香豆素类化合物生物学活性研究进展

综述了近10年来香豆素类化合物有效成分及生物学活性的研究进展。香豆素是自然界很重要的一大类天然有机化合物,实验研究发现香豆素类化合物具有抗HIV、抗癌、降压、抗心律失常、抗骨质疏松、镇痛、平喘及抗菌等多方面生物学活性。因此,完善香豆素类化合物提取分离工艺,寻找有效的先导化合物,合成并筛选出高效低毒的香豆素类衍生物已成为药物研发工作的重要方向之一。     

鹅不食草化学成分及其抗炎活性研究

目的：研究鹅不食草的化学成分及其抗炎活性。方法：采用柱色谱和制备液相色谱等方法对鹅不食草的80%乙醇提取物进行分离纯化,结合NMR、MS等现代波谱技术对化合物进行结构鉴定;通过检测化合物对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞(RAW264.7)释放炎症介质NO评价其抗炎活性。结果：从鹅不食草中共分离纯化得到22个化合物,分别鉴定为：蒲公英甾醇醋酸酯(1)、角鲨烯(2)、羽扇烯酮(3)、蒲公英甾醇(4)、无羁萜(5)、蒲公英甾酮(6)、伪蒲公英甾醇醋酸酯(7)、lupeol acetate(8)、β-谷甾醇(9)、9-羟基百里酚(10)、8-hydroxy-9-isobutyryloxy-10(2)-methylbutyryloxythymol(11)、8,10-dihydroxy-9-isobutyryloxythymol(12)、E-pcoumaryl-alcohol ethyl ether(13)、2-hydroxy-4-methy-lbenzoic acid(14)、3-deuteriomethyl-5-methyl-2,3-dihydrobenzofyran(15)、间苯二甲醚(1...     

祖师麻总香豆素的抗炎镇痛药效作用评价

目的:研究祖师麻总香豆素的抗炎镇痛作用,为后续研究开发新药提供依据。方法:采用蛋清致大鼠足跖肿胀模型与二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型,评价祖师麻总香豆素的抗炎作用;采用小鼠醋酸扭体模型,评价其镇痛活性。结果:祖师麻总香豆素可明显抑制蛋清所致的大鼠足跖肿胀和二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀,显著减轻由醋酸引起的小鼠疼痛,减少扭体反应次数。结论:祖师麻总香豆素具有较好的镇痛、抗炎作用。     

金莲花中首次分离的一个酚酸类化合物及其抗炎和抑菌活性

目的:研究首次从金莲花(Trollius chinensis Bunge)中分离得到的一个酚酸类化合物的结构及其体外生物活性。方法:经波谱方法鉴定其化学结构,采用微量稀释法和Griess法对该化合物进行了体外抑菌和抗炎活性研究。结果:经1H NMR、13C NMR和二维谱鉴定该化合物为藜芦酸葡萄糖酯,对LPS诱导的RAW264.7细胞释放NO的抑制作用的IC50=264.1μmol·L-1,对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的MIC值分别为256和128μg·m L-1。结论:该化合物具有一定的抗炎和抑菌作用,可被视为金莲花的抗炎和抑菌有效成分之一。     

白术抗炎活性成分的研究

 目的对白术(Atractylodes macrocephala Koidz.)的抗炎活性成分进行研究。方法采用正相、反相硅胶柱色谱对白术中的化合物进行分离,依据理化性质、波谱数据分析进行结构鉴定,采用整体动物试验,对各成分进行初步抗炎作用研究,结果从白术中分离鉴定5个化合物,分别为白术内酯Ⅲ(Ⅰ)、白术内酯Ⅰ(Ⅱ)、12-异戊烯酰-14-乙酰-2E,8E,10E-三烯-4,6-二炔-1-醇(Ⅲ)、12-α-甲基丁酰-14-乙酰-2E,8E,10E-三烯-4,6-二炔-1-醇(Ⅳ-1)、12-β-甲基丁酰-14-乙酰-2E,8E,10E-三烯-4,6-二炔-1-醇(Ⅳ-2)。抗炎结果表明,上述各成分对小白鼠急性炎症模型均有一定的抗炎作用。结论白术中含对小白鼠急性炎症模型有一定作用的抗炎活性成分,其中化合物Ⅲ及化合物Ⅳ-1 ¹³C-NMR波谱数据为首次报道。化合物Ⅳ-2数据为首次报道。     

