纤溶酶原激活物抑制剂-1与肾间质纤维化

肾间质纤维化（RIF）是各种慢性肾脏疾病发展到终末期肾病的共同归路。纤溶酶原激活物抑制剂（PAI）的表达及活性异常在RIF病变中发挥着至关重要的作用。该文就PAIs系统在RIF发生发展过程中的作用做一综述。     

卡托普利对内皮细胞分泌组织型纤溶酶原激活物和纤溶酶原激活物抑制剂-1的影响

目的研究转换酶抑制剂卡托普利对内皮细胞组织型纤溶酶原激活物(t-PA)和纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的影响.方法培养肺静脉内皮细胞(ECV304),分别用肿瘤坏死因子(TNF)-α(浓度为5、10、25、50、100μg/L)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)(5、10、25、50、100 nmol/L)刺激,在50μg/L TNF-α刺激的基础上用卡托普利(20、50、100、200 nmol/L)共育,用ELISA的方法检测培养上清中的t-PA和PAI-1的浓度.结果各浓度的TNF-α和AngⅡ刺激24 h后PAI-1的浓度明显增加,与空白对照相比P＜0.05,而t-PA的差异则无统计学意义;各浓度的卡托普利明显抑制TNF-α(50μg/L)诱导的PAI-1分泌增多,P＜0.05,而t-PA的变化不明显.结论TNF-α和AngⅡ可以增加内皮细胞PAI-1的分泌,卡托普利可以抑制TNF-α诱导PAI-1的分泌,而t-PA则不受TNF-α、AngⅡ和卡托普利等因素影响.     

肝硬化患者纤溶活性增高与组织纤溶酶原激活物及其抑制剂的关系

目的 探讨肝硬化患者纤溶性增高与组织纤溶酶原激活物(t-PA),组织纤溶酶原激活物抑制剂(PAI)的关系.方法 根据Child-Pugh分级把明确诊断为肝硬化的35例患者分为三组,A级10例,B级13例,C级12例.对每例样本检测组织纤溶酶原激活物(t-PA)抗原,组织纤溶酶原激活物抑制剂(PAI),纤维蛋白(原)降解产物(FDP)和D-二聚体(D-dimer).结果 22例具有正常纤溶活性(FDP＜5μg/ml;D-dimer＜0.5μg/ml)的病例中,其中A级12例,B级6例,C级4例,tPA抗原随病情严重程度而显著性升高,差异有显著性意义(P＜0.05),而PAI活性在三组结果近似(P＞0.05).另外,通过比较高纤溶活性和正常纤溶活性(B级和C级)t-PA/PAI变化.我们注意到t-PA在纤溶活性高的患者略高于正常纤溶患者,但差异没有显著意义(P＞0.05).PAI在两组间结果近似,差异没有显著性意义(P＞0.05).结论 t-PA随病情加重而显著性升高,PAI随病情加重变化不大;t-PA/PAI失衡不是肝硬化患者纤溶升高的主要因素.     

纤溶酶原激活物抑制物1和器官纤维化

近年来器官纤维化机制的研究热点集中在细胞外基质(ECM)降解过程及其发生机制上。纤溶酶原激活物及其抑制物1(PAI-1)是参与调节ECM代谢的关键酶系,PAI-1的异常表达在器官纤维化的进展过程中起重要作用。现对PAl-1生物学特性以及它和肾纤维化、肺纤维化、肝纤维化、心脏纤维化的关系的研究进展予以综述,为器官纤维化的诊治提供参考。     

纤溶酶原激活物抑制剂-1与其在心血管疾病中的临床应用

纤溶酶原激活物抑制剂-1可在影响纤溶系统的多种疾病中检测出升高,本文就其在心血管疾病中的研究现状作一综述。     

子痫前期患者胎盘组织中纤溶酶原激活物抑制剂-1的表达

目的:研究子痫前期患者胎盘组织中纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的表达情况.方法:采用免疫组织化学染色方法和图像分析系统分别对20例正常孕妇和48例子痫前期患者(轻度18例,重度30例)胎盘组织中PAI-1的表达进行检测.结果:PAI-1主要表达于胎盘绒毛小叶的滋养细胞、绒毛间质细胞和血管内皮细胞的胞核和胞质,以及蜕膜细胞的胞质.轻度子痫前期患者胎盘组织中PAI-1的表达水平(74.97±6.78)高于正常孕妇组的(67.85±3.65),重度子痫前期患者胎盘组织中PAI-1的表达水平(88.12±4.37)高于轻度子痫前期者,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:胎盘组织中PAI-1表达升高可能参与了子痫前期的发病.     

