清肠栓对大鼠溃疡性结肠炎白细胞介素受体表达的影响

[目的]从白细胞介素受体(IL-R)角度探讨中药清肠栓防治溃疡性结肠炎(UC)的作用机制.[方法]三硝基苯磺酸(TNBS)诱导建立大鼠UC模型;41只雄性SD大鼠随机分成6组(正常组,模型组,5-氨基水杨酸栓组,清肠栓大剂量、中剂量、小剂量组),治疗组均分别予肠道给药;1周后处死,ELISA法检测血清、结肠组织可溶性IL-R(sIL-R)2,4、6水平;RT-PCR半定量法检测结肠黏膜IL-2R、IL-4R、IL-6R mRNA的表达.[结果]清肠栓各剂量组sIL-2R、sIL-6R的水平降低,与模型组比较P＜0.01,中、大剂量组IL-2R、IL-6R mRNA表达降低,与模型组比较P＜0.01或＜0.05,清肠栓各剂量组皆有降低IL-4R mRNA表达的趋势,与模型组比较P＞0.05.[结论]清肠栓有效防治UC,其作用机制与降低slL-2R、sIL-6R水平,下调IL-2R、IL-6R mRNA表达,抑制T淋巴细胞活化增殖,减少炎症递质产生有关.     

乌梅丸对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织白细胞介素8及13表达的影响

[目的]探讨乌梅丸对大鼠溃疡性结肠炎（UC）结肠组织白细胞介素8（IL-8）及白细胞介素13（IL-13）表达的影响。[方法]采用2,4-二硝基氯苯（DNCB）加醋酸复合法制备大鼠UC模型。动物随机分为正常对照组、模型组、柳氮磺胺吡啶（SASP）组和乌梅丸大、中、小剂量组6组。采用免疫组织化学染色法检测结肠组织IL-8、IL-13的表达。[结果]与正常组相比,模型组大鼠结肠组织中IL-8的阳性表达显著增高（P〈0.01）,而乌梅丸各剂量组、SASP组则较模型组明显降低（P〈0.01）。与正常组相比,模型组大鼠结肠组织中IL-13的阳性表达显著降低（P〈0.01）,而乌梅丸各剂量组、SASP组则较模型组明显升高（P〈0.01）。[结论]IL-8I、L-13参与了UC的发生。乌梅丸可能是通过下调IL-8,上调IL-13达到治疗UC的目的。     

清肠泡腾栓对溃疡性结肠炎模型大鼠肿瘤坏死因子-α及白细胞介素-13的影响

[目的]探讨中药肠道泡腾栓剂治疗溃疡性结肠炎(UC)的免疫学机制.[方法]实验分设正常对照、模型对照、空白泡腾栓、清肠泡腾栓、清肠栓、柳氮磺胺吡啶(SASP)栓共6组,ELLESA法检测血清、结肠上清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-13(IL-13).[结果]模型组血清、结肠上清TNF-α较正常对照组升高,IL-13分别轻度降低和升高;清肠泡腾栓组明显降低结肠上清TNF-α含量,与模型对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).[结论]①模型组TNF-α、Ⅱ-13较正常组升高或降低,提示UC免疫学发病机制的可能性;②清肠泡腾栓组下调UC模型大鼠TNF-α,对IL-13的调控作用则不甚明显,提示清肠泡腾栓可能在抑制促炎细胞因子方面具有更为确切的优势.     