木竹果树皮化学成分及其抗炎活性的研究

目的研究木竹果Garcinia multiflora Champ树皮的化学成分及其抗炎活性。方法木竹果树皮的乙酸乙酯提取物采用硅胶和HPLC色谱柱进行分离纯化,波谱技术鉴定所得化合物的结构,MTT法检测化合物对RAW264.7细胞活力的影响,Griess法检测LPS诱导的RAW264.7细胞中一氧化氮(NO)水平。结果从中分离并鉴定出了9个化合物,分别为β-胡萝卜苷(1)、2,6-二甲氧基对苯醌(2)、4-羟基-3-甲氧基苯甲酸(3)、4-丙酮基-3,5-二甲氧基-1,4-对醌醇(4)、1-羟基-3,6,7-三甲氧基口山酮(5)、1,6-二羟基-3,7-二甲氧基口山酮(6)、GB1a glucoside(7)、volkensiflavone(8)、fukugetin(9)。其中,化合物8和9可抑制NO的生成,IC50分别为25.48和44.17μmol/L。结论化合物1~5为首次从该植物中分离得到,而且化合物8和9具有一定的抗炎作用。     

野马追化学成分及其抗炎活性

目的研究野马追Eupatorium lindleyanum DC.化学成分及其抗炎活性。方法野马追水提物通过大孔吸附树脂精制后的乙酸乙酯萃取部位,采用硅胶、C18柱、重结晶进行分离纯化,根据波谱数据对所得化合物结构进行鉴定,再采用ELISA法评价其抗炎活性。结果从中分离出9个化合物,分别鉴定为浙贝素(1)、梣皮树脂醇(2)、salicifoliol(3)、5-羟基-3,4-二甲基-5-戊基-2(5H)-呋喃酮(4)、3-(2-羟基-4-甲基丁基)-4-甲氧基苯乙酮(5)、松柏醇(6)、对羟基苯甲醛(7)、3-(羟甲基)-1,14,15-三羟基-7,11,15-三甲基-2,6,10-十六碳共轭三烯-13-乙酸酯(8)、3-羟甲基-1,13,15-三羟基-7,11,15-三甲基-2,6,10-十六碳共轭三烯-14-乙酸酯(9)。化合物1~3在40μmol/L浓度时可抑制IL-6生成,抑制率分别为41.6%、74.7%、35.0%,其中化合物2的IC50值为1.17μmol/L。结论化合物1~7为首次从泽兰属植物中分离得到,而且化合物1~3具有抗炎活性,并以2最强。     

苦笋化学成分及其抗炎活性

目的研究苦笋Pleioblastus amarus(Keng) keng的化学成分及其抗炎活性。方法苦笋水提液采用硅胶、Sephadex LH-20、HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用LPS诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症模型评价其抗炎活性。结果从中分离得到11个化合物,分别鉴定为5,6,7,8-四甲氧基香豆素(1)、环(脯氨酸-酪氨酸(2)、胸苷(3)、胸腺嘧啶(4)、对羟基苯乙醇(5)、对羟基苯乙酸(6)、对羟基苯丙酸(7)、4-羟基-3-甲氧基苯丙酸(8)、1-苯基-1,2-乙二醇(9)、bis(4-methoxyphenenyl)ether(10)、3-(3′-hydroxybutyl)-2,4,4-trimethylcyclohexa-2,5-dienone(11)。化合物2、8在30.0μg/mL表现出较弱的NO抑制作用。结论化合物1～4、6～11为首次从该植物中分离得到,其中化合物2、8具有较弱的抗炎活性。     

枇杷叶紫珠化学成分及其细胞毒活性和抗炎活性

目的研究枇杷叶紫珠Callicarpa kochiana的化学成分及其细胞毒活性和抗炎活性。方法枇杷叶紫珠90%丙酮提取物采用硅胶、Sephadex LH-20、MCI、ODS、重结晶、半制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用CCK8法、Griess法、ELISA法测定化合物4~5的细胞毒活性和抗炎活性。结果从中分离得到5个化合物,分别鉴定为3,7,3’,4’-tetramethyl-quercetin (1)、pachypodol (2)、14α-hydroxyisopimaric acid(3)、14α-hydroxy-7,15-isopimaradien-18-oic acid (4)、(16R)-16,17-dihydroxyphyllolladan-3-one (5)。化合物4在一定浓度范围内对7种肿瘤细胞具有不同程度的抑制作用,并可以减少RAW264. 7细胞NO、IL-10、MCP-1、TNF-α的释放量。结论化合物1~5均为首次从该植物中分离得到,化合物4具有细胞毒活性和抗炎活性。     

