右归饮对肺纤维化大鼠前列腺素及其受体的影响

目的探讨前列腺素及其受体EP2/EP3在右归饮改善大鼠肺纤维化中的作用机制。方法 SPF级雄性SD大32只采用随机数字表完全随机法分为正常组、模型组、右归饮低剂量组(右低组)、右归饮高剂量组(右高组)各8只。正常组无任何干预,模型及用药组经气管插管雾化博来霉素(6 mg/kg)建立实验性肺纤维化大鼠模型。造模后第14天右低组和右高组分别定时给予5 g/kg、10 g/kg右归饮灌胃1次,模型组等量饮用水灌胃,连续给药20 d。记录大鼠肺脏质量和体重,计算肺脏系数,ELISA法检测血清和肺组织中前列腺素E2(PGE2)的浓度,免疫组织化学染色分析肺组织中EP2和EP3的表达情况以及组织定位,分别计数阳性细胞数目。结果与正常组相比,模型组大鼠肺脏质量(3. 1±0. 44 g,P 0. 05)和肺脏系数(0. 69±0. 13%,P 0. 05)均病理性升高;血清PGE2为45. 49±7. 38 pg/ml(P 0. 05),肺组织中PGE2为113. 64±16. 78 pg/ml(P 0. 05),均显著升高;与正常组相比,模型大鼠肺组织实变区内可见大量EP2强阳性的AECⅡs异常增生,肺泡管和肺泡腔内大量聚集的巨噬细胞部分呈EP3阳性,EP2阳性和EP3阳性的细胞数量均显著增加(P 0. 05);与模型组比较,右低组大鼠肺脏质量(2. 63±0. 24 g,P 0. 05)和肺脏系数下降(0. 57±0. 08%,P 0. 05),血清中的PGE2(23. 01±8. 61 pg/ml,P 0. 05)和肺组织的PGE2(89. 84±20. 54 pg/ml,P0. 05)水平均降低,EP2阳性的Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡs)细胞EP2表达减弱,细胞数量减少(P 0. 05),而EP3阳性的巨噬细胞数增加(P 0. 05),右高组除血清中的PGE2水平降低(P 0. 05)外,其他未见统计学差异。结论右归饮能够明显改善博来霉素所致大鼠肺纤维化,可能与降低肺脏组织中PGE2水平,抑制实变区EP2的表达,减少EP2阳性的AECⅡs数量,增加EP3阳性的巨噬细胞有关。     

右归饮对慢性肾功能衰竭肾阳虚大鼠保护作用的研究

目的:观察右归饮对慢性肾功能衰竭(肾衰)肾阳虚大鼠保护作用的机制。方法:采用大鼠5/6肾皮质切除加丙硫嘧啶(PTU)灌胃造成慢性肾衰肾阳虚模型;将模型大鼠按随机数字表法分为慢性肾衰模型组、右归饮组和假手术对照组。右归饮组大鼠制模的同时灌胃右归饮,模型组和假手术对照组制模的同时灌胃等量凉开水,每日1次,连续28 d。实验结束时测定各组大鼠血清尿素氮(BUN)、肌酐(C r)和血脂水平。结果:右归饮能明显降低模型大鼠血清BUN和C r水平〔BUN(13.65±1.37)mm o l/L比(15.88±1.16)mm o l/L,C r(67.27±11.80)μm o l/L比(85.92±13.93)μm o l/L,P均<0.01〕;升高降低的甘油三酯〔TG(0.64±0.25)mm o l/L比(0.40±0.10)mm o l/L,P<0.05〕。结论:右归饮对慢性肾衰大鼠模型有显著的保护作用。     

