Hsa_circ_0001946/miR-7/KLF4轴调控乳腺癌进展的研究

目的探讨环状RNAhsa_circ_0001946在乳腺癌组织中的表达情况及hsa_circ_0001946/miR-7/Kruppel样因子4（KLF4）轴调控乳腺癌细胞发生侵袭和转移的机制。方法收集2018年6月至2019年8月在温州医科大学附属第三医院切除的乳腺癌组织标本及其癌旁正常乳腺组织标本91例。采用实时荧光定量PCR法检测乳腺癌及其癌旁正常组织中hsa_circ_0001946、miR-7、KLF4mRNA表达情况及乳腺癌细胞株MCF-7中hsa_circ_0001946、miR-7、KLF4、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）mRNA表达情况;采用细胞侵袭实验分析乳腺癌MCF-7细胞株的侵袭能力;采用Westernblot法检测乳腺癌细胞株MCF-7中E-cadherin及N-cadherin蛋白表达情况。结果与癌旁正常乳腺组织比较,乳腺癌组织中hsa_circ_0001946和KLF4mRNA表达水平均升高,miR-7表达水平下降（均P＜0.05）。与正常乳腺组织、乳腺导管原位癌组织比较,乳腺浸润性导管癌组织中hsa_circ_0001946mRNA表达水平升高（均P＜0.05）。分析82例乳腺浸润性导管癌患者发现,有淋巴结转移者hsa_circ_0001946mRNA表达水平高于无淋巴结转移者（P＜0.05）。Pearson相关显示,乳腺癌组织中hsa_circ_0001946mRNA的表达与miR-7的表达呈负相关（r=-0.418,P＜0.05）,miR-7的表达与KLF4mRNAmRNA的表达呈负相关（r=-0.340,P＜0.05）。与阴性对照组相比,转染sh-hsa_circ_0001946组MCF-7细胞中miR-7表达升高,KLF4mRNA表达下降（均P＜0.05）;与阴性对照组相比,转染miR-7mimics组MCF-7细胞中KLF4mRNA表达下降（P＜0.05）;与阴性对照组相比,转染sh-hsa_circ_0001946组侵袭细胞数减少（P＜0.05）;与阴性对照组相比,转染KLF4siRNA组MCF-7细胞中E-cadherinmRNA及蛋白表达水平均升高,N-cadherinmRNA及蛋白表达水平均下降（均P＜0.05）。结论Hsa_circ_0001946在乳腺癌细胞中表达升高,可通过miR-7/KLF4调控轴使癌细胞发生上皮-间质转化,促进癌细胞的侵袭和转移。     

microRNA-34a与乳腺癌的临床病理相关性研究

目的 检测microRNA-34a（miR-34a）在乳腺癌与相应正常组织中的表达情况,研究miR-34a与乳腺癌的临床病理相关性。 方法 应用qRT-PCR技术检测67例乳腺癌标本中miR-34a的表达,同时分析其和临床病理因素之间的相关性。 结果 乳腺癌组织中miR-34a的表达量明显低于配对的癌旁组织（P < 0.01）;年龄、性别、月经状况、孕激素受体水平、Ki67表达与人类表皮生长因子受体水平对病人癌组织miR-34a的表达影响均无统计学意义（P>0.05）;肿块直径、淋巴结转移、病理类型、临床分期、雌激素受体水平、是否三阴性对对病人癌组织miR-34a的表达影响均有统计学意义（P < 0.05~P < 0.01）,肿块直径≤2 cm组的表达高于直径>2 cm组（P < 0.05）,淋巴结无转移组的表达高于有转移组（P < 0.05）,非浸润性组的表达高于浸润性（P < 0.05）,Ⅰ期组和Ⅱ期组的表达均高于Ⅲ+Ⅳ期组（P < 0.01）,雌激素受体阳性组的表达高于阴性（P < 0.01）,三阴性组的表达低于非三阴性组（P < 0.01）。 结论 乳腺癌中miR-34a呈现低表达,与各临床病理因素分析后表明其可能在乳腺癌的发生发展及预后中起重要作用。     

