种子引发对NaCl胁迫下通关藤种子萌发及幼苗生理特性的影响

以采自云南省马关县的当年成熟通关藤种子为实验材料,分别研究了不同浓度的KNO₃-KH₂PO₄ (K-K),GA₃,PEG-6000,NaCl 4种试剂引发处理对通关藤种子在高盐胁迫(0.8%NaCl)逆境下发芽及幼苗素质的影响,分别测定了发芽势、发芽率、 发芽指数、根长、茎长以及侧根数.并测定了通关藤叶片中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性的变化及可溶性蛋白含量的变化.结果表明,0.80%NaCl胁迫下,通关藤种子萌发受到显著抑制,经不同浓度的4种试剂引发处理后,均不同程度地提高了盐胁迫条件下通关藤种子的发芽势和发芽率等指标,均显著提高了SOD,CAT活性、增加了可溶性蛋白的含量、降低了叶片中MDA量.其中,经1.20% KNO₃-KH₂PO₄ 溶液引发处理的效果最好,引发处理后,通关藤种子发芽率从52.67%提高到87.33%,SOD活性从138.01提高到219.44;其次是300 mg·L^-1GA₃溶液引发处理的种子,其发芽率从52.67%提高到80.67%,SOD活性从138.01提高到444.61.     

通关藤种子质量检验方法研究

目的研究通关藤Marsdenia tenacissima种子检验方法,为制定通关藤种子检验规程及质量分级提供依据。方法以当年采收的不同产地通关藤种子为材料,参照国际植物种子检验规程和中国农作物种子检验规程,对其质量进行检验,探索通关藤种子质量检验的方法。结果通关藤种子净度分析送检样本至少900 g,实验样品至少90 g;种子千粒质量测定选用五百粒法;含水量测定选用高恒温(133±2)℃烘干法,烘干时间为6 h;发芽前自来水浸种24 h,于砂中在30℃光照条件下做发芽实验,发芽计数时间为1~8 d;生活力测定采用0.1%TTC溶液染色,于恒温35℃黑暗条件下染色3 h。结论初步建立了包括扦样、净度分析、真实性鉴定、千粒质量、发芽条件、含水量及生活力7项指标在内的通关藤种子质量检验方法。     

HPLC-ELSD测定通关藤中通关藤苷H的含量

目的:建立通关藤药材中通关藤苷H的HPLC含量测定方法,为完善其质量标准提供科学依据。方法:采用高效液相色谱法(HPLC),YMC ODS-H80色谱柱(4.6 mm×250 mm,4μm),乙腈-水(50∶50)为流动相,流速0.8 mL.min-1,柱温35℃,蒸发光散射检测器(ELSD)检测,雾化温度60℃,N2流速1.5 mL.min-1。结果:通关藤苷H在0.562 5~36.00μg进样量对数与峰面积对数呈良好的线性关系(r=0.999 8),平均加样回收率为99.40%(n=6),RSD 1.8%。11个产地的通关藤药材中通关藤苷H含量相差较大(按干燥品计算0.200 7%~0.862 2%)。结论:建立了通关藤药材中通关藤苷H的HPLC-ELSD含量测定方法,该方法准确、可靠,可用于通关藤药材的质量控制与评价。     

HPLC-DAD-ELSD法同时测定22个产地通关藤中3种皂苷

目的建立HPLC-DAD-ELSD法同时测定22个产地通关藤Marsdenia tenacissima(Roxb.)Wight et Arn.中3种皂苷的含有量。方法通关藤70%乙醇提取物的分析采用Agilent Zorbax SB-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-水(45∶55);检测波长235 nm;体积流量1.0 mL/min;漂移管温度80℃;载气压力3.5 bar(1 bar=100 kPa)。结果通关藤苷G、H、I分别在1.768～5.305μg(r=0.999 2)、3.842～11.526μg(r=0.999 0)、3.026～9.078μg(r=0.999 1)范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为99.60%(RSD=1.86%)、99.88%(RSD=2.49%)、99.08%(RSD=1.14%),不同产地样品中三者含有量有明显差异。结论该方法稳定可靠,可用于通关藤的质量控制。     

HPLC测定通关藤药材及消癌平片中通关藤苷A含量

目的 建立通关藤药材及消癌平片中通关藤苷A的高效液相色谱含量测定方法.方法 色谱柱:Sinochrom ODS-BP分析柱(250 mm× 4.6mm,5 μm);流动相:乙腈-0.1％磷酸(41∶59);检测波长:230 nm.结果 通关藤苷A在0.996～ 19.92 μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系,r=0.999 95,平均加样回收率为96.6％,RSD =2.19％(n=6).结论 本方法操作简单,结果准确,稳定性和重复性好,可用于通关藤药材及消癌平片的含量测定及质量控制.     

