电刺激应激对C57 BL/6小鼠腹腔巨噬细胞产生白细胞介素1的影响

应激所致的免疫功能改变的机理认为与神经内分泌和免疫系统双向调节作用有关。鉴于白细胞介素1(IL-1)在这双向环路中的作用,促使研究电刺激应激对C57 BL/6小鼠腹腔巨噬细胞产生IL-1的影响。结果表明:应激6、12、20h后IL-1活性明显抑制,分别是正常活性的63.7±5.5％、59.2±4.8％、61.2±3.8％,P值均<0.01。而应激1、3 h后IL-1活性与正常无明显差异。我们进一步观察到:将应激6、12、20 h后的腹腔巨噬细胞在体外温育2、4、8 h后,再用内毒素诱生,随温育时间延长,巨噬细胞产生IL-1水平逐渐回升,8 h后IL-1活性基本恢复正常。上述结果提示:6 h以上电刺激应激抑制IL-1生成,但这种抑制在培养8 h条件下是可逆的。     

天敌应激对Balb/c小鼠腹腔巨噬细胞产生细胞因子的影响

目的 :探讨精神应激 (天敌应激 )对小鼠腹腔巨噬细胞产生细胞因子的影响 ,进一步完善神经免疫内分泌网络中下丘脑 垂体 肾上腺 单核 巨噬细胞 (HPA Mo MΦ)调节环路的知识。方法 :将小鼠分为正常对照组、急性应激组和慢性应激组。应激组暴露在猫境中。急性应激 [4 5min (次·d) ]和慢性应激 [4 5min (次·d) ,连续刺激 1 4d]后 ,快速断头杀鼠 ,无菌制备小鼠腹腔巨噬细胞 ,经 2 4h培养后用酶联免疫吸附测定法测定腹腔巨噬细胞培养上清液中IL 1 β、IL 6蛋白水平。结果 :慢性天敌应激后培养上清液中IL 1 β、IL 6水平较正常对照组无明显变化 (P >0 0 5 ) ;急性应激后 ,水平明显降低 ,与正常对照组及慢性应激组比有统计学意义 (P <0 0 5 )。结论 :天敌应激可影响巨噬细胞功能以及HPA Mo MΦ调节环路活性。     

链球菌组蛋白样蛋白对小鼠腹腔巨噬细胞产生IL-6的影响

为研究链球菌组蛋白样蛋白 (HlpA)对小鼠腹腔巨噬细胞 (MΦ)体外产生白细胞介素 6(IL 6)的影响 ,将不同质量浓度的HlpA和 (或 )LTA放入培养的细胞中 ,作用不同时间后收集上清液 ,用IL 6依赖株 7TD1细胞测定样品IL 6活性。结果显示 ,链球菌HlpA( 0～ 1 0 0mg/L)在体外以剂量和时间依赖方式促进MΦ产生IL 6。LTA和HlpA的混合物对IL 6的产生呈协同增强作用 ;肝素则起抑制作用     

氯氮平对雄性C57BL/6小鼠淀粉酶和促炎性细胞因子表达的影响

目的 研究不同剂量氯氮平对雄性C57BL/6小鼠血清及其胰腺组织中淀粉酶(amylase)和促炎性细胞因子[白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α]表达的影响.方法 将雄性C57BL/6小鼠随机分成对照组、氯氮平(5、10、20 mg/kg)组,分别给予0.9％氯化钠溶液、氯氮平(5、10、20 mg/kg)灌胃,连续灌胃14 d后采血测定各组小鼠amylase和促炎性细胞因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)的水平;随后取小鼠胰腺组织,用Western blot方法检测胰腺组织amylase和促炎性细胞因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)蛋白的表达,用荧光定量PCR方法检测胰腺组织amylase和促炎性细胞因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)mRNA的表达.结果 与对照组相比,氯氮平10、20 mg/kg组血清amylase水平明显升高(P＜0.01,P＜0.001);与对照组相比,氯氮平三组的血清IL-1β水平剂量依赖性地升高(P ＜0.01,P＜0.001);与对照组相比,血清IL-6水平在氯氮平5 mg/kg组有所下降(P＜0.05).氯氮平剂量依赖性地升高小鼠胰腺组织amylase和促炎性细胞因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)蛋白以及mRNA的表达水平,与对照组相比,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 氯氮平可以升高血清amylase和促炎性细胞因子IL-1β的水平,并增加胰腺组织中amylase和促炎性细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达,可能是氯氮平使用后易出现高淀粉酶血症乃至胰腺炎的发生机制之一.     