乳腺癌组织miR-23a、miR-1247-5p表达与临床病理特征及预后的关系

目的检测微小RNA（miR）-23a、miR-1247-5p在乳腺癌组织中的表达情况,并分析miR-23a、miR-1247-5p表达与乳腺癌患者临床病理特征及预后的关系。方法收集2012年1月至2013年12月在昆山市第二人民医院行手术切除的150例乳腺癌患者术后的乳腺癌组织及癌旁正常组织样本,采用RT-PCR法检测组织样本中miR-23a、miR-1247-5p表达水平。单因素分析miR-23a、miR-1247-5p表达水平与患者临床病理特征的关系;Kaplan-Meier生存曲线分析不同miR-23a、miR-1247-5p表达水平患者的术后生存情况;ROC曲线分析miR-23a、miR-1247-5p对患者预后的预测价值。结果与癌旁正常组织相比,乳腺癌组织miR-23a表达水平较高、miR-1247-5p表达水平较低（均P＜0.05）。乳腺癌组织miR-23a表达水平与肿瘤直径、分子分型、淋巴结转移、TNM分期有关（均P＜0.05）,miR-1247-5p表达水平与组织病理分级、分子分型、淋巴结转移、TNM分期有关（均P＜0.05）。miR-23a高表达、miR-1247-5p低表达患者的术后5年总生存率及中位生存时间均分别低于miR-23a低表达、miR-1247-5p高表达患者（均P＜0.05）。检测乳腺癌组织miR-23a、miR-1247-5p表达水平对患者预后预测的AUC分别为0.709（95%CI：0.625~0.793）、0.690（95%CI：0.606~0.775）,灵敏度分别为0.812、0.749,特异度分别为0.637、0.622。结论乳腺癌组织miR-23a表达上调,miR-1247-5p表达下调,且与患者预后有关。检测乳腺癌患者术后癌组织miR-23a、miR-1247-5p表达水平对患者预后预测有一定的临床价值。     

三阴性乳腺癌组织长链非编码RNA-P21、microRNA-17-3p的表达及其临床意义

目的 探讨三阴性乳腺癌组织中长链非编码RNA-P21 (LncRNA-P21)、microRNA-17-3p(miR-17-3p)的表达，分析其与三阴性乳腺癌患者的临床病理特征及预后的关系。方法 选取2016年1月—2017年5月南通大学附属医院收治的106例三阴性乳腺癌患者经手术切除的癌组织和癌旁组织（距离癌组织至少5 cm）标本，采用实时荧光定量聚合酶链反应检测癌组织、癌旁组织中LncRNA-P21和miR-17-3p的表达；收集患者的临床病理特征资料，分析LncRNA-P21、miR-17-3p表达与临床病理特征的关系；术后随访5年，采用Kaplan-Meier法绘制不同LncRNA-P21、miR-17-3p表达三阴性乳腺癌患者的生存曲线；Cox回归分析影响三阴性乳腺癌患者预后的因素。结果 癌组织LncRNA-P21 mRNA相对表达量低于癌旁组织（P <0.05）；癌组织miR-17-3p mRNA相对表达量高于癌旁组织（P <0.05）。临床Ⅲ期、腋窝淋巴结转移、Ki-67≥30%三阴性乳腺癌组织中LncRNA-P21 mRNA相对表达量低于临床Ⅰ、Ⅱ期，无腋窝...     

喉癌组织中miR-340-5p、c-Myc、TCF-4的表达及临床意义

目的 研究喉癌组织中微RNA(miR)-340-5p、原癌基因c-Myc及转录因子4(TCF-4)的表达,分析三者表达的相关性及与喉癌患者临床病理特征的关系。方法 选取2015年2月至2020年11月在盘锦辽油宝石花医院诊治的102例喉癌患者为研究对象。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法检测102例喉癌患者癌组织及癌旁组织中miR-340-5p、c-Myc、TCF-4的表达,统计分析三者表达与临床病理特征关系,Pearson线性相关分析三者表达的相关性。结果 与癌旁组织比较,癌组织中miR-340-5p的相对表达量均明显较低,而c-Myc、TCF-4的相对表达量明显较高（P <0.05）。不同肿瘤分期的喉癌组织中miR-340-5p、c-Myc及TCF-4的表达比较,差异有统计学意义（P <0.05）,不同性别、年龄、分型、肿瘤分化程度及是否伴有淋巴结转移比较,差异无统计学意义（P <0.05）。miR-340-5p和c-Myc、TCF-4的表达呈负相关（r=-0.549、-0.452,P <0.05）。结论 喉癌癌组织中miR-340-5p表达降低,而c-M...     

