鸦胆子油乳制剂对宫颈癌Hela细胞的抑制效果及作用机制研究

目的探讨鸦胆子油乳制剂对宫颈癌Hela细胞的抑制效果及作用机制。方法观察不同浓度(5,10μg/m L)鸦胆子油乳处理Hela细胞后的形态改变;检测不同浓度鸦胆子油乳(2.5,5,10,20,40μg/m L)处理后对Hela细胞的抑制率,并观察鸦胆子油乳处理浓度分别为10,20μg/m L时细胞周期的变化情况。结果鸦胆子油乳处理宫颈癌Hela细胞后出现凋亡小体,且细胞毒作用随时间延长毒性增强;在处理48 h后,研究组的抑制率均>60%,72 h后抑制率均>80%;伴随鸦胆子油乳浓度的增加,G0~G1期细胞比率降低,S期及G2~M期细胞比率明显增加。10μg/m L和20μg/m L鸦胆子油乳处理48 h后细胞凋亡率分别为60%与70%。结论鸦胆子油乳能够明显抑制宫颈癌Hela细胞的增殖,且呈时间依赖性,能够诱导细胞凋亡,且使Hela细胞阻滞于S期。     

鸦胆子油乳抑制胃癌细胞增殖及其机制的研究

目的研究鸦胆子油乳体外对人胃癌细胞BGC-823抑制增殖的作用及对细胞周期、细胞凋亡及p53表达的影响．探讨其抗肿瘤机制。方法：MTT法检测鸦胆子油乳对BGC-823细胞的毒性作用：漉式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期分布；免疫细胞化学染色检测p53表达。结果：鸦胆子油乳对人胃癌细胞有显著的增殖抑制作用，且有时间和浓度依赖性：0．10g/L鸦胆子油乳作用12、24、48h后，凋亡率明显上升，细胞周期被阻滞于G0／G1期；p53表达水平增高。结论：鸦胆子油乳体外对胃癌细胞BGC-823有显著的抑制增殖作用，上调p53的表达从而能诱导凋亡、阻滞细胞周期于C0／C1期是其重要机制。     

土贝母皂苷Ⅱ对诱导性肝癌大鼠肝细胞周期的影响

目的观察土贝母皂苷Ⅱ对诱导性肝癌大鼠肝细胞周期的影响。方法以诱导性肝癌大鼠为材料,采用流式细胞仪检测土贝母皂苷Ⅱ对诱导性肝癌大鼠肝细胞DNA含量,并分析细胞周期。结果经土贝母皂苷Ⅱ治疗的动物肝S期细胞较模型组明显减少,而G1/G0期细胞增多,几乎恢复到正常水平。结论土贝母皂苷Ⅱ可以阻止肝细胞从G1期向S期进程,使DNA合成受到抑制和阻断,造成G1期细胞的堆积。     

鸦胆子油乳剂逆转K562／ADM细胞多药耐药的作用和机制

目的：研究鸦胆子油乳剂能否逆转K562／ADM细胞多药耐药性,初步探讨鸦胆子油乳剂逆转多药耐药的机制。方法：四唑盐比色法（MTT法）检测药物对K562／ADM细胞的半数抑制浓度（IC50）;流式细胞仪分析细胞的凋亡和MDRmRNA的表达。结果：加入无毒剂量的鸦胆子油乳剂后ADM对K562／ADM细胞的IC50由81．5μg／ml降至14．0μg／ml,增敏倍数为5．83;加鸦胆子油乳剂后,K562／ADM细胞MDRmRNA表达下降。结论：鸦胆子油乳剂在一定程度上逆转了K562／ADM细胞的多药耐药性,逆转耐药的机制可能是它下调了MDRmRNA的表达。     

鸦胆子油乳剂联合NP方案治疗晚期肺癌72例近期疗效观察

目的：观察鸦胆子油乳剂联合NP方案治疗晚期非小细胞肺癌的临床效果。方法：将72例晚期非小细胞肺癌患者随机分为两组,对照组应用NP方案化疗,试验组应用NP方案化疗联合鸦胆子油乳剂;2个周期后评价疗效。结果：两组患者近期疗效差异无统计学意义,但试验组患者治疗后生活质量、机体免疫功能明显优于对照组,毒副作用低于对照组。结论：鸦胆子油乳剂能减轻NP方案对机体的毒副反应,提高机体免疫力,增加患者对化疗的耐受性。     

