耐长春新碱人舌鳞癌细胞系Tca8113/V100的研究

目的建立耐长春新碱（Ｖｉｎｃｒｉｓｔｉｎｅ，ＶＣＲ）人舌鳞癌细胞系。方法采用间歇性加药，逐步提高培养基中ＶＣＲ的浓度，连续体外诱导，培养，建立了一株耐ＶＣＲ人舌鳞癌细胞系Ｔｃａ８１１３／Ｖ１００。对其药物敏感性、倍增时间、裸鼠成瘤性、超微结构及耐多药基因等生物学特性进行了研究。结果Ｔｃａ８１１３／Ｖ１００在含ＶＣＲ１００μｍｏｌ／Ｌ的培养基中稳定生长，其对ＶＣＲ的耐药性为Ｔｃａ８１１３细胞系的１９２倍，对其他几种抗癌药物也有程度不同的耐药性。Ｔｃａ８１１３／Ｖ１００倍增时间３７２小时，具有裸鼠成瘤性，病理诊断为鳞状细胞癌，超微结构观察其微绒毛短粗，ｍｄｒ１ｍＲＮＡ表达水平明显增高。结论Ｔｃａ８１１３／Ｖ１００细胞系已具备多药耐药性的特点，为口腔癌多药耐药性研究提供了细胞模型。     

顺铂诱导Tca8113细胞凋亡及周期特异性

目的探化疗药物顺铂（ＣＤＤＰ）对口腔鳞癌细胞凋亡及细胞周期特异性的诱导作用。方法选用人舌鳞状细胞癌细胞系Ｔｃａ８１１３为研究对象,应用倒置显微镜、荧光显微镜、透射电镜、流式细胞仪等方法进行观察。结果ＣＤＤＰ作用Ｔｃａ８１１３细胞后,细胞增殖变慢,增殖指数下降,细胞变小,变圆,失去贴壁性,从附着处脱落。ＤＮＡ染色后荧光显微镜下观察,细胞核呈现橙红色,半月形,不规则块状等凋亡形态变化。透射电镜观察,细     

舌癌及舌癌脑转移细胞的凝集素受体和癌相关基因蛋白表达

目的：研究舌癌细胞系Ｔｃａ８１１３以及该细胞系在裸鼠体内脑转移细胞亚系（Ｔｂ）的凝集素受体和一些癌基因及抑癌基因蛋白的表达特点，探讨可能与Ｔｂ细胞转移有关的机理。方法：对Ｔｃａ８１１３细胞及Ｔｂ细胞亚系的细胞涂片进行常规ＡＢＣ法染色。结果：Ｐ５３、Ｐ１６和ＣＤＫ４蛋白在两种细胞中的表达情况不同，而Ｎｍ２３、Ｈ－ｒａｓ蛋白和各种凝集素在两种细胞中的表达情况无明显差别。结论：Ｐ５３和Ｐ１６蛋白可能与Ｔｂ细胞的转移能力有关     

TGF—β对颌面部癌瘤细胞系Tca8113,Acc83,Ca9—22的抑制作用

用ＭＴＴ法对ＴＧＦ－β对体外培养的口腔颌面部癌瘤细胞的生物学效应进行测定，结果表明ＴＧＦ－β对Ｔｃａ８１１３，Ａｃｃ８３，Ｃａ９－２２细胞的生长有明显抑制作用，这种抑制作用随ＴＧＦ－β浓度的增加而增强．从倒置显微镜下观察活细胞，经ＴＧＦ－β作用后，对细胞没有明显的细胞毒作用。细胞形态和贴壁情况未见明显改变，因而作者认为ＴＧＦ－β对癌细胞有一定的分化诱导作用，促进细胞的分化和成熟而抑制细胞的增殖。     

舌癌及舌癌脑转移细胞的药物敏感性

为研究舌癌细胞系Ｔｃａ８１１３以及该细胞系在裸鼠体内脑转移细胞亚系（Ｔｂ）药物敏感性，采用四唑盐比色法（ＭＴＴ法）检测了１５种药物对Ｔｃａ８１１３和Ｔｂ的抑制作用。结果表明Ｔｂ对其中的１０种药物敏感性低于Ｔｃａ８１１３，提示：舌癌转移细胞可能有一定程度的耐药性。     