纤溶酶原激活物抑制剂-1与糖尿病足发病关系的研究

目的: 探讨纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)与糖尿病足(DF)发病的关系,为DF的防治提供依据。方法: 42例DF患者为DF组,38例糖尿病(DM)无DF患者为DMNDF组,45名体检健康者为对照组,比较3组间PAI-1、糖基化血红蛋白(HbA1c)、C反应蛋白(CRP)等指标水平的变化。结果: 对照组、DMNDF组、DF组PAI-1、HbA1c、CRP依次升高,且差异均有统计学意义(P < 0.05~P < 0.01)。结论: DF患者PAI-1水平较高;对2型DM患者进行积极干预治疗,降低PAI-1水平,提高纤溶活性,可能延缓动脉硬化、狭窄,减少DF的发生。     

纤溶酶原激活物抑制剂-1启动子区域基因多态性与肺血栓栓塞症的相关性研究

目的探讨纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）基因启动子区域-675位点单核苷酸缺失/插入（4G/5G）多态性与PTE发生的相关性.方法采用病例-对照研究,病例组为经放射性核素肺通气/灌注显像、螺旋CT肺动脉造影（CTPA）检查并结合临床资料确诊的PTE患者101例;对照组为来自PTE患者相同地区汉族人群,101例,性别、年龄相匹配.应用碘化钾-氯仿-异丙醇法提取基因组.联合应用聚合酶链反应（PCR）、变性高效液相色谱分析（DHPLC）和DNA直接测序分析PAI-1基因启动子区域的4G/5G多态性.结果PAI-1基因4G和5G等位基因频率在对照组分别为0.495和0.505,基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡定律.4G4G、4G5G、5G5G基因型在PTE病例组分别为58（57.4%）、32（31.7%）、11（10.9%）;对照组分别为31（30.7%）、38（37.6%）、32（31.7%）,χ2=18.961,差别有统计学意义.病例组与对照组4G等位基因频率分别为0.733、0.495,5 G等位基因分别为0.267,0.505,χ^2=24.060,差别有统计学意义.单变量Logistic回归探讨PAI-1基因4G/5G与PTE的关系,4G4G＋4G5G、4G4G、4G5G的OR值分别为3.794（1.786-8.060）、5.443（2.416-12.260）、2.450（1.067-5.623）;P值分别为0.001、0.000、0.035.结论PAI-1启动子区域4G/5G、4G/4G基因型与PTE的发生有关,4G/5G、4G/4G基因型个体表现为更高的PTE危险性.     

纤溶酶原激活物抑制剂-1在胎盘源性疾病中的作用及其调控因素

纤溶酶原激活物抑制剂-1(plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1)在胎盘组织、蜕膜等妊娠组织中高表达,与胎盘源性疾病发生发展密切相关。胎盘滋养细胞的PAI-1水平受到各种激素、细胞因子、免疫细胞、遗传性基因多态性等因素的共同调控。PAI-1除了抑制纤维溶解、促进止血、预防母胎界面出血的作用外,还可能发挥着阻止细胞外基质降解、降低滋养细胞迁移或侵袭能力、调控细胞衰老的作用。本文就PAI-1的调控因素及其在胎盘源性疾病中的可能作用进行探讨。     

脑梗死患者纤溶酶原激活物抑制剂-1 4G/5G基因多态性的研究

目的研究纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)基因多态性对脑梗死发病的影响.方法对52例脑梗死患者和31名正常对照者进行PAI-1 4G/5G基因多态性的检测,同时进行血浆PAI-1活性测定.结果通过基因多态性的检测,脑梗死患者4G/5G基因型的比例明显高于正常对照组(P=0.021).在PAI-1活性测定中,脑梗死组高于对照组(P＜0.01).脑梗死和正常对照组中4G/5G基因者的PAI-1活性均大于4G/5G基因型个体(P＜0.01或P＜0.05).结论PAI-1及4G/5G基因多态性可能在脑梗死的发病中起重要作用.     

