大鼠卵巢蒂扭转后颗粒细胞凋亡及相关蛋白表达

目的探讨大鼠卵巢蒂扭转后不同时间颗粒细胞的凋亡及与Bax和Caspase-3蛋白表达的关系,用实验数据验证卵巢蒂扭转后保守性手术治疗的最佳时间．方法将20只Sprague—Dawley性成熟雌性大鼠按照随机设计原则分成4组,每组均为5只．此4组分为正常组,卵巢蒂扭转后24h,48h,72h组．取卵巢组织常规石蜡包埋,切片,HE染色,采用免疫组化（sP）法检测Bax和Caspase－3及（TUNEL）测定颗粒细胞凋亡．SPSS进行统计分析,P〈0．05为差异有统计学意义．结果SD性成熟雌性大鼠在卵巢扭转后,TUNEL检测细胞凋亡在第48h达高峰,与对照组比较,在第24h、48h、72h时均有统计学意义（P〈0．05）．实验组Bax的表达随扭转时间的增加而表达增加,扭转后第72h达高峰．与对照组比较,实验组Bax的表达在卵巢扭转后第24h、48h、72h均有统计学意义（P〈0．05）．Caspase－3蛋白在对照组几乎无表达,实验组Caspase－3的表达随扭转天数的增加而增加,扭转后第72小时达高峰．与对照组比较,实验组Caspase－3的表达在卵巢扭转后第j4h、48h、72h均有统计学意义（P〈0．05）．Bax和Caspase－3蛋白在卵巢扭转后细胞凋亡的表达中呈正相关．结论卵巢扭转后可诱导颗粒细胞发生凋亡,其机制与Bax和caspase-3的激活有关．同时根据TUNEL检测结果提示,卵巢扭转后,复位卵巢并保留卵巢的保守性手术治疗的最佳时机是扭转48h内,而且时间越早越好．     

卵巢颗粒细胞凋亡与多囊卵巢综合征

关于多囊卵巢综合征的确切病因机制未明，近年来，对卵巢颗粒细胞凋亡研究取得了很大的进展。颗粒细胞凋亡在多囊卵巢综合征中的发病机制逐渐受到人们的重视。本文对此做一综述，为多囊卵巢综合征的病因研究提供相关的理论依据。     

体外受精-胚胎移植67例患者卵巢颗粒细胞bcl-2、bax蛋白表达与妊娠结局的关系

目的 探讨卵巢颗粒细胞中凋亡相关蛋白bcl-2、 bax的表达与妊娠结局的关系. 方法 选择67例适合进行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)手术的不孕症患者,通过免疫组织化学方法 检测卵泡液中卵巢颗粒细胞凋亡相关蛋白bcl-2和bax的表达率.同时分析其与优质胚胎数和妊娠结局的关系. 结果 IVF-ET患者优质胚胎≥2个组与无或优质胚胎<2个组其颗粒细胞bc1-2蛋白及ba x 蛋白阳性率比较,差异有统计学意义.临床妊娠组与非临床妊娠组其颗粒细胞bc1-2蛋白及 bax蛋白阳性率比较,差异有统计学意义. 结论 卵巢颗粒细胞凋亡相关蛋白bcl-2、bax的表达与优质胚胎数有关,研究卵巢颗粒细胞的bcl-2、bax蛋白表达可以预测IVF-ET妊娠结局.     

颗粒细胞凋亡机制与多囊卵巢综合征

多囊卵巢综合征（PCOS）是引起育龄妇女不孕的主要原因，但其确切病因机制目前尚不清楚。近年来，对卵巢颗粒细胞凋亡的研究取得了很大的进展，故颗粒细胞凋亡在多囊卵巢综合征发病中的作用逐渐引起人们的重视。本文就多囊卵巢综合征与卵巢颗粒细胞凋亡的关系作一综述。     

颗粒细胞凋亡机制与多囊卵巢综合征

多囊卵巢综合征（PCOS）是引起育龄妇女不孕的主要原因,但其确切病因机制目前尚不清楚。近年来,对卵巢颗粒细胞凋亡的研究取得了很大的进展,故颗粒细胞凋亡在多囊卵巢综合征发病中的作用逐渐引起人们的重视。本文就多囊卵巢综合征与卵巢颗粒细胞凋亡的关系作一综述。     

体外受精-胚胎移植67例不孕症患者卵巢颗粒细胞凋亡率与妊娠结局的关系

目的：探讨卵巢颗粒细胞凋亡率与妊娠结局的关系。方法：选择67例适合进行体外受精-胚胎移植（IVF-ET）手术的不孕症患者，收集卵泡液中的颗粒细胞，通过流式细胞仪检测卵泡液中卵巢颗粒细胞凋亡率，分析其与妊娠结局的关系。结果：IVF—ET患者临床妊娠组颗粒细胞凋亡率明显低于非临床妊娠组（P〈0．01）。结论：卵巢颗粒细胞凋亡率可能可以预测IVF—ET妊娠结局。     

