在Staib琼脂上形成厚膜孢子是都柏林念珠菌种的特异性特征

念珠菌主要通过形态学和生化试验来鉴别。新近发现的都柏林念珠菌的主要鉴定特征与白念珠菌极其相似 ,只能用其他不同的试验加以鉴别。Ｓｔａｉｂ琼脂是临床用于从艾滋病患者分离新生隐球菌的常规培养基 ,作者研究利用Ｓｔａｉｂ琼脂鉴定白念珠菌和都柏林念珠菌。方法 :待测白念珠菌和都柏林念珠菌经分子生物学、表型和温度试验明确鉴定 ,接种于Ｓｔａｉｂ琼脂 3 0℃培养。自培养皿上形成菌落开始 ,观察菌落形态和显微镜下形态。Ｓｔａｉｂ琼脂的成分为鸟子粉 (Ｇｕｉｚｏｔｉａａｂｙｓｓｉｎｉｃａｓｅｅｄ) 5 0ｇ、葡萄糖 1ｇ、ＫＨ2 Ｐ…     

用套式PCR法诊断系统性念珠菌病时血清优于全血

用ＰＣＲ法诊断系统性念珠菌病既可以使用血清 ,也可以使用全血 ,但比较这两种类型样本检测的结果还未见正式报道。作者设计了含有 5对特异性内引物的嵌套式ＰＣＲ方法 ,可以扩增白念珠菌、热带念珠菌、假热带念珠菌、克鲁斯念珠菌和光滑念珠菌的核糖体ＲＮＡ(ｒＲＮＡ)的特异性靶序列。真菌特异性通用引物为 :ＩＴＳ1 :ＴＣＣＧＴＡＧＧＴＧＡＡＣＣＴＧＣＧＧ ;ＩＴＳ4:ＴＣＣＴＣＣＧＣＴＴＡＴＴＧＡＴＡＴＧＣ。白念珠菌的内引物为 :ＣＡＬ1 :ＡＡＣＴＴＧＣＴＴＴＧＧＣＧＧＴＧＧＧＣ ;ＣＡＬ3 :ＴＧＧＡＣＧＴＴＡＣＣＧＣＣＧＣＡ…     

在staib琼脂和咖啡酸-枸橼酸铁琼脂上区分都柏林念珠菌和白念珠菌

都柏林念珠菌和白念珠菌很近的基因关系导致它们具有很多相同的表型特征 ,这阻碍了准确、快速区分这两种菌。近期一项对 14株都柏林念珠菌和11株白念珠菌的研究显示都柏林念珠菌有ｓｔａｉｂ琼脂 (ＳＡ)上产生粗糙菌落和厚壁孢子的能力能够作为简单、准确区分都柏林念珠菌和白念珠菌的试验的基础。作者用从 18个不同国家收集的 130株都柏林念珠菌和 16 6株白念珠菌评价了这种方法。试验菌株在土豆葡萄糖琼脂培养基 (ＰＤＡ)上37℃ 4 8小时培养后划线接种于ＳＡ和咖啡酸枸橼酸铁琼脂 (ＣＡＦ)上。 30℃孵育 72～ 12 0小时 ,每隔 2 4小时观察…     

白念珠菌表面葡萄糖淀粉酶基因GCA1的克隆和鉴定

白念珠菌 (以下简称白念 )对宿主细胞的粘附在疾病的发展中起重要作用 ,生长在右旋半乳糖的白念比生长在右旋葡萄糖的白念具有更强的细胞粘附力 ,且前者细胞中 1 90ｋＤ的甘露糖蛋白 (ＭＰ1 90 )含量比后者高得多。该文对ＭＰ1 90及其基因进行鉴定并对ＭＰ1 90的 3条内肽进行分离测序。材料与方法 :采用ＳＤＳ -ＰＡＧＥ法分离ＭＰ1 90 ,将ＭＰ1 90转印至硝酸纤维素膜上 ,经氨基黑染色 ,脱色后经蛋白水解酶消化后得到3条内多肽 ,进行序列分析。以许旺酵母ＧＡＭ1的一个 0 9ｋｂ内片段作探针 ,从基因库中得到一个含白念葡萄糖淀粉酶 5′端基…     

