1,25(OH)_2D_3联合小剂量化疗药物对白血病细胞的体外作用

以人早幼粒白血病细胞系(HL-60)为作用对象,对1,25(OH)_2D_3与小剂量化疗药物的体外合用效应进行了研究。将培养4d的细胞进行有关指标测定:NBT还原试验证实1,25(OH)_2D_3与小剂量高三尖杉酯碱(HH)或柔红霉素(DNR)有协同诱导分化效应;[~3H]TdR参入试验表明小剂最HH或DNR能弥补1,25(OH)_2D_3抑制增殖力较弱的不足;流式细胞分析(FCM)则提示经上述作用后的细胞中S期细胞显著减少,而大部分细胞停滞于G_0/G_1期。从而为诱导分化剂治疗白血病提供新的配伍方案。     

碱性成纤维细胞生长因子对骨髓基质细胞粘附、增殖和分化的影响

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）对骨髓基质细胞（ＢＭＳＣ）粘附、增殖和分化等生物学效应的影响。方法利用体视学计数、四唑盐（ＭＴＴ）比色法及碱性磷酸酶（ＡＬＰ）试剂盒分别测定不同浓度ｂＦＧＦ诱导一定时间后ＢＭＳＣ的粘附特性、增殖和分化情况的变化。结果１０ｎｇ／ｍｌ　ｂＦＧＦ明显促进ＢＭＳＣ的粘附,但是２００ｎｇ／ｍｌ　ｂＦＧＦ反而不利于细胞粘附;在细胞增殖和分化测定中,１００ｎｇ／ｍｌ　ｂＦＧＦ明显促进细胞增殖但细胞碱性磷酸酶含量也最低。结论碱性成纤维细胞生长因子对骨髓基质细胞的生物效应是复杂和多方面的,可以作用于骨髓基质细胞的粘附、增殖和分化等多个环节,这种影响与碱性成纤维细胞生长因子的剂量有关。     

IGF-Ⅰ联合BMP-2促MC 3T3-E1和NIH 3T3细胞的增殖和分化及钙化效应

目的：探讨重组人胰岛素样生长因子-Ⅰ（rhIGF—Ⅰ）和重组人骨形成蛋白-2（rhBMP-2）单独或联合应用对MC3T3-E1和NIH 3T3细胞增殖、分化和钙化的影响。方法：单独或联合应用不同浓度rhIGF—Ⅰ和rhBMP-2作用于小鼠成骨样细胞株MC3T3-E1和小鼠成纤维细胞株NIH 3T3，采用四唑盐比色法（MTT）和流式细胞技术检测细胞增殖，碱性磷酸酶（ALP）试剂盒检测细胞分化，放射免疫法检测细胞分泌的骨钙素水平（OC），以及Von kossa钙化染色法观察细胞的钙化。结果：1～50ng／ml rhIGF—Ⅰ作用于MC 3T3-E1细胞或5～75ng／ml rhIGF—Ⅰ作用于NIH 3T3细胞后，均能显示明显的促细胞增殖作用（P〈0．01），使S期细胞百分率升高、G1期细胞百分率减少，以及使胞内ALP活性、钙化面积百分比增高（P〈0．05）。10～100ng／ml rhBMP-2也可促进MC 3T3-E1和NIH 3T3细胞的增殖作用（P〈0．01），使S期细胞百分率升高、G1期细胞百分率减少，并使2种细胞ALP活性、钙化面积百分比升高（P〈0．05）。各浓度rhIGF—Ⅰ或rhBMP-2对MC 3T3-E1及NIH 3T3细胞作用8h、24h和48h的MTT检测结果相似。rhIGF—Ⅰ和rhBMP-2联合作用后，对2种细胞的促增殖、增强ALP活性、促钙化的作用均较各自单独作用更为明显（P〈0．05）。单独或联合应用不同浓度rhIGF—Ⅰ和rhBMP-2对细胞分泌的OC水平均无显著性差异（P〉0．05）。结论：rhIGF—Ⅰ和rhBMP-2具有明显的促进细胞增殖、早期分化及钙化的协同作用，但对成骨末期细胞分化影响不大，而其活性主要与使用剂量有关。     

甘草酸二铵对人肺癌细胞A549增殖作用的影响

目的研究甘草酸二铵对人肺癌细胞系A549增殖的影响。方法采用A549细胞体外培养的方法，以MTT、^3[H]-TdR掺入法及流式细胞术观察细胞的增殖情况。结果甘草酸二铵能促进A549细胞代谢MTT，增加其^3[H]的掺入率，并呈现剂量依赖性。在100ng／ml时，流式细胞术显示，甘草酸二铵可抑制A549细胞由静止期进入DNA合成期。结论甘草酸二铵能呈剂量依赖型抑制A549细胞的分裂增殖。     

