人乳腺癌细胞株透明质酸酶的表达及其意义

目的：通过检测人乳腺癌细胞株透明质酸酶（Hyse）水平的表达，并与雌激素受体（ER）、以及血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶－9（MMP－9）和组织蛋白酶－D（Cath-D）比较，探讨Hyse在乳腺癌侵袭、转移及预后评价中的作用。方法：应用细胞培养技术、酶联免疫吸附测定和免疫组织化学等方法分别测定10株人乳腺癌细胞的Hyse,以及VEGF、MMP－9、和Cath-D的表达。结果：10株人乳腺癌细胞Hyse的表达存在明显差异。ER（＋）细胞株Hyse表达低水平，EP（－）细胞株Hyse表达高水平（P＜0．01）。Hyse高表达细胞株中VEGF、MMP－9和Cath-D的表达明显高于Hyse低表达细胞株（P＜0．05）。结论：Hyse与乳腺癌的侵袭、转移潜能及预后有一定的相关性。     

外源性透明质酸对创面愈合组织的影响

目的：研究外源性透明质酸对创面愈合组织中生化组分的影响，以期探索外源性HA在创伤愈合中的作用及其机制。方法：在小型猪背部的去中厚皮创面上应用不同浓度和剂型的外源性HA，并于术后第3、7、14、21、28天切取创面组织及正常皮肤，测定其糖胺多糖、HA及Ⅲ型胶原的含量变化。结果：愈合过程中，实验组创面愈合组织中的GAG、HA含量逐渐升高，1周时达峰值并能维持3周；创面对照组术后3天也见增高，但随后即迅速下降。实验组的Ⅲ型胶原含量也始终明显高于对照组，其中又以1．0％、2．0％HA组最高。结论：外源性HA能显著增高愈合组织中HA、Ⅲ型胶原含量并能维持较长时间，从而有利于创伤愈合及减轻瘢痕形成。     

透明质酸及透明质酸酶对兔耳创面增生性瘢痕形成影响的对比研究

目的观察皮肤创伤愈合过程中外源性透明质酸(HA)及透明质酸酶(HAse)对愈合后瘢痕增生的影响.方法成年日本大耳白兔18只,建立兔耳皮肤创伤愈合模型,随机分成HA治疗组(a组),HAse治疗组(b组),磷酸盐缓冲液(PBS)对照组(c组),观察形态学及组织学变化,创面愈合速度,羟脯氨酸(HPr)含量测定及瘢痕测量.结果①3组平均愈合时间为(11.7±0.6)d、(9.8±0.9)d、(10.8±1.0)d,差异显著(P＜0.01).②在创伤愈合期a组胶原纤维较细,排列较整齐,b、c两组胶原纤维较粗大,排列紊乱;在瘢痕增生期3组胶原形态基本相似.③在创伤愈合初期,a组伤口内HPr含量明显低于b、c两组(P＜0.01),在愈合晚期和瘢痕增生期差异逐渐减小b组HPr含量始终高于a、c两组(P＜0.01).④a、b、c三组相对瘢痕厚度分别为(1.55±0.35)mm、(1.89±0.39)mm、(1.59±0.29)mm,b组瘢痕大于a、c两组(P＜0.05);a组与c组间无显著差异.结论①创面外用HA不能减轻愈合后瘢痕增生.②创面外用HAse能促进愈合后瘢痕增生.     

乙酰肝素酶反义寡核苷酸对人乳腺癌细胞株侵袭力的抑制作用

目的　探讨乙酰肝素酶 (HPSE)反义寡脱氧核苷酸 (AS ODN )对人乳腺癌细胞株侵袭力的抑制活性。方法　设计合成分别互补于HPSEmRNA 5 '未翻译区和起始密码区的AS ODN1、AS ODN2及相应对照NS ODN1、NS ODN 2 ,在脂质体介导下以 2 5 0nmol/L终浓度转染人乳腺癌MDA43 5细胞 ,以RT PCR和Westernblot分别检测HPSEmRNA和蛋白表达 ,以基质凝胶侵袭实验检测细胞侵袭力。结果　AS ODN 2组的HPSEmRNA相对表达量、蛋白表达量和侵袭细胞数(0 .62± 0 .0 4、12 .70± 1.70、61.0 0± 9.0 0 )与脂质体对照组 (1.60± 0 .0 4、3 6.2 0± 2 .10、178.0 0±17.0 0 )和NS ODN2组 (1.48± 0 .0 3、3 5 .5 0± 2 .3 0、174.0 0± 2 0 .0 0 )相比较均显著降低 (P <0 .0 1) ;而AS ODN 1组与脂质体对照组和NS ODN1组相比较差异均无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　互补于起始密码区的HPSEAS ODN可通过下调HPSE表达显著抑制人乳腺癌细胞株MDA43 5的侵袭力。     