四物汤对小鼠淋巴细胞增殖及巨噬细胞产生白细胞介素1的影响

四物汤对小鼠淋巴细胞增殖及巨噬细胞产生白细胞介素１的影响曹尉尉△郑钦岳王洪斌四物汤（Ｓｉｗｕｔａｎｇ，ＳＷＴ）由熟地、当归、白芍、川芎４味中药组成，为中医补血理血经典方剂。现代研究发现ＳＷＴ对机体的免疫及造血功能有一定增强作用［１］。为进一步探讨该方...     

IL-33敲除对小鼠腹腔巨噬细胞极化的影响

目的研究白细胞介素33敲除（IL-33-/-）小鼠腹腔巨噬细胞（pMφ）表面分子表达及炎性因子分泌水平的变化,探讨IL-33-/-对pMφ 极化的影响。方法收集C57BL/6 IL-33-/-小鼠和野生型（WT）小鼠的pMφ,体外培养48 h后,分为IL-33-/-组和WT组,比较2组小鼠pMφ 炎性介质、细胞因子及表面分子表达水平的变化。结果IL-33-/-小鼠pMφ M1型标志物NO,MHCⅡ类分子,TLR4及CD86的表达水平均高于WT小鼠（NO,CD86和MHCⅡ,P＜0.01;TLR4,P＜0.05）。结论IL-33-/-可促进小鼠pMφ向M1型极化。     

西洋参茎叶总皂甙对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能作用的研究

目的:观察西洋参茎叶总皂甙对活化的小鼠腹腔巨噬细胞代谢和分泌一氧化氮(NO)、白细胞介素1(IL-1)活性的影响.方法:将不同浓度的西洋参茎叶总皂甙加入体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞中.以NO试剂盒检测培养上清液中NO的含量,以溴化四唑蓝(MTT)比色法检测巨噬细胞代谢能力及产生IL-1的活性.结果:西洋参茎叶总皂甙可明显促进小鼠腹腔巨噬细胞代谢和产生NO,且NO的产生呈剂量依赖关系,对IL-1的活性无明显影响.结论:西洋参茎叶总皂甙可增强小鼠腹腔巨噬细胞活性,可能是西洋参茎叶总皂甙调节机体免疫功能的重要途径.     

乌贼黑提取物对体内巨噬细胞的激活作用

目的：以白细胞介素１（ＩＬ－１）和α肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）的产生水平及巨噬细胞的吞噬功能为指标，通过检测乌贼墨提取物在体内对巨噬细胞的活化作用，进一步了解乌贼墨的抗肿瘤机理。方法：以常规生物学测定的＾３Ｈ－ＴdＲ掺入法和细胞素测定法进行检则。结果：乌贼墨提取物处理组动物的ＩＬ－１和ＴＮＦ－α的生产水平及巨噬细胞的吞噬功能均较对照组呈现有显著意义的增高或增强。结论：乌贼墨提取物呆于体内激活巨噬细     

长期激怒刺激对大鼠全血粘度和巨噬细胞功能影响的研究

有实验证明用大鼠打斗这种较为自然的激怒刺激复制的肝郁证动物模型近似中医临床肝郁证［１］。虽然动物难以完全模仿人类中枢神经活动的特点，但激怒刺激能诱发大鼠血液流变学指标的变化，而这种改变符合中医关于肝郁气滞导致血瘀证的理论。目前有关报道肝郁证的动物模型...     

巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素-10对人外周血单核巨噬细胞产生肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-8的相互作用

目的:研究巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和白细胞介素(IL)-10对人外周血单核细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-8的诱生作用及相互影响。方法:自健康献血员血液中分离单核细胞进行体外培养,并以M-CSF、IL-10单独及共同作用,然后收集上清,以双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法和生物活性法测TNF-α,以ELISA法检测IL-8。结果:①M-CSF能诱导单核细胞分泌TNF-α(P<0.05),与脂多糖(LPS)具有诱生TNF-α的协同效应(P<0.05);IL-10则能抑制TNF-α的产生(P<0.05),并拮抗M-CSF增强LPS诱生TNF-α的作用(P<0.05);②M-CSF能诱导单核细胞分泌IL-8(P<0.05),IL-10则能抑制IL-8的分泌(P<0.01),并拮抗M-CSF对IL-8的诱生效应(P<0.05)。结论:M-CSF可以促进单核细胞释放炎性细胞因子,是体内重要的炎症性因子之一,而IL-10则是体内重要的炎症抑制因子,能拮抗M-CSF的致炎作用。     

石胆酸对小鼠腹腔巨噬细胞内质网应激和凋亡的影响

目的 观察石胆酸(lithocholic acid, LCA)对小鼠腹腔巨噬细胞内质网应激和凋亡的影响。方法 分离原代小鼠腹腔巨噬细胞并培养,待细胞生长至70%融合时,饥饿处理细胞16～18 h,实验组给予不同浓度LCA(10,20,30μmol/L)或给予LCA 30μmol/L干预不同时间(1,2,3,4 h),对照组用LCA的溶剂二甲基亚砜(DMSO)干预。提取上述干预后细胞的蛋白,用Western blot检测内质网应激相关分子Chop、p-p38MAPK和凋亡关键分子Caspase-3、cleaved-Caspase-3、PARP、cleaved-PARP。另外,LCA(30μmol/L)干预巨噬细胞1 h, TUNEL检测细胞凋亡情况。结果 与对照相比,LCA可显著升高内质网应激相关蛋白Chop和p-p38MAPK的表达,并呈浓度和时间依赖性(P<0.05);与对照相比,LCA可显著升高凋亡相关蛋白cleaved-Caspase-3、cleaved-PARP的表达并呈浓度和时间依赖性(P<0.05),并可诱导巨噬细胞凋亡。结论 LCA能够诱导小鼠腹腔巨噬细胞发生...     

高脂膳食对C57小鼠肝脏内质网应激及PAI-1表达的影响

目的研究高脂膳食致C57小鼠脂肪肝内质网应激及其纤溶酶原激活物抑制物1(plasminogen activator in-hibitor-1,PAI-1)的变化。方法采用高脂膳食诱导代谢综合征(胰岛素抵抗、脂肪肝、肥胖)小鼠模型(HF组,n=10),以正常普食喂养的小鼠为对照组(NF组,n=12),喂养25周,检测各组小鼠血清中空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINs)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、PAI-1、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,实时荧光定量PCR(QRT-PCR)检测各组小鼠肝组织中C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)、PAI-1mRNA的表达。苏木精-伊红染色观察肝组织的形态学改变。结果 HF组肝脏病理检测提示中度脂肪肝,血清中FBG、FINs、TC、TG、PAI-1、ALT、AST均较NF组呈不同水平增高(均P<0.05),同时,肝组织中CHOP、PAI-1mRNA表达水平也明显上调(均P<0.01)。结论高脂膳食喂养可诱发C57小鼠脂肪肝内质网应激;PAI-1mRNA表达增高且活性增强,可能参与了脂肪肝内质网应激。     

重组鼠白细胞介素12与粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子基因联合治疗小鼠B16黑色素瘤