夏枯草种子萌发特性的研究

目的：了解温度、光照等条件对夏枯草种子萌发的影响。方法：常规的发芽试验方法进行试验。结果：适宜温度条件下,光照与否对夏枯草种子发芽率影响不明显,温度不适时,光照为制约夏枯草种子发芽的主要因素；在12～36 h浸种时间范围内,随着时间的增加夏枯草发芽率有所降低；5～25 ℃,夏枯草种子的发芽率呈现先升后降的趋势。结论： 浸种12 h,20 ℃光照条件,最适宜夏枯草种子的萌发。     

通关藤中的孕甾醇苷类成分

目的研究通关藤Marsdenia tenacissima茎的化学成分。方法采用正反相硅胶柱色谱法进行分离纯化,结合MS、IR、NMR波谱数据及理化性质鉴定化合物的结构。结果从通关藤茎中分离得到两个孕甾醇苷类化合物,分别鉴定为:11α-丁烯酰基-通关藤苷元B-3-O-β-葡萄糖吡喃基-(1→4)-3-O-甲基-6-脱氧-β-阿洛糖吡喃基-(1→4)-β-齐墩果糖吡喃糖苷,命名为通关藤苷I(1);11α,12β-二-乙酰-通关藤苷元B-3-O-β-葡萄糖吡喃基-(1→4)-3-O-甲基-6-脱氧-β-阿洛糖吡喃基-(1→4)-β-齐墩果糖吡喃糖苷(通关藤苷K,2)。结论化合物1为新化合物,化合物2为首次从通关藤中分离得到。     

HPLC测定通关藤中ZP-7通关藤苷元B的含量

目的:建立HPLC测定通关藤药材中ZP-7通关藤苷元B([11α-O-(2-甲基丁酰基)-12β-O-乙酰基通关藤苷元B])含量的方法,并对不同产地的药材进行测定.方法:采用Agilent TC-C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,流动相乙腈-水(35∶65),流速1.0 mL· min-1,检测波长210 nm,柱温25℃,进样量10μL.结果:ZP-7通关藤苷元B的线性范围为3.183～7.427 μg(r=0.999 4),平均回收率99.95％(RSD 0.83％).结论:方法准确,重复性好,专属性强,可控制药材的质量.     

通关藤的化学成分

目的 研究了通关藤Marsdenia tenacissima的化学成分.方法 利用正、反相硅胶柱色谱分离提纯,经理化常数测定,结合MS、1R、UV、~1H-NMR、~(13)C-NMR等现代波谱学技术确定了其结构.结果 从通关藤水提取物中分离得到10个化合物,分别鉴定为美国商陆脑苷(poke-weed cerebroside,I)、β-D-黄夹吡喃糖苷-(1→4)-β-D-磁麻吡喃糖甲苷(Ⅱ)、11α、12β-丙酮缩二羟基通关藤苷元B(Ⅲ)、牛奶菜醇A(IV)、1-(4-羟基-3-甲氧基-苯基)-2-{2-甲氧基-4-[-1-(E)-丙烯-3-醇]-苯氧基}-丙烷-1,3-二醇(赤式)(V)、半乳糖醇(VI)、东莨菪素(Ⅶ)、直立牛奶菜双糖(marsectobiose,Ⅷ)、胡萝卜苷(Ⅸ)、丁二酸(X).结论 化合物I、V是首次从该属植物中分离得到;化合物Ⅱ、Ⅵ～Ⅷ、X为首次从该植物中分离得到.     

通关藤苷H抑制低分化鼻咽癌细胞增殖及转移的作用机制研究

[目的]研究通关藤苷H对低分化鼻咽癌(NPC)细胞增殖和转移抑制作用及其机制.[方法]以人低分化NPC细胞株CNE-2为病理模型,采用细胞计数试剂CCK-8检测通关藤苷H对细胞存活率的影响.摸索适宜的药效浓度范围,流式细胞法检测细胞凋亡率,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测磷酸化蛋白激酶B、磷酸化糖原合成酶...     

