山萘酚、芹菜素对H2O2诱导的心肌细胞凋亡过程中线粒体损伤的影响

目的：观察山萘酚和芹菜素对H₂O₂诱导的大鼠心肌细胞凋亡过程中线粒体损伤的影响。方法:采用胰蛋白酶消化法，体外分离和培养新生大鼠心肌细胞，建立H₂O₂损伤心肌细胞模型。以MTT法检测心肌细胞活力，流式细胞仪检测心肌细胞凋亡情况，JC-1荧光探针测定线粒体膜电位，estern blotting 法检测胞浆中细胞色素C（Cyt C）的表达。结果:与模型组比较，山萘酚和芹菜素能显著提高心肌细胞活力，降低心肌细胞凋亡率，抑制线粒体膜电位下降和Cyt C释放。结论:山萘酚和芹菜素对H₂O₂诱导的心肌细胞凋亡具有明显的抑制作用,山萘酚的抗氧化作用强于芹菜素，其机制可能依赖于抑制线粒体膜电位降低和Cyt C释放。     

山萘酚、芹菜素对H2O2诱导的心肌细胞凋亡过程中线粒体损伤的影响

目的:观察山萘酚和芹菜素对H2O2诱导的大鼠心肌细胞凋亡过程中线粒体损伤的影响.方法:采用胰蛋白酶消化法,体外分离和培养新生大鼠心肌细胞,建立H2O2损伤心肌细胞模型.以MTT法检测心肌细胞活力,流式细胞仪检测心肌细胞凋亡情况,JC-1荧光探针测定线粒体膜电位,Western blotting法检测胞浆中细胞色素C(Cyt C)的表达.结果:与模型组比较,山萘酚和芹菜素能显著提高心肌细胞活力,降低心肌细胞凋亡率,抑制线粒体膜电位下降和Cyt C释放.结论:山萘酚和芹菜素对H2O2诱导的心肌细胞凋亡具有明显的抑制作用,山萘酚的抗氧化作用强于芹菜素,其机制可能依赖于抑制线粒体膜电位降低和Cyt C释放.     

黄粉虫抗菌肽促K562细胞凋亡作用及其机制的研究

为观察黄粉虫抗菌肽对K562细胞线粒体膜电位及K562细胞凋亡蛋白半胱天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的影响,进而探讨黄粉虫抗菌肽否是影响线粒体膜电位以及是否可以引起K562细胞凋亡,本文首先采用荧光探针罗丹明123 标记K562细胞,在激光扫描共聚焦显微镜下观察K562细胞中罗丹明123荧光强度,以细胞内荧光...     

白藜芦醇诱导胃癌原代细胞凋亡(英文)

目的：探讨白藜芦醇诱导胃癌原代细胞发生凋亡的可能性，揭示该凋亡发生与Bcl-2和Bax之间的关系。 方法： 在体外实验中，采用MTT比色法测定白藜芦醇对胃癌原代细胞的生长抑制率；以透射电镜和TUNEL 染色法，定性、定量地研究白藜芦醇与胃癌原代细胞凋亡的关系；通过免疫组织化学法和RT-PCR检测凋亡相关基因bcl-2和bax的表达。 结果： 白藜芦醇对胃癌原代细胞生长有明显抑制作用，随白藜芦醇浓度增加和培养时间的延长而增强；白藜芦醇诱导胃癌原代细胞出现典型的凋亡细胞形态；TUNEL 染色法可见，经白藜芦醇处理24 h、48 h、72 h、96 h后，胃癌原代细胞凋亡数明显随时间增加。免疫组化发现经白藜芦醇处理24 h、48 h、72 h、96 h后，胃癌原代细胞的Bcl-2蛋白阳性率减少，Bax蛋白阳性率增加。经白藜芦醇处理24、48、72、96 h后，RT-PCR检测发现胃癌原代细胞bcl-2和bax的mRNA表达阳性，并显示bcl-2 mRNA条带密度随时间的延长而递减，bax mRNA条带密度随时间的延长而增强。 结论： 白藜芦醇可能通过下调bcl-2的表达和上调bax的表达而诱导胃癌原代细胞发生凋亡。     