右归饮汤剂对难治性哮喘患者血浆皮质醇及免疫球蛋白水平的影响

目的 观察右归饮汤剂对难治性哮喘皮质醇及免疫球蛋白的影响.方法 60例难治性哮喘患者随机分为治疗组和对照组各30例,对照组给以吸氧、氨茶碱、糖皮质激素、长效β2受体兴奋剂(LABA),必要时给以抗感染治疗,治疗组在上述治疗的基础上给予右归饮汤剂,每日两次,之后每两周减少激素用量的三分之一,出院后对两组患者每周一次随访,记录及制定激素用量.三个月为一疗程.两组患者治疗前后测定血清皮质醇水平,检测外周血中免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM、IgE),T细胞亚群(CD3、CD4、CD8、CD4/CD8).结果 两组患者疗效对比,差异无显著性.但治疗组患者血浆皮质醇水平,免疫球蛋白及T细胞亚群与对照组相比,差异有显著性.结论 右归饮汤剂治疗难治性哮喘有较好的疗效,可以减少难治性哮喘患者的糖皮质激素用量,可以显著改善难治性哮喘患者的肾上腺皮质功能和免疫功能,值得临床推广应用.     

右归饮合炙甘草汤对21例Shy-Drager综合症血压的影响

目的 探讨右归饮合炙甘草汤对SDS直立性低血压的治疗作用。方法 21例SDS口服右归饮合炙甘草汤4周,观察治疗前后卧—立位血压变化及头晕、晕厥等症候的改变情况。结果治疗前后卧—立位血压差明显改善(P<0.01),头晕减轻,晕厥消失。结论 右归饮合炙甘草汤对SDS直立性低血压及头晕、晕厥有显著治疗作用。     

葛根素在体外对成骨细胞增殖和分化的影响

背景:成骨细胞是骨代谢平衡过程中的关键功能细胞,植物雌激素对成骨细胞的增殖和分化有重要影响,葛根素作为植物雌激素的一种,在体外以较大范围浓度对成骨细胞功能的影响仍少见报道。目的:观察葛根素在体外对大鼠成骨细胞增殖和分化功能的影响。方法:取新生Wistar大鼠的颅盖骨,对成骨细胞进行分离、培养、纯化及鉴定。将培养的成骨细胞随机分为对照组、10-3～10-10mol/L不同浓度葛根素组,观察不同浓度葛根素对体外培养的成骨细胞增殖和碱性磷酸酶活性表达的影响。结果与结论:细胞经葛根素处理后10-5～10-9mol/L组成骨细胞增殖活性较对照组明显增加(P<0.05),第3天增殖最快(P<0.01),第4天开始下降;诱导第4天,各组碱性磷酸酶活性与对照组相比,差异均有显著性意义(P<0.01),其中以10-6mol/L组最显著(P<0.01)。然而葛根素10-3mol/L组成骨细胞增殖活性、碱性磷酸酶活性表达较对照组均减少(P<0.05)。提示葛根素对成骨细胞的影响存在剂量依赖性,并且具有双向性,即在低浓度(10-5～10-8mol/L)下刺激骨形成;在高浓度(10-3～10-4mol/L)下抑制骨形成。     

葛根素在体外对成骨细胞增殖和分化的影响

背景：成骨细胞是骨代谢平衡过程中的关键功能细胞,植物雌激素对成骨细胞的增殖和分化有熏要影响,葛根素作为植物雌激素的一种,在体外以较大范围浓度对成骨细胞功能的影响仍少见报道。目的：观察葛根素在体外对大鼠成骨细胞增殖和分化功能的影响。方法：取新生Wistar大鼠的颅盖骨,对成骨细胞进行分离、培养、纯化及鉴定。将培养的成骨细胞随机分为对照组、10^-3-10-10mol／L不同浓度葛根素组,观察不同浓度葛根素对体外培养的成骨细胞增殖和碱性磷酸酶活性表达的影响。结果与结论：细胞经葛根素处理后10～-10-9gmol／L组成骨细胞增殖活性较对照组明显增加（P〈0．05）,第3天增殖最快（P〈0．01）,第4天开始下降;诱导第4天,各组碱性磷酸酶活性与对照组相比,差异均有显著性意义（P〈0．01）,其中以10μmol／L组最显著（P〈0．01）。然而葛根素10μmol／L组成骨细胞增殖活性、碱性磷酸酶活性表达较对照组均减少（P〈0．05）。提示葛根素对成骨细胞的影响存在剂量依赖性,并且具有双向性,即在低浓度（105--10-8mol／L）下刺激骨形成：在高浓度（10^-3-10^-4mol／L）下抑制骨形成。     