鸦胆子油静脉乳剂对卵巢癌细胞株CAOV3作用的实验研究

目的探讨并阐明鸦胆子油静脉乳剂对卵巢癌细胞株CAOV3作用机制,为该中药治疗卵巢癌提供可靠的实验依据。方法采用电镜技术,观察应用鸦胆子油静脉乳剂后卵巢癌细胞株CAOV3的形态学改变。结果CAOV3细胞超微结构变化明显,出现中晚期细胞凋亡现象,微绒毛及突起明显减少,伪足消失,线粒体空泡化,核染色质凝集,可见凋亡小体。结论鸦胆子油静脉乳剂可促进卵巢细胞形态学改变、诱导癌细胞凋亡,能降低CAOV3细胞侵袭和转移能力。     

鸦胆子油自微乳化颗粒在大鼠体内生物利用度考察

目的研究鸦胆子油自微乳化颗粒在大鼠体内的药代动力学过程及其相对生物利用度。方法大鼠分别灌服市售鸦胆子油口服乳剂和鸦胆子油自微乳颗粒剂,于不同时间点取血,HPLC法检测血浆中鸦胆子油的油酸、亚油酸,采用DAS 2.1.1版软件求算药动学参数。结果大鼠灌服市售鸦胆子油口服乳剂和鸦胆子油自微乳颗粒剂后油酸AUT为72.738、170.334(h·μg)/m L,亚油酸为41.393、140.759(h·μg)/m L。制剂中油酸、亚油酸相对生物利用度分别达到234.2%、340.1%。结论与市售鸦胆子油口服乳剂相比,鸦胆子自微乳化颗粒可明显提高油酸、亚油酸在大鼠体内的相对生物利用度。     

鸦胆子油乳剂联合化疗治疗肺癌脑转移的临床研究

目的：比较鸦胆子油乳剂联合化疗与单纯化疗治疗肺癌脑转移的疗效、NK细胞活性和生活质量的改善。方法：采用随机对照分组,治疗组(20例)为鸦胆子油乳剂联合化疗(Vm-26 DDP);对照组(15例)为单纯化疗,化疗方案同治疗组,两组均以30天为一疗程,治疗2个疗程。结果：治疗组有效率为25％,与对照组比较无显著性差异,但中位生存期明显延长,治疗组NK细胞活性及KPS评分均明显高于对照组。结论：鸦胆子油乳剂联合化疗治疗肺癌脑转移可提高患者的细胞免疫功能,改善生存质量,延长中住生存期,值得临床推广。     

鸦胆子乳剂对HepG2细胞系中突变型TIP30基因表达及细胞增殖的影响

目的：观察鸦胆子乳剂对HepC2细胞系中突变型TIP30基因表达及细胞增殖的影响。方法：通过基因转染技术将TIP30野生基因、TIP30^R106H突变基因和TIP30^R106S突变基因分别导入3组体外培养的HepG2肝癌细胞内,MTT法检测鸦胆子乳剂对各组肿瘤细胞增殖的抑制效果;WesternBlot法检测鸦胆子乳剂处理后各组细胞TIP30蛋白的表达水平。结果：鸦胆子乳剂能显著上调TIP30各基因组细胞中正常TIP30基因蛋白的表达,抑制TIP30空白组及突变组细胞增殖。结论：鸦胆子乳剂通过上调突变组细胞中正常TIP30蛋白的表达,抑制突变组细胞增殖,其对肿瘤细胞增殖的干预很可能是靶向治疗的一个方向。     