siRNA沉默HYAL1基因表达对人乳腺癌细胞侵袭力的影响

目的研究RNA干扰对透明质酸酶基因HYAL1的表达以及对人乳腺癌细胞侵袭力的影响。方法体外化学合成HYAL1序列特异性双链RNA（dsRNA）,在脂质体（SiPORT Lipid）的介导下转染人人乳腺癌细胞株MDA-MB-231、MDA—MB-453S、ZR-75和ZR-75-30。荧光共聚焦显微镜下观察转染效率,RT—PCR分析HYAL1 mRNA的表达,体外实验测定肿瘤细胞穿透matrigel的能力。结果4种乳腺癌细胞株的HYAL1基因的表达均被HYAL1-siRNA有效封闭,HYAL1 mRNA相对水平明显降低（P〈0．05）。转染48h后4种人乳腺癌细胞的侵袭力均明显降低（P〈0．01）。结论HYAL1-siRNA能有效抑制人乳腺癌细胞株HYAL1基因的表达,降低人乳腺癌细胞的侵袭力。     

透明质酸酶及基质金属蛋白酶-9在人乳腺癌侵袭与转移中的意义

目的研究透明质酸酶(HAase)与基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在人乳腺癌侵袭与转移中的意义。方法应用组织匀浆、酶连吸附测定法及免疫组化等方法测定HAase和MMP-9在人乳腺癌中的表达和其病理特征比较。结果①乳腺癌组织学分级Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级组HAase的分别为4.89±2.55、8.03±2.66、12.00±3.96 mU/g(n=10,20,3),Ⅲ级组>Ⅱ级组>Ⅰ级组(P<0.05)。乳腺癌有腋淋巴结转移组HAase表达(8.27±3.26 mU/g,n=23)明显高于无腋淋巴结转移组(5.53±2.82 mU/g,n=10)(t=-2.305,P=0.028)。②MMP-9阳性率在淋巴结转移组为(78.3%,18/23),明显高于无淋巴结转移组(30.0%,3/10)(P=0.016)。③MMP-9阳性组(n=21)HAase(8.57±3.12)mU/g明显高于阴性组(n=12)(5.47±2.85)mU/g(t=2.830,P=0.008)。结论HAase和MMP-9一样,与人乳腺癌侵袭与转移有关。     

4′,5,7-三羟基黄酮,芹菜配基对人乳腺癌细胞生长和侵袭潜力的影响

目的探讨透明质酸酶（Hyaluronidase，Hyase）抑制剂4′，5，7-三羟基黄酮，芹菜配基（Apigenin）对人乳腺癌细胞生长、增殖及侵袭潜力的影响。方法通过体外侵袭模型观察Apigenin对人乳腺癌细胞穿透Matrigel（人工基底膜）能力的影响；MTT法和流式细胞仪检测Apigenin对人乳腺癌细胞株生长和增殖的影响。结果8株人乳腺癌细胞的侵袭潜力存在明显差异。加用Apigenin后其侵袭潜力均明显降低（P〈0．05），并与Apigenin存在量效关系；Apigenin对MDA-MB-435S和T47D细胞株的生长抑制作用均呈浓度依赖性；流式细胞仪显示Apigenin阻滞人乳腺癌细胞株MDA-MB-231和ZR-75-30生长于G2／M期（P〈0．05）。结论Apigenin可抑制人乳腺癌细胞的增殖和Hyase的表达，并可降低人乳腺癌细胞株的侵袭潜能。     