白藜芦醇诱导人胃癌原代细胞裸鼠移植瘤凋亡的研究

目的：探讨白藜芦醇诱导人胃癌原代细胞裸鼠移植瘤凋亡的机制。 方法： 建立人胃癌原代细胞裸鼠移植瘤模型，采用瘤旁注射的方法，用不同剂量的白藜芦醇进行治疗，并设对照，用透射电镜和TUNEL法检测肿瘤组织细胞凋亡情况，免疫组织化学法和RT-PCR法检测肿瘤组织的凋亡相关基因bcl-2和bax的表达情况。 结果： 白藜芦醇对胃癌原代细胞移植瘤有明显的抑制作用； 透射电镜和TUNEL法发现白藜芦醇导致移植瘤内大量细胞发生凋亡；免疫组织化学法发现白藜芦醇注射组的Bcl-2蛋白阳性细胞率（3.92％±0.85％、5.70％±0.84％和11.86％±0.97％）明显低于两个对照组（P<0.05），两个对照组（27.56％±1.40％和29.48％±0.51％）之间无显著差异；Bax蛋白阳性细胞率（52.30％±1.54％、45.72％±0.88％和40.02％±1.20％）明显高于两个对照组（P<0.05），两个对照组（20.88％±0.91％和19.34％±0.35％）之间无显著差异； RT-PCR法发现白藜芦醇注射组的bcl-2 mRNA条带强度随剂量的增大而递减，并明显低于两个对照组（P<0.05），两个对照组之间无显著差异（P>0.05）；bax mRNA条带强度递增，并明显高于两个对照组（P<0.05），两个对照组之间无显著差异（P>0.05）。 结论： 白藜芦醇对胃癌原代细胞移植瘤有明显的抑制作用，通过下调bcl-2 的表达和上调bax 的表达而诱导胃癌裸鼠移植瘤细胞发生凋亡，是其抗胃癌作用的机制之一。     

蛇床子素诱导人前列腺癌LNCaP细胞凋亡及其分子机制

目的探讨天然化合物蛇床子素对人前列腺癌LNCaP细胞凋亡的影响及其分子机制。方法采用CCK8法检测蛇床子素对前列腺癌LNCaP细胞增殖的影响;荧光电子显微镜下观察细胞核形态的变化;流式细胞仪AnnexinV-FITC/PI双染法检测蛇床子素诱导细胞凋亡情况;Western blot法检测凋亡相关蛋白Bax、bcl-2的表达情况。结果蛇床子素对LNCaP细胞增殖有明显的剂量依赖性抑制作用,诱导细胞凋亡,可见典型的细胞凋亡改变,且与凋亡率呈一定剂量相关性。随着蛇床子素浓度的增加,凋亡相关蛋白bcl-2的表达减少、Bax的表达增加。结论蛇床子素诱导前列腺癌LNCaP细胞凋亡,与调节凋亡相关蛋白Bax、bcl-2的表达相关。     

松针油诱导宫颈癌Hela细胞凋亡及其作用机制研究

目的 研究松针油对人宫颈癌Hela细胞生长的抑制作用，探讨Hela细胞发生凋亡的分子机制。方法 采用水蒸气蒸馏法提取松针油，气相色谱一质谱联用仪分析成分。MTT法测定松针油对Hela细胞增殖的影响。流式细胞仪和Hochest 33258检测药物作用前后细胞凋亡的情况。应用Western blotting观察Hela细胞caspase-3酶原的变化。用caspase活性检测试剂盒检测caspase-3，8，9的活性。结果 MTT结果显示松针油对Hela细胞生长有明显的抑制作用，呈显著的时间和浓度依赖性。流式细胞仪分析显示松针油诱导Hela细胞发生凋亡，细胞表现出典型的凋亡特征，并且可见凋亡小体，且凋亡率具有时间依赖性。松针油诱导Hela细胞凋亡过程中caspase．3被激活。Caspase-8，9活性增高，又有时间依赖性，且有时间顺序。结论 松针油对Hela细胞的生长有明显的抑制作用，其作用机制是松针油可诱导Hela细胞发生凋亡。在诱导细胞凋亡的过程中，caspase-3的激活是介导Hela细胞发生凋亡的共同通路。同时，活化的caspase-8，9可能参与了caspase-3的激活，从而诱导凋亡的发生。     

