复方丹参对缺血预适应大鼠心肌蛋白激酶C表达的影响

目的　探讨复方丹参加强缺血预适应 ( IPC)的机制 ,是否通过促进蛋白激酶 C ( PKC)蛋白、m RNA水平表达发挥作用。方法　采用冠脉结扎大鼠 5 min缺血 ,5 min再灌反复循环 3次的缺血预适应方案 ,缺血 30 m in,再灌 2 h的缺血再灌模型 ,通过免疫组化、RT— PCR的方法观察 PKC蛋白、m RNA表达以及复方丹参对其影响。结果　 PKC在正常对照组中主要存在胞浆 ,但经过 IPC和使用复方丹参后 ,在胞膜和胞核也可见 ;不论早期 ,还是晚期 IPC组 PKC表达均高于假性预处理组 ,以早期 IPC组明显 ( P<0 .0 1) ;经复方丹参预处理后 ,PKC的表达均高于再灌组、早期、晚期 IPC组 ,以药物预处理 +缺血预处理组 ( DIPC)为优 ,显著高于早期 IPC组 ( P<0 .0 1)。PKCm RNA在正常心肌组织、再灌组、假性预处理组间无明显差异 ,但 IPC后不论早期 ,还是晚期 PKC m RNA表达均高于假性预处理组 ,晚期 IPC组表达更加明显 ;经复方丹参预处理后 ,可明显促进早、晚期 IPC及再灌组 PKC m R-NA的表达 ( P<0 .0 5 )。结论　复方丹参可激活 PKC,使其发生转位 ,促进其蛋白、m RNA表达水平增高。这可能是此方加强 IPC的主要机制之一     

冠心康对大鼠缺血心肌细胞ATP敏感钾通道的影响

目的 观察中药复方冠心康对大鼠缺血心肌细胞ATP敏感钾（ATP-sensitive potassium channel,KATP）通道的影响,进一步探讨冠心康保护心血管、抗心肌缺血可能的作用机制。 方法 随机选取Wistar大鼠分为正常组、模拟缺血再灌注损伤模型组、模型加格列苯脲组、模型加吡那地尔组、模型加冠心康组、模型加冠心康加格列苯脲组,每组8只。用无钙台式液灌流10 min,停灌30 min再灌注45 min模拟心肌缺血再灌注损伤模型。检测各组心肌细胞钙-镁-ATP（Ca2+-Mg2+-ATP）酶、钠-钾-ATP（Na+-K+-ATP）酶活性及全细胞膜片钳技术的电流电压钳模式记录各组心室肌细胞的ATP敏感钾通道（KATP通道）电流变化。 结果 在缺血的基础上,中药复方冠心康可使KATP通道进一步开放,通道电流明显增大,与KATP通道开放剂吡那地尔具有同等开放效应（P >0.05）。与模型组比较,冠心康组Ca2+-Mg2+-ATP酶、Na+-K+-ATP酶含量明显增高（P <0.05）。 结论 中药复方冠心康对于心肌缺血再灌注损伤具有一定的干预作用,促进KATP通道开放,减轻Ca2+内流,抑制Ca2+超载可能是冠心康在心肌缺血过程中发挥干预作用的有效途径。     

无创肢体缺血预处理对兔缺血性心肌的影响

目的:通过观察不同组兔心肌中热休克蛋白(HSP,0),环氧合酶(COX-2),一氧化氮合酶(iNOS),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),转录因子-κB(NF-κB) mRNA的表达以及超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA)和一氧化氮(N0)的变化,探讨无创肢体缺血预处理对兔缺血性心肌的影响和可能机制.方法:实验分单纯缺血对照(Ctr),无创肢体缺血预处理(LIP)和LIP+KATP抑制剂(LG)组.Ctr组不作特殊处理,先静脉注射垂体后叶素后,再静脉注射肾上腺素诱发心律失常;LIP组兔双后肢缺血5 min,再灌注5 min,重复4次建立无创肢体缺血预处理模型,余同Ctr组;LG组先静脉注射KATP抑制剂(格列本脲),余处理同LIP组;实验结束后取心肌组织标本,生化法检测心肌组织中SOD活力,MDA,NO含量;RT-PCR法检测心肌组织中HSP70,COX4,iNOS,TNF-α及NF-κB mRNA的表达.结果:与Ctr组相比,LIP组COX-2和iNOS表达增高,TNF-α与NF-κB表达明显降低,LG组HSP70表达明显降低;与LIP组相比,LG组HSP70和iNOS表达均明显降低,TNF-α和NF-κB表达明显增高.心肌组织中SOD活力LIP组较高,LG组与Ctr和LIP组无差异;MDA含量Ctr组高于LIP组和LG组;NO含量LIP组较高,LG组NO含量与Ctr组相比无差异.结论:LIP具有减轻缺血性心肌损伤的作用,KATP是其发挥保护作用的重要途径.     