右归饮对去卵巢血管钙化大鼠NMDAR1蛋白表达的影响

目的：观察右归饮对去卵巢血管钙化中谷氨酸受体变化的影响。方法：40只远交群大鼠（sprague Dawley,SD）雌性大鼠随机分为假手术组,模型组,低剂量组,高剂量组以及辛伐他汀组,采用华法令加维生素D3制备血管钙化模型,于造模后,低剂量组、高剂量组分别给予右归饮浓缩液5.35g·kg-1·d-1、16.05g·kg-1·d-1灌胃,辛伐他汀组予辛伐他汀混悬水溶液按照5.25mg·kg-1·d-1灌胃,假手术组和模型组给予等量生理盐水,共12W;于实验结束时采集血浆标本测定雌二醇以及血脂四项检测,苏木精—伊红染色法（HE染色）观察动脉钙化的情况以及应用免疫印迹试验检测N-甲基-D-天门冬氨酸受体（NMDAR,NR）1蛋白的表达。结果：模型组大鼠雌二醇、甘油三酯下降以及NR1蛋白表达降低（P﹤0.05）,低密度脂蛋白升高（P﹤0.05）;高剂量组以及低剂量组可提高雌二醇、甘油三酯含量并增加NR1蛋白表达（P﹤0.05）,高剂量组和低剂量组以及辛伐他汀组可降低低密度脂蛋白的含量（P﹤0.05）,辛伐他汀组对雌二醇无影响（P＞0.05）。结论：右归饮可抑制去卵巢血管钙化的形成,可能与提高雌激素水平以及提高NR1蛋白的表达有关。     

右归饮对去卵巢血管钙化大鼠NMDAR1蛋白表达的影响

目的:观察右归饮对去卵巢血管钙化中谷氨酸受体变化的影响。方法:将40只远交群雌性大鼠(sprague dawley,SD)随机分为假手术组、模型组、低剂量组、高剂量组和辛伐他汀组,采用皮下注射华法令加维生素D3制备血管钙化模型,造模后,低剂量组、高剂量组分别给予右归饮浓缩液5.35 g/(kg·d)和16.05 g/(kg·d)灌胃,辛伐他汀组给予辛伐他汀混悬水溶液5.25 mg/(kg·d)灌胃,假手术组和模型组给予等量生理盐水,共12周;实验结束时采集血浆标本测定雌二醇及血脂四项,采用苏木精-伊红染色法(HE染色)观察动脉钙化的情况,并采用免疫印迹试验检测N-甲基-D-天门冬氨酸受体(NMDAR,NR)1蛋白的表达。结果 :模型组大鼠雌二醇、甘油三酯含量和NR1蛋白表达降低,P<0.05,低密度脂蛋白升高,P<0.05;高剂量组和低剂量组雌二醇、甘油三酯含量升高,NR1蛋白表达增加,P<0.05;高剂量组、低剂量组和辛伐他汀组低密度脂蛋白的含量降低,P<0.05;辛伐他汀组雌二醇无变化,P>0.05。结论:右归饮可抑制大鼠去卵巢血管钙化的形成,可能与提高雌激素水平和NR1蛋白的表达有关。     

孕酮对体外培养人成骨细胞增殖和分化的促进作用

目的：探讨孕酮对正常成人成骨细胞的作用，验证孕激素治疗绝经后骨质疏松症的假设机制。方法：以正常成年女性松质骨分离培养的人成骨细胞为对象，用10^-10，10^-8，10^-6M孕酮干预。四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖情况；半定量反转录聚合酶链反应和免疫印记法测定孕激素受体mRNA和蛋白质表达；半定量RT-PCR测定c-fos，c-jun和骨钙紊基因表达。结果：与对照组相比较，10^-10，10^-8，10^-6M孕酮增加人成骨细胞增殖达9．8％，23．O％和32．8％。孕酮不影响孕激素受体mRNA和蛋白质表达，但可增加c-fos，c-jun mRNA表达，分别为5．4％，15．3％，35．5％和7．2％，20．1％，40．3％。孕酮增加骨钙紊mRNA表达为12．2％，23．7％和45．5％。结论：孕酮可促进人成骨细胞的增殖和分化，可用于治疗绝经后骨质疏松症。     