乌梅丸对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织白细胞介素8及13含量的影响

[目的]观察乌梅丸对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织白细胞介素(IL)-8、IL-13的影响.[方法]84只SD大鼠随机分为正常对照组,模型组,柳氮磺胺吡啶( SASP)组,乌梅丸大、中、小剂量组,每组14只;除正常组外,其他各组大鼠采用2.4-二硝基氯苯(DNCB)加醋酸复合法制备溃疡性结肠炎模型;采用双抗体夹心ELISA法检测各组大鼠结肠组织IL-8、IL-13的含量.[结果]模型组大鼠结肠组织中IL-8含量较正常组显著增高(P＜0.01),乌梅丸各剂量组、SASP组则较模型组明显降低(P＜0.01或P＜0.05);模型组大鼠结肠组织IL-13含量较正常组显著降低(P＜0.01),乌梅丸各剂量组、SASP组较模型组明显升高(P＜0.01或P＜0.05).乌梅丸大剂量组降低IL-8、升高IL-13的效果最显著,其IL-8、IL-13的含量与正常组比较差异无统计学意义.[结论]IL-8、IL-13参与了UC的发生、发展,乌梅丸能通过降低溃疡性结肠炎大鼠结肠组织IL-8的含量、升高IL-13的含量,从而起到治疗UC的作用.     

枯草杆菌二联活菌对溃疡性结肠炎大鼠的作用及机制

目的探讨枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊(美常安)对溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠促炎症性细胞因子白细胞介素(IL)-1β和细胞黏附分子CD44表达的影响及其作用机制。方法采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇法灌肠建立UC大鼠模型。将SD大鼠随机分成正常对照组、模型组、美常安治疗组。观察各组疾病活动指数(DAI)、结肠组织病理学评分(HPS)。造模及美常安干预7 d后处死大鼠,取结肠行HE染色,观察镜下结肠病理变化。RT-PCR法检测各组大鼠肠黏膜细胞因子IL-1βmRNA表达,流式细胞仪检测各组大鼠结肠组织中黏附分子CD44的含量。结果模型组较正常对照组大鼠结肠黏膜可见脓性分泌物、糜烂及溃疡,美常安干预后显著改善UC大鼠结肠黏膜的病理变化,DAI和HPS评分下降显著,并明显降低UC大鼠IL-1βmRNA和CD44的表达(P<0.05)。结论枯草杆菌二联活菌可能通过下调UC大鼠IL-1βmRNA和CD44的表达而发挥干预作用。     

白细胞介素-23/-17轴在小鼠急性实验性结肠炎中的表达及作用

目的 研究白细胞介素(IL)-23/IL-17轴在小鼠实验性结肠炎结肠组织中的表达和作用.方法 将64只小鼠分为对照组24只、模型组24只、抗体组8只、正常血清组8只.除对照组外,其余各组建立小鼠急性实验性结肠炎模型.对照组和模型组小鼠分别于造模后24 h、48 h、7 d处死.抗体组和正常血清组小鼠分别于造模前2 h腹腔内注射多克隆大鼠抗小鼠IL-17中和抗体和正常大鼠血清,于造模48 h后处死.检测各组小鼠组织学损伤评分、肠组织髓过氧化物酶(MPO)活性;酶联免疫吸附试验检测结肠组织IL-23p19、IL-17含量;免疫组化染色检测核因子(NF)-κB p65在结肠组织中的表达;实时荧光定量(RT)PCR检测IL-23p19、IL-17、IL-12p35的mRNA表达水平.结果 模型组24 h、48 h、7 d时IL-23p19蛋白表达水平和mRNA表达水平[分别为(15.53±3.32)、(31.16±4.98)、(14.03±3.56)ng/mg蛋白和4.09±0.34、3.39±0.46、6.54±1.82]、IL-17的蛋白表达水平和mRNA表达水平[分别为(0.35±0.06)、(0.38±0.08)、(0.26±0.05)ng/mg蛋白和4.21±2.61、2.65±0.91、5.63±1.43]均显著高于正常对照组(P值均＜0.05),48 h时达高峰.IL-23与IL-17蛋白表达水平和mRNA表达水平呈正相关(r值分别为0.745和0.793,P＜0.05).抗体组IL-23p19和IL-12p35高水平表达,但NF-κB p65阳性细胞率、组织学评分及MPO活性[分别为1.86%±0.36%、0.63±0.52、(0.40±0.03)U/g]明显低于48 h模型组[分别为4.35%±0.37%、5.13±0.64、(2.29±0.40)U/g],说明中和IL-17后能明显减轻结肠炎症,抑制NF-κB活性.结论 IL-23/IL-17轴在急性实验性结肠炎早期阶段起关键作用.IL-17有望成为炎症性肠病治疗的新靶标.     