Urocortin介导的对心脏保护作用的调节及针灸效应的研究分析

在心肌缺血损伤过程中,心脏保护因子Urocortin(Ucn)可以通过cAMP/PKA、PI3K-Akt、CaMKII、NO-cGMP、MAPK等多条信号通路进行干预,而在这个过程中介入针灸疗法同样可以通过这些途径对心肌进行保护,而且多条信号通路可以相互影响,机制非常复杂。就Ucn与针灸对缺血心肌在信号通路方面的保护机制进行归纳总结分析,以期为进一步探讨针灸对心脏保护的机制研究以及临床应用提供更广阔的思路。     

川芎嗪预处理对大鼠心肌缺血／在濯注损伤的保护

目的：观察川芎嗪预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法：将40只大鼠随机分为4组。对照组（C组），心肌缺血预适应组（IPC组），川芎嗪组，川芎嗪＋5-HD（线粒体ATP敏感性钾通道阻滞剂5-羟基葵酸）组。心肌缺血预适应由3次10分钟缺血和10分钟再灌注组成，所有大鼠均接受30分钟缺血和60分钟再灌注。梗死范围由饱和曲利苯蓝和红四氮唑染色判定，并以坏死区占缺血区的百分比表示。测定CK和LDH的含量，应用透射电镜观察心肌超微结构的变化。并检测川芎嗪组和川芎嗪＋5-HD组的心功能。结果：川芎嗪组和IPC组的心肌梗死范围明显低于C组和川芎嗪＋5-HD组（p〈0．01）。血中检察到的CK和LDH的含量也明显低于C组和川芎嗪＋5-HD组（p〈0．05）。心肌细胞超微结构分析显示川芎嗪组线粒体损伤轻于对照组及川芎嗪＋5-HD组。川芎嗪组的心功能恢复明显好于川芎嗪＋5-HD组（p〈0．05）。结论：川芎嗪预处理的心脏对缺血再灌注损伤有保护作用，且其机制之一是开放线粒体ATP敏感性钾通道。     

线粒体和KATP在三七总皂苷心脏保护中的作用

目的:探讨ATP敏感性钾通道(KATP)和线粒体通透性转换孔(MPTP)在三七总皂苷(PNS)心脏保护中的作用.方法:利用Langendorff灌注技术,在离体大鼠心脏观察不同药物对缺血/再灌注后心功能的影响.结果:(1)与对照组相比,PNS可浓度依赖地改善大鼠缺血/再灌注心功能的恢复.再灌注60 min后,PNS组心脏左室发展压(LVDP)、左室压力上升和下降最大变化速率(±LVdp/dtmax)和冠脉流量(CF)均明显高于对照组的(P<0.05或0.01);而左室舒张末压(LNEDP)明显低于对照组(P<0.01).(2)预先应用非特异性KATP阻断剂格列本脲可完全消除PNS(80 mg/L)对缺血/再灌注心脏的保护作用;此外,特异性线粒体KATP阻断剂5-HD能够大部分阻断PNS(80 mg/L)心功能改善作用.(3)再灌注初期应用MPTP开放剂苍术苷可完全消除PNS(80 mg/L)的保护作用.结论:PNS具有明显的抗心肌缺血/再灌注损伤作用;此作用与KATP,尤其是线粒体KAaV开放以及抑制MPTP开放有关.     