氯化钙对成骨细胞增殖和分化的影响

目的为了正确使用氯化钙于可注射组织工程骨之中,研究不同浓度氯化钙对骨髓基质成骨细胞增殖与分化的影响。方法从兔髂骨中获取骨髓基质成骨细胞,将骨髓基质成骨细胞置于含不同浓度氯化钙的细胞培养液中,培养24,72,120h后,通过检测骨髓基质成骨细胞的代谢活性和碱性磷酸酶活性。观察不同浓度氯化钙对成骨细胞增殖和分化的影响。结果骨髓基质成骨细胞在不同浓度(1～10mmol)的氯化钙培养液中培养24,48,72h后,除1mmol浓度氯化钙在细胞培养72h后对成骨细胞增殖稍有促进作用外,其余各组随着细胞培养液中氯化钙浓度的升高,骨髓基质成骨细胞的代谢活性逐渐降低。骨髓基质成骨细胞在不同浓度(1～10mmol)的氯化钙培养液中培养24,72,120h后,随着氯化钙浓度的增加,成骨细胞中碱性磷酸酶活性逐渐降低,各组与对照组间差异均有显著性意义(P<0.01)。结论氯化钙对骨髓基质成骨细胞增殖与分化有一定的抑制作用。     

糖皮质激素对骨髓基质细胞增殖及分化的影响(英文)

目的观察糖皮质激素对骨髓基质细胞增殖及分化的作用,探讨糖皮质激素导致继发性骨质疏松的病理学机制。方法骨髓基质细胞以随机数字表法随机分为对照组和实验组。以1×10-7mol/L地塞米松加入髓基质细胞培养物中,测定增殖的骨髓基质细胞数及培养液中骨钙素含量。通过苏丹III脂肪细胞染色计数观察地塞米松作用时间对脂肪细胞分化的影响。结果实验组及培养液中骨钙素含量(5.2±1.4)ng/mg蛋白质,明显低于对照组(12.5±1.5)ng/mg蛋白质(t=12.61,P<0.001);骨髓基质细胞数实验组(3.73±0.43)×105个细胞/孔,明显低于对照组(5.76±0.69)×105个细胞/孔(t=7.45,P<0.001);脂肪细胞的数量随地塞米松作用时间延长而增多。结论糖皮质激素抑制骨髓基质细胞增殖及向成骨细胞分化,促进其向脂肪细胞分化,这可能与糖皮质激素引起继发性骨质疏松时,骨量减少,髓内脂肪组织增多有关。     

纳米钛酸钙对鼠成骨细胞增殖与分化的影响

背景：以不同修饰剂制备的纳米钛酸钙具有良好的骨传导性、生物相容性及生物活性。目的：观察纳米钛酸钙材料对成骨细胞增殖、分化的影响。方法：分别以聚乙二醇、十六烷基三甲基溴化铵、柠檬酸钠为修饰剂制备纳米钛酸钙,同时制备无修饰剂的纳米钛酸钙。将制备的4组纳米钛酸钙分别配制为0.1,1.0,10 g/L的浸提液,MTT方法检测材料浸提液对乳鼠成骨细胞增殖及碱性磷酸酶活性的影响,以正常培养的细胞为对照。结果与结论：以聚乙二醇、十六烷基三甲基溴化铵、柠檬酸钠为修饰剂制备的纳米钛酸钙,无修饰剂的纳米钛酸钙在1.0,10 g/L质量浓度下可明显促进成骨细胞的增殖;上述4组纳米钛酸钙浸提液在1.0,10 g/L质量浓度下,培养3,6,9 d的细胞A值也高于对照组（P〈0.05,P〈0.01）,培养6,9 d的细胞碱性磷酸酶活性值均高于对照组（P〈0.05,P〈0.01）。表明以聚乙二醇、十六烷基三甲基溴化铵、柠檬酸钠、无修饰剂制备的钛酸钙对成骨细胞无毒性作用,可促进成骨细胞的增殖和分化。     

