控制目标为<140/90mm Hg(1mm Hg=0.133kPa),但是并非所有患者都必须将血压降至同一水平,而应根据患者情况进行个体化治疗。Framingham进行的一项长达10～12年的心血管事件研究发现,第5年后,正常上限血压[收缩压(SBP     

Lack of correlation of degree of villous atrophy with severity of clinical presentation of coeliac disease

BACKGROUND AND AIM: Both the clinical presentation and the degree of mucosal damage in coeliac disease vary greatly. In view of conflicting information as to whether the mode of presentation correlates with the degree of villous atrophy, we reviewed a large cohort of patients with coeliac disease. PATIENTS AND METHODS: We correlated mode of presentation (classical, diarrhoea predominant or atypical/silent) with histology of duodenal biopsies and examined their trends over time. RESULTS: The cohort consisted of 499 adults, mean age 44.1 years, 68% females. The majority had silent coeliac disease (56%) and total villous atrophy (65%). There was no correlation of mode of presentation with the degree of villous atrophy (p=0.25). Sixty-eight percent of females and 58% of males had a severe villous atrophy (p=0.052). There was a significant trend over time for a greater proportion of patients presenting as atypical/silent coeliac disease and having partial villous atrophy, though the majority still had total villous atrophy. CONCLUSIONS: Among our patients the degree of villous atrophy in duodenal biopsies did not correlate with the mode of presentation, indicating that factors other than the degree of villous atrophy must account for diarrhoea in coeliac disease.