脉冲电场对肝癌细胞的凋亡诱导效应及线粒体跨膜电位的影响研究

为研究脉冲电场对肿瘤细胞的杀伤作用,采用Annexin V-FITC凋亡试剂盒和流式细胞技术检测电脉冲(1kV/cm、100μs和1 Hz)作用后人肝癌细胞HepG2和人肝细胞L02在不同作用时间点(8、15、30和60 s)下的凋亡效应。实验结果表明:与对照组相比,8 s刺激时间不足以诱导HepG2细胞凋亡,而15、30和60 s的刺激时间与可以明显的诱导HepG2凋亡,并且凋亡率随刺激时间增加而增大,说明延长刺激时间可以增大肿瘤细胞的凋亡程度;另外,在刺激60 s时,肿瘤细胞凋亡率是正常细胞的2倍,这表明肿瘤细胞比正常细胞对电脉冲的刺激更敏感。采用罗丹明123探针染色,用激光共聚焦显微镜实时观测细胞的线粒体膜电位荧光强度变化,观察到电刺激30 s前细胞线粒体膜电位无明显变化,而30 s后开始出现膜电位陡升后急剧降低的变化现象,揭示线粒体途径可能是脉冲诱导肿瘤细胞凋亡的机理之一。     

白藜芦醇诱导大鼠肝癌细胞凋亡的作用

目的:探讨白藜芦醇(Res)对大鼠肝癌细胞CBRH7919的作用.方法:采用SRB细胞活性检测法检测白藜芦醇对CBRH7919细胞活性的影响;用流式细胞仪检测CBRH7919对细胞周期分布、凋亡、线粒体膜电位的影响.结果:白藜芦醇作用于CBRH7919细胞24、48和72h后,SRB检测细胞活性有时间和浓度依赖性,CBRH7919细胞凋亡率增加,细胞周期阻断于G0～G1期,细胞线粒体膜电位降低.结论:白黎芦醇对大鼠肝癌细胞CBRH7919有明显的抑制作用,可能是通过线粒体凋亡途径诱导细胞的凋亡.     

Cyt-C 依赖的线粒体途径在T42诱导肝癌HepG2细胞凋亡中的作用

目的 检测重组肿瘤抑素42肽(T42)诱导肝癌HepG2细胞凋亡及与线粒体凋亡途径的关系,探讨T42诱导肿瘤细胞凋亡的可能机制.方法 吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)荧光染色观察细胞凋亡的形态学变化;流式细胞仪检测凋亡率;JC-1荧光染色检测线粒体膜电位的变化;Western印迹检测细胞色素C(Cyt-C)的分布.结果 18 μmol/LT42作用下,HepG2细胞出现明显凋亡形态学变化,凋亡率为22.4%,与对照组比较差异有统计学意义(t=7.75,P＜0.05);T42降低了HepG2细胞线粒体膜电势,明显减少了线粒体Cyt-C.结论 T42通过降低线粒体膜电势,促进Cyt-C由线粒体膜释放到胞浆中,激活 caspase-3途径诱导人肝癌细胞系HepG2细胞凋亡.

