逆转录巢式聚合酶链反应检测重型肝炎患者血清HGVRNA及分析

采用逆转录巢式聚合酶链反应技术检测重型肝炎患者血清ＨＧＶＲＮＡ，并与临床病死率间关系进行了初步探讨。结果发现２２例重肝患者血清标本中检出６例ＨＧＶＲＮＡ阳性，阳性率２７．３％，其中亚急性重型肝炎１１例，ＨＧＶＲＮＡ阳性４例，阳性率３６．４％，慢性重型肝炎１０例，ＨＧＶＲＮＡ阳性２例，阳性率２０．０％，急性重型肝炎１例未检出。ＨＧＶＲＮＡ阳性６例中，死亡１例，死亡率１６．７％，ＨＧＶＲＮＡ阴性１６例中，死亡６例，死亡率３７．５％。表明川北地区亦存在ＨＧＶ感染，ＨＧＶ感染病例病死率较低，预后好     

重型病毒性肝炎肝组织内丙型肝炎病毒抗原表达的研究

目的：研究重型肝炎肝组织内丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）抗原表达及特点，探讨ＨＣＶ感染在重型肝炎发生中的地位和作用。方法：用免疫组化法检测２０例重型肝炎组织内ＨＣＶ抗原。结果：肝组织内ＨＣＶ抗原表达阳性率４５％（９／２０），其中慢性重型肝炎６０％（６／１０），亚急性４２．９％（３／７），急性０％（０／３），ＨＣＶ抗原仅在肝细胞内表达，可呈胞浆均质型、包涵体型和膜下型，９例肝组织ＨＣＶ抗原表达阳性患者均混合     

慢性肝病患者肝组织中庚型肝炎病毒NS5抗原的检测

目的了解慢性肝病患者肝组织中庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）的存在状况。方法采用免疫组织化学方法,用抗ＨＧＶＮＳ５单克隆抗体对１１０例血清学病毒标记非甲非戊、乙型及丙型肝炎的慢性肝病患者肝组织中的ＨＧＶ抗原进行了检测。结果ＨＧＶ的总检出率为３２７％（３６／１１０）,非甲非戊、乙型及丙型肝炎病毒的检出率分别为２１％（４／１９）、３６％（２５／６９）及３２％（７／２２）;活动性肝硬化、原发性肝癌及慢性重型肝炎中ＨＧＶ的检出率为２２％（１０／４５）、４３％（２０／４７）及３３％（６／１８）,不同血清病毒标志组或病理类型之间其检出率差异均无显著意义（χ２＝４３１,１．５２;Ｐ＞０１０,Ｐ＞０２５）。ＨＧＶＮＳ５Ａｇ主要于肝细胞或癌细胞胞浆内表达,阳性肝细胞呈弥漫或大片灶状分布,免疫组织化学双标记染色显示ＨＢｓＡｇ或丙型肝炎（ＨＣＶ）ＮＳ３Ａｇ阳性细胞呈单个或小片灶状,多与ＨＧＡｇ阳性细胞位于同一区域内,或在同一肝细胞内表达。结论在慢性肝病患者肝组织中ＨＧＶ的感染较为常见     

丙型肝炎患者肝组织中病毒抗原检测

目的研究丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）抗原在患者肝组织中的分布状况及其相互关系。方法采取免疫组织化学方法，用多克隆抗－ＨＣＶ和单克隆抗－ＨＣＶ－ＮＳ３、抗－ＨＣＶ－ＮＳ５，对１０７例ＨＣＶ感染患者肝组织中ＨＣＶ抗原进行检测。结果应用三种抗体均从ＨＣＶ患者肝组织中检出相应抗原，检出率分别为３８．３％，２８．０％和５２．３％；阳性颗粒定位于肝细胞浆；阳性细胞分布呈散在、弥漫状和簇状；ＨＣＶ－ＮＳ３的表达与炎症反应无明显解剖学关系，ＨＣＶ－ＮＳ５阳性细胞较常见位于炎症灶旁或灶中。结论ＨＣＶ各成分在肝组织中的表达水平存在差别；ＨＣＶ－ＮＳ５的表达可能与ＨＣＶ的致病机制有关。     