二种念珠菌混合感染致前列腺炎1例

我们于1998年7月从一份前列腺液中,同时分离出二种念珠菌,而无其它细菌生长,重复一次培养结果相同。现报告如下:1　病历摘要　患者朱某某,男,46岁,1998年6月因尿疼,尿道分泌物来我院就诊。取尿道分泌物涂片,革兰氏染色,镜检,见大量细胞内Ｇ-双球菌,培养为淋病双球菌,诊断为淋病,用环丙沙星及菌必治治疗后好转。月余后因下腹不适,隐痛来我院复诊,做尿培养,结果无菌生长,后做前列腺按摩,取前列腺液培养,有二种念珠菌生长。患者用氟胞嘧啶及两性霉素Ｂ抗真菌治疗愈痊。2　念珠菌分离鉴定　取前列腺液接种普通血琼脂平板,35℃24ｈ培养,2/3菌落形…     

巴西首例HIV阳性患儿口腔分离出都柏林念珠菌

都柏林念珠菌是 1995年最新报道的病原真菌 ,其生物学特性和基因类型有别于白念珠菌 ,主要从ＨＩＶ阳性患者分离出。 1998年 9月至 1999年 3月 ,从 173例 0～ 12岁ＨＩＶ阳性儿童中分离真菌。于舌根部刮取分泌物接种于Ｍｙｃｏｓｅｌ琼脂培养基室温培养 ,出芽酵母转种至土豆葡萄糖琼脂培养基 (ＰＤＡ) ,再转种至显色念珠菌琼脂平板 37℃培养 ,以分离都柏林念珠菌。从 1例 3岁ＨＩＶ阳性、无口腔损害的患儿分离出 4个暗绿色的菌落。 4个菌落均于ＰＤＡ4 2℃培养 4 8小时 ,玉米吐温琼脂培养基 2 7℃培养 2周观察厚壁孢子 ,5 0 %生理盐水马血清…     

泌尿生殖道生殖支原体分离及PCR电镜鉴定的实验研究

目的联合采用培养、电镜观察及ＰＣＲ检验技术,对沪、宁两地部分高危人群的泌尿生殖道分泌物标本进行分离及鉴定。方法沪宁受检者７１例,宫颈或尿道口内拭子分泌物接种于５ｍｌＳＰ－４培养基３７℃培养。对初代分离的阳性株用ＰＣＲ技术进行扩增以鉴定ＭＧ ＤＮＡ。对阳性株再行电镜负染观察其形态特征。结果７１份标本中培养分离出２株ＭＧ,分离率为２．８２％。分离培养的阳性株满足ＭＧ生长代谢的基本特性,ＰＣＲ在标本及培养物中均可扩增出特异性序列片段;电镜下呈现ＭＧ特征性外观,可呈烧瓶状、鸭梨状或纺锤状。结论采用培养方法可在高危人群中分离ＭＧ感染株,其分离株具生长时间长,需特制培基和特殊生化反应性能,具特征性外观形态等。     

脑脊液对新生隐球菌和念珠菌的抗真菌活性研究

隐球菌性脑膜炎是隐球菌病中最严重的一型 ,尽管从隐球菌性脑膜炎患者脑脊液 (ＣＳＦ)中可分离出新生隐球菌 ,但对ＣＳＦ影响病原真菌生长的因素知之甚少。作者参照血清抑制新生隐球菌生长因素的研究方法 ,探讨了ＣＳＦ对新生隐球菌和念珠菌的体外抗真菌活性。材料与方法 :新生隐球菌 8株、白念珠菌 2株、光滑念珠菌 1株、克柔念珠菌 1株、乳酒念珠菌 1株。ＣＳＦ过滤除菌后用乳酒念珠菌作生物测试以排除其中的抗真菌药物活性。用ＲＰＭＩ-1 64 0培养液将ＣＳＦ倍比稀释后加入微测量平板中 ,同时用ＲＰＭＩ-1 64 0作对照 ,然后在上述培养基…     

Abbott LCx法检测沙眼衣原体和淋病奈瑟菌的可重复性问题

常规应用ＡｂｂｏｔｔＬＣｘ法 (连接酶链反应 )检测沙眼衣原体 (ＣＴ)和淋病奈瑟菌 (ＮＧ)的过程中 ,可发生可重复性问题 ,这些问题不能被试剂盒内的质控程序发现 ,研究的目的是发现并阻止污染和可重复性问题的发生。Ａｂｂｏｔｔ公司建议 :如果一个实验结果在可疑范围内变化 [样本 /阈值的比值 (Ｓ/ＣＯ) ,ＣＴ为 0 8～ 0 99Ｓ/ＣＯ ;ＮＧ为 0 8～ 1 2Ｓ/ＣＯ],则应重新检测。如果重复实验的Ｓ/ＣＯ≥ 1 0 ,此结果被认为是阳性 ;如果Ｓ/ＣＯ <1 0则为阴性。该研究采用了一个扩大的范围 (ＣＴ为 0 8～ 2 0Ｓ/ＣＯ ,ＮＧ为 0 8～3 0Ｓ…     