Abstract：

Objective The aim of the present article is to detect the apoptosis of hepatocarcinoma cells HepG2 induced by recombinant tumor endostatin 42 peptide (T42) ,with an emphasis on the signaling pathways involved. Methods Observed the morphological changes associated with the apoptosis of HepG2 cells by using AO/EB. Apoptosis rate were dentified by using flow cytometry. Mitochondrial membrane potential was evaluated by using JC-1 fluorescent staining. The distribution of cytochrome C(Cytc ) was estimated by using western blot. Results Compared with the control group, there was significant difference in apoptosis rate of cells HepG2 under 18μmol /L of T42. (22.4% vs 3.70% ,t =7.75, P＜0.05). Mitochondrial membrane potential was decreased by T42, and cytochrome c was reduced significantly compared with the control group. Conclusions The result demonstrated that the T42 enhanced the apoptosis of HepG2 cells and its potential mechanism was related to the decreased of mitochondrial membrane potential, an increase in Cytochrome C released into the cytosol, and reduced activation of Caspase-3 channels.     

SD118-2对人HepG2细胞凋亡影响及机制探讨

目的观察化合物SD118-2对人HepG2细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法取对数生长期人HepG2细胞,分为对照组和给药组。给药组分别给予7 mg/L SD118-2处理12、24和48 h,对照组给予相同浓度DMSO。用MTT法检测细胞增殖率,DAPI荧光染色法观察SD118-2处理后细胞形态,流式细胞仪AnnexinⅤ-FITC/PI双标法检测细胞凋亡率及周期阻滞,用流式细胞仪JC-1染色法检测线粒体膜电位(ΔΨm),Western blot检测凋亡相关蛋白BCL-2、BAX、PARP和C-PARP表达。结果 SD118-2呈时间依赖性抑制人HepG2细胞生长、降低线粒体膜电位、诱导细胞凋亡、阻滞细胞G2期;抗凋亡蛋白BCL-2表达呈时间依赖性减少,促凋亡蛋白BAX、C-PARP表达呈时间依赖性增加;SD118-2对正常肝脏细胞增殖几乎无影响。结论化合物SD118-2具有诱导人HepG2细胞凋亡的作用,并能使细胞周期进程发生变化。     

人参皂苷Re对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞缺氧复氧损伤的保护作用

目的：探讨人参皂苷Re 对人神经母细胞瘤SH-SY5Y 细胞缺氧复氧损伤的保护作用。 方法：采用缺氧复 氧法制备SH-SY5Y 细胞损伤模型,分为对照组、模型组、Re 6.25 μg/mL 组和Re 12.50 μg/mL 组。采用MTT 法测定细胞存活率,四甲基罗丹明甲酯（TMRM）染色评估细胞线粒体膜电位变化,DAPI 染色观察细胞凋亡 率,并进一步采用免疫印迹检测各组细胞核因子NF-E2 相关因子2（Nrf-2）、Bax 和p53 的蛋白表达。 结果：人 参皂苷Re 对SH-SY5Y 细胞活力无显著影响;缺氧复氧条件下,细胞存活率显著降低,而人参皂苷Re 在6.25、 12.50 μg/mL 浓度下预保护可显著提高细胞存活率。缺氧复氧损伤后,人参皂苷Re 6.25、12.50 μg/mL 能显著提 高SH-SY5Y 细胞的线粒体膜电位水平和抑制SH-SY5Y 细胞的凋亡率。人参皂苷Re 能够提高Nrf-2 的蛋白表达, 抑制Bax 和p53 蛋白的表达。结论：人参皂苷Re 可以抑制缺氧复氧损伤细胞的凋亡和氧化损伤,对缺氧复氧诱导 的神经细胞具有显著的保护作用。     

截短型人bid基因的克隆、表达和促凋亡作用的研究

目的 :探讨截短型bid(truncatedbid ,tbid)基因的表达对Hela细胞的促进凋亡活性。方法 :用RT PCR法克隆人全长bid基因 ,测序正确后 ,通过PCR截去编码N末端 6 0个氨基酸残基的基因 ,而获得tbid基因。将其克隆入含绿色荧光蛋白(GFP)基因的真核表达载体pIRES2 EGFP中 ,用脂质体法转染Hela细胞。通过荧光显微镜、电子显微镜观察和TUNEL检测法 ,检测目的基因的表达对转染细胞的形态及生长状况的影响。结果 :成功地构建了tbid基因的真核表达载体。以其转染Hela细胞后 ,tbid基因在细胞中得到表达 ,随后引起细胞荧光强度下降 ,生长状况不良甚至死亡。电镜观察及TUNEL检测的结果显示 ,许多细胞呈典型的凋亡特征。结论 :tbid基因的表达可促进Hela细胞的凋亡     

