荧光镜检法检查抗酸杆菌及报告方式的探讨

本文报告４５９６例痰标本荧光镜检法观察不同视野数阳性结果及５００例痰标本荧光镜检法与抗酸镜检法的比较实验。结果提示，观察６０视野为宜，避免造成假阴性，又可提高工作效率３～５倍。观察３０视野造成漏检（假阴性）５７例，占总阳性数９０７例的６．３％；荧光镜检（直涂片）法优于抗酸镜检（直涂片、集菌涂片）法，阳性率分别提高６．６％及０．６％。上述实验结果提示提高阳性检出率的优势，关键在对少量菌及（１＋）的控制尺度。     

抗酸杆菌荧光染色镜检的应用研究

目的对荧光显微镜检测抗酸杆菌的应用进行评价。方法5个结核病专业诊疗机构共收集2157份标本,每份标本均采用荧光染色（FS）、萋-尼染色（Z-N染色）镜检。其中1245份标本同时进行传统培养检查,并且以培养结果为最终的金标准,计算FS和Z-N染色镜检方法的敏感度、特异度和正确指数[正确指数-（敏感度＋特异度）-11（假阴性率＋假阳性率）]。所有结果采用SPSS17．0统计软件完成配对7。检验,以P〈O．05为差异有统计学意义。结果全部标本荧光染色镜检阳性率为10．8％（234／2157）,萋-尼染色镜检阳性率为8．8％（190／2157）,两种镜检方法阳性率差异有统计学意义（X2=25．473,P〈0．001）。初诊标本经荧光染色镜检的阳性率为15．9％（179／1127）,萋一尼染色阳性率为13．2％（149／1127）,荧光染色镜检检出抗酸杆菌的能力较萋尼染色高20．1％;两种镜检方法检查初诊标本的阳性率,差异有统计学意义（X2=18．000,P〈0．001）。同时完成涂片和培养的标本,荧光染色镜检阳性率13．8％（172／1245）,培养阳性率15．2％（189／1245）,两者比较差异无统计学意义（X2=2．173,P=0．140）。同时完成涂片和培养的初诊标本,荧光染色镜检阳性率16．4％（128／781）,培养阳性率19．7％（154／781）,分离培养阳性率较荧光染色阳性率高20．3％,差异有统计学意义（X2=7．861,P〈0．01）。荧光染色镜检的敏感度为60．3％（114／189）、特异度为94．5％（998／1056）,假阴性率为39．7％（75／189）、结果正确指数为0．548,萋-尼染色镜检相应指标分别是56．6％（107／189）,97．1％（1025／1056）,43．4％（82／189）和0．537。结论与萋一尼染色镜检比较,荧光染色镜检具有更高的敏感度和很好的特异度;能够提高工作效率,降低工作强度,适合在工作量较大、人力资源紧张的基层实验室开展。     

结核分支杆菌H37Rv株菌体抗原单克隆抗体制备、特性分析及纯化

目的　利用单克隆抗体技术分析分支杆菌多肽抗原的共性和个性 ,建立纯化单克隆抗体的最佳方法。方法　按常规方法制备单克隆抗体。分泌单克隆抗体阳性杂交细胞株的筛选采用ELISA法 ,确认采用免疫印迹法。 2 4种分支杆菌菌株均生长于改良罗氏培养基上 ,H3 7Rv株分别生长于改良罗氏培养基和苏通液体培养基上。单克隆抗体的纯化采用硫酸铵沉淀法、辛酸沉淀法和离子交换法。结果　经筛选获得 14株单克隆抗体杂交细胞瘤。其中 ,C2 、7C12 单克隆抗体所抗的 76 0 0 0、16 0 0 0抗原成份为分泌抗原 ,76 0 0 0抗原存在于 2 4种分支杆菌菌体中 ,为共同抗原。 16 0 0 0抗原仅存在于H3 7Rv ,H3 7Ra,牛分支杆菌 ,BCG株中。单克隆抗体免疫印迹结果显示 ,分支杆菌H3 7Rv株在不同培养条件下 ,其 40 0 0 0 / 380 0 0多肽抗原表达不同。单克隆抗体纯化以硫酸铵沉淀法回收率最高 ,离子交换法获得的单抗纯度最高 ,辛酸沉淀法可以有效地去除白蛋白 ,并具有简单、省时等优点。单克隆抗体的相对亲和力均在 10 -4 ～ 10 -7之间。结论　C2 、7C12 单克隆抗体均抗结核分支杆菌H3 7Rv株的分泌抗原成份。 40 0 0 0 / 380 0 0多肽抗原为结核分支杆菌H3 7Rv株固体培养菌体特有。单抗纯化结果显示离子交换层析法适用于科研分析 ,而辛酸     