胃癌组织中lncRNA UCA1、miR-590-3p表达及与病理参数和预后的关系

目的 探讨胃癌组织中长链非编码RNA(lncRNA)尿路上皮癌相关基因1(UCA1)、微小RNA(miR)-590-3p表达及与病理参数和预后的关系。方法 选取2017年1月至2018年7月河北省唐山市中医医院收治的107例胃癌患者,qRT-PCR检测癌组织和癌旁组织中lncRNA UCA1和miR-590-3p的表达。分析胃癌组织中lncRNA UCA1与miR-590-3p表达的相关性及与病理参数的关系。K-M法绘制不同lncRNA UCA1和miR-590-3p表达的胃癌患者生存曲线。结果 胃癌组织中lncRNA UCA1表达高于癌旁组织,miR-590-3p表达低于癌旁组织(P <0.05)。Pearson相关性分析显示,胃癌组织中lncRNA UCA1与miR-590-3p表达呈负相关(r=-0.720,P <0.01)。不同临床病理分期和淋巴结转移患者lncRNA UCA1和miR-590-3p表达比较,差异有统计学意义(P <0.05)。K-M生存曲线显示,高lncRNA UCA1表达组累积生存率低于低lncRNA UCA1表达组,高miR-590-3p...     

结直肠癌患者microRNA-101、microRNA-182表达与病理特征及预后的关系

目的 探讨结直肠癌组织中microRNA-101（miR-101）、microRNA-182（miR-182）表达与临床病理特征及预后的关系。方法 选取2015年4月—2018年1月青海省人民医院收治的83例拟行结直肠癌根治术患者,术后随访5年。采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测所有患者癌组织及癌旁组织miR-101、miR-182的表达;分析不同临床病理特征结直肠癌患者癌组织miR-101、miR-182的表达;采用多因素Cox比例风险模型分析影响结直肠癌患者术后复发转移的因素;分析结直肠癌患者癌组织miR-101、miR-182表达与术后复发转移的关系。结果 癌组织miR-101 mRNA相对表达量低于癌旁组织,miR-182 mRNA相对表达量高于癌旁组织（P <0.05）;低分化、病理分期Ⅲ期、有浆膜浸润、有淋巴结转移的结直肠癌患者癌组织miR-101 mRNA相对表达量低于中高分化、病理分期Ⅱ期、无浆膜浸润、无淋巴结转移者（P <0.05）,miR-182 mRNA相对表达量的比较结果则相反（P <0.05）;多因素Cox比例风险模型分析结果显示,病理分期［R^R =7.294（95% CI：3.001,17.726）、分化程度［R^R =5.150（95% CI：2.119,12.516）］、miR-101［R^R =4.477（95% CI：1.842,10.881）］、miR-182［R^R =4.495（95% CI：1.850,10.925）］是影响结直肠癌患者术后复发转移的因素（P <0.05）;miR-101高表达患者的无病生存率高于低表达患者（P <0.05）,miR-182低表达患者的无病生存率高于高表达患者（P <0.05）。结论 结直肠癌患者癌组织miR-101、miR-182的表达与临床病理特征及预后有关,miR-101低表达、miR-182高表达患者治疗后复发转移风险高。     