通光藤的化学成分研究

目的 研究通光藤Marsdenia tenacissima的化学成分.方法 利用硅胶、Dephadex LH-20等各种色谱技术进行分离纯化,根据化合物的理化性质和光谱数据进行结构鉴定.结果 从通光藤的正丁醇层提取物中分离得到6个化合物,分别鉴定为二氢肉珊瑚苷元(Ⅰ)、胡萝卜苷(Ⅱ)、3-O-乙酰基-齐墩果烷-18-烯-3β羟基(3-O-acetyl-oleanane-18-ene-3β-ol,Ⅲ)、牛奶菜醇(Ⅳ)、β-谷甾醇(Ⅴ)、豆甾醇(Ⅵ).结论 化合物Ⅰ为首次从自然界中分离得到的新天然产物,化合物Ⅱ为首次从该植物中分得.     

通关藤化学成分HPLC指纹图谱研究

目的：研究通关藤化学成分的指纹图谱。方法：采用HPLC以TC-C₁₈色谱柱（4.6 mm×150 mm,5 μm）,乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,检测波长210 nm,流速1.0 mL·min^-1,柱温25 ℃。结果：以ZP-7通关藤苷元B（[11α-O-(2-甲基丁酰基)-12β-O-乙酰基通关藤苷元B]）为参照物,建立了通关藤的指纹图谱,指认了17个共有峰,精密度和重复性中共有峰相对保留时间RSD<3%,每个产地色谱图中的共有峰的峰面积之和>90%,10批药材的相似度在0.75~0.98,存在一定差异。结论：该方法准确、重复性好,为通关藤质量评价和质量控制提供依据,也为通关藤进一步开发奠定基础。     

GC-MS分析测定乌骨藤挥发性成分

目的:研究乌骨藤挥发性成分。方法:采用石油醚和乙醚作为溶剂,用索氏提取法提取挥发性成分,气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)鉴定其化学成分。结果:采用石油醚作为溶剂鉴定出24种化合物,占挥发成分的55.43%,其中脂肪酸占75.10%,烷烃类占11.91%;乙醚作为溶剂提取鉴定出24种化合物,占60.43%,脂肪酸占38.98%,烷烃类占39.27%。结论:测定了乌骨藤挥发性成分,为进一步研究乌骨藤成分提供了理论依据。     

利用HPLC-IT-TOF-MS表征通关藤化学轮廓

目的利用HPLC-IT-TOF-MS对通关藤的化学轮廓进行全面地解析。方法通关藤甲醇超声提取后,采用Waters AcquityUPLCHSST3色谱柱,乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱;采用正、负离子自动多级质谱模式检测。利用多个孕甾烷类对照品推导该类化合物的质谱裂解规律。结果通过与对照品比对,准确归属了6个绿原酸类化合物和15个孕甾烷衍生物;通过相关文献数据结合质谱裂解规律推导,初步鉴定了100个孕甾烷类衍生物、4个黄酮类化合物和2个绿原酸类化合物。结论利用HPLC-IT-TOF-MS技术能快速、准确地对通关藤的化学轮廓进行全面解析,为通关藤及其制剂消癌平的质量标准及体内药效物质研究提供有效信息。     

通光藤化学成分和药理作用研究进展

通过对通光藤化学成分和药理作用研究进展进行综述,为其研究开发提供有价值的参考。通光藤主要含有C21甾体类化合物,其结构特点是苷元11α和12β位连有多种酰基取代基团,3β位连有糖链基团;药理研究证明其具有抗肿瘤、降血压、平喘等作用。通光藤抗肿瘤生物活性具有潜在开发前景,深入开展相关研究工作具有重要的意义。     

通关藤化学成分的气相色谱-质谱联用分析

目的分析通关藤化学成分的组成,为进一步研究其药理打下物质基础。方法使用气相色谱-质谱联用法在线分析。结果从通关藤石油醚萃取物中鉴定得到了22个化合物。结论气相色谱-质谱联用(GC-MS)法分析通关藤的化学成分,方法可靠,重复性高,可用于进一步研究所得化合物与药效之间的关系。     

通光藤的化学成分研究

目的 :研究中药通光藤Marsdenia tenacissima的化学成分。方法 :利用溶剂提取和硅胶、SephadexLH-20等色谱方法对云南昆明产通光藤的醋酸乙酯可溶部位进行分离纯化 ,通过化学和光谱方法鉴定结构。结果 :共分离得到 8个化合物 ,已鉴定出其中 5个化合物 :大叶牛奶菜苷丁 (Ⅰ) ,大叶牛奶菜苷乙 (Ⅱ) ,牛奶菜醇 (Ⅲ) ,二氢牛奶菜醇 (Ⅳ) ,喙柱牛奶菜苷乙 (Ⅴ)。结论 :这 5个化合物均为首次从该植物中分离得到 ;通光藤的醋酸乙酯可溶部位含有较多的甾体酯苷类化合物。