耐长春新碱人舌癌细胞系Tca8113／V100的研究

目的 建立耐长春新碱人舌鳞癌细胞系。方法 采用间歇性加药,逐步提高培养基中ＶＣＲ的浓度,连续体外诱导,培养,建立了一株耐ＶＣＲ人舌鳞癌细胞系Ｔｃａ８１１３／Ｖ１００。对其药物敏感性、倍增时间、裸鼠成瘤性、超微结构及耐多药基因等生物学特性进行了研究。结果 Ｔｃａ８１１３／Ｖ１００在含ＶＣＲ１００μｍｏｌ／Ｌ的２基中稳定生长,其对ＶＣＲ的耐药性为Ｔｃａ８１１３细胞系的１９．２倍,对其他几各抗癌药物也有     

LAK细胞联合平阳霉素对人舌鳞癌细胞Tca8113的体内...

作者采用白细胞介素－２体外激活的ＬＡＫ细胞联合平阳霉素对人舌鳞癌细胞Ｔｃａ８１１３进行了杀伤活性测定以及对裸鼠Ｔｃａ８１１３移植瘤作用研究。结果显示，ＬＡＫ细胞对Ｔｃａ８１１３靶细胞具有明显杀伤作用，平阳霉素作用靶细胞后，可显著提高ＬＡＫ细胞对靶细胞的杀伤活性。ＬＡＫ细胞／ＩＬ－２局部应用，并联合平阳霉素能够有效地抑制裸鼠Ｔｃａ８１１３移植瘤的生长，延长其存活期。     

CD/5-FC系统治疗口腔鳞癌移植瘤的研究

胞嘧啶脱氨酶基因 (ＣＤ) / 5 氟胞嘧啶 (5 ＦＣ)自杀基因系统在多种恶性肿瘤治疗中具有强的杀伤作用 ,但在口腔鳞癌方面的研究仍较少 ,我们将ＣＤ/ 5 ＦＣ系统用于治疗口腔鳞癌移植瘤。1 .材料和方法 :于ＢＡＬＢ/ｃ裸小鼠右侧腋下接种Ｔｃａ81 1 3细胞 (何荣根教授惠赠 ) ,肿瘤形成直径约 5ｍｍ时开始治疗 (第 8天 ) ,随机分组如下 :空白对照组 8只 ,5 ＦＣ对照组 7只 ,ＡｄＣＭＶＣＤ对照组 7只 ,ＡｄＣＭＶＣＤ/ 5 ＦＣ组 8只。瘤内注射ＡｄＣＭＶＣＤ(许德华教授提供 ) :1× 1 0 9ＰＦＵ/次 (第 8、1 1天接种 ) ;腹腔注射 5 ＦＣ(Ｓｉ…     

肿瘤坏死因子—α基因修饰口腔鳞癌DNL体外抗肿瘤的实验研究

实验目的是观察肿瘤坏死因子－α在体外抗肿瘤的活性，探讨其治疗口腔癌的可行性。通过缺陷型逆转录病毒介导，将肿瘤坏死因子－α基因导入体外培养的人口腔鳞癌引流区淋巴结淋巴细胞（ＤＮＬ），经ＰＣＲ技术、ＴＮＦ－α活性检测技术及Ｇ４１８培养基筛选试验证实外源基因确已导入ＤＮＬ中，并能够表达。应用ＭＴＴ比色法比较转导及未转导基因的ＤＮＬ抗人舌鳞癌Ｔｃａ８１１３细胞的活性。结果显示，转导ＴＮＦ－α基因ＤＮＬ的细胞毒活性明显强于未转导基因ＤＮＬ。     

恒磁场诱导联合平阳霉素对舌癌化疗的实验研究

目的：观察平阳霉素对恒磁场诱导作用下的人舌癌细胞裸鼠种植瘤的化疗效果。方法：用体外培养的人舌癌Ｔｃａ８１１３系细胞，种植裸鼠成瘤后，随机分为空白对照（Ａ）组，恒磁场诱导化疗（Ｂ）组，化疗组（Ｃ）组，化疗药物均为平阳霉素，治疗１０天，从肿瘤体积大小，裸鼠体重变化，肿瘤组织病理学和术后复发方面评价化疗效果。     