乳腺癌组织中miR-199b-5p和MTA1表达水平与临床病理特征和预后的关系

目的 检测乳腺癌组织中miR-199b-5p与MTA1表达情况，并分析其表达水平与临床病理特征和预后关系。方法 选取2017年10月至2018年10月期间河南大学第一附属医院收治的行乳腺切除手术的乳腺癌患者135例作为研究对象，取其癌组织与癌旁组织分别作为癌旁组织组与乳腺癌组，qRT-PCR法测定癌组织与癌旁组织miR-199b-5p、MTA1 mRNA水平，免疫组化法分析组织MTA1阴阳性，分析miR-199b-5p、MTA1表达与乳腺癌患者年龄、绝经情况(是、否)、肿瘤直径(<2 cm、≥2 cm)、临床分期(Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ期)、分子分型(Lumina A/B型、HER-2阳性型、三阴性型)、淋巴结转移(是、否)关系。结果 与癌旁组织组相比，乳腺癌组癌组织miR-199b-5p水平降低，MTA1 mRNA水平升高(P<0.05);与癌旁组织组相比，乳腺癌组MTA1阳性率升高(P<0.05);乳腺癌患者癌组织miR-199b-5p表达与临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05);MTA1表达与临床分期、淋巴结转移、分子分型有关(P<0.05);乳腺癌患者治疗...     

MicroRNA-93及Tspan1在结肠癌中的表达及其临床病理意义*

目的 探讨microRNA-93（miR-93）及Tspan1在结肠癌组织及细胞中的表达及其临床病理意义,预测两者的靶向调控关系。方法 选取手术切除结肠癌组织及对应癌旁组织74例,人结肠癌细胞株（SW480、SW620、HCT116、CaCo-2、LoVo、HT29）及正常人结肠上皮细胞株（FHC）,分别采用qRT-PCR及Western blotting检测miR-93、Tspan1 mRNA及Tspan1蛋白表达,观察两者在不同临床病理特征患者的表达差异,Pearson法分析miR-93与Tspan1 mRNA的相关性,采用TargetScan及GeneCard软件预测两者的靶向调控关系。结果 与癌旁组织比较,miR-93在结肠癌组织中表达降低（P?<0.05）,Tspan1 mRNA及蛋白在结肠癌组织中表达升高（P?<0.05）;与正常人结肠上皮细胞比较,miR-93在结肠癌细胞株中表达降低（P?<0.05）,Tspan1 mRNA及蛋白在结肠癌细胞株中表达升高（P?<0.05）;miR-93在远处转移、淋巴结转移阳性、血管浸润阳性及高TNM分期患者中低表达（P?<0.05）,Tspan1 mRNA在远处转移、淋巴结转移阳性、血管浸润阳性及高TNM分期患者中高表达（P?<0.05）。Pearson法相关性分析显示,miR-93与Tspan1 mRNA表达呈负相关[r?=-0.735（95% CI：-0.855,-0.535）,P?=0.000]。生物信息学预测,miR-93及Tspan1在3''-UTR区可能具有靶向调控关系。结论 miR-93在结肠癌中低表达,Tspan1在结肠癌中高表达,miR-93及Tspan1具有靶向调控关系,两者可能成为结肠癌的肿瘤标志物或预测因子。     

乳腺癌组织中Snail、Bcl-2 的 表达水平及其临床意义

目的 探讨乳腺癌组织中Snail 和Bcl-2 蛋白的表达水平与临床病理特征及预后的相关性。 方法 使用免疫组织化学法分析2010 ～ 2015 年在该院就诊的92 例乳腺癌患者的癌组织中Snail 和Bcl-2 蛋 白表达水平,分析2 种蛋白表达的相关性,以及两者与患者临床病理特征及预后的关系。结果 乳腺癌组织 中Snail 高表达率为62.5%,Bcl-2 低表达率为57.6%,与癌旁组织蛋白表达率比较有差异（P <0.05）,乳腺癌 组织中Snail 与Bcl-2 呈负相关（P <0.05）;Snail 表达水平与组织学分级、淋巴结是否转移、雌激素受体（ER） 及孕激素受体（PR）表达有相关性（P <0.05）,Bcl-2 表达水平与肿瘤大小、ER 及PR 有相关性（P <0.05）; 低表达Snail 乳腺癌患者无瘤生存率为87.5%,死亡1 例;高表达Snail 乳腺癌患者无瘤生存率为78.3%,死亡5 例, 差异有统计学意义（P <0.05）;高表达Bcl-2 乳腺癌患者无瘤生存率为87.2%,死亡1 例,低表达Bcl-2 乳腺 癌患者无瘤生存率为77.4%,死亡5 例,差异有统计学意义（P <0.05）。结论 Snail 表达水平与乳腺癌进展呈 正相关,Bcl-2 表达水平与乳腺癌进展呈负相关,而高表达Snail 和低表达Bcl-2 患者预后较差。     