青黛颗粒对溃疡性结肠炎实验大鼠血清白细胞介素6和10水平的影响

[目的]观察青黛颗粒对溃疡性结肠炎（UC）实验大鼠血清白细胞介素6（IL-6）和白细胞介素10（IL-10）水平的影响,探讨其治疗UC可能的作用机制。[方法]将52只SD大鼠采用三硝基苯磺酸（TNBS）法制备UC大鼠模型。造模结束后第2天取4只大鼠处死确定造模成功,余48只随机均分为6组：正常组,模型组,柳氮磺胺嘧啶（SASP）阳性药物治疗（SASP）组,青黛颗粒低、中、高剂量组,各8只。造模后第3天开始各组动物灌胃给药,连续给药10 d,实验第14天通过腹主动脉采血取血清,用ELISA法测定血清IL-6、IL-10水平。[结果]青黛颗粒低、中、高3个剂量组与模型组比较,血清IL-6水平显著降低,IL-10水平升高（P〈0.01）;青黛颗粒高剂量组血清IL-6I、L-10水平变化与SASP组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。[结论]青黛颗粒治疗实验性UC的作用机制可能与降低IL-6水平,升高IL-10水平有关。     

清肠栓对溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜纤丝状肌动蛋白的影响

[目的]探讨复方中药清肠栓对溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠黏膜纤丝状肌动(F-actin)蛋白的修复作用。[方法]清洁级雄性SD大鼠36只,随机分为正常组,模型组,柳氮磺胺吡啶(SASP)组,清肠栓高、中、低剂量组,每组6只。选用三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的UC大鼠模型,采用免疫荧光的方法观察各组大鼠结肠黏膜F-actin蛋白的表达,并运用图像分析软件进行平均光密度测定,观察清肠栓对UC大鼠结肠屏障的修复作用。[结果]UC发病对结肠黏膜细胞骨架系统严重损害,模型组大鼠结肠黏膜F-actin蛋白几乎完全被破坏,荧光染色暗淡。图像分析测其平均光密度较正常组明显降低(P<0.01)。清肠栓能不同程度减轻UC黏膜的破坏,改善F-actin蛋白的分布,并使其表达升高(P<0.01)。[结论]清肠栓能有效地调节肠黏膜屏障功能,有效抑制UC大鼠结肠通透性的升高,改善肠黏膜屏障功能,促进溃疡愈合。     

银杏叶提取物对实验性结肠炎大鼠肠组织IL-6表达的影响

目的探讨银杏叶提取物(EGB)对实验性结肠炎大鼠肠组织大体形态组织学及炎性指标的影响。方法利用三硝基苯磺酸灌肠制备大鼠实验性结肠炎模型。实验设正常对照组、模型组、5-氨基水杨酸组、EGB组。4周后评价结肠组织大体形态和组织学评分,检测髓过氧化物酶(MPO)活性和IL-6、IL-6 mRNA表达。结果模型组大鼠结肠组织大体形态和组织学评分较对照组显著增加,MPO活性、IL-6、IL-6 mRNA表达水平显著升高;EGB组上述指标较模型组显著下降。结论EGB对大鼠实验性结肠炎有一定治疗作用,其作用机制可能与其降低结肠组织细胞因子IL-6水平有关。     

青白栓抗大鼠溃疡性结肠炎的实验研究

[目的]探讨青白栓对大鼠溃疡性结肠炎（UC）的治疗作用。[方法]采用二硝基氯苯和乙酸复合方法制备大鼠UC模型，经病理切片证实造模成功后，随机分为5组，青白栓高、中、低剂量组，模型组和柳氮磺吡啶栓组。各组大鼠根据其分组分别给予相应的处理20d后，检测各组大鼠结肠组织中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和血清白细胞介素2（IL-2）、白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、IgA、IgM、体重及肠重指数的变化。[结果]青白栓高、中剂量组动物组织中SOD显著降低，MDA显著下降（P〈0．01），青白栓高剂量组动物血清中IL-2、IL-6、TNF-α均显著降低（P〈0．05，〈0．01）。[结论]青白栓可有效地用于实验性UC的治疗。     