外源性胰岛素对豚鼠胆结石形成机理的研究

本实验通过给豚鼠皮下注射胰岛素，观察了外源性胰岛素对其胆汁酸代谢与肝脏形态学的影响，及其在胆石形成中的作用。     

环氧化酶-2在人乳腺癌中的表达及对肿瘤血管形成的影响

动物和体外实验研究表明环氧化酶-2(COX-2)有助于肿瘤的新生血管形成，可支持血管依赖性的实体肿瘤的生长及转移。我们旨在探讨COX-2的过度表达是否与乳腺肿瘤的新生血管形成有关。     

透明质酸合成酶-2在人腹膜间皮细胞透明质酸合成及胞外基质形成中的作用

目的 明确哪一种透明质酸合成酶是人腹膜间皮细胞合成透明质酸及形成细胞外基质/胞衣样结构的主要酶。方法 分离培养人腹膜间皮细胞,以半定量RT-PCR法检测其3种透明质酸合成酶HAS-1、HAS-2、HAS-3 mRNA水平表达情况。明确正常培养人腹膜间皮细胞主要表达HAS-2mRNA和微量HAS-3 mRNA后,设计HAS-2的反义寡核苷酸序列,以脂质体介导法将其转入正常培养的人腹膜间皮细胞。转染前(0 h)、转染后8、24、48 h以RT-PCR法观察HAS-2 mRNA表达情况,并以微粒排除法观察细胞衣样结构面积变化。结果 转染后8和24 h,HAS-2 mRNA表达分别下降58％和89％(P均<0.05);转染后48 h HAS-2 mRNA表达已部分恢复至正常表达的25％水平(P<0.05)。相应地,转染后24 h以微粒排除法观察人腹膜间皮细胞细胞外基质/胞衣样结构面积与细胞体面积比值,亦明显减少至几乎完全消失。作为对照的正义序列和逆转序列则无该作用。结论 HAS-2是正常培养人腹膜间皮细胞合成透明质酸以及细胞外基质/胞衣样结构形成的关键酶。     

microRNA与乳腺癌浸润转移关系的研究进展

目的总结microRNA（miRNA）与乳腺癌浸润、转移关系的研究进展。方法检索并筛选近年来国内外发表的有关miRNA与乳腺癌浸润、转移关系的文献并对其进行综述。结果许多miRNA在乳腺癌发生、发展与浸润、转移过程中都起着关键作用,按其作用可分为促癌miRNA（miR-21、miR-10b等）和抑癌miRNA（miR-31、let-7等）两类。结论miRNA调控乳腺癌浸润及转移的具体过程还需要更多、更详细的实验研究。     

Multifaceted Roles of Integrins in Breast Cancer Metastasis

Malignant breast cancer can be a debilitating disease due to metastasis to tissues such as brain or bone. The metastatic process involves the invasion of tumor cells into the adjacent tissue, followed by systemic dissemination and colonization of secondary organs. These processes require interactions between tumor cells and a changing microenvironment, which drive cell proliferation, migration, invasion and colonization, as well as promoting cell survival. The integrin family of cell adhesion receptors has been shown to play a critical role in all of these processes, consistent with their extracellular matrix binding properties. Experiments in cultured epithelial cells and in vivo models have demonstrated that integrins can promote various stages of metastasis by modulating the effects of growth factor receptors, extracellular proteases and chemotactic molecules. Integrins may therefore play a pivotal role in multiple mechanisms of metastasis. As a result, they represent promising targets for effective treatment of metastatic breast cancer.     

乳腺癌干细胞与基因分型

目的 总结乳腺癌干细胞与基因分型的研究进展,并分析二者之间的相关性.方法 分析近年来有关乳腺癌干细胞与基因分型研究的文献报道.结果 乳腺癌干细胞与基因分型的相关性研究支持了乳腺癌的肿瘤干细胞起源学说,解释了乳腺癌基因分型的复杂性及其异质性.结论 乳腺癌干细胞和基因分型的相关性研究能为从细胞分子水平研究乳腺癌的形成机理和生物学特性找到新的途径,有望为乳腺癌的诊断和治疗提供新的策略与手段.     