抗精子抗体和抗子宫内膜抗体与不孕及流产的关系

目的　探讨抗精子抗体（ＡｓＡｂ）与抗子宫内膜抗体（ＥＭＡｂ）在不孕、流产中的作用及二者关系,进一步 揭示不孕、流产的病因。方法　采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）同时检测３４５例不孕、流产妇女血清中的ＡｓＡｂ与 ＥＭＡｂ,按ＡｓＡｂ检测结果分阳性组和阴性组,比较两组ＥＭＡｂ阳性率的差异。结果　原发不孕及自然流产妇女中, ＡｓＡｂ（－）组ＥＭＡｂ阳性率高达１６．６７％和１９．５１％,而ＡｓＡｂ（＋）组ＥＭＡｂ阳性率高达４３．６４％和４２．８６％,显著高于 ＡｓＡｂ（－）组（Ｐ＜０．０１,Ｐ＜０．０５）。继发不孕妇女中ＡｓＡｂ（－）组ＥＭＡｂ阳性率为１８．１８％,ＡｓＡｂ（＋）组ＥＭＡｂ阳性率 为３２．２％,二者无显著性差异（０．０１＞Ｐ＞０．０５）。结论原发不孕及自然流产妇女中因个体免疫反应差异使某些 人易对体内、外物质发生免疫反应而产生抗体,从而导致不孕或流产。     

亚硝基脲类和亚硝基硫脲类的理化性质及致突变能力

本题选择N,N′-二甲基亚硝基脲(DMNU),N,N′-二乙基亚硝基脲(DENU),及其类似物N,N′-二甲基亚硝基硫脲(DMNTU)、N,N′-二乙基亚硝基硫脲(DENTU)为代表,测定了这些化合物的水解反应速度、脂溶性(HPLC的logk′值)、水解产物和致突变能力。证明了硫脲的脂溶性大于脲的脂溶性。DMNTU对TA100菌株的致突变能力最强,其它较弱。     

气血与足月妊娠分娩关系的探讨

论述足月妊娠分娩的发动和维持依靠气的推动、温煦、气化、固摄功能和血的营养、濡润功能。顺利分娩既要气血充足，还要气顺血和。临床研究结果表明调补气血，是促进产程，预防难产的重要手段。实验研究结果阐明调补气血中药加强产力、促进产程主要是从改善产妇全身情况，提高机体抗应激、抗疲劳、耐缺氧能力，即所谓使产妇气血充足调和，充分发挥气血在分娩过程中的生理作用。     

水疗联合抚触对新生儿的生长发育、黄疸及睡眠的影响

目的探讨新生儿游泳联合抚触对新生儿的生长发育、黄疸及睡眠的影响。方法将经阴道顺产分娩的正常新生儿100例随机分为两组，观察组（水疗联合抚触组）50例，对照组（单纯沫浴组）50例。①测定两组10日、28日的体重、身长、上臂围；②观察记录胎便转黄时间，测定皿清胆红素；③记录24h睡眠时间。结果两组新生儿10日、28日体重、身长、上臂同增长有显著差异（P〈0．05），两组新生儿5日时，胎便转黄时间及黄疸指数比较均有显著性差异（P〈0．01），两组睡眠时间比较有统计学意义（P〈0．05），两组并发症比较无统计学意义（P〉0．05）。结论新生儿水疗联合抚触可促进新生儿的生长发育，能加速胎粪的早排出，减轻生理性黄疸程度，有效地降低新生儿高胆红素血症的发病率，提高睡眠质量。