清肝活血方及其拆方对酒精性肝纤维化大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物途径的影响

目的：通过观察清肝活血方及其拆方对酒精性肝纤维化大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物（urokinase-type plas-minogen activator,uPA）和纤溶酶原激活物抑制物1（plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1）途经的调控作用,探讨清肝活血方及其拆方治疗酒精性肝纤维化的作用机制。方法：雄性SD大鼠随机分为空白组、四氯化碳（carbon tetrachloride,CCl4）组和造模组。造模组采用56度二锅头酒、玉米油、吡唑混合物灌胃联合腹腔注射CCl4橄榄油溶液（CCl4∶橄榄油=1∶3）的方法造模。8周后造模组再随机分为模型组、清肝活血方组、清肝方组及活血方组。各治疗组分别加用相应药物（4.75、1.5、3.25g/kg）灌胃,其他各组灌胃等体积生理盐水。12周末处死大鼠,观察大鼠肝功能变化和肝组织病理学改变;采用蛋白印迹法、实时荧光定量聚合酶链式反应、免疫荧光法检测uPA、PAI-1蛋白和mRNA表达。结果：与空白组比较,CCl4组肝纤维化程度未见明显加重;模型组肝纤维化程度则明显加重（P〈0.01）,血清丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）和门冬氨基氨转移酶（aspartate aminotransferase,AST）活性明显升高,肝组织uPA和PAI-1表达明显升高,并且PAI-1升高幅度高于uPA。与模型组比较,清肝活血方及其拆方均能不同程度地减轻酒精性肝纤维化大鼠肝纤维化程度（P〈0.01）,降低血清ALT和AST活性,显著降低PAI-1表达,提高uPA表达。全方对上述环节的调控优于拆方。结论：清肝活血方及其拆方均能改善酒精性肝纤维化大鼠肝功能,减轻纤维化程度,且全方作用优于拆方,其机制可能与调控uPA/PAI-1纤溶途径有关。     

2型糖尿病小鼠肾脏纤溶酶原激活物抑制物-1表达

目的探讨2型糖尿病动物模型KKAy小鼠肾脏纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)和组织纤溶酶原激活物(tPA)mRNA表达与肾脏细胞外基质蓄积的关系.方法选取8周龄雄性KKAy小鼠和C57BL-J小鼠,分别于16、20和24周处死.采用发色底物法检测不同周龄的KKAy小鼠及参照组C57BL/J小鼠的血浆PAI-1活性,RT-PCR法检测小鼠肾皮质tPA mRNA表达,原位杂交法检测肾皮质PAI-1 mRNA水平,免疫组织化学和免疫印迹法检测肾皮质层粘连蛋白表达.结果不同周龄KKAy小鼠肾皮质层粘连蛋白表达均高于同龄对照组(P＜0.05).2型糖尿病KKAy小鼠与C57BL/J小鼠血浆PAI-1活性的差异没有显著性(P＞0.05);但肾皮质tPA mRNA水平却显著降低,以16周时最为显著,仅为C57BL/J小鼠的47%,随周龄的增加,其差异逐渐减小.原位杂交显示KKAy小鼠PAI-1mRNA可在肾脏多部位表达,并以近端小管上皮细胞内的表达为主,且明显高于同龄C57BL小鼠.结论2型糖尿病KKAy小鼠早期肾病时,细胞外基质蛋白的蓄积可能和tPA mRNA表达下调及PAI-1 mRNA表达上调所致的纤溶酶降解细胞外基质作用降低有关.     