DOWN-REGULATION OF FIBRINOGEN BIOSYNTHESIS BY IL-4, IL-10 AND IL-13

High levels of fibrinogen are recognized as an important vascular risk factor; however, it is not known if the increase of plasma fibrinogen is directly responsible for this risk, or is only a marker of vascular inflammation. To support this second hypothesis, Oncostatin M (OSM) is a potent stimulator of fibrinogen biosynthesis and induces smooth muscle cell proliferation. In the same way, we analysed whether interleukin-4 (IL-4), interleukin-10 (IL-10) or interleukin-13 (IL-13), which protect vessel walls from monocytes injuries leading to atherosclerosis, could influence fibrinogen biosynthesis. The two levels of regulation of fibrinogen biosynthesis were tested: firstly, the direct effect of these cytokines on fibrinogen production by the hepatoma cell line Hep G2, and secondly their effect on the secretion of hepatocyte stimulating factor (HSF) activity in the supernatant of lipopolysaccharide (LPS)-activated monocytes. IL-4 and IL-13 added to Hep G2 cells down-regulated both the increase of fibrinogen secretion induced by IL-6 and fibrinogen mRNA levels, this effect being more pronounced when Hep G2 were preincubated with the two cytokines before IL-6 addition. The effect of IL-10 was evidenced only on mRNA expression. IL-10 and IL-13 dose-dependently decrease HSF activity secreted by LPS-activated monocytes, whereas IL-4 had no effect. However, the three cytokines decreased HSF activity when monocytes were incubated with the cytokines before LPS activation. The effects of these cytokines on HSF activity are related to variations of IL-6 and OSM secretion. Our data strengthen the hypothesis that the fibrinogen level is a marker of vascular disease, since cytokines which have a protective vascular effect down-regulate fibrinogen production.     

阿奇霉素对MPP患儿的疗效及对血清sIL-2R、IL-6、IL-17及IL-23的影响

目的探讨阿奇霉素治疗肺炎支原体肺炎(mycoplasma pneumoniae pneumonia, MPP)患儿的临床效果及对患儿血清可溶性白细胞介素-2 受体(soluble interleukin-2 receptor, sIL-2R)、IL-6、IL-17、IL-23 水平的影响。方法选取我院 2018 年 1—8 月收治的 142 例 MPP 患儿作为研究对象,采用随机数字表法分为阿奇霉素组和红霉素组各 71 例,2 组基础治疗保持一致;对比 2 组患儿的临床效果,sIL-2R、IL-6、IL-17 及 IL-23 水平,各项临床症状缓解时间及不良反应。结果阿奇霉素组的咳嗽消失时间、肺部啰音消失时间、退热时间均短于红霉素组(P 均< 0.05);治疗前,2 组患儿的sIL-2R、IL-6、IL-17 及 IL-23 水平差异无统计学意义(P 均> 0.05);治疗 7 d 后,阿奇霉素组患儿的 sIL-2R、IL-6、IL-17及 IL-23 水平均低于红霉素组(P 均< 0.05);治疗 10 d 后,阿奇霉素组的临床效果优于红霉素组(P < 0.05);阿奇霉素组的不良反应发生率为 5.63%低于红霉素组的 16.90%(P < 0.05)。结论阿奇霉素治疗 MPP 患儿效果优于红霉素,能有效缓解患儿的临床症状并降低 sIL-2R、IL-6、IL-17 及 IL-23 水平。     

变应性鼻炎和哮喘患者血清IL-9、IL-4、IL-5变化及临床意义

目的探讨血清IL-9、IL-4、IL-5在变应性鼻炎、支气管哮喘（哮喘）、变应性鼻炎合并哮喘中的作用。方法采用双抗体夹心ELISA法检测哮喘组、过敏性鼻炎组、过敏性鼻炎合并哮喘（合并组）患者及查体健康者（对照组）的血清IL-9、IL-4、IL-5。结果与对照组比较,三组患者的血清IL-4、IL-5、IL-9均明显升高（P均〈0．01）;其中血清IL-5合并组高于哮喘组及过敏性鼻炎组（P〈0．01,〈0．05）,过敏性鼻炎组高于哮喘组（P〈0．01）;IL-4合并组高于哮喘组（P〈0．05）。结论IL-4、IL-5、IL-9参与过敏性鼻炎和哮喘的发病,三组患者均表现为Th2型细胞因子过度表达;变应性鼻炎合并哮喘的炎症程度较高,哮喘和鼻炎也有不同炎症反应。     