絮状表皮癣菌和西弗念珠菌引起皮肤疣状增生 :一例报告

患者外伤数年后，先后在两足部，两踝部，两小腿出现皮肤疣状增生30余年，时有溃疡，治疗前皮损9次真菌学检查，直接镜检5次阳性，可见细长分隔菌丝和（或）孢子，用沙堡培养基25℃培养，2次有黄绿色菌落生长，鉴定如絮状表皮癣菌，5次有酵母样菌落生长，用API鉴定为西弗念珠菌，治疗后2次有黄绿色菌落生长，鉴定为絮状表皮癣菌；5次有酵母样菌落生长，用API鉴定为西弗念珠菌，治疗后6次真菌学检查，均检出西弗念珠菌，而无絮状表皮癣菌，皮损组织病理学检查；表皮棘层，颗粒层和角质层内可见细长分隔菌丝，角质层内可见孤立或成堆的芽孢，孢子和厚壁孢子，因此，认为皮肤疣状增生是由絮状表皮癣菌和西弗念珠菌混弹簧感染所致，先服用氟康唑胶囊50mg,每日1次，共5周，后服用特比萘芬片250mg，每日1次共36周和250mg，每日2次，共18周，服特比萘芬片第5周时，左小腿胫前有大块皮损脱落，以后疗效不明显。     

病原真菌菌种的五年调查及分析

为研究和了解病原真菌的分布及动态，我们对自１９９４年～１９９８年在我院分离的深、浅部真菌和条件致病菌作了调查分析，结果如下。标本与方法　浅部真菌标本均来自皮肤科门诊，深部真菌标本为病房、门诊及外院送检。培养方法：标本均接种于沙堡弱葡萄糖琼脂（ＳＤＡ），浅部真菌的鉴定根据菌落生长的快慢、菌落形态特征及颜色、镜下孢子及菌丝的特征等确定其菌种。必要时作特殊鉴定；深部真菌的鉴定如系酵母先作芽管试验，如非白念珠菌经纯化后作ＡＰＩ２０Ｃ酵母同化试验，鉴定至种，霉菌则依据其菌落形态、色素及镜下产孢结构的特征确…     

临床标本中分离的念珠菌及细菌菌丛

在自然界生物间存在着协同或拮抗作用。Ｏｄｄｓ通过复习文献得出白念珠菌能增加细菌协同感染机会的结论。为验证此假设 ,作者用常规培养方法对1986～ 1988年收集的各种临床标本共 67765份进行了分析研究。材料和方法 :所有标本均来自Ｇｏｔｔｉｇｅｎ大学医院。所有标本均用标准方法培养并根据生化方法鉴定 ,用ＡＰＩ- 2 0系统鉴别不同的酵母。所有获得的数据用ＩＢＭ主机由医学信息分析得出结果。细菌与真菌的关系用 χ2 检验。结果 :在 67765份标本中 ,有 5195份 ( 7 7% )培养出真菌或真菌与细菌的混合物 (Ｆ) ,有 62 570份标本仅培养出…     

从一例巴西HIV感染者分离出非典型的新生隐球菌

患者女 ,2 9岁 ,巴西圣保罗州立大学感染科患者 ,于 1995年 8月诊断为艾滋病 (Ｃ3期 ) ,接受过抗逆转录病毒药物齐多夫定和去羟肌苷治疗。随访发现患有口咽念珠菌病和播散性疱疹。 1996年 6月 ,出现严重头痛等脑膜炎症状。做脑脊液检查 ,印度墨汁染色镜检发现有荚膜的孢子。在沙堡琼脂平板上长出光亮、粘液样菌落 ,命名为新生隐球菌Ｃ14。随机扩增多态性ＤＮＡ分析无特殊。分离和鉴定 :分离株 (Ｃ14 )在咖啡酸琼脂平板30℃培养 ,4ｄ生长出浅黄褐色菌落。用ＩＤ32Ｃ鉴定缺乏肌醇同化力 ,用ＣＲＹＰＴＯ检查血清型为Ａ ,尿素酶试验 (+ ) ,配对…     

念珠菌显色培养基鉴定阴道念珠菌的应用评价

目的：评价念珠菌显色培养基在外阴阴道念珠菌病诊断及菌种鉴定中的应用价值。方法：用念珠菌显色培养基对外阴阴道念珠菌进行培养，根据菌落形态，进行了菌种鉴定。结果：白念珠菌仍然是最常见的病原菌。念珠菌显色培养基对白念珠菌、克柔念珠菌的检出有很好的敏感性和特异性，对少数非白念珠菌的检出率有待商榷人：念珠菌显色培养基在阴道分泌物病原快速诊断、菌种鉴定中有较好的应用价值。     