Rhein inhibits transforming growth factor β1 induced plasminogen activator inhibitor-1 in endothelial cells

Objectives To investigate the effect of rhein on endothelial plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1) mRNA expression and protein production induced by transforming growth factor β1 (TGFβ1), and to explore the mechanism of the protective action of rhein on endothelial cells. Methods A human umbilical endothelium derived cell line (ECV-304) from ATCC was used in this study. The PAI-1 mRNA expression and protein synthesis in the endothelial cells were detected by Northern blot and flow cytometry analysis, respectively. The activity of phospho-p44/p42 MAP kinase induced by TGFβ1 was determined by immunoprecipitation analysis and western blot. Results TGFβ1 rapidly increased PAI-1 mRNA expression in the endothelial cells, and this effect lasted at least 24 hours. The upregulation of PAI-1 mRNA expression induced by TGFβ1 in endothelial cells was inhibited by rhein in a dose-dependent manner. In addition, rhein inhibited endothelial PAI-1 protein production. Further study revealed that rhein had a significant inhibitory effect on the activity of phospho-p44/p42 MAP kinase induced by TGFβ1 in human endothelial cells. Conclusions Our results showed that rhein may have a protective effect on the endothelial dysfunction by inhibiting overexpression of PAI-1, indicating a way for the treatment of vascular diseases.     

AP-1在血管内皮细胞PAI-1表达中的作用

目的 研究核转录因子激活蛋白-l(activator protein-l,AP-1)在肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、弱氧化修饰低密度脂蛋白(minimal modified low density lipoprotein,mmLDL)诱导血管内皮细胞PAI-l基因表达中的转录调控机制。方法 进行人脐静脉内皮细胞(human vascular endothelial cells,HUVECs)的培养和鉴定。采用基因重组技术,构建4个含人PAI-l基因不同长度5′上游序列的荧光素酶报告基因质粒,并结合瞬时转染分析实验,初步确定PAI-l基因上游具有调控作用的是位于-823到-553之间的AP-l元件。为进一步确证AP-l元件的调控作用,采用PCR法对该元件进行定点突变。结果 TNF-α能明显诱导构建质粒pGL3-PAl-l-823／ 90荧光素酶的表达,但对质粒pGL3-PAl-l-823／ 90的3个突变体诱导作用明显降低;mmLDL也能明显诱导质粒pGL3-PAI-1-823／ 90荧光素酶表达,但对质粒pGL3-PAl-l-823／ 90的3个突变体的诱导作用不明显。结论 在TNF-α、mmLDL作用下,内皮细胞转录表达PAI-l基因过程中,3个AP-l元件起着重要的作用。     

两类心绞痛患者胰岛素抵抗和纤溶酶原激活抑制物-1的比较

目的　两种不同类型心绞痛胰岛素抵抗和纤溶功能的比较 .方法　狭窄性心绞痛 (AP)组 2 7例 ;微血管性心绞痛(MV)组 17例 ;对照组 13例 .分别测量患者身高 ,体质量和血压 .冠状动脉造影前 ,空腹 12 h抽取静脉血 ,测定血脂 ,空腹血糖 ,胰岛素 (Ins) ,C-肽 (C- P)和纤溶酶原激活抑制物 - 1(PAI- 1) .结果　 AP和 MV组血清 Ins分别为 (2 3± 8)m IU· L- 1 和 (2 5± 6 ) m IU· L- 1 ,均明显高于对照组 (15± 5 )m IU· L- 1 (P<0 .0 5 ) ;C- P分别为 (2 .7± 0 .9) μg· L- 1和 (3.1± 0 .8)μg· L - 1 均明显高于对照组 (2 .0± 0 .9)μg· L- 1 (P<0 .0 5 ) ,AP和 MV组胰岛素敏感性指数 (Ins I)均明显低于对照组 0 .0 1± 0 .0 1vs 0 .0 2± 0 .0 1(P<0 .0 5 ) ,以上各指标在AP和 MV组间没有差异 (P>0 .0 5 ) .AP组血浆 PAI- 1为(3.2± 0 .9) AU· m L- 1 ,明显高于 MV组 (2 .5± 0 .6 ) AU·m L- 1和对照组 (2 .5± 0 .4) AU·m L- 1 (P<0 .0 5 ) ,MV组和对照组间没有差异 (P>0 .0 5 ) . AP患者血浆 PAI- 1分别与血清Ins(r=0 .484,P<0 .0 5 )和 C- P(r=0 .5 2 1,P<0 .0 5 )正相关 .AP和 MV组 TG,TC明显高于对照组 (P<0 .0 5 ) ,此两组间没有差异 (P>0 .0 5 ) .结论　 AP和 MV患者都存在胰岛素抵抗 ,     