脉冲电磁场诱导人骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的研究

目的 观察脉冲电磁场(PEMFs)对人骨髓间充质干细胞(hMSCs)向成骨细胞分化的影响。方法 分离并培养hMSCs，取第3代细胞，分为对照组与处理组，处理组细胞接受频率12Hz、场强1．1mT的PEMFs刺激，每日8h；对照组细胞不接受PEMFs刺激。应用透射电镜观察2组细胞超微结构，采用碱性磷酸酶染色、骨钙素免疫组织化学染色、四环素荧光标记等方法进行观测。结果 细胞培养5～6d即可传代，经PEMFs连续刺激3d后，hMSCs细胞形态发生变化，3周后聚集成细胞钙化结节。透射电镜下观察显示：细胞比较成熟，内质网扩张，其碱性磷酸酶染色、骨钙素免疫组织化学染色和四环素荧光标记均为阳性。结论 hMSCs经特定频率和场强的PEMFs体外刺激后，可向成骨细胞分化，符合成骨细胞的形态学和生物学特性，为体外构建组织工程化骨提供自体种子细胞。     

大鼠骨髓基质干细胞的培养鉴定及向成骨细胞诱导分化的实验研究

目的研究体外培养大鼠骨髓基质于细胞的方法及其生长特点和成骨能力。方法通过贴壁培养法和密度梯度离心法分离成年大鼠骨髓基质干细胞，应用含维生素C、地塞米松、β-甘油磷酸钠的诱导分化培养液定向诱导传代细胞向成骨细胞分化，检测碱性磷酸酶活性和细胞矿化作用。结果原代培养基质干细胞首先形成细胞集落，14d时集落间接近融合；传代细胞体积变大，约5～7d传代一次。诱导条件下，细胞碱性磷酸酶活性明显增高，并出现了矿化结节。结论骨髓基质干细胞易于体外分离培养及扩增，成骨能力较强，可作为骨组织工程的种子细胞。     

缺氧对大鼠成骨细胞增殖、分化及矿化功能的影响

目的：探讨缺氧对体外培养成骨细胞的影响。方法：应用MTT法、对硝基苯磷酸盐法及茜素红染色方法观察缺氧对体外培养成骨细胞的增殖、碱性磷酸酶（ALP）表达及矿化结节形成的影响。结果：缺氧具有抑制成骨细胞增殖，降低ALP活性及矿化结节形成的数量的作用，并随缺氧时间的增加而更加明显。结论：缺氧具有抑制体外培养成骨细胞增殖、分化成熟及延缓矿化的作用。     

磁刺激对大鼠离体神经干细胞生长和分化的影响

目的 观察磁刺激对离体新生大鼠神经于细胞生长和分化的影响。方法 利用无血清培养技术，从新生大鼠脑室下区分离培养神经于细胞。将神经于细胞置于0．5Hz，刺激强度分别为0．48T(25％最大输出，B组)、0．95T(50％最大输出，c组)和1．44T(75％最大输出，D组)的条件下进行磁刺激干预，每天1次，每次30个脉冲，作用3d，同时设立对照组(A组)，用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活性(0D值)，并用流式细胞技术检测神经于细胞分化情况。结果磁刺激各组神经于细胞在于预后24～48h0D值较A组稍低(P＜0．05)，至72h后可恢复至A组水平；流式结果显示磁刺激各组神经丝蛋白(NF)阳性细胞比例均高于A组，其中D组NF阳性神经元的比例最高(P＜0．05)。结论0．5Hz磁刺激对神经于细胞增殖有一过性的轻度抑制作用，有利于神经于细胞向神经元方向的分化。     

