益气明目口服液对缺血再灌注损伤鼠视网膜电图的影响

 目的观察中药益气明目口服液对大鼠实验性高眼压所致视网膜缺血再灌注诱发视网膜损害的保护作用。方法所有大鼠随机分为正常组、模型组、低剂量组、高剂量组。经前房恒压灌注生理盐水60 min,建立视网膜缺血再灌注损伤的动物模型。低剂量组与高剂量组于造模前7 d分别给予不同剂量的益气明目口服液灌胃给药,正常组及模型组给予等量生理盐水灌胃。观察缺血再灌注损伤后1,3,7,15 d各组视网膜电图(ERG)中a波及b波的变化。结果正常组大鼠左、右眼(ERG)a波及b波的振幅差异无显著性的意义;缺血再灌注损伤后,模型组大鼠ERG a波及b波的振幅均呈持续性、进行性下降;益气明目口服液低、高剂量组对实验大鼠缺血再灌注损伤后ERG a波振幅的降低均有保护作用,益气明目口服液高剂量组可有效保护缺血再灌注损伤后ERG b波振幅的降低。结论益气明目口服液对视网膜缺血再灌注损伤有保护作用。     

丹参注射液对兔视网膜缺血再灌注损伤后视网膜节细胞凋亡和caspase-3表达的影响

目的探讨丹参注射液对兔视网膜缺血再灌注损伤视网膜节细胞凋亡和caspase-3表达的影响。方法在建立兔视网膜缺血再灌注损伤模型前30 min,首先进行左眼球后注射平衡盐溶液(对照组),右眼球后注射丹参注射液(治疗组)。30 min后通过升高眼内压造成视网膜缺血后,再恢复正常眼内压而制作成兔视网膜缺血再灌注损伤动物模型,分别于1、6、24 h和72 h处死动物,取视网膜,部分视网膜切片行Tunel染色,部分视网膜采用免疫组化法检测视网膜节细胞相关基因caspase-3蛋白的表达。结果除1 h组外,同一时间点对照组视网膜节细胞凋亡计数和治疗组比较,差异具有统计学意义。除1 h组外,同一时间点对照组cas-pase-3蛋白表达与治疗组比较差异均有统计学意义。结论球后注射丹参注射液能够减少视网膜缺血再灌注后视网膜节细胞的凋亡,降低caspase-3蛋白表达。     

活血解毒方对糖尿病早期大鼠视网膜功能的影响

目的 观察活血解毒方对糖尿病早期大鼠模型视网膜电图(electroretinogram, ERG)和大鼠视网膜组织胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acid protein, GFAP)表达的影响。方法 采用链脲佐菌素(65 mg/kg)一次性腹腔注射SD大鼠建立糖尿病大鼠模型,随机分为模型组和活血解毒方低(3.85 g/kg)、中(7.70 g/kg)、高剂量组(15.40 g/kg)及西药组(羟苯磺酸钙胶囊,0.167 g/kg),每组8只。另设正常对照组(8只,给予等体积蒸馏水灌胃),各组均灌胃给药20周。测定ERG,检测暗适应眼最大电反应的a、b波振幅及振荡电位(oscillatory potentials, OPs)振幅总和。并采用免疫组织化学法、Western blot和荧光定量PCR法检测大鼠视网膜积分光密度值(integral optical density, IOD)、GFAP蛋白及 mRNA表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠ERG a波、b波和OPs振幅降低(P<0.01), IOD、GFAP蛋白及mRNA表达升高(P<0.01)。与模型组比较,活血解毒方各剂量组b波和OPs振幅升高, IOD、GFAP蛋白及mRNA表达降低,活血解毒方中、高剂量组a波振幅值升高;西药组b波振幅值升高, IOD表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05, P<0.01)。西药组与活血解毒方各剂量组各指标比较,差异无统计学意义。结论 活血解毒方可减轻糖尿病早期大鼠视觉电生理功能损害,对视网膜神经胶质细胞有一定的保护作用。     