2946份痰标本抗酸杆菌检查结果与咳痰时间的关系

目的　探讨痰标本的咳痰时间对抗酸杆菌检查结果的影响。方法 采用痰直接厚涂片萋-尼氏抗酸染色显微镜(物镜100×)检查,统计不同咳痰时间的痰标本阳性检出率和全部阳性痰标本按咳痰时间的分布。结果 2946份痰标本中,清晨痰、夜间痰、即时痰阳性检出率有显著性差异。462份阳性痰标本中,按清晨痰、夜间痰、即时痰统计分布有非常显著意义。结论 咳痰时间对痰标本抗酸杆菌检出有很大影响,要强调清晨痰的送检。     

分支杆菌中文命名的探讨

本文根据《Ｂｅｒｇｅｙ′ｓＭａｎｕａｌｏｆＳｙｓｔｅｍａｔｉｃＢａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ》、《放线菌分类与鉴定》、《细菌名称》及一些文献资料，收集整理９９种分支杆菌，对其中尚未有中文名称者予以命名，并探讨了分支杆菌命名的基本原则。     

浙江省痰结核分支杆菌涂片检查的质量监控

痰涂片检查是国家控制结核病规划中确诊结核病患者的主要手段［１］。但在实践中,基层的痰检工作常存在问题,痰检质量不能保证。因此建立一套较完善的痰检监控系统势在必行。１９９３年浙江省的肺结核排菌患者比例非常低,仅为１６０％,为此我们建立了痰检质控网络制...     

快速荧光生长指示管检测法对各种抗酸分支杆菌培养的研究

目的　探讨快速荧光生长指示管培养法对各种抗酸分支杆菌菌株培养的适应性。方法 应用本室研制的快速荧光生长指示管(以下简称RFGIT),定量接种各种抗酸分支杆菌标准菌株,并与改良罗氏培养管(LJ管)和BD公司MGIT快速培养管进行配对比较;用结核分支杆菌H37Rv株梯度稀释,分别接种RFGIT、MGIT和LJ管,记录出现阳性结果时间。结果 RFGIT对19种标准菌株培养阳性检出时间,平均为4.68±2.48d;MGIT管培养为5.39±2.89d。有8种菌株RFGIT检出时间显著早于MGIT管。接种不同浓度H₃₇Rv,在3种培养管配对比较,RFGIT阳性检出时间较MGIT管提前1～5d,平均提前3.2d;较改良罗氏法提前11～31d,平均提前19.1d。结论 RFGIT对各标准菌株及不同浓度H₃₇Rv培养阳性的检出时间均明显早于改良罗氏培养管;部分菌株明显早于MGIT培养管。结果表明RFGIT是一种有效、安全、经济和快速的培养法。     

1983-2001年阿根廷结核病实验室网络抗酸杆菌涂片显微镜检查的质量评价

地点阿根廷结核病实验室网络.目标(1)评价1983-2001年间督导的抗酸杆菌(AFB)涂片显微镜检查技术质量,(2)分析操作过程误差对检查结果的影响.设计对抗酸杆菌(AFB)涂片显微镜检查的督导评价结果进行分析.评价标本、涂片、染色以及结果判读质量,并分析这些参数之间的联系.结果优良质量标本的比例比较高.研究结果证明,阳性结果与黏液脓性痰标本之间有直接联系.薄涂片的比例相对较高.薄涂片的阳性率以及细菌计数较低.染色质量良好.全国的读片一致性为98%.然而假阳性率也比较突出,46%的假阳性与染色缺陷有关.结论阿根廷结核病实验室网络的抗酸杆菌涂片显微镜检查技术质量以及涂片判读一致性比较满意.然而,需要在以下方面加以改进涂片质量、染色和读片、覆盖率、督导工作的非中心化、涂片的选择方法以及数据登记等.也需要开展涂片保存方面的实施性研究.     