细胞凋亡相关基因bcl-2与bax在胃癌组织中表达探讨

目的:探讨凋亡相关基因bcl-2和bax在人胃癌组织中蛋白的表达情况及其与胃癌的各种临床病理特征和预后的关系。方法:用免疫组织化学SABC法检测经手术治疗的72例胃癌患者的病理标本,用TUNEL法检测其中的细胞凋亡情况。同时检测13例正常胃组织作为对照。结果:bcl-2蛋白在胃癌组织中的阳性表达率为36.11%,bax为52.78%,两者与正常胃组织比较差异均有统计学意义(P<0.05和<0.01)。结论:bcl-2和bax蛋白的表达与胃癌的lauren分型、分化程度及淋巴结转移相关,并通过对细胞凋亡的调控参与了胃癌的发生、发展,和预后密切相关。     

米非司酮对体外大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响

目的 探讨米非司酮(RU-486)对体外培养的大鼠卵巢颗粒细胞分泌功能及其凋亡的影响.方法 体外培养SD雌性大鼠的卵巢颗粒细胞,采用流式细胞术及荧光染色观察加入米非司酮后细胞凋亡情况,免疫细胞化学法观察颗粒细胞中凋亡因子Fas的表达,化学发光法检测雌、孕激素水平.结果 颗粒细胞凋亡数量随米非司酮剂量增加而增多,凋亡率在米非司酮低剂量组[(7.50±0.86)%]与对照组[(6.70±0.73)%]间差异无统计学意义,中剂量组[(9.53±0.78)%]、高剂量组[(13.00±1.75)%]与对照组间差异有统计学意义(P<0.05),各处理组之间差异有统计学意义(P<0.05).颗粒细胞中Fas蛋白表达随米非司酮处理剂量的增加而增强,各组间差异均有统计学意义(P<0.05).培养细胞上清液中孕酮的水平随米非司酮浓度增加而降低,各处理组间差异有统计学意义(P<0.05),雌二醇水平组间差异无统计学意义.结论 米非司酮可能通过上调颗粒细胞表面Fas蛋白的表达,直接抑制颗粒细胞孕酮的分泌,诱导颗粒细胞发生凋亡,抑制卵泡发育;米非司酮对颗粒细胞分泌雌二醇的功能则没有直接的影响.     

胃粘膜癌前病变Hp感染与bax蛋白表达及细胞凋亡的关系

目的 研究幽门螺杆菌（Hp) 感染后胃粘膜前病变中bax蛋白表达状态及其与细胞凋亡的关系,了解Hp在胃癌发生过程中的作用。方法 采用免疫组织化学等方法检测83例病理证实为慢性胃炎病人胃粘膜上皮细胞中bax蛋白的表达情况,并采用凋亡细胞原位检测方法对组织切片中的凋亡细胞进行观察和比较。结果 在浅表性胃炎、萎缩性胃炎、肠化生及异型增生中,bax蛋白表达率分别为26．67％、45．45％、70．00％、56．25％,bax蛋白在肠化生组织中的表达率显著高于浅表性胃炎（P＜0．01）。Hp感染者bax蛋白表达率为64．28％,显著高于未感染者的29．62％（P＜0．01）。在萎缩、肠化生及异型增生等癌前病变中,Hp感染者与未感染者bax蛋白表达率分别为70．21％及33．33％（P＜0．01）。凋亡细胞原位检测结果显示,bax蛋白表达阳性肠化生和异型增生组织中的凋亡细胞指数显著高于bax蛋白阴性组（P＜0．05及P＜0．01）。结论 Hp感染对bax蛋白表达有一定的影响,bax基因对胃粘膜相皮细胞凋亡具有促进性调控作用,Hp感染可促进bax蛋白表达增加,这可能是Hp感染诱导胃粘膜上皮细胞凋亡的机制之一。     

镉对小鼠卵泡颗粒细胞凋亡的影响

目的：主要研究镉对卵泡颗粒细胞凋亡和DNA完整性的影响。方法通过向培养液中添加不同浓度的CdCl2使小鼠卵泡颗粒细胞处于Cd暴露的条件下,采用流式细胞术、 DNA Ladder和台盼蓝染色的方法检测细胞的凋亡和DNA完整性。结果低浓度(5μM)的CdCl2处理细胞24 h可引起小鼠细胞的大量死亡,高浓度(20μM和50μM) CdCl2处理颗粒细胞12 h即可引起细胞的大量死亡;流式细胞术结果显示, CdCl2处理颗粒细胞后,随着Cd浓度的增加,无论凋亡早期、凋亡后期和死细胞所占比例都会极显著的增加(P<0.01); Cd引起的细胞凋亡过程中伴随着DNA的片段化。结论5μM的镉即可引起小鼠颗粒细胞的凋亡,进而可能影响小鼠卵巢的正常正理功能。     