脾气虚型兔视网膜脱离自动复位后视网膜电图的研究

目的观察脾气虚型兔孔源性视网膜脱离(RRD)自动复位后视网膜电图的变化,评价脾气虚证对RRD复位后视网膜功能恢复的影响。方法 21只健康成年新西兰灰兔随机分为空白对照组(A组)、RRD自动复位组(B组)、脾气虚型RRD自动复位组(C组),采用耗气破气加饥饱失常法建立脾气虚证动物模型,在显微镜下行视网膜下注射透明质酸钠术建立视网膜脱离自动复位动物模型,分别于模型制备后10 d、20 d、30 d行视网膜电图(ERG)检查并进行分析比较。结果观察期间,C组兔脾气虚证持续存在,视网膜下注射透明质酸钠术后5～9 d,B组及C组视网膜自动复位。与A组比较,C组术后暗视ERG b波潜伏期及振幅,a波潜伏期,∑OPs振幅等检测值均有显著差异,表现为潜伏期延长及振幅降低,在术后30 d,B组与A组以上各值已无统计学差异,C组仍与A组比较有统计学差异。结论脾气虚证这一病理状态对RRD复位后Müller细胞和双极细胞、无长突细胞的功能恢复产生更为显著的不良影响,而且涉及视锥细胞和视杆细胞。     

蒙药珍宝丸对视网膜缺血再灌注损伤中的影响及ICAM-1,Caspase-3的表达

观察ICAM-1,caspase-3在RIR损伤中的表达及蒙药珍宝丸对其的影响并探讨其对RIR损伤中的保护作用。方法:用升高眼压的方法制作兔视网膜缺血模型,在不同时间观察95只家兔视网膜组织病理学改变及ICAM-1,caspase-3的表达。结果:模型组视网膜神经节细胞层,内核层细胞数减少,出现大量的水肿和空泡,内核层细胞排列紊乱。缺血再灌注后6h起改变明显,24h达到高峰72h水肿和空泡减少,视网膜明显变薄。珍宝丸组水肿和空泡现象较模型组轻,内核层和神经节细胞数较模型组多,视网膜较厚,细胞排列有序。ICAM-1,caspase-3的表达6h起明显,24h达到高峰,72h仍少量表达。珍宝丸治疗组各观察指标表达变化规律与缺血再灌注组基本一致,但均较缺血再灌注组明显下降。结论:1.RIR损伤中ICAM-1,caspase-3的表达增高。2.珍宝丸对RIR损伤中ICAM-1,caspase-3的表达有抑制作用。3.珍宝丸对RIR损伤有保护作用。     

观察蒙药额尔敦乌日勒对兔视网膜缺血再灌注损伤的保护作用

目的：通过观察兔视网膜缺血再灌注（RIR）损伤后,视网膜中丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性和形态学的变化来探讨蒙药额尔敦乌日勒对RIR损伤的保护作用。方法：将60只日本大耳白兔随机分为正常组、模型组、蒙药组及维生素E组。采用升高兔眼压到110mmHg持续60分钟的方法制作视网膜缺血再灌注模型。分别在缺血再灌注24、72、168h后测定视网膜中MDA含量和SOD活性,并作光镜切片进行形态学观察。结果：模型组视网膜的内核层变薄、细胞排列紊乱,神经节细胞明显减少、有大量空泡形成,伴随MDA含量升高和SOD活性下降。上述变化随时间延长而加重。而蒙药组内核层和神经节细胞层分别比模型组、维生素E组增厚,细胞排列整齐。MDA含量比模型组、维生素E组均明显降低,SOD活性明显升高。结论：蒙药额尔敦乌日勒能降低视网膜中MDA含量、升高SOD活性。能够清除自由基,减轻视网膜组织损伤,对视网膜缺血再灌注损伤具有保护作用。     