白细胞介素-1β和白细胞介素-6对妊娠相关血浆蛋白-A表达的影响

目的探讨炎性因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)对人冠状动脉平滑肌细胞(human coronary artery smooth muscle cell,HCASMC)表达妊娠相关血浆蛋白-A(pregnancy-associated plasma pro-tein-A,PAPP-A)的影响。方法应用20μg/L的IL-1β、10μg/L的IL-6各自刺激HCASMC,共同培养0、2、4、8、243、6 h后收集细胞。应用不同浓度的IL-1β(0、5、20、40μg/L)I、L-6(0、5、10、50μg/L)刺激HCASMC,共同培养6 h后收集细胞。应用实时定量聚合酶链反应的方法检测细胞内PAPP-A基因的表达量。结果在同剂量IL-1βI、L-6刺激下,PAPP-A的表达量在2 h时就开始发生上调,8 h达高峰,而后开始下降;在不同剂量IL-1βI、L-6刺激下,PAPP-A的表达量在实验剂量范围内随着剂量的加大呈上升趋势(IL-1β:r=0.972,P=0.000;IL-6:r=0.941,P=0.000)。结论炎性因子IL-1βI、L-6能促进HCASMC中斑块稳定相关标记物PAPP-A的表达,可能是炎症在急性冠状动脉综合征发生发展中的重要作用机制之一。     

清胰汤对重症急性胰腺炎细胞因子白细胞介素8及10的影响

[目的]探讨中药清胰汤对重症急性胰腺炎(SAP)患者的治疗作用及对细胞因子白细胞介素8、10(IL-8、IL-10)的影响.[方法]将符合SAP诊断标准的患者随机分为综合治疗组和联合清胰汤组,综合治疗组给予常规西药、胃肠减压等治疗,联合清胰汤组给予清胰汤加综合治疗,其他辅助治疗及护理等影响因素相同,分别检测发病24 h内,第2、4天的IL-8、IL-10水平及入院后第4、8天患者的APACHE-Ⅱ评分、血清淀粉酶(AMY)、血清清蛋白(Alb)及三酰甘油(TG)水平.并选取轻症急性胰腺炎(MAP)作为对照.[结果]发病24 h内SAP患者的1L-8、IL-10水平均明显高于MAP患者(P＜0.05);联合清胰汤组第2、4天IL-8、IL-10水平低于综合治疗组(P＜0.05).SAP 2组患者治疗前后AMY、Alb水平无显著变化,但联合清胰汤组血清TG水平及APACHE-Ⅱ评分明显低于综合治疗组(P＜0.05).[结论]SAP患者全身炎症反应综合征(SIRS)的程度明显重于MAP患者;清胰汤联合西药治疗能有效降低APACHE-Ⅱ评分,清胰汤治疗SAP的可能机制是通过减少急性期IL-8、IL-10等细胞因子的释放而抑制SIRS反应.     

HBV 相关慢性肝衰竭患者白介素-17 及白介素-6检测分析

目的：探讨HBV相关慢性肝衰竭（HBV related chronic liver failure，HBV-CLF）患者细胞因子表达及其与预后的关系。方法：采用流式液相多重蛋白定量技术检测HBV—CLF患者及慢性乙型肝炎（CHB）患者血清IL．17及IL-6水平，并对HBV—CLF患者进行为期24周随访，分为死亡组及存活组。结果：HBV-CLF患者IL-17及IL-6水平高于CHB患者（P〈0．05）；HBV—CLF患者死亡组IL-17水平高于存活组（P〈0．05），两组间IL-6水平之差异无显著性意义（P〉0．05）。结论：IL．17和IL-6可能与肝衰竭的发病机理有关，其中IL．17水平与患者预后有一定相关性。     