HSP70介导的川芎嗪预处理对大鼠离体心脏的延迟保护作用

目的:研究川芎嗪(TMP)预处理对离体大鼠心脏缺血再灌注(I/R)损伤的延迟保护作用及其可能的机制。方法:大鼠分为对照组(Cont)组、Cont Act D组、I/R组、I/R Act D组、TMP组、TMP Act D组。TMP组、TMP Act D组大鼠分别静脉注射TMP 10 mg/kg或TMP 10 mg/kg和Act D 7 mg/kg;Cont组、Cont Act D组、I/R组、I/R Act D组大鼠分别静脉注射等量生理盐水或等量胜利盐水和Act D 7 mg/kg。25 h后取大鼠心脏行Langendorff逆行灌流、制作I/R损伤模型。检测ECG、LVP、dp/dtmax、心肌梗死面积以及心肌组织中SOD与GSH-Px活性、MDA含量、HSP70的表达。结果:TMP预处理可显著改善大鼠离体心脏I/R损伤时的左心功能,减少梗死面积与心律失常的发生率,提高心肌组织中SOD与GSH-Px活性、降低MDA含量、上调HSP70的表达;TMP预处理的延迟保护作用可被Act D所取消。结论:TMP预处理整体大鼠24 h后,可在其心脏诱导出良好的延迟保护作用;其机制可能与上调HSP70蛋白表达有关。     

ATP敏感性钾通道与心肌保护的研究新进展

缺血预处理（IP）和缺血后处理（POC）对心肌缺血/再灌注损伤有一定的保护作用,ATP敏感性钾通道是IP、POC的重要环节。因而KATP通道在调节心肌细胞缺血、缺氧的病理生理反应中起重要作用。对KATP通道结构、功能调控,在IP、POC中的心肌保护作用以及中药在该领域的研究进展作一综述。     

蒺藜皂苷预适应对心肌缺血再灌注损伤大鼠心功能的影响

目的建立Langendorff离体心脏灌流系统,制备缺血再灌注实验模型,观察蒺藜皂苷(gross saponinsfromTribulus terrestris,GSTT)预适应对大鼠心肌缺血再灌注损伤心功能的影响。方法 56只大鼠随机分为7组,正常对照组、缺血/再灌组(I/R)、心肌缺血预适应组(IPC)、阳性药腺苷组、GSTT 200、100、50 mg/L组,缺血30 min,再灌40 min,记录给药前、再灌后5、10、15、20、30 min心率(HR)、左室收缩压(LVSP)等心功能指标,并同步记录冠脉流量(CF),同时测定心肌组织ATP水平。结果 I/R组再灌注后5、10、15、20、30 min HR、LVSP明显下降(P0.001);IPC组,GSTT 200、100 mg/L预适应组和腺苷预适应组再灌注后5、10、15、20、30 min HR、LVSP均明显升高(P0.05、0.01);I/R组再灌注后各时间点(5、10、15、20、30 min)CF明显减少(P0.001);与I/R组相比,IPC组,GSTT 200、100 mg/L预适应组和腺苷预适应组再灌注后各时间点(5、10、15、20、30 min)CF均增加(P0.05、0.01、0.001);I/R组Na+-K+ATP酶活力明显降低(P0.001)。与I/R组相比,IPC组,GSTT 200、100 mg/L预适应组和腺苷预适应组Na+-K+ATP酶活力明显升高(P0.05、0.01)。I/R组的Ca2+-Mg2+ATP酶活力有增高趋势,与I/R组相比,IPC组,GSTT 200、100 mg/L预适应组和腺苷预适应组Ca2+-Mg2+ATP酶活力明显升高(P0.05、0.01)。结论 GSTT可抑制心功能低下,舒张冠状动脉,增加冠脉血流量而改善心肌的供血、供氧;GSTT还可增加心肌组织ATP酶活性,通过抑制Na+/Ca2+交换,使得细胞摄取的Ca2+减少。     

中药预处理对家兔心肌缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的:从细胞保护角度出发,探讨温心汤抗家兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用.方法:将家兔随机分为6组(每组8只),即假手术组、缺血再灌注(IR)组、缺血预适应组、复方丹参组、温心汤低剂量组、温心汤高剂组量组.辅以各组家兔血清心肌酶学、超氧化物歧化酶、丙二醛、内皮素、降钙素基因相关肽等水平的测定.结果:温心汤预处理组、缺血预适应组心肌酶水平、SOD水平、MDA含量、ET含量、CGRP浓度与缺血再灌注组、复方丹参组相比差异均极为显著(P＜0.01),且它们组间则无显著性的差异.结论:温心汤通过预处理途径对心肌缺血再灌注损伤产生保护作用.     