紫杉醇和鸦胆子油分子配型纳米乳的制备及抗肿瘤作用的体内外评价

目的 制备共同时递送紫杉醇-油酸前药(PTX-OA)和鸦胆子油(BJO)的分子配型纳米乳制剂(CMNEs)。方法 对基于分子配型组装技术的紫杉醇-油酸/鸦胆子油纳米乳制剂体外对HepG2细胞的抑制、细胞周期、细胞凋亡和体内抑制裸鼠肿瘤生长的评价。结果 紫杉醇-油酸/鸦胆子油纳米乳（PTX-OA/BJO CMNEs）粒径为108.7 2.3 nm,包封率> 95%。PTX-OA/BJO CMNEs对HepG-2细胞的毒性作用有浓度和时间依赖性,细胞周期试验表明PTX-OA/BJO CMNEs增加了G2/M期阻滞。注射PTX-OA/BJO CMNEs后的裸鼠模型中,对比注射生理盐水组,裸鼠肿瘤体积明显减少 (P<0.05),表明PTX-OA/BJO CMNEs在体内有很好抗肿瘤效果。进一步研究发现,PTX-OA/BJO CMNEs的抗肿瘤作用增强与诱导肿瘤细胞凋亡的能力有关,尤其是PTX-OA/BJO CMNEs可明显抑制肿瘤细胞的增殖和TOPO II的活性。结论 不同机制的两种药物联合给药能同时阻断不同的抗癌途径,从而提高治疗反应,降低毒性。     

鸦胆子油乳注射液结合中医辨证治疗70岁以上Ⅳ期肺癌的疗效观察

目的:观察鸦胆子油乳剂结合中医辨证治疗70岁以上Ⅳ期肺癌的临床疗效。方法:选择入组患者40例,随机分为对照组和观察组各20例,对照组予以辨证治疗及支持对症治疗,观察组在对照组的基础上采用鸦胆子油乳剂30mL静滴,每日1次,连用2疗程。结果:观察组在生活质量、症状改善及肿瘤缩小方面优于对照组,比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:鸦胆子油乳剂结合中医辨证治疗70岁以上Ⅳ期肺癌,可提高疗效。     

鸦胆子油喷雾干燥乳剂的制备与药效学的研究

 目的：将鸦胆子油制成干燥乳剂,进行药效学对比实验,开发药物新剂型。方法：采用喷雾干燥方法制备鸦胆子油干燥乳剂,进行质量评价,同时用两种动物,以雷尼替丁为对照药进行抑制胃溃疡形成的药效学实验。结果与结论：干燥乳剂具有良好的再分散性、稳定性。药效学结果显示,对小鼠阿司匹林所致胃溃疡,束水应激胃溃疡,大鼠醋酸所致慢性胃溃疡,幽门结扎胃溃疡均有明显的抑制作用。     

金叶败毒制剂对人巨细胞病毒感染细胞病变及细胞周期的影响

目的 探讨中药金叶败毒制剂(简称中药)对人巨细胞病毒(HCMV)感染人胚肺成纤维细胞(HEL)细胞病变及细胞周期的影响.方法 用HCMV AD169感染人胚肺成纤维细胞,分别用金叶败毒制剂和更昔洛韦(简称GCV)干预后,用倒置相差显微镜观察不同感染时间细胞病变,并采用流式细胞技术检测HCMV感染及药物干预后宿主细胞周期.结果 金叶败毒制剂能明显抑制HCMV感染HEL细胞病变.中药干预组在病毒感染48 h后,HEL细胞处于G2/M期的细胞明显增多,在HCMV感染72 h后,药物干预组 HEL细胞均表现为S期细胞明显减少,G2/M期和G0/G1期细胞明显增多.结论金叶败毒制剂可能通过延缓HCMV感染细胞病变,促进细胞周期进程而发挥抗病毒作用.     