Cox-2在舌鳞癌细胞Tca8113增殖机制中的作用

目的:观察并探讨Cox-2在舌鳞癌细胞(Tca8113)增殖机制中的作用。方法:通过免疫细胞化学检测Cox-2在Tca8113细胞中的表达;再通过建立裸鼠荷瘤模型及应用Cox-2特异性抑制剂(SC236)进行干预的方法,观察SC236对Tca8113细胞的增殖活性、致瘤性和成瘤速度的影响。结果:在Tca8113细胞中存在Cox-2的表达;将Tca8113细胞接种于裸鼠颈部皮下可成功诱导出组织学形态与人舌鳞癌基本一致、且表达Cox-2的移植瘤。SC236能够显著抑制Tca8113细胞及其诱导的移植瘤的生长(P<0.01),并明显延缓Tca8113细胞的成瘤速度(P<0.05)。结论:Cox-2在Tca8113细胞的增殖过程中可能发挥重要作用;Cox-2特异性抑制剂可显著抑制Tca8113细胞及其诱导的移植瘤的增殖和生长。     

乳铁蛋白抑制舌癌细胞血管内皮生长因子表达的研究

目的探讨乳铁蛋白(lactoferrin)对舌癌细胞株Tca8113细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达调控的情况。方法采用四甲基氮唑蓝实验(MTT)、RT-PCR法检测乳铁蛋白对Tca8113细胞的增殖作用及VEGFmRNA表达改变的情况。结果乳铁蛋白显著抑制Tca8113细胞的增殖,呈剂量依赖性,乳铁蛋白对Tca8113细胞VEGF的RT-PCR产物试验组(2和3)与对照组之间比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论乳铁蛋白对Tca8113细胞的增殖有抑制作用,可以降低细胞中VEGFmRNA的表达水平,为乳铁蛋白用于肿瘤的预防及治疗提供实验基础。     

NS-398对Tca8113细胞体外增殖的抑制作用

目的:探讨环氧合酶-2抑制剂NS-398对Tca8113细胞的生长抑制作用。方法:应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)快速比色法,观察NS-398对Tca8113细胞生长的抑制作用,检测NS-398与Tca8113细胞间的时-效关系和量-效关系;通过流式细胞仪(FCM)研究NS-398对Tca8113细胞周期的影响和作用,采用SAS8.1统计软件包进行数据处理,均数比较采用t检验和重复测量方差分析。结果:含0、25、50、75、100、125、150、200μmol/LNS-398的Tca8113细胞培养液,在分别培养48、72、96、120h后,随着作用时间的延长和药物浓度的增加,抑制作用也增强。NS-398在浓度150μmol/L作用96h后,抑制作用明显(药物浓度:P<0.05;时间:P<0.001),NS-398可引起Tca8113细胞G0/G1期细胞的大量增加,S期和G2/M期细胞比例数减少,阻滞细胞生长于G0/G1期(P<0.001)。结论:NS-398可抑制Tca8113细胞的增殖,并具有时间和浓度依赖性;这种作用可能与阻止细胞周期进展有关,NS-398可能在口腔鳞癌治疗中发挥重要作用。     

平阳霉素抑制舌鳞癌细胞系的量效和时效关系及可能的抗癌机制

目的:探讨平阳霉素体外抑制口腔鳞癌细胞系的量效和时效关系及可能的抗癌机制。方法:用不同浓度的平阳霉素培养人舌鳞癌细胞系Tca8113不同时间,以MTT法和荧光显微镜观察细胞增殖抑制情况,流式细胞术分析细胞凋亡率。结果:MTT法和荧光观察显示:不同浓度平阳霉素组间细胞生长抑制率有显著差异(P<0.05),浓度越高,抗增殖效应越明显;随药物作用时间延长,肿瘤细胞生长受抑制递增(P<0.05)。流式细胞术显示:凋亡率随药物浓度增加而增加,但与作用时间长短无关。低浓度药物无法诱导细胞凋亡。结论:平阳霉素在体外能明显抑制人舌鳞癌细胞系Tca8113生长,并具有浓度和时间依赖性。其抗癌机制可能包括细胞毒作用和启动程序化死亡信号等。     