心肌缺血预适应的研究进展

心脏经历了短暂的心肌缺血再灌注后 ,对随后长时间缺血再灌注损失产生保护作用 ,这种现象称为缺血预处理 (预适应 )。预适应对心肌的保护作用主要表现在缩小心肌梗死范围、抗缺血再灌注性心律失常、改善心肌收缩和舒张功能等。研究表明 :心肌缺血预适应的机制可能与内源性心脏保护物质的释放、受体激活及信号传导有关。药理性预处理是根据缺血预处理机制 ,通过药物激发或模拟机体内源性物质的活性 ,进而呈现对心脏的保护作用。根据其作用机理的不同 ,将其分为特异性受体依赖性和非特异性受体依赖性 ,为研究防治心肌缺血性疾病提供了新思路。     

丹参注射液加强缺血预处理对大鼠心肌的保护作用

以整体麻醉SD大鼠心脏冠状动脉左前降支结扎／松开作为缺血／再灌注动物模型，研究丹参注射液（SM）在加强缺血须处理（IP）的心肌保护中的作用。结果显示，IP能减轻复灌性心律失常的严重程度，缩小心肌梗死范围；SM能缩小心肌梗死范围；SM联合IP与单纯IP比较，心肌梗死范围进一步缩小；SM联合IP与单纯SM比较，心律失常严重程度减弱且心肌梗死面积进一步减小。结果表明，SM能加强IP的心肌保护作用，特别是加强IP的抗心肌梗死作用。     

冠心康对豚鼠缺血再灌注心室乳头肌电生理特性的影响

目的观察中药复方冠心康对豚鼠模拟缺血再灌注损伤心室乳头肌细胞电生理作用,初步探讨其心肌保护机制。方法将32只豚鼠随机分为模型组、格列苯脲组、吡那地尔组、冠心康组（每组8只）,分离左心室乳头肌标本。模型组于正常台氏液平衡灌流30min后,用模拟缺血缺氧液灌流15min,再用正常台氏液复灌30min。吡那地尔组（100μmol/L）和格列苯脲组（100μmol/L）缺血前行药物预处理,其余步骤同模型组。冠心康组动物预先灌胃给予冠心康溶液生药6g.kg^-1.d^-1,每日1次,连续14日,然后分离左心室乳头肌,其余步骤同模型组。采用细胞内标准玻璃微电极技术记录各组动物心室乳头肌细胞电生理参数的变化。结果冠心康预处理对平衡期心肌无明显影响;进一步缩短了缺血早期5min和再灌注早期1min心肌90%动作电位时程（action potential duration at90%repolarization,APD90）,与模型组比较有明显差异（P〈0.05）;自再灌注5min起,冠心康组心肌动作电位时程（action potential duration,APD）迅速恢复,至再灌注30min时50%动作电位时程（action potential duration at50%repo-larization,APD50）和APD90明显长于平衡期（P〈0.05）;冠心康对各时期心肌静息电位（resting potential,RP）、动作电位振幅（ac-tion potential amplitude,APA）均无明显影响。吡那地尔明显缩短缺血5min、再灌注1min、5min和10min心肌APD50和APD90,与模型组比较有显著差异（P〈0.05）,而格列苯脲则明显延长缺血和再灌注心肌APD。结论中药复方冠心康对缺血再灌注心肌细胞具有一定的保护作用,其电生理作用可能与影响KATP通道（ATP-sensitive potassium channels,KATP channels）和Ca2＋通道有关。     