Inactivating mutation of the pro-apoptotic gene BID in gastric cancer

There is evidence that deregulation of apoptosis is mechanistically involved in cancer development and somatic mutations of apoptosis-related genes have been reported in human cancers. BID, a pro-apoptotic member of the Bcl-2 family, interconnects the extrinsic apoptosis pathway initiated by death receptors to the intrinsic apoptosis pathway. To explore the possibility that genetic alterations of BID might be involved in the development of human cancers, this study analysed the entire coding region and all splice sites in the human BID gene in 67 advanced gastric carcinomas. Overall, four BID mutations (6.0%) were detected that consisted of one frameshift and three missense mutations. The tumour-derived BID mutants were expressed in 293T cells and it was found that, compared with wild-type BID, the frequency of apoptosis was significantly reduced in cells expressing the gene containing the frameshift mutation. Furthermore, expression of the inactivating frameshift mutant interfered with cell death by overexpression of death receptors, indicating that this mutant inhibits the extrinsic apoptosis pathway in a dominant-negative fashion. Also, the frameshift mutation rendered cancer cells resistant to apoptosis induced by the anti-cancer drug 5-fluorouracil (5-FU). This is the first report of BID gene mutation in human malignancy. The data suggest that such mutations occur rarely in gastric cancers and that only a small fraction of BID mutations may lead to the loss of its apoptotic function.     

Reg2 protects mouse insulinoma cells from streptozotocin-induced mitochondrial disruption and apoptosis

We reported previously that pancreas-specific ablation of IGF-I in mice induced an increased expression of regenerating family proteins Reg2 and Reg3β in the pancreas and protected them from streptozotocin (Stz)-induced β-cell damage. We, therefore, assessed the effect of ectopically introduced Reg2 on Stz-induced apoptosis in MIN6 mouse insulinoma cells and report here that Reg2 protects MIN6 cells from Stz-induced apoptosis by attenuating its ability to disrupt mitochondrial membrane integrity, activate caspase-3 and promote poly-ADP ribose polymerase cleavage, and induce apoptosis. These changes correlated with suppression of c-jun N-terminal kinase (JNK) phosphorylation by Stz. Reg2 inhibited Stz-induced proapoptotic events as well as the inactivation of JNK. Inclusion of chemical inhibitor of JNK to Reg2 expressing cells rendered them sensitive to Stz. These data demonstrate that Reg2 protects insulin-producing cells against Stz-induced apoptosis by interfering with its cytotoxic signaling upstream of the intrinsic proapoptotic events by preventing its ability to inactivate JNK.     

胰岛素对滋养层细胞凋亡的调节作用及机制

目的 :探讨胰岛素对培养的滋养细胞凋亡的影响及可能的机制。方法 :将培养的妊娠早期滋养层细胞 ,分为正常对照组(细胞 +培养液 )、H2 O2 组 (细胞 +培养液 +H2 O2 )和胰岛素 +H2 O2 组 (细胞 +H2 O2 +胰岛素 )。采用透射电镜观察及流式细胞术 ,观察H2 O2 诱导的细胞凋亡及胰岛素对H2 O2 诱导的细胞凋亡的抑制作用。并检测胰岛素对滋养细胞caspase 3的活性及Bcl 2蛋白表达的影响。结果 :H2 O2 可诱导培养的滋养细胞凋亡 ,透射电镜下可见特征性的细胞核改变。胰岛素可显著抑制H2 O2 诱导的细胞凋亡 ,流式细胞仪检测其凋亡率较H2 O2 组显著下降 (P <0 .0 1)。H2 O2 组滋养细胞中caspase 3的活性较对照组显著增高 (P <0 .0 1) ,而Bcl 2蛋白的表达则较对照组显著下降 (P <0 .0 1)。结论 :胰岛素可明显抑制H2 O2诱导的滋养细胞凋亡 ,其机制可能与降低caspase 3的活性和促进Bcl 2蛋白的表达有关     