RNA病毒性肝炎的免疫病理特点及其临床意义

采用双重ＰＡＰ法检测丙型肝炎肝组织中ＨＣＶ－ＮＳ５;采用直接酶标法检测丁型肝炎肝组织中ＨＤＡｇ;采用链霉菌抗生物素蛋白－过氧化酶（ＳＰ）方法检测庚睦炎肝组织中ＨＧＶ－ＮＳ５。结果在免疫病理表达中,阳性信号的益、形态和阳性肝细胞在肝小叶的分布及周围淋巴细胞的浸润等在３型肝炎中有较明显的差异。说明免疫是表达中有可鉴别怕不同特点,为临床防治和预后判断提供了依据。     

肝病患者中丙型肝炎病毒感染的免疫组化检测

以ＨＣＶＮＳ３区单克隆抗体，ＬＳＡＢ法检测了１１６例各类肝病肝组织（其中肝细胞癌５２例，肝炎后肝硬化１６例，慢性肝炎４０例，体质性黄疸８例）及６份正常肝组织（作为对照）中ＨＣＶ抗原的表达状况，结果表明，ＨＣＶ抗原在肝细胞癌，肝炎后肝硬化及慢性肝炎中检出率分别为１３．５％（７／５２），１２．５％（２／１６），１０％（４／４０），而在体质性黄疸及正常肝组织中未检出ＨＣＶ抗原，ＨＣＶ抗原可见于癌细胞或癌     

分泌抗丙型肝炎病毒NS5a蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株的建立及应用

制备抗丙型肝炎（丙肝）病毒（ＨＣＶ）－ＮＳ５ａ重组蛋白的单克隆抗体（单抗），并探讨其在临床诊断中的应用价值。方法通过常规细胞融合技术制备分泌单抗的杂交瘤细胞株，用含该杂交瘤细胞的腹水对石蜡包埋肝组织细胞中的ＨＣＶ－ＮＳ５ａ抗原进行免疫组化测定，同时用抑制法检测６７例丙肝血清中的ＨＣＶＮＳ５ａ和ＮＳ３抗体分布，并与ＮＳ３单抗的结果进行比较。结果融合后的阳性克隆中筛选出４株稳定分泌单抗的杂交瘤细胞株，命名为８Ｂ２，６Ｆ１１，４Ｃ６和７Ｄ９。这４株单抗与ＮＳ５ａ抗原有良好的反应性；与ＨＣＶ核心区多肽，ＮＳ３区表达多肽及乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的表面抗原均无反应。免疫组织化学检测显示，在ＨＣＶ感染肝组织中，ＮＳ５ａ抗原阳性占５４．９％（１７／３１），而ＮＳ３抗原阳性占５１．６％（１６／３１），抗原分布多呈包涵体分布，少数病例为胞浆型，１例ＮＳ５抗原呈核型表达。在６７例抗ＨＣＶ阳性血清中，ＮＳ５抗体阳性４０例，占５９．７％，而ＮＳ３阳性４７例，占７０％。结论此法制备的单抗有强特异性，在开展ＨＣＶ免疫组织化学研究上具有广阔应用前景。     

抗－HEV检测对戊型病毒性肝炎诊断的意义

目的：探讨抗－ＨＥＶＩｇＧ和ＩｇＭ阳性对急性戊型肝炎（急性戊肝）的诊断价值。方法：应用酶联免疫法（ＥＬＩＳＡ）检测非肝炎住院患者血清抗－ＨＥＶＩｇＧ。结果：在３６９例非肝炎患者中，阳性３３例（８．９％），再经不同批号的试剂复测，此３３例血清仍阳性者２８例，符合率８５％，检测其抗－ＨＥＶＩｇＭ，阳性者４例。而确诊为急性戊肝的２０例患者，复检血清抗－ＨＥＶＩｇＧ阳性率仍１００％，抗－ＨＥＶＩｇＭ阳性率８０％。结论：（１）急性戊肝早期抗－ＨＥＶＩｇＧ和ＩｇＭ均可阳性。若ＩｇＭ阴性时，结合临床表现、肝功能检查、肝炎病毒感染标志检测，抗－ＨＥＶＩｇＧ阳性对急性戊肝仍有早期诊断意义；（２）在非肝炎患者或健康人中，可以出现抗－ＨＥＶＩｇＧ和ＩｇＭ阳性，前者为既往隐性感染，后者为近期隐性感染。     