青心酮预处理对离体大鼠心肌保护作用的研究

目的　研究心肌青心酮预处理和缺血预处理对离体大鼠心脏缺血 /再灌注后心肌功能的影响。方法　以离体大白鼠工作心脏模型 ,比较经青心酮预处理和缺血预处理 ,心肌缺血再灌前后左室压 (LVP)、左室舒张末期压 (LVDEP)、左心室内压上升及下降最大速率 (±dt/dpmax　 )、主动脉压 (AP)、冠脉流量 (CF)、主动脉流量 (AF)和测定冠脉流出液乳酸脱氢酶 (LDH) ,心肌三磷酸腺苷 (ATP)含量及自灌注停搏液至完全停搏的时间 (AT)。结果　青心酮预处理和缺血预处理产生相似的心肌保护作用 ,明显促进心肌缺血再灌后心肌功能的恢复 ,增进心脏的收缩功能、心肌ATP含量。结论　青心酮预处理对心脏模拟体外循环的缺血再灌损伤具有保护作用 ,该方法有临床应用价值     

心肌缺血预适应基础与临床研究进展

预先一次或反复短时间缺血可使心肌在其后长时间缺血中得到保护,使心肌细胞死亡延缓,这种现象称为缺血预适应现象。这种缺血预适应现象可以分为“早期保护”和“延迟保护”。除缺血外,化学损伤等也可引起机体普遍适应现象,一些药物也可以引发预适应现象。缺血预适应现象与再灌注后氧自由基生成增多、细胞内钙超载、细胞凋亡等有关。     

脑宁康颗粒对脑缺血预适应大鼠HSP70表达影响的实验研究

目的观察中药脑宁康（NNK）颗粒对经脑缺血预适应（IPC）处理后大鼠HSP70表达的影响。方法根据Pulsinelli四管法及Liu法分别制作大鼠IPC及脑缺血再灌注（IR）模型，应用免疫组化SP法作HSP70染色，比较NNK颗粒对IPC和IR两种模型大鼠HSP70表达的影响，并以阿斯匹林作对照。结果NNK在两模型中均可使HSP70表达明显增强（P〈0．05～0．01），且效应显著高于阿斯匹林（P〈0．05），但两模型之间比较无显著性差异。且NNK能够延缓HSP70表达强度的减弱。结论NNK颗粒通过增强IPC和缺血状态中HSP70表达，扮演了强化IPC及药物预适应角色，旨在增加脑神经细胞对缺血、缺氧的耐受力，并通过对HSP70的干扰，获得稳定神经细胞结构，维护其正常功能的药理效应。     

基于钾离子通道开放的中药降压成分发现研究

该文以降压靶标膜ATP敏感钾通道(ATP-sensitive potassium channel,KATP)为研究对象,构建其基于配体和基于受体结构的药效团模型,并分别筛选中药化学成分数据库(traditional Chinese medicine database,TCMD),利用分子对接评价筛选结果,发现具有潜在KATP开放作用的中药降压活性成分。其中,基于配体的药效团模型(ligand based pharmacophore,LBP)以对人源KATP具有开放活性的48个化合物为研究对象,利用Hypogen模块进行构建,最优模型由1个氢键受体、1个氢键供体、1个疏水基团、1个芳香环和5个排除体积组成,预测训练集化合物活性相关系数为0.876 4,测试集相关系数为0.705 8,辨识有效性指数N为3.304,综合评价指数CAI为2.616;以KATP同源模建模型(PM0079770)为研究对象,构建基于受体的药效团模型(structure-based pharmacophore,SBP),最优模型具有6个氢键受体、8个氢键供体、7个疏水基团和18个排除体积,辨识有效性指数N为2.200,综合评价指数CAI为2.017。分别用2个最优模型对TCMD数据库进行筛选,对候选化合物进行Lipinski五规则及ADMET性质预测研究,LBP模型命中171个化合物,SBP模型命中178个化合物。利用分子对接技术分别对上述2组潜在中药活性成分进行评价,按照打分值由大到小的排序,分别选取对接pose个数的前3%为潜在活性化合物。得到由LBP模型虚拟筛选得到的10个化合物、由SBP模型虚拟筛选得到的2个化合物,共12个具有潜在KATP开放活性的中药成分。该研究为发现新的KATP开放剂提供了思路。