金属钴、铬离子对成骨细胞增殖及I型胶原蛋白表达功能的影响

目的：观察钴、铬离子对小鼠成骨细胞(MC3T3-E1)的细胞毒性及I型胶原蛋白合成的影响,探讨钴、铬离子对骨代谢功能的影响机制。方法钴、铬离子分别与小鼠成骨样MC3T3-E1细胞体外培养,噻唑蓝(MTT)法测定细胞活力。 ELISA法检测培养上清液中I型胶原蛋白含量、RT-PCR检测成骨细胞I型胶原蛋白mRNA的表达。结果 MTT结果显示,与对照组相比,钴、铬离子能明显抑制成骨细胞的细胞活力;成骨细胞暴露在钴铬离子下,与对照组相比,24h、48h后：I型胶原蛋白的分泌分别下降45.3%、49.2%（P<0.05）;I型胶原蛋白mRNA表达分别下降26.8%、32.6%（P<0.05）。结论钴、铬离子可抑制成骨细胞I型胶原蛋白的分泌及其mRNA的表达,提示其对MC3T3-El细胞可能存在细胞毒性。     

BMP-2和地塞米松对成人成骨细胞增殖和分化的影响

目的 观察不同浓度骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)和地塞米松(dexamathasone,DEX)对体外培养的人成骨细胞增殖、分化的影响。方法成人髂骨松质骨胰蛋白酶消化后获得成骨细胞进行培养,用倒置显微镜进行活体观察并做碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)、Ⅰ型及Ⅲ型胶原染色观察成骨细胞生物学特征。培养的细胞加入不同浓度BMP-2(1、10、100、1000ng／m1)和DEX(10^-8、10^-7、10^-6mol／L)作用48h后,用MTT法检测细胞增殖,同时测定细胞裂解液中ALP活性和OCN含量。结果 体外培养的成人成骨细胞可合成碱性磷酸酶、骨钙素、Ⅰ型胶原,并形成钙化结节、3个浓度的DEX在48h后均能刺激成骨细胞的增殖,增加成骨细胞ALP活性和OCN含量,4个浓度BMP-2在48h后对成骨细胞无增殖作用,但都能增加ALP活性和OCN含量。结论 地塞米松促进体外培养的成人成骨细胞增殖和分化;短期作用下,BMP-2对成骨细胞的增殖无明显作用,但可促进成骨细胞的分化。     

中药促成骨细胞增殖和分化的机制与作用

背景：中药促进成骨细胞增殖和分化的效果已经得到肯定,其在细胞分子水平的药理机制研究取得了很大进展。目的：对国内外应用中药诱导成骨细胞增殖和分化的药理机制研究进展作一综述。方法：应用计算机检索CNKI,Pubmed和sciencedirect数据库中2001-01/2010-12关于中药促进成骨细胞增殖和分化机制研究的文章,在标题和摘要中以＂中药,成骨细胞,增殖,分化,机制＂或＂Chinese herbs,osteoblast,proliferation,differentiation,mechanism＂为检索词进行检索。初检得到176篇文献,最终选择30篇文献进行综述。结果与结论：中药通过对成骨细胞基因、信号通路、细胞因子和OPG/RANK/RANKL系统的调控,以及类雌激素样作用促进成骨细胞增殖和分化,其作用机制明确,将中药引入骨组织工程领域具有良好的发展前景。     

血清对U937细胞分化成熟及细胞周期的影响

目的探讨血清对U937细胞分化成熟及细胞周期的影响。方法应用乙酸肉豆蔻佛波醇（PMA）诱导U937细胞分化,血清作为调节因素,通过倒置显微镜观察细胞的形态与贴壁情况并计算细胞贴壁率并依此作为细胞分化成熟的标志,采用流式细胞仪测定细胞周期的变化。结果 FCS＋PMA组细胞贴壁生长;其他3组细胞悬浮生长;细胞周期测定结果显示,与FCS组相比,NOFCS、NOFCS＋PMA和FCS＋PMA组的G1期细胞明显增多,S期细胞明显减少（P〈0.05）。NOFCS＋PMA组经血清恢复后细胞贴壁率明显升高,与FCS＋PMA组相比有显著性差异（P〈0.05）,与NOFCS＋PMA组相比细胞周期无明显差异。NOFCS组经血清恢复后,细胞悬浮生长,细胞周期与NOFCS组相比G1期细胞下降,S期细胞明显增多（P〈0.05）;血清加PMA组在无血清培养与血清培养条件下,细胞都贴壁生长,二者贴壁率没有改变,细胞周期无显著差异。结论血清促进PMA诱导的U937细胞分化成熟并调节细胞周期的变化。