在培养的人正常黑素细胞中脂多糖和细胞因子诱生氧化氮合成酶并产生氧化氮

一氧化氮 (ＮＯ)的许多生理学和病理生理学的重要意义已为人们所熟知 ,但它在人黑素生成过程中的作用还不清楚。作者运用免疫印迹法证实经脂多糖 (ＬＰＳ)和细胞因子 (ＣＫ)处理过的正常人黑素细胞 (ＮＨＭＣ)表达诱生型氧化氮合成酶异构体 (ｉＮ ＯＳ) ,同时发现ＮＯ的合成被ＮＯＳ的竞争抑制剂ＮＧ-单甲基 -Ｌ -精氨酸 (Ｌ -ＮＭＭＡ)阻断。作者以此来探讨ＮＯ在色素脱失性疾病中的作用。方法 :取 2～ 5岁正常儿童包皮作ＮＨＭＣ培养。用常规方法消化皮片 ,分离真表皮 ,制成细胞悬液 (1～ 3× 10 6细胞 /培养瓶 ) ,并放入 1%热灭活胎牛血…     

某些真菌的限制性片段长度多态性分析

传统的病原真菌的鉴定主要通过分离株的形态和生理特征进行鉴定。这些方法比较费时,常常需要数天到数周才获得分离培养结果,而且这种依据菌株表型特征获得的结果往往存在不稳定、重复性差和操作繁琐等缺点。本实验将聚合酶链反应(ＰＣＲ)技术应用于病原真菌的鉴定分析,现将结果报道如下。一、材料和方法(一)菌株:实验所用菌株均为标准菌株:白念珠菌ＡＴＣＣ76615、067,白念珠菌Ｂ型Ｃ1,克柔念珠菌Ｒ5,高里念珠菌Ｄ10,热带念珠菌Ｄ9,乳酒念珠菌Ｄ12,光滑念珠菌Ｃ2,新生隐球菌Ｄ48、ＲＶ45981、ＲＶ59939、ＲＶ52642、ＲＶ45977。罗伦特隐球菌…     

应用AP-PCR进行真菌菌型鉴定的方法建立

目的 建立应用斜引物聚合酶链反应进行真菌菌型鉴定的方法。方法 用任意引物ＯＰＡＡ１１（５’－ＡＣ－ＣＣＧＡＣＣＴＧ－３’）和引物ＯＰＤ１８（５’－ＧＡＧＡＧＣＣＡＡＣ－３’）对一些常见真菌进行了任意引物聚合酶链反应。结果 扩增产物电泳分析发现不同菌种间产生的ＤＮＡ带型存在明显差异。结论 ＡＰ－ＰＣＲ用来进行真菌鉴定比较可靠、稳定。     

都柏林念珠菌的鉴定

都柏林念珠菌是一种新近鉴定的机会致病念珠菌，其表型特征如菌落颜色、形态及染色形态均类似于白念珠菌，许多生化特征也与其相同，所以需要多种表形特征结合才能鉴定都柏林念珠菌。鉴别方法较多，如培养基鉴定、生化鉴定、分子生物学鉴定、免疫鉴定及光学鉴定。尤其近年分子生物学兴起，提供了方便、快速的实验方法。     

都柏林念珠菌的鉴定

都柏林念珠菌是一种新近鉴定的机会致病念珠菌,其表型特征如菌落颜色、形态及染色形态均类似于白念珠菌,许多生化特征也与其相同,所以需要多种表形特征结合才能鉴定都柏林念珠菌。鉴别方法较多,如培养基鉴定、生化鉴定、分子生物学鉴定、免疫鉴定及光学鉴定。尤其近年分子生物学兴起,提供了方便、快速的实验方法。     

念珠菌与细菌混合感染引起足菌肿1例

报告1例由热带念珠菌、娄德罗念珠菌和金黄色葡萄球菌所致足菌肿。患者男,45岁。左足及左小腿红肿,足底破溃形成窦道伴溢液2个月。真菌直接镜检阴性。皮损组织病示:表皮下组织可见菌丝、孢子及颗粒物质。真菌培养有酵母样菌落生长,DNA测序鉴定为热带念珠菌和娄德罗念珠菌;细菌培养为金黄色葡萄球菌。诊断为足菌肿,给予伊曲康唑、阿奇霉素及局部外洗治疗后痊愈。