白细胞介素1β与地塞米松联合应用对人成骨细胞芳香化酶活性影响

目的探讨白细胞介素1β(IL-1 β)与地塞米松联合应用对人成骨细胞(Human Osteoblast-likecells HOS)芳香化酶活性的影响.方法对人的成骨细胞进行培养,设立实验组,分别加入IL-1β 1ng/mL(实验Ⅰ组)、10 ng/mL(实验Ⅱ组)、50 ng/mL(实验Ⅲ组);分别加地塞米松浓度0.1 uM(实验Ⅳ组)、1.0 uM(实验Ⅴ组)、10.0 uM(实验Ⅵ组);地塞米松浓度0.1 uM和IL-1β 1ng/mL(实验Ⅶ组);IL-1 β10 ng/mL和IL-1ra 500 ng/mL(实验Ⅷ组),对照组加培养液,采用氚水法检测芳香化酶活性.结果实验组Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ组氚水放射强度与对照组比较放射强度明显增加,差异显著(P＜0 05).实验Ⅳ,Ⅴ,Ⅵ组放射强度与对照组比较有非常显著性差异(P＜0.001).实验Ⅶ组与对照组间差异无统计学意义.实验Ⅷ组放射强度高于对照组及实验组Ⅰ和Ⅳ,差异非常显著(P＜0.001).结论人成骨细胞中IL-1 β、地塞米松分别可以增加芳香化酶的活性.IL-1β是通过与成骨细胞的IL-1受体相结合而起作用.地塞米松和IL-1β联合应用使芳香化酶活性增加,它们相互作用影响着骨骼中雌激素合成.     

BMP-7诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经元细胞分化的初步研究

目的 探讨骨形态发生蛋白7(BMP-7)体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向神经元细胞分化的作用.方法 以全骨髓贴壁法分离、培养大鼠BMSCs;流式细胞仪检测细胞表型CD29、CD44及成脂诱导以鉴定大鼠BMSCs; MTT法检测浓度分别为25、50、75、100 ng/ml的BMP-7对大鼠BMSCs增殖的影响;第3代细胞贴壁后随机分为三组:阴性对照组、阳性对照组(β-巯基乙醇)、BMP-7诱导组;倒置相差显微镜下观察各组细胞形态学变化;诱导2 h后进行免疫细胞化学实验,检测各组细胞神经元标志物神经丝蛋白-200(NF-200)及神经突触素-1(SYN-1)的表达情况.结果 体外培养的第3代大鼠BMSCs形态呈长梭形,"鱼尾纹"状聚集生长;CD29、CD44阳性表达,阳性率分别为99.44％、 99. 17％;成脂诱导28 d后油红0染色阳性;不同浓度的 BMP-7均具有促进大鼠BMSCs增殖的作用,以75 ng/ml最为显著;75 ng/ml BMP-7诱导大鼠BMSCs 2 h后可见形态典型的神经元细胞,NF-200及SYN-1为阳性.结论 BMP-7体外具有诱导大鼠BMSCs向神经元细胞分化的作用.     

肝细胞生长因子对多囊肾病囊肿衬里上皮细胞增殖及细胞外基质合成的影响

目的：研究重组人肝细胞生长因子（rhHGF）对常染色体显性遗传型多囊肾病（ADPKD）囊肿衬里上皮细胞增殖及细胞外基质合成的影响。方法：用^3H-TdR掺入法测定不同浓度（0．5、1、2．5、5ng/ml)rhHGF作用48h以及最适浓度的rhHGF分别作用24、48、72h ADPKD囊肿衬里上皮细胞系细胞的增殖情况;并分别用^3H-脯氨酸掺入法和放免法测定最适浓度rhHGF作用最佳时间后ADPKD囊肿衬里上皮细胞系细胞胶原及层粘连蛋白的合成情况。结果：rhHGF促进了ADPKD囊肿衬里上皮细胞增殖及胶原和层粘连蛋白的合成,以1ng/ml持续作用48h最为显。结论：rhHGF对体外培养的ADPKD囊肿衬里上皮细胞增殖及细胞外基质合成有明显的促进作用。     

1,25(OH)_2D_3类似物MC903对人原始巨核白血病细胞系生长分化的影响

作者观察了1,25-二羟维生素D_3[1,25(OH)_2D_3]的类似物MC903对人原始巨核白血病细胞系(HIMeg)生长分化的影响。结果显示,MC903可以明显地抑制HIMeg的生长并诱导其分化,MC903(10~(-10)～10~(-6)mol/L)几乎完全抑制了HIMeg细胞的克隆形成能力;经MC903作用4d后,细胞周期分布也发生明显改变,表现为G_0+G_1期细胞百分数明显增多,而S期及G_2+M期细胞百分数减少。MC903对HIMeg细胞生长分化的影响具有剂量和时间依赖性特点,且其作用效应强于1,25(OH)_2D_3。本文结果提示,MC903和1,25(OH)_2D_3对巨核细胞系的生长分化调节过程具有重要作用。     

BDNF对大鼠胚胎神经干细胞诱导分化的影响

【目的】脑源性神经营养因子（BDNF）对体外培养大鼠神经干细胞（NSCs）诱导分化的影响。【方法】体外克隆化培养获得的NSCs中分别加入不同浓度的BDNF,采用倒置光显微镜观察细胞克隆形成,透射电子显微镜观察细胞超微结构的变化,免疫组化的方法检测胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达。【结果】在倒置光显微镜下可见细胞接种后5 d形成小细胞球,7 d成为大小不等的细胞克隆。在电镜下可见具有典型的神经干细胞和神经胶质样细胞特征。经BDNF处理7 d后星形胶质样细胞增多,且突起的长度随浓度的增加逐渐延长,尤以40 ng/ml组突起最为显著（P〈0.05）。免疫细胞化学检测GFAP的阳性颗粒位于细胞浆中,经40 ng/mlBDNF诱导后阳性率可达86.1%,与对照组（13.1%）比较有显著性差异。【结论】BDNF可诱导神经干细胞分化为星形胶质细胞。