Effects of simvastatin on cigarette smoke extract induced tissue-type plasminogen activator and plasminogen activator inhibitor-1 expression in human umbilical vein endothelial cells

Background Cigarette smoking has an influence on both arterial-type and venous-type thrombosis. However, little is known about the direct effect of cigarette smoke extract （CSE） on fibrinolytic activity of human umbilical vein endothelial cells （HUVECs）. Most recently, simvastatin has been marked in its effect on endothelial cells protection and anticoagulation. In this study, the effect of CSE on the expression of tissue-type plasminogen activator （t-PA） and plasminogen activator inhibitor-l（PAl-1） in HUVECs was addressed. The role of simvastatin in CSE-induced fibrinolytic activity changes was investigated as well. Methods The fourth to fifth generation of HUVECs were incubated respectively with 0, 5%, 10% and 20% CSE for 6 hours or exposed to 5% CSE for 0, 4, 6, 8, 12, 24 hours to determine the expression changes of t-PA and PAl-1 protein. Meanwhile, cells were also accordingly exposed either to 5% CSE alone or simvastatin pre-treated and 5% CSE for 24 hours to assess the role of simvastatin in CSE-induced t-PA and PAl-1 protein and mRNA expression in HUVECs. RT-PCR and ELISA techniques were used for detecting the t-PA or PAl-1 mRNA and protein. Results After 6-hour exposure to CSE, the expression levels of t-PA protein in 10% and 20% CSE-treated groups reduced significantly （（0.0365±0.0083） ng/ml, （0.0255±0.0087） ng/ml） when compared with that of control group （（0.0660±0.0120） ng/ml） （P 〈0.05）. In contrast, the levels of PAl-1 protein in 5%, 10% and 20% CSE-treated groups increased remarkably （（13.3225±0.5680） ng/ml, （14.2675±1.5380） ng/ml, （14.4292±1.6230） ng/ml） when compared with that of control group （（8.5193_±0.7537）ng/ml） （P〈0.05）. After stimulation with 5% CSE for 0, 4, 6, 8, 12, 24 hours, the levels of PAl-1 protein increased over time and reached the peak at 24 hours （（14.6400±1.0651） ng/ml）, which was significantly higher than that of control group （（12.0656±0.6148） ng/ml） （P 〈0.05）. Additionally, CSE could up-regulate PAl-1 expression at both the mRNA and the protein levels. The levels of PAl-1 mRNA and protein increased significantly in 5% CSE-treated group （（8.8030±0.4745） ng/ml, （1.8155±0.0412） ng/ml） compared with those of control groups （（5.0588±0.2315） ng/ml, （1.3030±0.0647） ng/ml） （P 〈0.01）, and decreased after 2-hour simvastatin pre-treatment （（5.4875±0.3166） ng/ml, （1.3975-±0.0297） ng/ml） （P 〈0.01）. No significant difference was found at the levels of t-PA protein and mRNA （P 〉0.05）. Conclusions CSE inhibits the fibrinolytic activity of HUVECs in vitro. Simvastatin plays a protective role in CSE-induced fibrinolytic malfunction.     