庚型肝炎病毒抗原在乙型肝炎病人肝组织中的检测及免疫病理 …

使用基因重组的抗－ＨＧＶＮＳ５单克隆抗体，采取链霉抗生物素蛋白－过氧化酶（ＳＰ）方法对３３６例乙型肝炎患者肝穿活检组织进行庚型肝炎病毒抗原（ＨＧＶＡｇ）检测，检出率为７．４％，阐明ＨＧＶＡｇ在肝组织中的分布及免疫病理表达特点，提出了在乙肝患者人群中ＨＧＶ的同时感染或重叠感染比ＨＧＶ单一感染有其更广泛的意义。     

急性病毒性肝炎患者中HGV血清学研究

目的 探讨庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）在病毒性肝炎发生中的作用。方法 选择２２例以急性肝炎就诊的血清学标志阴性的非甲～戊型肝炎患者血清,分别检测ＨＢＶ ＤＮＡ、ＨＣＶ ＲＮＡ、ＨＧＶ ＲＮＡ,并观察ＨＧＶ感染者的临床及病理表现。结果 ２２例病人中有６例为ＨＧＶ感染者,占非甲～戊型肝炎病人中的２７．２７％。其中１例单纯ＨＧＶ感染,其临床表现及病理特征均为急性肝炎;其他５例为ＨＧＶ合并ＨＢＶ、ＨＣＶ感染;合     

三种肝炎病毒在肝细胞癌组织及慢性肝炎肝组织中的表达

目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)及庚型肝炎病毒(HGV)在肝细胞癌(HCC)及慢性肝炎肝组织中的存在状态。方法:分别采用抗HBVS,抗-HBVC,抗HCVNS5及抗-HGVNS5单克隆抗体,以免疫组织化学SPAB法检测27例HCC及37例慢性肝病患者石蜡包埋的肝组织中HBVS抗原(HBsAg)、HBVC抗原(HBcAg)、HCVNS5抗原(HCAg)和HGVNS5抗原(HGAg)。结果:HCC中检出HBsAg18例(66.7%),HCAg13例(48.2%)及HGAg9例(33.3%)。其中HBV/HCV/HGV重叠感染7例,HBV/HCV重叠感染4例,HBV单独感染7例,HCV单独感染2例,HGV单独感染2例;在慢性肝炎中检出HBsAg26例(70.3%),HCAg19例(51.4%)及HGAg12例(32.4%)。其中HBV/HCV/HGV重叠感染10例,HBV/HCV重叠感染5例,HBV单独感染11例,HCV单独感染5例,HGV单独感染2例。HBsAg、HCAg、HGAg均表达于肝细胞或肝癌细胞浆内,呈细颗粒状分布。HBcAg表达于肝细胞或肝癌细胞胞核或胞浆内。结论:慢性肝炎及HCC患者有较高的HBV、HCV及HGV感染率,HBV感染在HCC的发生过程中起重要作用,HCV和HGV的感染可能是HCC发生的相关因素。     

肝细胞癌组织中HBV，HCV，HGV的表达

目的　探讨乙型肝炎病毒 (HBV) ,丙型肝炎病毒 (HCV)及庚型肝炎病毒 (HGV)在肝细胞癌 (HCC)组织中的存在状态。方法　分别采用抗 -HBVS ,抗 -HCVNS5及抗 -HGVNS5三种单克隆抗体 ,以免疫组织化学SPAB法检测 2 6例HCC患者石蜡包埋的肝癌及癌旁肝组织中HBVS抗原 (HBsAg) ,HCVNS5抗原 (HCAg)和HGVNS5抗原(HGAg)。结果　检出HBsAg 17例 ( 65 % ) ,HCAg 13例 ( 5 0 % )及HGAg 9例 ( 3 5 % ) ,其中HBV/HCV/HGV重叠感染 7例 ,HBV/HCV重叠感染 4例 ,HBV单独感染 6例 ,HCV单独感染 2例 ,HGV单独感染 2例 ,另有 5例均不表达上述三种抗原 ;HBsAg与HGAg阳性率之间差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,HBsAg与HCAg及HCAg与HGAg阳性率之间差异均无显著性(P >0 0 5 ) ;HBV ,HCV及HGV均表达于肝细胞或肝癌细胞浆内 ,呈细颗粒状分布 ,癌组织表达强度均弱于癌旁组织。结论　HCC患者中有较高的HBV ,HCV及HGV感染率 ,感染率顺序为HBV >HCV >HGV ;推测HBV感染在HCC发生过程中起重要作用 ,HCV和HGV感染可能是HCC发生的相关因素。     