鸦胆子油剂对家兔颅内压的影响

本研究应用侧脑室插管连续描记颅内压方法，观察了中药鸦胆子油静脉乳剂及口服乳剂对家兔颅内压的影响。结果表明：鸦胆子油静脉乳剂具有较强的对抗硝普钠引起的颅内压升高作用（Ｐ＜０．０１），口服乳剂也有轻度拮抗颅内压升高作用；两种剂型对家兔正常颅内压及血压影响不大。这与鸦胆子乳剂可使肺癌脑转移引起的颅内压升高症状缓解的临床观察结果是一致的。     

鸦胆子油乳剂对家兔颅内压的影响

本研究应用侧脑室插管连续描记颅内压方法，观察了中药鸦胆子油静脉乳剂及口服乳剂对家兔颅内压的影响。结果表明：鸦胆子油静脉乳剂具有较强的对抗硝普钠引起的颅内压升高作用（Ｐ＜０．０１），口服乳剂也有轻度拮抗颅内压升高作用；两种剂型对家兔正常颅内压及血压影响不大。这与鸦胆子乳剂可使肺癌脑转移引起的颅内压升高症状缓解的临床观察结果是一致的。     

泰素帝联合鸦胆子对前列腺癌PC-细胞生长的影响

目的：研究不同浓度泰素帝合并鸦胆子对人前列腺癌Pc一3细胞增殖的影响,寻求对激素抵抗型前列腺癌（hormonal refractory prostate cancer,HRPC）更为有效的治疗方法。方法：应用MTT、流式细胞仪方法,观察PC-3细胞经不同剂量泰素帝及其联合鸦胆子油乳剂作用24h,48h后,细胞增殖抑制率、细胞凋亡率变化。结果：泰素帝能抑制PC-3细胞增殖,抑制效应随着药物剂量和作用时间的增加而增强。鸦胆子增强泰素帝对PC-3细胞增殖的抑制作用,合并组与泰素帝单独作用比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。流式细胞仪测定显示,泰素帝组和合并组凋亡率随泰素帝浓度的升高而增加,合并组与泰素帝组差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：本实验结果显示鸦胆子油乳剂能增强泰素帝对HRPC的PC-3细胞增殖的抑制、促进肿瘤细胞凋亡,两者有协同抗肿瘤效应。结论本研究的初步结果提示鸦胆子油乳剂可作为泰素帝治疗HRPC的新型联合药物。     

抑肺饮对肺腺癌细胞A549裸鼠移植瘤的抑瘤作用

目的：观察中药抑肺饮对肺腺癌细胞A549裸鼠移植瘤的抑制作用，探讨其抑制细胞增殖的作用机制。方法：将肺腺癌细胞A549接种于裸鼠腋窝皮下，形成移植瘤，实验分为阴性对照组、鸦胆子油对照组、抑肺饮高、中、低剂量治疗组，采用流式细胞术检测细胞周期，免疫组织化学法检测P16基因及血管内皮生长因子（VEGF）、P53基因的表达。结果：抑肺饮可明显抑制移植瘤的增长，使G0／G1期细胞明显增多，显著上调P53、P16蛋白的表达，并下调VEGF的表达，与阴性对照组比较，有统计学差异（P〈0．05），中剂量组与鸦胆子油对照组效果相当（P〉0．05）。结论：中药抑肺饮对肺腺癌细胞A549裸鼠移植瘤具有抑制作用，其机制可能与其抑制细胞增殖有关。     