观察蒙药额尔敦乌日勒对兔视网膜缺血再灌注损伤的保护作用

目的：通过观察兔视网膜缺血再灌注（RIR）损伤后,视网膜中丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性和形态学的变化来探讨蒙药额尔敦乌日勒对RIR损伤的保护作用。方法：将60只日本大耳白兔随机分为正常组、模型组、蒙药组及维生素E组。采用升高兔眼压到110mmHg持续60分钟的方法制作视网膜缺血再灌注模型。分别在缺血再灌注24、72、168h后测定视网膜中MDA含量和SOD活性,并作光镜切片进行形态学观察。结果：模型组视网膜的内核层变薄、细胞排列紊乱,神经节细胞明显减少、有大量空泡形成,伴随MDA含量升高和SOD活性下降。上述变化随时间延长而加重。而蒙药组内核层和神经节细胞层分别比模型组、维生素E组增厚,细胞排列整齐。MDA含量比模型组、维生素E组均明显降低,SOD活性明显升高。结论：蒙药额尔敦乌日勒能降低视网膜中MDA含量、升高SOD活性。能够清除自由基,减轻视网膜组织损伤,对视网膜缺血再灌注损伤具有保护作用。     

原花青素对视网膜缺血再灌注损伤大鼠视网膜结构及核转录因子-κB 表达的影响

目的 观察原花青素(PC)对大鼠视网膜缺血再灌注(RIR)损伤后视网膜结构及核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响,探讨其作用机制.方法 所有大鼠随机分为5 组.于造模前2 周PC 低、高剂量组分别给予100、300 mg/kg剂量灌胃PC 混悬液,丹参组予丹参颗粒溶液0.09 g/kg 剂量灌胃,正常组及模型组给予等量生理盐水灌胃,均每日1 次.造模后各组仍继续按原方案给药,除正常组外,其余各组按再灌注时间的不同分为缺血再灌注6、24、48、72 h 组.以免疫组织化学方法检测各时点视网膜中NF-κB 的表达,通过透射电镜观察各时点视网膜的超微结构.结果 NF-κB在缺血再灌注6 h 后开始表达,24 h 表达最强,然后逐渐下降.PC 低、高剂量组及丹参组明显低于缺血再灌注模型组同期NF-κB 的表达(P ＜0.01).PC 高剂量组NF-κB 的表达明显受到抑制(P ＜0.01).电镜下可见48 h 模型组视网膜各层细胞超微结构异常程度明显重于6、24 h.模型组神经节细胞层见部分神经节细胞胞质内细胞器溶解、消失,细胞核固缩,异染色质增多,染色质边集;丹参组及PC 低剂量组神经节细胞胞质内细胞器肿胀;PC 高剂量组神经节细胞层结构基本正常.结论 PC 对大鼠RIR 损伤中NF-κB 的表达具有抑制作用,从而对RIR 损伤有保护作用.     

黄斑明目颗粒对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤的保护作用及机理探讨

目的:观察中药黄斑明目颗粒防治实验性高眼压所致大鼠视网膜缺血-再灌注损伤的疗效观察。方法:所有大鼠随机分为正常对照组、模型组、黄斑明目颗粒组。经前房恒压灌注生理盐水60 min,建立视网膜缺血-再灌注损伤的动物模型。黄斑明目颗粒组于造模前7 d开始予以黄斑明目颗粒灌胃给药,正常对照组及模型组给予等量生理盐水灌胃。观察缺血-再灌注损伤后1、7、14、28 d各组视网膜电图中a波及b波的变化,分析视网膜厚度,并进行视网膜电镜检查,结果:正常对照组大鼠不同时间点ERG的潜伏期和振幅无显著性差异;缺血-再灌注损伤后,模型组大鼠ERG的潜伏期和振幅均呈持续性、进行性下降,黄斑明目颗粒组大鼠ERG的潜伏期和振幅较模型组有显著改善(P0.05),但仍差于正常对照组。眼病理试验结果表明,与模型组比较,黄斑明目颗粒组缺血-再灌注所致的大鼠视网膜损伤显著减轻。结论:黄斑明目颗粒对视网膜缺血-再灌注损伤有保护作用,是治疗视网膜缺血性疾病的有效中药复方制剂。     