Type and Duration of Exogenous Hormone Use Affects Breast Cancer Histology

Background It is unclear whether hormone replacement therapy (HRT), in addition to increasing risk for breast cancer, affects the type of breast cancer diagnosed. We conducted this investigation to assess whether the type of hormone used (none, estrogen, progesterone, or combined) and duration of use influences subsequent breast cancer histology. Methods We performed a retrospective cohort analysis among women listed as incident cases of breast malignancy in the Kaiser Permanente Northern California Cancer Registry during 2003 (n = 2830). Type and duration of hormone used (none, estrogen, progesterone, or combined) before breast cancer diagnosis was obtained from electronic pharmacy records. The association between type and duration of hormone use with characteristics of subsequent breast cancers was examined. Results Among women aged >50 years (n = 1701), any use of estrogen, progesterone, or combination therapy was not associated with an increased risk of estrogen receptor (ER)-positive disease. However, >6 months’ use of combined HRT increased the odds of ER-positive tumors (odds ratio, 1.65; 95% confidence interval, 1.07–2.5; P = .02). Estrogen HRT patients were more likely than nonusers to present with low-grade (P = .05), and early-stage tumors (P = .03). This trend was not seen in combined HRT users. Conclusions Short-duration HRT did not increase the likelihood of ER-positive breast cancer. However, prolonged duration of combined HRT, but not estrogen or progesterone alone, resulted in a marked increase in ER-positive disease. Our findings suggest that the effect of combined HRT on breast cancer incidence or progression is not immediate and that long-term use is more likely to affect breast cancer histology.     

人平衡型核苷载体在乳腺癌细胞中的表达情况及其对5-FU药效的影响

目的研究乳腺癌细胞株MDA-MB-231、MDA-MB-468、SK-BR-3、MCF-7中人平衡型核苷载体（hENTS）的表达及其对5氟尿嘧啶（5-Fu）细胞毒性的影响。方法MDA-MB-231、MDA—MB-468、SK-BR-3、MCF-7细胞常规培养于含10％小牛血清的高糖DMEM培养液中。逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）检测4种细胞株中hENTlmRNA及hENT2mRNA的表达。每种细胞分别在含有一定浓度序列（1．28×10^4ng／L～2．00×10^8ng／L）5-FU的培养液中培养48h。MTT法检测4种细胞株增殖,并计算其5-FU的半数抑制浓度（IC50）。结果①bENT1及hENT2mRNA在MDA-MB-231、MDA-MB-468、SK-BR-3细胞中的表达均较其在MCF-7细胞中（P伊〈0．05）,但其表达在MDA-MB-231、MDA-MB-468、SK-BR-3细胞中差异无统计学意义（P〉0．05）。hENT2mRNA表达在4种细胞中均较hENT1 mRNA表达低,差异有统计学意义（P〈0．05）。②MTT结果显示,5-FU的IC50在MDA-MB-231、MDA-MB-468、SK-BR-3细胞株中均较在MCF-7细胞株中低（P〈0．05）,在MDA-MB-231、MDA-MB-468、SK-BR-3细胞株之间差异无统计学意义（P〉0．05）。③在5-FU的IC50 较低的乳腺癌细胞株（MDA-MB-231、MDA—MB-468、SK-BR-3）中高表达hENTs,而在5-Fu的Ic50较高的乳腺癌细胞株（MCF-7）中,低表达hENTs或无表达。结论在乳腺癌细胞株中,细胞膜上hENTs的表达情况能显著影响5-FU的作用效果,其结果提示,在临床上可能需要依据hENTs的表达情况来选择核苷类抗癌药物。     

抗肿瘤相关糖蛋白-72单抗在人乳腺癌中的表达

目的 检测肿瘤相关糖蛋白-72（TAG-72）在人乳腺癌细胞系的表达，为利用抗TAG-72单链抗体（single chain variable fragment，scFv）诊治乳腺癌提供实验依据。方法 将人乳腺癌细胞系MCF-7和Bcap-37通过细胞培养至对数生长期，并固定于载玻片上。用原核表达的抗TAG-72scFv经免疫细胞化学方法检测TAG-72在乳腺癌细胞中的表达。结果 TAG-72在乳腺癌细胞系MCF-7中表达为阳性，在Bcap-37中表达为阴性，表明TAG-72在部分人乳腺癌细胞中得以表达。结论 TAG-72在人部分乳腺癌中阳性表达，表明TAG-72抗原可作为一个肿瘤标志物在临床中应用，也为抗TAG-72scFv在乳腺癌诊治中应用奠定了实验基础。     