染料木黄酮诱导人卵巢癌HO-8910 细胞凋亡的实验研究

目的研究染料木黄酮对人HO-8910卵巢癌细胞的抑制效应和诱导凋亡作用,探讨其机制。方法将不同浓度的染料木黄酮作用于人HO-8910卵巢癌细胞,利用MTT法检测其有效作用浓度,分别采用瑞氏染色、TUNEL、流式细胞仪观察和检测HO-8910细胞凋亡情况。结果MTT法测得其IC50值为28.63 mg/L,浓度为8~128 mg/L的染料木黄酮具有诱导人HO-8910卵巢癌细胞凋亡的作用,且随药物作用时间延长凋亡率逐渐增加。结论染料木黄酮具有抗卵巢癌作用,其重要作用机制之一是诱导人HO-8910卵巢癌细胞凋亡。     

重组凋亡素真核表达载体诱导人卵巢癌细胞凋亡

目的 观察凋亡素基因（VP3）在卵巢癌细胞株CoCl中诱导凋亡的情况。方法 用Kpn Ⅰ、Xba Ⅰ分别双酶切pMD18-CAVP3和pcDNA3．1（＋），分别回收365bp和5．0kb大小的片断，然后常规行连接反应，构建重组凋亡素真核表达栽体pcDNA3．1-VP3。采用Lipofectamine^TM 2000介导的基因转染法，在体外将pcDNA3．1-VP3转染入卵巢癌细胞株CoCl中，RT—PCR检测凋亡素在细胞中的表达，用流式细胞仪检测细胞凋亡。结果 酶切鉴定及测序结果表明重组凋亡素真核表达载体pcDNA3．1-VP3构建成功。RT—PCR证实VP3基因在COCl中存在并在转录水平表达。转染pcDNA3．1-VP3细胞凋亡率明显高于转染空质粒组（P〈0．01）。结论 凋亡素可有效诱导卵巢癌细胞COCl凋亡。     

Bcl-2和bax蛋白在人脑胶质瘤中的表达及其与恶性程度的关系

目的:探讨bc l-2和bax蛋白在人脑胶质瘤中的表达及其与恶性程度的关系。方法:对本院神经外科住院手术切除的脑胶质瘤组织标本60例用免疫组化法检测bc l-2和bax蛋白的表达,用TUNEL法检测细胞凋亡。结果:Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤间bc l-2、bax蛋白表达阳性细胞率分别为(50.55±1.63)%、(35.14±0.87)%、(15.42±1.56)%和(15.08±0.99)%、(28.15±1.58)%、(39.58±1.66)%(均P<0.05)和凋亡细胞百分率(4.58±1.05)%、(10.26±1.66)%、(19.78±1.45)%(P<0.05),差异有显著性。胶质瘤的分级与bc l-2蛋白阳性细胞率呈负相关(r=-0.8991,P<0.05),与bax蛋白表达和凋亡细胞百分率呈正相关(r=0.8856,0.9047,P<0.05)。结论:bc l-2、bax蛋白表达阳性细胞率和凋亡细胞百分率与胶质瘤的恶性程度有关。     

阿魏酸钠对多囊卵巢大鼠颗粒细胞凋亡的影响

目的:研究阿魏酸钠(SF)对多囊卵巢大鼠体重、血清激素和卵巢颗粒细胞凋亡的影响。方法:20只SD雌性大鼠注射脱氢表雄酮(DHEA)建立多囊卵巢大鼠(PCO)模型,随机分为SF组和DHEA组,观察用药前后动物体重和血清激素水平变化情况;TUNEL法和免疫组化法检测卵巢颗粒细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达水平变化。结果:SF组血清T水平和E2浓度均较DHEA组降低(P<0.05),血清P浓度则明显增加(P<0.05);DHEA组镜下可见卵巢颗粒细胞层数明显增加至4-8层,细胞凋亡率显著低于SF组(P<0.001),其Bcl-2表达较空白组低(P<0.05),Bax表达则较高(P<0.001),Bcl-2/Bax的比值下降;SF组Bcl-2的表达较DHEA组高(P<0.001);Bax表达较低(P<0.001),Bcl-2/Bax的比值增加。结论:阿魏酸钠改善多囊卵巢大鼠内分泌状况可能与调节Bcl-2和Bax蛋白表达,发挥其抗细胞凋亡有关。     