HGV/GBV-C感染在肝细胞损伤中的作用探讨

目的 研究单一ＨＧＶ／ＧＢＶ－Ｃ感染者肝组织中该病毒核酸定位及相关抗原表达,探讨ＨＣＶ／ＧＢＶ－Ｃ感染在肝细胞损伤中的作用。方法 １２例单一ＨＧＶ／ＧＢＶ－Ｃ感染者经肝穿获得取肝组织常规病理诊断,采用地高辛标记探针原位杂交法检测病毒ＲＮＡ,并用免疫组织化学法检测病毒相关抗原表达。结果 病理诊断急性肝炎８例,慢性肝炎４例。ＨＧＶ／ＧＢＶ－ＣＮＳ５抗原检出阳性率为６６．６７％（８／１２）,阳性信号主要     

应用RT-PCR检测供血员及HBV、HCV感染患者并发HGV感染的比较研究

目的：探讨供血员及病毒性肝炎患者与庚型肝炎病毒(HGV)重叠感染的临床意义。方法：应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测庚型肝炎病毒核酸(HGV-RNA)。结果：供血员HGV感染率为4％,HBV、HCV合并HGV感染率分别是13．9％和15．8％。结论：说明HGV感染具有普遍性,与HBV、HCV重叠感染,对人体免疫反应及肝组织中复制情况仍是今后研究的课题。     

不同肝炎病毒感染模式对慢性肝炎病情的影响研究

目的：探讨慢性肝炎病人中ＨＢＶ、ＨＣＶ、ＨＤＶ和ＨＧＶ四型肝炎病毒的感染和重叠感染和慢性肝炎的病情及预后的影响。方法：选择慢性肝炎病人１３６例，应用ＰＣＲ方法检测ＨＢＶＤＮＡ、ＨＣＶＲＮＡ、ＨＤＵＶＲＮＡ和ＨＧＶＲＮＡ，用ＥＬＩＳＡ法检测ＨＢＶ、ＨＣＶ、ＨＤＶ和ＨＧＶ其他血清学标志物。结果：上述四型肝炎病毒的感染模式为：：ＨＢＶ、ＨＢＶ＋ＨＣＶ、ＨＢＶ＋ＨＤＶ、ＨＢＶ＋ＨＧＶ、ＨＣＶ和ＨＢＶ＋ＨＣ     

庚型肝炎病毒感染对重型肝炎发病的影响

目的 探讨庚型肝炎病毒感染在重型肝炎中的发病作用。方法 采用RT－PCR及EIA法检测重型肝炎患者血清HGVRNA及抗－HGV阳性情况，并与临床肝功、预后进行比较。结果 各临床类型重肝HGV感染率无明显差别，HGV感染病例ALT升高较低，SB、A／G较高，病死率显著低于HGV（－）病例，单纯HGV感染少见。结论 庚型肝炎病毒致病务弱，其感染不但未加重肝衰竭，反有利于肝衰竭的恢复。     

原发性肝癌患者庚型肝炎病毒感染的临床研究

目的：探讨原发性肝癌患者庚型肝炎病毒（HGV）感染的分布。方法：根据中国株HGV5’端非编码序列设计引物，采用逆转录套式聚合酶链反应方法。用此技术对107例原发性肝癌、45例慢性肝炎、43例肝硬化患者血清进行了检测分析。结果：107例原发性肝癌患者中有10例HGV－RNA阳性（9．3％）；45例慢性肝炎患者中有5例HGV－RNA阳性（11．1％）；43例肝硬化患者中有3例HGV－RNA阳性（7．0％）。结论：庚型肝炎病毒感染可能与原发性肝癌发生有一定关系，但不是引起肝癌的主要的因素。