乳腺癌患者血浆尿激酶型纤溶酶原激活系统的变化及其意义

目的 :观察乳腺癌患者血浆尿激酶型纤溶酶原激活物 (u -PA)及其特异性受体 (u -PAR)和纤溶酶原激活物抑制物 - 1 (PAI- 1 )含量的变化及其与肿瘤转移和预后的关系。方法 :用ELISA法测定 2 2例乳腺癌患者和 2 1例正常人血浆中u -PA、u -PAR和PAI- 1含量。结果 :乳腺癌患者的血浆u -PA、u -PAR和PAI - 1含量均显著升高 (P <0 .0 5～ 0 .0 1 ) ;中、晚期组u -PA显著高于早期组 (P <0 .0 5 ) ,已转移组u -PA、u -PAR和PAI- 1较未转移组显著升高 (P <0 .0 5～ 0 .0 1 )。结论 :乳腺癌患者血浆中u -PA、u -PAR和PAI - 1含量不同程度升高 ,并与肿瘤转移和预后相关     

PDGF对大鼠肾小球系膜细胞表达PAI-1的影响

目的:探讨血小板源性生长因子(PDGF-BB)对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞表达纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的影响.方法:以0、5、10 ng/ml终质量浓度的PDGF-BB刺激体外培养的大鼠肾小球系膜细胞分别作用0、12、24、48 h, 以发色底物显色法检测细胞上清液中PAI-1的活性;以0、5、10 ng/ml质量浓度的PDGF-BB刺激系膜细胞24 h和10 ng/ml质量浓度的PDGF-BB刺激细胞0、12、24、48 h, 半定量RT-PCR观察系膜细胞PAI-1 mRNA表达情况.结果:0、5、10 ng/ml的PDGF-BB 作用于系膜细胞24 h,其PAI-1 mRNA/GAPDH mRNA分别为0.296、 0.428、0.542.10 ng/ml的PDGF-BB作用系膜细胞0、12、24、48 h, PAI-1 mRNA/GAPDH mRNA分别为0.156、0.345、0.493、0.597,表现为浓度和时间依赖效应.PDGF-BB也可浓度依赖性地增加PAI-1的活性,24 h内活性逐渐增高,48 h时下降.结论:PDGF-BB可上调体外培养的大鼠肾小球系膜细胞PAI-1的活性及其mRNA的表达,提示PDGF可能通过抑制细胞外基质的降解导致细胞外基质的积聚,从而参与肾小球硬化的过程.     

肝硬化患者血浆纤溶酶原活化系统变化及其意义

目的探讨肝硬化患者血浆尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)、尿激酶型纤溶酶原激活物受体(uPAR)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)变化及其意义。方法检查确诊的72例乙肝后肝硬化患者,依据Child-Pugh分级分为3级,其中A级23例,B级29例,C级20例。健康志愿献血者6例做为正常对照组。酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆uPA、uPAR、PAI-1的变化。同时检测血浆TGF-β1、透明质酸、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)变化以及血浆白蛋白、胆红素、凝血酶原活动度改变。结果随着肝硬化的进展,血浆uPA、uPAR、PAI-1逐渐增加,血浆TGFβ1、血透明质酸、Ⅲ型前胶原也明显增加。Child C组患者血浆uPA、uPAR、PAI-1水平明显高于ChildA、ChildB组。Child A组PAI-1/uPA值下降,而Child B组、Child C组PAI-1/uPA又复升高。Child C组血浆uPA、uPAR、PAI-1水平与正常组、Child A组相比,差异显著。在Child A组,血浆uPA与PCⅢ呈负相关,与TGFβ1正相关;在Child C组血浆TGFβ1与血Ⅲ型胶原呈正相关,与HA呈正相关。结论血浆uPA、uPAR、PAI-1变化与肝硬化发生发展密切相关。肝硬化晚期,虽然血浆uPA、PAI-1增加,但总的效应表现为uPA相对不足,肝基质纤维降解受抑。适当增加uPA活性,抑制TGFβ1的早期激活,抑制肝硬化晚期PAI-1过度表达,可能有助于抑制HSC的激活、增加肝细胞外基质降解,从而有助于延缓肝硬化的发生发展。