蒙药珍宝丸对视网膜缺血再灌注损伤Fas\Fasl、P53蛋白表达的影响及意义

目的:研究蒙药珍宝丸对Fas、FasL及p53蛋白在家兔视网膜缺血再灌注损伤中的表达影响,探讨珍宝丸对家兔视网膜缺血再灌注损伤的保护作用及其相关机制。方法:通过升高眼内压法造成视网膜缺血再灌注损伤模型,采用免疫组织化学链酶卵白素一生物素复合体法和计算机图像分析系统对95只家兔视网膜中Fas、Fasl和P53蛋白表达进行测定。结果:1.组织病理学改变:6~48 h水肿逐渐加重,神经节细胞和内核层细胞数量减少,内外核层密度降低、排列紊乱。72 h视网膜明显变薄,水肿减轻,神经节细胞数量稀少,内核层明显变薄。2.相关因子表达情况:Fas在正常视网膜组织中几乎不表达,在缺血再灌注6 h开始表达,24 h达到高峰,48 h开始下降,延续至缺血再灌注后72 h仍有表达;FasL在正常视网膜组织中低表达,于缺血再灌注12 h表达升高,24 h达到高峰,48 h开始下降;再灌注72 h表达较24 h降低,但仍维持高表达。P53在正常视网膜组织中无表达,缺血再灌注后6 h开始表达,24 h达高峰,48 h仍持续强表达,72 h已明显下降。珍宝丸治疗组各观察指标表达变化规律与缺血再灌注组基本一致,但均较缺血再灌注组明显下降。其中Fas表达在6 h、12 h、24 h、48 h组较缺血再灌注组显著下降(P<0.05);FasL表达在12 h、24 h、48 h组较缺血再灌注组明显下降(P<0.05);P53在6 h、12 h、24 h、48 h组表达明显低于缺血再灌注组(P<0.05)。结论:视网膜缺血再灌注损伤导致视网膜组织中Fas/Fasl和P53蛋白表达的增高。珍宝丸可以抑制其增高,可用于临床上视网膜缺血再灌注损伤的治疗。     

川芎嗪对糖尿病大鼠视网膜组织型纤溶酶原激活物含量的影响

目的探讨糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)的发病机制及川芎嗪治疗糖尿病视网膜病变的机制.方法将SD大鼠随机分成正常对照组、糖尿病组和糖尿病川芎嗪治疗组.后两组大鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱发糖尿病模型,于第30天和第90天测定各组大鼠视网膜组织型纤溶酶原激活物(tissue-type plasminogen activator,TPA)的含量.结果糖尿病组大鼠视网膜TPA含量高于正常对照组.治疗组大鼠视网膜TPA含量低于糖尿病组.结论DR的发生与视网膜TPA含量升高有关,川芎嗪可通过降低糖尿病大鼠视网膜TPA含量防治DR的发生.     

川芎嗪对脑缺血再灌注后神经细胞凋亡及其相关蛋白Fas-L表达的影响

目的观察川芎嗪对大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经细胞凋亡及Fas-L蛋白表达的影响。方法SD大鼠36只随机分成假手术组、模型组、川芎嗪组。采用TUNEL法检测各组大鼠脑组织神经细胞凋亡;采用免疫组织化学法与医学图像分析结合的方法检测各组大鼠脑组织Fas-L蛋白的表达。结果与假手术组相比,模型组大鼠缺血侧脑组织TUNEL阳性神经细胞及Fas-L阳性细胞表达增多;与模型组相比,川芎嗪组大鼠缺血侧脑组织TUNEL阳性神经细胞及Fas-L阳性细胞表达减少。结论川芎嗪可下调Fas-L蛋白的表达,从而抑制脑缺血再灌注后神经细胞凋亡,这可能是其对脑缺血再灌注损伤起保护作用的分子机制之一。     