特布他林、氨茶碱对脂多糖诱导的A549细胞分泌IL-6和IL-8的影响

目的探讨特布他林、氨茶碱对脂多糖诱导的A549细胞分泌白介素（IL）-6、IL-8的影响。方法培养A549细胞,对脂多糖诱导的A549细胞给予不同浓度特布他林、氨茶碱干预,采用放射免疫法检测IL-6、IL-8浓度。结果特布他林、氨茶碱抑制脂多糖诱导的A549细胞分泌IL-6、IL-8,且存在浓度依赖关系。结论特布他林、氨茶碱均可以通过抑制脂多糖诱导的A549细胞对IL-6、IL-8的分泌起到一定的抗炎作用。     

尘螨变应性鼻炎全血细胞IL-4、IL-13的表达及临床意义

目的探讨IL-4、IL-13在变应性鼻炎发病机制中的作用及IL-4、IL-13拮抗剂治疗变应性鼻炎的临床意义。方法取52例变应性鼻炎（实验组）及25例无过敏性疾病（对照组）患者的外周血，用PMA（phorbol 12-myristate 13-acetate佛波酯）＋inomycin（离子霉素）及标准化尘螨抗原刺激后经细胞内染色，流式细胞仪检测IL-4、IL-13、IFN-γ的表达细胞百分数，ELISA检测血清IL-4、IL-13含量。结果对照组经标准化尘螨变应原刺激后细胞内测出IFN-γ为0．3％-0．4％，但检测不到IL-4与IL-13，经PMA＋inomycin刺激后IFN-γ为5．0％-12．4％、IL-4为0．5％-0．8％、IL-13为0％-0．2％；实验组经标准化尘螨变应原刺激后IFN-γ为0．3％-0．5％、IL-4为0．9％-1．3％、IL-13为0．5％-0．9％，经PMA＋inomycin刺激后IFN-γ为17.3％-24．0％、IL-4为2．1％-3．5％、IL-13为0．8％-2．0％。实验组血清中IL-4含量为（1．768±0．485）pg／ml、IL-13为（5．427±1．263）pg／ml，对照组IL-4与IL-13含量均低于敏感度。结论IL-4、IL-13在变应性鼻炎患者中表达升高，参与了变态反应过程，为临床应用IL-4、IL-13拮抗剂治疗变应性鼻炎提供了依据。     

IL-2I、L-21诱导人外周血单个核细胞及其抗肿瘤作用

目的探讨IL-2I、L-21对人外周血单个核细胞（PBMC）的诱导增殖和表型改变的影响及其体外抗瘤作用。方法取PBMC细胞,调整浓度为1×10^6个/ml,分为四组I,L-2组加入IL-2 100 IU/mlI,L-21组加入IL-21 100IU/ml,联合组加入IL-2 50 IU/ml和IL-21 50 IU/ml,对照组加入0.1 ml生理盐水,台盼蓝染色法计数各组活细胞,流式细胞仪检测各组PBMC表型;以上述四组为效应细胞（E）,以对数生长期的4种肿瘤细胞（人胃癌细胞系M85,胃癌细胞系BGC823,结肠癌细胞系HCT116,结直肠腺癌细胞系HCT8）为靶细胞（T）,稀释靶细胞5×10^3个/孔,E∶T为1∶1和2∶1,MTT法测定细胞毒性（杀伤率）。结果联合组活细胞计数高于IL-2组I、L-21组、对照组,P均〈0.05;联合组I、L-2组和IL-21组CD3^-/CD56^＋、CD3^＋/CD56^＋水平高于对照组,P〈0.05或0.01;联合组对4种肿瘤细胞的杀伤率均高于其余三组I,L-2组I、L-21组高于对照组,P均〈0.05。结论 IL-2联合IL-21的协同刺激作用,可有效地刺激PBMC的增殖和表型改变,对4种消化道肿瘤细胞株均有较强的杀伤力。