鸦胆子油联合卡培他滨通过抑制Wnt/β-catenin信号通路诱导人结直肠癌细胞周期阻滞和增殖抑制

目的:探讨鸦胆子油(Brucea javanica oil,BJO)和卡培他滨(Capecitabine,Cap)合用对体外培养的人结直肠癌LOVO和HT29细胞周期和增殖及对Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法:以CCK-8比色法,检测不同浓度的鸦胆子油(0.0625、0.125、0.25、0.50和1.00mg/ml)、卡培他滨(0.025、0.050、0.100、0.200、0.400μM)作用不同时间(2h、12h、24h和48h)以及单独、联合应用对LOVO和HT29细胞增殖能力影响;PI染色分析鸦胆子油、卡培他滨以及联合应用对细胞周期的影响;免疫印迹法检测结直肠癌细胞系(SW620、LOVO、LS174T、HT29和SW116)和人正常结直肠粘膜细胞系,以及鸦胆子油、卡培他滨单用及合用对细胞β-catenin和Wnt3a蛋白的表达影响;实时荧光定量PCR法检测结直肠癌细胞系(SW620、LOVO、LS174T、HT29和SW116)和人正常结直肠粘膜细胞系,鸦胆子油、卡培他滨单用及合用对细胞Wnt3a、β-catenin及其下游Cyclin D1和c-Myc mRNA含量的影响。结果:结直肠癌细胞系(SW620、LOVO、LS174T、HT29和SW116)中β-catenin蛋白和mRNA含量均明显高于正常结直肠上皮细胞系;0.25、0.50和1.00 mg/ml鸦胆子油作用12h(分别为:93.1%,90.8%和90.5%),24h(分别为:76.7%,71.1%和72.7%)可明显抑制LOVO细胞生长,且呈现时间和剂量依赖性的变化,同时抑制HT29细胞,卡培他滨与鸦胆子油作用相同;0.125、0.25、0.50和1.00mg/ml的鸦胆子油联合0.4μM卡培他滨比单独卡培他滨作用结直肠癌细胞系LOVO和HT29的细胞增殖率明显较低,且具有剂量依赖性,分别为:对LOVO分别为70.9%、67.0%、61.3%和55.7%;对HT29分别为70.1%、58.1%、48.3%和40.4%;1.00 mg/ml鸦胆子油和0.4μM卡培他滨合用于LOVO和HT29细胞48 h的增殖抑制率为55.7%和40.4%,明显低于单独使用0.4μM卡培他滨(72.5%和55.1%);DAPI染色证实,合用1.00mg/ml的鸦胆子油联合0.4μM卡培他滨比单独鸦胆子油和卡培他滨作用结直肠癌细胞系LOVO和HT29增殖抑制作用更强;联合使用明显增加两种细胞G1/G0期细胞数量,同时增加G2/M细胞数量;再者,联合使用明显抑制细胞Wnt3a、β-catenin蛋白和mRNA及其下游Cyclin D1和c-Myc mRNA含量表达。结论:鸦胆子油和卡培他滨合用可抑制结直肠癌细胞增殖,促进凋亡,该作用可能是通过抑制Wnt/β-catenin信号通路和细胞周期阻滞实现的。     

高脂血症沙鼠某些脂酶活性的变化及鸦胆子油乳剂降脂作用的研究

通过制成的长爪沙鼠高脂血症模型观察其心肌和肝脏的组织总脂解活性（ＬＡ），脂蛋白脂肪酶（ＬＰＬ），肝甘油三酯脂肪酸（ＨＴＧＬ）及血清卵磷脂：胆固醇脂酰基转移酶（ＬＣＡＴ）的活性变化，并对中药鸦胆子油乳剂的降脂作用及机理进行了探讨。结果表明。高脂血症沙鼠血清中ＬＣＡＴ活性明显升高；肝脏ＬＡ降低；心肌和肝脏的ＬＰＬ活性都明显降低，而ＨＴＧＬ的活性则无明显改变；给其投入鸦胆子油乳剂后，血清ＬＣＡＴ活性更进一步增强；血清总胆固醇（ＴＣ）、甘油三酯（ＴＧ）降低；ＬＡ及ＨＴＧＬ无明显改变；但ＬＰＬ活性增高。说明鸦胆子油乳剂具有明显的降脂作用。     

鸦胆子油乳剂对非小细胞肺癌患者细胞免疫功能及生活质量的影响

目的观察鸦胆子油乳剂对经化疗治疗非小细胞肺癌患者的免疫功能及生活质量的影响。方法将115例中晚期（Ⅲ／Ⅳ期）非小细胞肺癌患者随机分为两组,对照组（57例）给予GP方案化疗。治疗组（58例）给予鸦胆子油乳剂联合GP方案化疗。治疗2个周期后进行疗效评价。结果治疗组与对照组的有效率分别为51．8％、47．4％,两组差异无统计学意义（P〉0．05）。治疗后治疗组细胞免疫功能改善,生活质量提高（P〈0．05,P〈0．01）,而对照组化疗后机体细胞免疫功能及生活质量较化疗前降低（P〈0．05）。结论鸦胆子油乳剂联合化疗治疗中晚期非小细胞肺癌患者,可以提高患者的细胞免疫功能、改善患者的生活质量。