川芎嗪对肾性高血压犬血流动力学及冠状动脉血管环功能的影响

目的观察川芎嗪对肾性高血压犬血流动力学及冠状动脉环舒缩功能的影响。方法以直接测压法测定犬在给予川芎嗪（0．2g／kg小剂量组和0．6g／kg大剂量组）前及给药后0．5,1,2．4h共5个时间点的左室内压力峰值（LVSP）、左室内压力最大上升速率（＋LVdp／dtmax）、平均动脉压（MAP）、脉压（PP）。以去甲肾上腺素（NE）和氯化钾（KCI）分别灌流模型组犬离体冠状动脉环,测定川芎嗪对犬冠状动脉环半抑制浓度（IC50）,观察川芎嗪对NE及KCI致肾性高血压的冠状动脉环收缩的影响。结果给药后1,2h2个时间点测定的川芎嗪有较明显的剂量依赖性地降低肾性高血压犬LVSP、＋LVdp／dtmax、MAP的作用;抑制NE和KCl引起的离体冠脉收缩,NE及KClIC50分别为（1．06±0．65）×10-4mol／L和（1．51±0．26）×10-4mol／L。1×10-4和5×10-4mol／L川芎嗪可使NE引起的内源性钙收缩张力由（1．45±0．18）g分别下降至（0．94±0．42）g和（0．63±0．25）g,外源性钙收缩张力由（2．15±0．47）g降至（1．21±0．42）g和（0．89 ±0．25）g。结论川芎嗪对肾性高血压犬有降压作用,并可抑制NE和KCI引起的冠脉收缩,其作用机制与抑制平滑肌细胞电压依赖性钙通道和受体操纵钙通道介导的外钙内流和内钙释放,降低心肌收缩力进而影响心功能有关。     

阿魏酸川芎嗪对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及分子机制研究

目的:观察阿魏酸川芎嗪对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响,并探讨其可能的分子机制.方法:将60只雄性SD大鼠随机分成5组:假手术组、缺血再灌注组、川芎嗪(4 mg· kg-1)组、阿魏酸川芎嗪低剂量(4 mg· kg-1)组、阿魏酸川芎嗪高剂量(8 mg· kg-1)组;采用结扎左冠状动脉前降支30 min、再灌注120 min的方法复制大鼠心肌缺血再灌注模型;各组大鼠于再灌注前10 min分别颈iv给药;于再灌注结束后,进行血清生化学指标及心肌组织学检测.结果:阿魏酸川芎嗪能显著降低血清中肌酸激酶同功酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)和心肌钙蛋白I(cTnI)、丙二醛(MDA)的水平,提高总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性,缩小心肌梗死范围,增加Bcl-2蛋白的表达,减少Bax蛋白的表达,降低Bcl-2/Bax的比值和心肌细胞凋亡指数,与缺血再灌注组比较,差异有统计学意义(P＜0.01);阿魏酸川芎嗪部分指标优于川芎嗪(P＜0.05),且呈现剂量依赖性.结论:阿魏酸川芎嗪对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有良好保护作用;阿魏酸川芎嗪抗心肌细胞凋亡的机制可能与其上调Bcl-2基因和下调Bax基因表达有关.     

赤芍对家兔血管内膜平滑肌细胞增生的影响

目的观察赤芍对兔颈动脉平滑肌细胞增殖细胞核抗原 (PCNA)表达作用,以了解赤芍对动脉损伤后内膜增生的影响.方法新西兰大白兔随机分为对照组、高脂饲料组、赤芍高剂量组及赤芍低剂量组,高脂喂养 8周后行兔颈总动脉球囊损伤术, 10周取材,用免疫组化法检测平滑肌细胞中 PCNA表达.结果各组内皮增生成分主要为平滑肌细胞.与高脂饲料组比较,赤芍高剂量组内膜、中膜、外膜 PCNA阳性着色及内膜增生面积均显著减少.结论赤芍有抑制平滑肌细胞增殖的作用.     

血栓通对脑缺血再灌注损伤大鼠神经细胞HSP70表达的影响

目的观察血栓通对大鼠脑缺血再灌注损伤神经细胞热休克蛋白70(heat shockprotein 70,HSP70)表达的影响,探讨其神经保护作用机制。方法将大鼠随机分为5组,其中川芎嗪组术前3 d腹腔注射川芎嗪注射液80 mg/kg,血栓通大、小剂量组术前3 d分别腹腔注射血栓通10 mg/kg和5 mg/kg。除假手术组外,其余4组用双侧颈总动脉结扎法建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型,于脑缺血30 min再灌注24 h后断头取脑,用免疫组织化学法检测脑组织中HSP70表达,并与病理组织学改变进行对照。结果血栓通能明显增强大脑皮质及海马HSP70的表达,减轻神经细胞损伤。结论血栓通能减轻脑组织的缺血再灌注损伤,改善神经功能缺失,其作用机制可能与增加HSP70表达有关。     