Avoidance of Adjuvant Radiotherapy in Selected Patients With Invasive Breast Cancer

Background: Current standard therapy for invasive breast carcinoma is mastectomy or breast conservation with adjuvant radiation. Data from randomized trials suggest no advantage for radiotherapy after lumpectomy in highly selected patients. Selective radiotherapy would make contemporary breast cancer therapy more rational with decreased morbidity and expense.Methods: A total of 163 patients were treated by breast conservation without adjuvant radiation between 1978 and June 2003. They declined radiation after discussion or had medical contraindications. The great majority were postmenopausal and had lower-grade T1 tumors with resection margins 1 cm and no nodal metastases. The goal was to identify patients with favorable prognostic features for omission of postsurgical irradiation without impaired local recurrence or survival.Results: Twenty patients (12%) had local recurrences; 17 (10%) were invasive, and 3 (2%) were ductal carcinoma-in-situ. An ideal patient subgroup >50 years of age with grade 1 or 2 cancers 1.5 cm in diameter and with surgical margins 1 cm was empirically defined. Of 80 such patients, 5 (6%) had local recurrence; 3 (3.5%) were invasive, and 2 (2.5%) were ductal carcinoma-in-situ.Conclusions: A defined ideal subset of older breast cancer patients with smaller, lower-grade cancers and adequate excision margins can be treated with lumpectomy without irradiation and with minimal local recurrence.     

尿多酸肽对乳腺癌细胞周期的影响

目的研究肿瘤细胞分化诱导剂尿多酸肽（CDA-Ⅱ）对乳腺癌细胞周期的影响。方法将CDA-Ⅱ与乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-231进行体外培养，同时以维甲酸为阳性对照，观察其对乳腺癌细胞生长曲线、细胞周期、形态学等方面的影响。结果CDA-Ⅱ可减缓两株乳腺癌细胞的生长和增殖能力，使乳腺癌细胞的细胞周期的分布出现S期比例减少，G0／G1期增加。结论CDA-11可抑制不同生物学特性的两株乳腺癌细胞的生长和增殖能力，细胞周期出现G0／G1期阻滞，为CDA-Ⅱ治疗乳腺癌提供了实验依据。     

乳腺癌转移抑制基因1抑制乳腺癌转移的作用机理研究进展

目的综述乳腺癌转移抑制基因1（BRMS1）在抑制乳腺癌转移中的作用机理研究进展。方法采用文献回顾的方法，对目前国内、外有关BRMS1在乳腺癌中的研究状况加以分析与综述。结果BRMS1与其他肿瘤转移抑制基因一样，主要抑制肿瘤的转移，并不影响肿瘤的生长，在乳腺癌中主要通过调节细胞间的信号转导及其他转移抑制基因的表达而抑制乳腺癌的转移。结论对BRMS1基因的深入研究有助于进一步深化对乳腺癌转移的认识，为肿瘤转移的分子诊断和基因治疗提供新的思路。     

人精子透明质酸酶活性测定的临床意义

目的 :测定人精子透明质酸酶 (HYD)活性并分析其与精液常规参数之间的相关性。　方法 :用改良Singer法测定 14 6例男性精子HYD活性 ,常规检测精子密度、活动率和正常形态百分率。　结果 :精子HYD活性与密度、活动率及与正常形态百分率存在显著相关性 (r值分别为 0 .65、0 .63和 0 .72 ,P均 <0 .0 1)。不育男性精子密度在 4 0× 10 6 /ml以上组的HYD活性明显高于精子密度少于 2 0× 10 6 /ml以下组 (P <0 .0 1)。不育男性精子活动率 >60 %组的HYD活性明显高于 <3 0 %组 (P <0 .0 1)。　结论 :精子HYD活性测定是评价精子功能的有效指标之一