CARD18在凋亡素基因转染的胃癌细胞的表达及其在临床样本中的检测和意义

目的 探讨caspase募集结构域家族成员18(CARD18)在凋亡素诱导胃癌细胞凋亡的机制及在胃癌发生发展中的作用.方法 运用二维凝胶电泳法分离凋亡素作用胃癌细胞后表达的差异蛋白质,通过基质辅助激光解吸附飞行时间质谱技术(MALDI-TOF-MS)和生物信息学方法确定其中部分差异蛋白质,RT-PCR和Western blot法检测CARD 18的表达,采用免疫组化检测56例胃癌组织及癌旁组织中CARD 18的表达,并分析其与胃癌临床病理参数的关系.结果 凋亡素处理后的胃癌细胞CARD18表达下调最明显,CARD18蛋白在胃癌组织中的表达明显高于癌旁组织(P＜0.05),且与胃癌的分化程度和淋巴结转移有关(P＜0.05).结论 CARD18可作为一个潜在的预后标志物和靶向标志物.     

Fas基因转导逆转胃癌耐药细胞的作用及其机制分析

目的　 观察Fas基因转导人胃癌耐药细胞SGC790 1/VCR对化疗药物的敏感性 ,并初步探讨其机制。方法　 以流式细胞仪检测Fas基因转导和对照胃癌细胞在细胞周期中的分布 ;用MTT实验检查癌细胞对多种药物的敏感性 ;用免疫细胞化学染色法检测胃癌细胞P 糖蛋白 (P gp)和拓扑异构酶II(TopoII)的表达。结果　与胃癌细胞SGC790 1和pBK SGC790 1/VCR相比较 ,Fas SGC790 1/VCR在G2期减少 ,S期增多 ,并出现明显的凋亡峰 ;Fas SGC790 1/VCR对DDP ,MMC和 5 Fu的敏感性增加 ,但对VCR和DOX的敏感性无明显变化 ;SGC790 1,pBK SGC790 1/VCR和Fas SGC790 1/VCRTopoII的表达无明显差别 ;Fas SGC790 1/VCRP gp的表达水平明显低于 pBK SGC790 1/VCR ,仅显示弱阳性。 结论　Fas基因可在一定程度上逆转人胃癌耐药细胞SGC790 1/VCR的多药耐药性 (MDR) ,其涉及的相关机制可能是增强细胞对凋亡诱导剂的敏感性 ,以及降低细胞P gp的表达水平     