1983-2001年阿根廷结核病实验室网络抗酸杆菌涂片显微镜检查的质量评价

地点:阿根廷结核病实验室网络.目标:(1)评价1983-2001年间督导的抗酸杆菌(AFB)涂片显微镜检查技术质量,(2)分析操作过程误差对检查结果的影响.设计:对抗酸杆菌(AFB)涂片显微镜检查的督导评价结果进行分析.评价标本、涂片、染色以及结果判读质量,并分析这些参数之间的联系.结果:优良质量标本的比例比较高.研究结果证明,阳性结果与黏液脓性痰标本之间有直接联系.薄涂片的比例相对较高.薄涂片的阳性率以及细菌计数较低.染色质量良好.全国的读片一致性为98%.然而假阳性率也比较突出,46%的假阳性与染色缺陷有关.结论:阿根廷结核病实验室网络的抗酸杆菌涂片显微镜检查技术质量以及涂片判读一致性比较满意.然而,需要在以下方面加以改进:涂片质量、染色和读片、覆盖率、督导工作的非中心化、涂片的选择方法以及数据登记等.也需要开展涂片保存方面的实施性研究.     

游泳池肉芽肿皮损中分离出海分支杆菌的报告

目的 报告一例从游泳池肉芽肿患者皮肤组织标本中分离出一株海分支杆菌。方法 标本的分离培养采用碱处理后接种酸Ｌ－Ｊ培基,置２８℃和３７℃两种条件下培养;药物敏感性测定采用绝对浓度法;菌各鉴定采用形态学观察、鉴别培基（ＰＮＢ、ＴＣＨ、５％ＮａＣｌ、葡萄糖琼脂、麦康盖琼脂）的鉴别及细胞生物化学反应的方法进行鉴定。结果 该菌株在２８℃中的生长明显优于３７℃培养;并对ＩＮＨ、ＳＭ耐药,对ＲＦＰ、ＥＭ敏感;经     

比例法测试结核分支杆菌药物敏感性的探讨

目的 探讨在我国应用比例法测试结核分支杆菌药物敏感性的可行性以及与以往资料的可比性。方法 用比例法和绝对浓度法测试了３６０株结核分支杆菌对四种抗结核药物（ＩＮＨ、ＳＭ、ＲＦＰ）的敏感性,对１９株结果有差别的菌株进行了ＭＩＣ测试,用国产和Ｓｉｇｍａ抗结核药对３０株分支杆菌分别进行了耐药性测定。结果 ＳＭ和ＲＦＰ二种方法检出的耐药率以及与标准结果的一致率均无显著性差异,而ＩＮＨ、ＥＭＢ用比例法测试上述     

影响痰涂片抗酸杆菌检出率的因素探讨

结核病有死灰复燃的迹象，近年来发病率呈逐渐增加的趋势，给结核病防治工作带来很大的挑战。结核病的实验室检查常包括痰涂片查抗酸杆菌、痰培养以及PCR检测等。但痰培养受杂菌污染、处理痰比较复杂，时间长等缺点。PCR检测则受到如检测结果的特异性、实验室设备、条件等因素的制约。WHO在全球规划（GTP）中明确提出：首要是痰涂片抗酸染色查抗酸杆菌。[第一段]     

提高痰涂片抗酸杆菌检出率的探讨

肺结核病人痰直接涂片查抗酸杆菌,方法简单,但阳性率低,普通涂片染色法,每毫升痰须含菌5万以上,方能查到。为了提高阳性率,作者改良了抗酸染色方法,取得了较好的效果,并对染色方法和标本选择与阳性的关系,作了一些探索。材料和方法一、标本来源 147例及100例对照痰检标本,均来自我院传染科住院的肺结核病人。     

抗酸杆菌自动荧光染色和显微镜扫描技术在结核病诊断中的临床评价

目的 观察自动荧光染色和显微镜扫描技术检测结核分枝杆菌的临床价值。 方法 2016年9—12月,在临沂市人民医院门诊连续纳入了748例疑似肺结核患者,收集2243份痰标本。每份痰标本制作2张涂片,一张采用传统荧光染色法,并用传统荧光显微镜(fluorescence microscopy, FM)人工阅片。另一张用自动荧光染色和显微镜扫描技术(AFSS)进行染色和扫描。所有样品经4% NaOH消化处理,然后接种到罗氏培养基中进行分离培养。与培养结果相比,分析AFSS的效能。所有AFSS和传统FM检测结果有差异的涂片采用萋-尼染色显微镜检查方法进行复核。 结果 AFSS检测的阳性率为32.1%(720/2243),常规FM检测的阳性率为31.92%(716/2243),两者比较差异无统计学意义(χ ²=0.016,P>0.05)。与罗氏培养相比,AFSS检测分枝杆菌的敏感度和特异度分别为83.4%(657/788)和95.9%(1386/1446)。阳性预测值和阴性预测值分别为91.6%(657/717)和91.4%(1386/1517)。 结论 AFSS检测分枝杆菌的敏感度和特异度较高,自动化程度高,值得推广应用该技术。