目的：研究重组鼠白细胞介素12（AdCMVIL-12）与粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（AdCMVGM-CSF）的腺病毒载体联合应用对B16黑色素瘤的抗肿瘤作用。方法：将B16黑色素瘤细胞接种于C57/BL6小鼠右侧背部皮下后,待瘤体直径达5mm时将荷瘤小鼠随机分为4组,分别为AdCMVIL-12组、AdCMVGM-CSF组、AdCMVIL-12加AdCMVGM-CSF组（联合治疗组）和AdC MVLacZ组（对照组）,每组12只,并于肿瘤组织局部分别多点注射相对应剂量的腺病毒载体,观察各组小鼠肿瘤的生长情况及其诱导的细胞免疫反应,检测各组小鼠血清IL-12和GM-CSF表达水平的变化。结果：病理学观察,联合治疗组肿瘤组织内可见大片凝固性坏死,有大量的淋巴细胞、巨噬细胞浸润。治疗30 d后,联合治疗组肿瘤平均体积为（60.73±11.36 ）mm³,与对照组、AdCMVIL-12组和AdCMVGM-CSF组［分别为（675.18±80.59）、（1 86.91±19.15）和（223.45±23.11）mm³］ 比较差异均有显著性（P>0.01）。同时,AdCMVIL-12与AdCMVGM-CSF联合基因治疗可有效延长IL-12和GM-CSF的表达时间,并且对B16黑色素瘤细胞具有很强的特异性杀伤作用,杀伤率为（69.53 ± 9.20）%。 结论：IL-12与GM-CSF联合基因治疗可增强荷B16黑色素瘤小鼠的抗肿瘤免疫反应,并能有效降低单独应用AdCMVIL-12的毒副作用。     

白细胞介素18重组腺病毒对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响

目的 研究白细胞介素18重组腺病毒(AdmsIL-18)对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响,并对其机理作一探讨.方法重组腺病毒腹腔注射BALB/C小鼠,每周注射1次,共 2次.2周后制备腹腔巨噬细胞,经LPS刺激,采用ELISA法检测培养上清mIL-18、mIL-1β、mTNFα的水平;酶还原法检测NO的含量;LDH释放法检测巨噬细胞的杀伤活性. 结果AdmsIL-18注射后,小鼠腹腔巨噬细胞高效表达mIL-18,同时巨噬细胞分泌 mIL-1β、mTNFα、NO水平明显增加,并增强巨噬细胞的杀伤活性,与其它对照组比较均 P<0.01.结论小鼠腹腔注射AdmsIL-18,能显著增加巨噬细胞表达mIL -18、mIL-1β、mTNFα、NO,增强巨噬细胞的杀伤活性.     

IL-10对Aa-LPS刺激的兔肺泡巨噬细胞功能的影响

目的研究白细胞介素10(IL-10)在伴放线放线杆菌(Aa)脂多糖(LPS)刺激兔肺泡巨噬细胞(AM)产生炎症反应过程中的免疫调节作用及其机制。方法分离纯化AM,100ng/mL IL-10预孵2h,加入Aa-LPS刺激继续培养24h,流式细胞术检测AM对荧光标记Aa(FITC-Aa)的吞噬指数(PI)情况及AM的活性氧(ROS)水平;荧光定量PCR法检测CD14、TLR4、SRA和MHC-Ⅱ基因表达的变化;硝酸还原酶法检测AM的NO分泌情况。结果 IL-10上调Aa-LPS诱导的AM的PI(P<0.05),下调Aa-LPS诱导的AM膜表面受体CD14、TLR4、MHC-ⅡmRNA的表达(P<0.01),而SRA mRNA表达量升高(P<0.05);IL-10抑制Aa-LPS诱导的AM的ROS和NO水平(P<0.01)。结论 IL-10可以通过上调Aa-LPS诱导的AM SRA基因表达,下调CD14、TLR4、MHC-Ⅱ基因表达,并且抑制其产生ROS和NO的水平,从而调节免疫反应,限制炎症介质的大量释放,同时增强AM的吞噬作用,清除感染。     

疏肝、健脾、补肾复方对慢性束缚应激大鼠行为学和免疫功能的影响

目的　研究慢性束缚应激时大鼠行为学和免疫功能的变化以及疏肝、健脾、补肾三种中药复方对其影响。方法　用特制束缚架连续束缚 2 1d(或 7d) ,每天 3h的方法制作大鼠束缚应激模型 ,观察大鼠行为学和免疫功能的变化。结果　慢性束缚应激后 ,大鼠的行为学发生了明显的变化 ,血清IL - 1β 上升 ,IL - 2和IL - 6下降 ,并且随着束缚时间的延长变化越明显。结论　逍遥散、四君子汤和金匮肾气丸能改善大鼠行为学的变化 ,明显增强慢性束缚应激大鼠的免疫功能。