芹菜素治疗去卵巢骨质疏松模型大鼠的作用与剂量

文题释义： 芹菜素：主要存在于瑞香科、马鞭草科、卷柏科植物中,如芫花,卷柏中含量较大。芹菜素属于黄酮类,具有抑制致癌物质的致癌活性;作为治疗HIV和其他病毒感染的抗病毒药物;MAP激酶的抑制剂;治疗各种炎症;抗氧化剂;镇静、安神;降压。与其他黄酮类物质(槲皮素、山奈黄酮)相比具有低毒、无诱变性等特点。 骨密度：全称是骨骼矿物质密度,是骨骼强度的一个重要指标,以g/cm³表示,是一个绝对值。在临床使用骨密度值时由于不同的骨密度检测仪的绝对值不同,通常使用T值判断骨密度是否正常。T值是一个相对值,正常参考值在-1和+1之间。当T值低于-2.5时为不正常。骨密度,是骨质量的一个重要标志,反映骨质疏松程度,预测骨折危险性的重要依据。 背景：研究证实芹菜素具有抗病毒、抗炎、抗氧化、镇静安神等功效。 目的：研究不同剂量芹菜素对大鼠骨质疏松的疗效并探讨其机制。 方法：实验方案经南方医科大学动物实验伦理委员会批准。成年雌性SD大鼠42只,通过卵巢切除法建立大鼠骨质疏松模型,实验分为7组,每组6只大鼠,分别为假手术组、芹菜素20,40,60和80 mg/kg组、对照组、阳性对照组。假手术组未摘除卵巢,阳性对照组每天灌胃烯雌酚(0.02 mg/kg)、维生素D和钙;对照组给予同等量纯净水皮下注射;芹菜素各组分别给予相应剂量的芹菜素皮下注射;1次/d,用药8周。分别检测干预后第4周和第8周大鼠股骨密度和血清中钙、磷、骨碱性磷酸酶、Ⅰ型前胶原氨基末端前肽、β-Ⅰ型胶原C-末端肽的水平。 结果与结论：①与对照组比较,芹菜素剂量为40,60和80 mg/kg时,大鼠的骨密度、血清中钙、磷在第4周和第8周时均较高(P < 0.05),Ⅰ型前胶原氨基末端前肽、β-Ⅰ型胶原C-末端肽、骨碱性磷酸酶较低(P < 0.05);②与阳性对照组比,芹菜素剂量为60 mg/kg和80 mg/kg时,大鼠的骨密度、血清中钙、磷和骨碱性磷酸酶、Ⅰ型前胶原氨基末端前肽、β-Ⅰ型胶原C-末端肽在第4周和第8周时均无明显差别(P > 0.05),剂量为 20 mg/kg和 40 mg/kg时,骨密度、血清中钙、磷、均比阳性对照组低(P < 0.05),Ⅰ型前胶原氨基末端前肽、β-Ⅰ型胶原C-末端肽比阳性对照组高(P < 0.05);③对照组和假手术组比较,在第4周和第8周时大鼠骨密度、 血清中钙、磷均比较低(P < 0.05),Ⅰ型前胶原氨基末端前肽、β-Ⅰ型胶原C-末端肽均比较高(P < 0.05);④结果说明,去卵巢法建立大鼠骨质疏松模型确实有效;芹菜素对骨质疏松的治疗作用和剂量相关,一定剂量的芹菜素具有类似烯雌酚样的抗骨质疏松效果。 ORCID: 0000-0002-9167-5286(赖丽金) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

Notch1表达下调抑制病理性瘢痕成纤维细胞增殖并诱导其凋亡

目的探讨慢病毒介导的Notch1表达下调对病理瘢痕成纤维细胞(PSF)中caspase-9活化水平及线粒体膜电位的影响。方法分离培养增生性PSFs,感染Notch1 siRNA慢病毒和阴性对照慢病毒。分别采用RT-qPCR和Western blot检测细胞中Notch1mRNA和蛋白表达;MTT法检测细胞增殖;PI单染法检测细胞周期;Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡;Western blot检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、细胞周期依赖性蛋白激酶4(CDK4)、活化的caspase-3(c-caspase-3)和caspase-9(c-caspase-9)蛋白及胞质和线粒体中细胞色素C(cytochrome C)蛋白;JC-1法检测细胞线粒体膜电位。结果Notch1 siRNA慢病毒感染后的PSFs中Notch1表达水平明显低于阴性对照慢病毒和未感染的PSFs的表达水平(P<0.05)。下调Notch1后的PSFs增殖能力降低(P<0.05);细胞G0/G1期比例升高(P<0.05);细胞凋亡率升高(P<0.05);c-caspase-3和c-caspase-9蛋白表达升高(P<0.05);细胞线粒体膜电位明显下降(P<0.05);细胞中cyclin D1和CDK4蛋白水平降低(P<0.05);胞质内的cytochrome C蛋白含量升高(P<0.05)及线粒体中cytochrome C蛋白水平降低(P<0.05)。结论Notch1表达下调抑制PSFs增殖并诱导凋亡。