加热联合黄体酮对人舌癌耐药细胞株Tca8113/BLM耐药性的影响

目的:研究加热(hyperthermia, HT)联合黄体酮(progresterone, Prog)对人舌癌细胞Tca8113和耐药细胞Tca8113/BLM耐药性的影响.方法:采用MTT法检测加热41 ℃ 1 h后联合Prog对人舌癌亲本细胞Tca8113和耐药细胞Tca8113/BLM化疗药物的敏感性;流式细胞仪(FCM)检测细胞内阿霉素(ADM)浓度聚积以及细胞膜上P-gp和MRP的表达.结果:与黄体酮作用细胞相比,加热41 ℃ 1 h联合2 μmol/L Prog作用细胞后,Tca8113和Tca8113/BLM细胞的IC_50显著下降(P<0.01),且各组之间均有显著差异(P<0.01),ADM浓度聚积在2 种细胞中明显增加(P<0.01),细胞膜上的P-gp 和MPR荧光强度显著下降(P<0.01).结论:加热联合Prog能协同增加细胞内药物浓度的聚积,显著提高细胞对化疗药物BLM的敏感性,其二者协同作用与降低细胞膜上的P-gp和MRP的表达有关.     

端粒酶RNA反义寡核苷酸对舌癌细胞系Tca8113细胞增殖和端粒酶活性的影响

目的探讨端粒酶RNA反义寡核苷酸对舌癌细胞系Tca8113细胞增殖和端粒酶活性的影响。方法反义寡核苷酸(AS-ONS)作用于Tca8113细胞;采用MTT法测定AS-ONS对Tca8113细胞的毒性;倒置相差显微镜观察细胞生长状况及形态学改变;透射电镜观察细胞超微结构;测定Tca8113细胞端粒酶活性。结果AS-ONS可明显地抑制Tca8113细胞的生长,其生长抑制随剂量的增加而增强,具有浓度依赖性;AS-ONS对于Tca8113细胞端粒酶活性抑制作用具有时间依赖性。不同浓度AS-ONS作用于Tca8113细胞,其细胞毒性作用较弱;在倒置显微镜下可见AS-ONS组随药物浓度增高,细胞生长出现抑制。透射电镜观察到AS-ONS组作用的细胞细胞膜破损,细胞核内染色质凝聚,边集,并穿过核膜溢入胞质中,胞质部分溶解,线粒体空胞变性;AS-ONS对端粒酶活性抑制效果非常明显。结论反义寡核苷酸AS-ONS可明显地抑制Tca8113细胞的生长,并具有剂量依赖性和时间依赖性;靶向于端粒酶RNA的反义寡核苷酸可明显地抑制Tca8113细胞端粒酶活性,细胞增殖受到明显抑制。     

三氧化二砷抑制口腔鳞癌细胞增殖的研究

目的:体外试验研究三氧化二砷对口腔鳞癌的可能治疗作用。方法:以人舌鳞状细胞癌细胞系Tca8113细胞为研究对象之一,采用台盼蓝拒染法计数活细胞,观察三氧化二砷作用于Tca8113细胞的量效关系、时效关系。采用平皿法姬姆萨染色观察三氧化二砷对Tca8113细胞的克隆形成抑制作用。以舌鳞状细胞癌临床新鲜标本组织块为研究对象之二,消化后细胞悬液与各浓度三氧化二砷、一定浓度的MTX、5Fu、PYM体外培养后MTT法测定临床舌癌细胞生长抑制率。结果:三氧化二砷对Tca8113细胞、临床舌癌细胞均有显著生长抑制作用。1μmolAs2O3台盼蓝染色活细胞计数Tca8113细胞生长抑制率28.57%,克隆形成抑制率31.01%;3μmolAs2O3浓度Tca8113细胞生长抑制率58.36%,克隆形成抑制率76.63%;5μmolAs2O3浓度Tca8113细胞生长抑制率86.03%,克隆形成抑制率91.30%。体外药敏测定:1μmol浓度As2O3的临床舌癌细胞的生长抑制率39.5%,3μmol浓度As2O3为47.2%,5μmol浓度As2O3为89%,MTX为36.5%,5Fu为41.3%,PYM为58.16%。临床药敏标准一般大于30%为敏感,PYM大于50%为敏感。结论:体外试验表明三氧化二砷可显著抑制人舌鳞状细胞癌细胞系Tca8113细胞的生长,对临床癌细胞也表现了良好的抗增殖作用,三氧化二砷可能成为治疗口腔鳞癌的有效药物     