槲皮素对多囊卵巢综合征大鼠卵巢颗粒细胞增殖与凋亡的影响研究

[目的] 探究槲皮素(quercetin,Q)对多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)大鼠卵巢颗粒细胞增殖与凋亡的影响及其作用机制。[方法] 建立PCOS大鼠模型,提取培养卵巢颗粒细胞进行鉴定,并分为PCOS组、PCOS+4-氯-N-环己基-N-(苯基甲基)苯甲酰胺(N-benzyl-4-chloro-N-cyclohexylbenzamide,FZ)组、PCOS+L-Q(槲皮素0.5 μg·mL-1)组、PCOS +H-Q(槲皮素1 μg·mL-1)组、PCOS+H-Q+FZ组、PCOS+盐酸二甲双胍(metformin hydrochloride,MH)组,并取正常颗粒细胞作为对照组。以四甲基偶氮唑盐[3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,MTT]法检测细胞活力,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞上清液中雌二醇(estradiol,E2)、孕酮(progesterone,P)、促卵泡生成素(follicle-stimulating hormone,FSH)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、雄激素(testosterone,T)含量,流式细胞术测定细胞凋亡率,并进行活性氧(reactive oxygen species,ROS)活性检测。实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,Real-time qPCR)检测细胞中晚期糖基化终末产物受体(receptor of advanced glycation end products,RAGE)、Bax、Bcl-2及炎性介质高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)的mRNA表达情况,免疫印迹法检测细胞中晚期糖基化终末产物/晚期糖基化终末产物受体(advanced glycation end products/receptor of advanced glycation end products,AGEs/RAGE)及细胞外信号调节蛋白激酶/有丝分裂原蛋白激酶(extracellular signal-regulated kinase/mitogen-activated protein kinase,ERK/MAPK)相关蛋白表达情况。[结果] 分离的大鼠卵巢颗粒细胞鉴定正常。MTT结果显示,槲皮素在0～1 μg·mL-1时对正常颗粒细胞活力无影响,对于PCOS组细胞,槲皮素作用后各组细胞活力显著升高(P＜0.05,P＜0.01)。与PCOS组比较,PCOS+FZ组、PCOS+H-Q组、PCOS+H-Q+FZ组和PCOS+MH组细胞中E2、LH、T含量以及ROS活性均显著降低(P＜0.05,P＜0.01),PCOS+H-Q组、PCOS+H-Q+FZ组、PCOS+MH组中RAGE、HMGB1、Bax的mRNA,AGEs和RAGE的蛋白表达水平均显著降低(P＜0.05,P＜0.01),Bcl-2的mRNA及p-ERK、p-p38 MAPK蛋白表达水平均显著升高(P＜0.05,P＜0.01)。 [结论] 槲皮素能够通过降低AGEs/RAGE通路活性,促进PCOS大鼠卵巢颗粒的增殖,抑制细胞凋亡来改善PCOS。     

醋酸棉酚诱导鼠前列腺癌细胞凋亡的研究

目的研究醋酸棉酚对鼠前列腺癌RM-1细胞的抑制作用和诱导凋亡作用,探讨其作用机制。方法将不同浓度的醋酸棉酚作用于鼠前列腺癌RM-1细胞,利用MTT法检测其有效作用浓度,分别采用电子显微镜及流式细胞仪观察和检测RM-1细胞凋亡和bax蛋白表达情况,RT-PCR检测mRNA表达水平变化。结果MTT法测得其IC50值为34.56mg／L,浓度为30mg／L的醋酸棉酚具有诱导鼠前列腺癌RM-1细胞凋亡的作用,且随药物作用时间的延长,凋亡率逐渐增加,同时bax蛋白表达也逐渐增加;RT-PCR显示bax-mRNA水平逐渐升高。结论醋酸棉酚能诱导鼠前列腺癌细胞凋亡,其作用机制之一是上调bax-mRNA水平、增加bax蛋白表达,且具有时间依赖性。     

Bax蛋白在丁酸钠诱导食管癌细胞凋亡中的表达

目的:探讨丁酸钠对人食管癌Eca-109细胞凋亡的作用。方法:以1 mmol/L、2.5 mmol/L和5 mmol/L丁酸钠分别与人食管癌Eca-109细胞共培养,倒置显微镜观察细胞生长情况,免疫组化(SP)法检测凋亡抑制基因bax蛋白的表达。结果:Eca-109细胞经丁酸钠处理后,在倒置显微镜下观察到丁酸钠处理后的Eca-109细胞形态学发生了改变,细胞生长明显受到抑制;免疫组化检测实验组细胞的bax蛋白表达阳性率低于对照组,具有统计学意义(P<0.05)。结论:丁酸钠可诱导食管癌Eca-109细胞凋亡,其机制与下调凋亡抑制基因bax蛋白表达有关。