山香圆叶中黄酮苷类成分及其抗炎活性研究

应用大孔树脂、聚酰胺、Sephadex LH-20,HPLC等各种色谱技术对山香圆叶95％乙醇提取物经乙酸乙酯萃取后的水部位进行分离纯化,分离得到8个黄酮苷类化合物,采用NMR等谱学方法分别鉴定为:野漆树苷(1),女贞苷(2),刺槐素-7-O-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(3),刺槐素-7-O-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→6)-o-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(密蒙花新苷,4),木犀草素-7-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(5),金圣草素-7-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)β-D-吡喃葡萄糖苷(6),刺槐素-7-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)β-D-吡喃葡萄糖苷(蒙花苷,7),芹菜素6,8-二-C-β-D-吡喃葡萄糖苷(8).其中化合物3～8为首次从该植物中分离获得.采用脂多糖(LPS)刺激RAM264.7巨噬细胞炎症模型对分离得到的化合物进行抗炎活性评价,结果表明化合物2,3在1x10-5 mol.L-1浓度下,对LPS刺激RAW264.7细胞NO生成的抑制率分别为33.7％和23.8％,提示化合物2,3具有较弱的抗炎活性.     

Antispasmodic and antioxidant activities of fractions and bioactive constituent davidigenin isolated from Mascarenhasia arborescens

Ethnopharmacological relevance

Mascarenhasia arborescens A. DC. (Apocynaceae) is used in traditional medicine in the North of Madagascar to treat intestinal disorders, intestinal spasms and diarrhoea.

Aim of the study

The main objective of this work was to evaluate the antispasmodic activity of the crude methanolic extract of Mascarenhasia arborescens and of its four partitions and to identify the effective compound responsible for this effect.

Materials and methods

Isolation and structure elucidation techniques were performed in order to identify the bioactive constituent of Mascarenhasia arborescens and HPLC analysis was used for its quantification. Total phenolic content (TPC) of crude extracts and partitions were determined using the Folin–Ciocalteu method. Crude methanolic extract, partitions and the bioactive compound were investigated for their spasmolytic activity on several isolated organs. Their antiradical activity was also investigated by the DPPH test.

Results

Bioassay-guided fractionation using isolated guinea pig ileum pre-contracted with histamine 3 × 10⁻⁶ M led to the isolation of davidigenin (DG), a dihydrochalcone, as the main active constituent from the most promising methylene chloride partition (McP). This partition was effective on isolated guinea pig ileum pre-contracted with 3 × 10⁻⁶ M histamine, with a median effective concentration (EC₅₀) of 41.19 ± 3.74 μg/ml. The DG content of this partition was shown to be 26.5% by HPLC. DG induced a concentration-dependent relaxation of the histamine pre-contracted guinea pig ileum with an EC₅₀ of 8.04 ± 0.81 μg/ml and a concentration-dependent relaxation of the acetylcholine pre-contracted rat duodenum with an EC₅₀ of 9.35 ± 0.30 μg/ml. It inhibited in a non-competitive manner histamine-induced isolated ileum contraction and the acetylcholine-induced isolated duodenum contraction. Moreover, DG does not have any antiradical activity.

Conclusions

We demonstrated for the first time antispasmodic and antioxidant effects of Mascarenhasia arborescens. This study supports its use in traditional medicine. Furthermore, we highlighted the crucial role of davidigenin in the antispasmodic activity of this plant.     

益母草香豆素类化学成分与抗血小板聚集活性

综合运用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20、MCI色谱以及反相C18柱色谱等方法分离纯化益母草中的化学成分,运用有机波谱学方法鉴定各化合物的结构,并进一步测试各化合物的体外抗血小板聚集活性。从益母草的乙酸乙酯部位中分离鉴定了10个香豆素类化合物,依次为佛手柑内酯(1)、花椒毒素(2)、异茴芹内酯(3)、异栓翅芹醇(4)、异欧前胡素(5)、橙皮内酯水合物(6)、异橙皮内酯(7)、九里香酮(8)、橙皮油内酯烯(9)、欧芹酚甲醚(10)。除化合物9外,其他化合物均为首次从该属植物中分离得到,活性筛选结果表明化合物4和8对ADP诱导的血小板聚集有明显的抑制作用。     

Analgesic,anti-inflammatory and venotonic effects of Cissus quadrangularis Linn.