p27kip1基因转染与化疗药联合应用对舌癌细胞生长的影响

目的探讨人p27^kip1基因转染与化疗药联合应用对舌癌细胞生长的影响。方法从正常组织中克隆人p27^kip1基因连接至pcDNA3真核表达载体上，应用脂质体将重组质粒转染舌癌Tca8113细胞，观察外源目的基因在靶细胞中的整合及表达，以及转染与未转染细胞加用化疗药物后的生长情况。结果成功克隆p27^kip1 cDNA并构建p27^kip1真核表达载体，将其导入Tca8113细胞中，经G418筛选得到稳定表达p27^kip1基因的细胞株，转染p27^kip1基因的细胞显示了对化疗药长春新碱的敏感性增高。结论p27^kip1基因转染提高了化疗药对舌癌Tca8113细胞生长抑制作用。     

Celecoxib enhances the inhibitory effect of cisplatin on Tca8113 cells in human tongue squamous cell carcinoma in vivo and in vitro

J Oral Pathol Med (2010) 39 : 579–584 Background: Overexpression of cyclooxygenase‐2 (COX‐2) is associated with carcinogenesis, invasiveness, and metastasis of malignant tumors. Inhibition of COX‐2 is one hot topic of research in prevention and treatment of malignant tumors. Because of the selective and specific inhibition on the activity of COX‐2, the roles of celecoxib in prevention and treatment of tumors have attracted broad attention in recent years. In this study, we investigated the inhibitory effect of celecoxib combined with cisplatin on the proliferation of human tongue squamous cell carcinoma cell line Tca8113 in vivo and in vitro. Methods: Human tongue squamous cell carcinoma tumor cells Tca8113 and a mouse model with Tca8113 cells were used to study the growth inhibition of cisplatin enhanced by celecoxib. Drug treatment of Tca8113 in vitro and mice bearing xenografts in vivo were used. The level of COX‐2 expression was detected by Western blotting. Sensitivity of cells to drug treatment was analyzed by MTT assay. Results: Treatment of Tca8113 cells with cisplatin (CDDP) had less effect on the expression of COX‐2, whereas the COX‐2 expression was significantly down‐regulated after treatment with celecoxib alone or in combination with CDDP for 24 h. In addition, the combination of celecoxib with CDDP was also able to inhibit the Tca8113 line heterotransplanted in Balb/c nude mice. Conclusions: Those findings indicate that a low dose of celecoxib could augment CDDP‐induced growth inhibition of Tca8113 cells and its xenograft in Balb/c nude mice.     

塞来昔布对Tca8113细胞侵袭性影响的体外研究

目的:探讨环氧化酶-2(cyclooxygenease-2,COX-2)抑制剂——塞来昔布(celecoxib)对Tca8113细胞侵袭性的抑制作用。方法:用划痕实验检测Tca8113细胞的迁移能力;不同浓度的塞来昔布处理人舌鳞癌Tca8113细胞后,用MTT法检测细胞-基质黏附力的变化;用Transwell小室结合Matrix胶检测肿瘤细胞侵袭能力的变化。结果:10、20μmol/L的塞来昔布作用24 h后,细胞的侵袭能力分别下降了54%和73%(P<0.001),细胞-基质黏附力也明显降低(P<0.001)。结论:Tca8113细胞是高侵袭性细胞,塞来昔布对Tca8113细胞侵袭的抑制作用呈剂量依赖性。