复方丹参对缺血再灌注损伤鼠视网膜的保护作用

目的　探讨复方丹参注射液球后注射对视网膜缺血再灌注 (retinalischemiareper fusion ,RIR)损伤的防护作用及机制。方法　采用前房灌注液体形成 14 .3kPa高眼压而建立RIR模型。在损伤前 30min给予防护组大鼠球后注射复方丹参注射液 0 .0 5mL ,对照组大鼠球后注射生理盐水 0 .0 5mL ,缺血 6 0min后恢复血流 ,分别于再灌注 30min ,2 4h和 72h检测视网膜组织中丙二醛 (MDA)含量及视网膜电图 (ERG)中b波变化 ,并进行视网膜透射电子显微镜和光学显微镜的组织学观察。结果　再灌注 30min ,2 4h和 72h后防护组视网膜中MDA含量均明显低于对照组 (P <0 .0 1) ,而ERG中被标化的b波振幅均高于对照组 (P <0 .0 1) ,且防护组病理组织学损害较对照组明显减轻。结论　复方丹参注射液球后注射是防护RIR损伤的有效方法。     

盐酸川芎嗪对同型半胱氨酸致ECV304 细胞损伤的保护作用

目的:研究盐酸川芎嗪对同型半胱氨酸损伤的ECV304细胞的保护作用。方法:选择人脐静脉内皮细胞ECV304作为体外研究对象,同型半胱氨酸作为造模剂,监测NOS和NO含量的变化判断其损伤程度。确定同型半胱氨酸损伤ECV304细胞时最佳浓度,最佳作用时间,建立内皮细胞损伤模型。在此基础上检测盐酸川芎嗪作用损伤内皮细胞NO和NOS含量,研究其对内皮细胞的保护作用。结果:同型半胱氨酸损伤ECV304细胞的最适浓度为1 mmol.L-1,最佳作用时间为48h,建立内皮细胞损伤模型。阳性药物硝酸甘油和盐酸川芎嗪对ECV304细胞的损伤具有保护作用,NOS和NO生成量与模型组相比显著升高。结论:盐酸川芎嗪具有ECV304细胞保护作用,本实验所建模型可用于筛选以内皮细胞保护剂为靶点的抗心肌缺血药物。     

川芎嗪对缺氧状态下视网膜血管舒缩因子表达影响的实验研究

目的:体外培养牛视网膜血管内皮细胞,观察不同浓度川芎嗪组对缺氧状态下细胞增殖及其舒缩因子表达的影响。方法:选取第6代牛视网膜血管内皮细胞进行培养。将正常培育的细胞加入100 μmol/L的CoCl₂诱导缺氧12 h后,将细胞随机分为三组。缺氧对照组(不含药物、无生长因子及血清的培养液组)、含川芎嗪0.02 μg/ml培养液组、含川芎嗪0.2 μg/ml培养液组。培养24 h后用MTT比色法检测各组视网膜内皮细胞的吸光度值,观察川芎嗪对血管内皮细胞的增殖情况。Western blot法检测各组细胞eNOS及ET-1的表达。结果:川芎嗪0.02 μg/ml组、0.2 μg/ml组的吸光度值明显高于缺氧对照组,差异有统计学意义(P<0.01),并且随浓度的增高吸光度值也增高 0.02 μg/ml组与0.2 μg/ml组间比较,差异有统计学意义(P<0.01)。与缺氧对照组比较,川芎嗪各组eNOS蛋白表达升高(P<0.01),且药物浓度与蛋白表达呈正相关 川芎嗪各组ET-1的蛋白表达均降低(P<0.01),但药物组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:川芎嗪能保护在缺氧环境下受损的视网膜血管内皮细胞,对细胞增殖有一定的促进作用,通过上调eNOS表达,下调ET-1表达,调节其分泌功能和血管舒缩功能,从而维持血管外周阻力和局部舒缩状态。