Cissus quadrangularis, a medicinal plant indigenous to Asia and Africa, is used for many ailments, especially for the treatment of hemorrhoid. The effects associated with hemorrhoid, i.e. analgesic and anti-inflammatory activities as well as the venotonic effect of the methanol extract of C. quadrangularis (CQ) were assessed in comparison with reference drugs. In the analgesic test, CQ provoked a significant reduction of the number of writhes in acetic acid-induced writhing response in mice. CQ also significantly reduced the licking time in both phases of the formalin test. The results suggest peripheral and central analgesic activity of CQ. In acute phase of inflammation CQ elicited the inhibitory effect on the edema formation of the rats’ ear induced by ethyl phenylpropiolate as well as on the formation of the paw edema in rats induced by both carrageenin and arachidonic acid. It is likely that CQ is a dual inhibitor of arachidonic acid metabolism. In addition, CQ exerted venotonic effect on isolated human umbilical vein similarly to the mixture of bioflavonoids, i.e. 90% diosmin and 10% hesperidin. The results obtained confirmed the traditional use of C. quadrangularis for the treatment of pain and inflammation associated with hemorrhoid as well as reducing the size of hemorrhoids.     

28个不同采集地土茯苓(断面红色、白色)中落新妇苷分析及抗炎作用的比较

目的:采用HPLC分析测定28个不同采集地土茯苓(断面红色、白色)中落新妇苷的含量,并通过对土茯苓(断面红色、白色)渗透型炎症的研究,拟对该品种进行药效与成分的评价.方法:RP-HPLC测定落新妇苷含量,采用依利特Hypersil ODS2色谱柱(4.6 mm× 250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1％冰醋酸溶液(21∶ 79),流速1.0 mL·min-1,检测波长291 nm,柱温25℃,理论塔板数以落新妇苷计不得低于5 000.用毛细血管通透性试验比较不同断面颜色药的抗炎作用.结果:在选定的色谱条件下,落新妇苷在0.003 379 ～4.004 μg呈良好线性关系.加样回收实验加样80％,100％,120％,平均回收率分别为100.1％,101.9％,99.3％.断面白色土茯苓中落新妇苷质量分数为0.19％ ～2.46％,断面红色土茯苓中落新妇苷质量分数为2.10％ ～ 5.92％.药效学实验结果表明,断面白色土茯苓抗炎抑制率为32％,断面红色土茯苓抗炎抑制率仅为21％.结论:红、白2种断面土茯苓中落新妇苷的含量及抗炎作用均存在较大差异,土茯苓中落新妇苷的含量高低与其抗炎作用的强弱不呈正相关.     

圆锥绣球化学成分研究

目的:对圆锥绣球茎枝水提取物进行化学成分研究。方法:利用各种色谱方法进行化学成分分离,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。结果:分离得到9个化合物,分别鉴定为茵芋苷(1),isotachioside(2),8-甲氧基香豆素-7-O-β-D-葡萄糖苷(3),6-甲氧基香豆素-7-O-β-D-葡萄糖苷(东莨菪苷,4),3,4,5-三甲氧基苯酚-1-O-6-α-L-鼠李糖基-(1→6)-O-β-D-葡萄糖苷(5),伞形花内酯-7-O-β-D-芹菜糖基-(1→6)-O-β-D-葡萄糖苷(6),伞形花内酯(7),6-甲氧基-7-羟基香豆素(东莨菪素,8)和7-羟基-8-甲氧基香豆素(9)。结论:1~7为首次从该植物中分离得到。     

狼毒大戟抗乙肝病毒活性成分的研究

目的:研究狼毒大戟的抗乙肝病毒活性成分。方法:应用各种色谱技术进行分离纯化,根据化合物的波谱数据进行结构鉴定,并将化合物进行抗乙肝病毒活性的筛选。结果:分离鉴定了11个化合物,分别为5,24-甘遂二烯-3β-醇(tirucalla-5,24-dien-3-ol,1),24-亚甲基-5,24-甘遂二烯-3β-醇(24-methyltirucalla-5,24-dien-3-ol,2),大戟醇(euphol,3),丁酰鲸鱼醇(butyrosper-mol,4),24-亚甲基环阿屯醇(24-methylenecycloartenol,5),环阿屯醇(cycloartenol,6),大戟内酯E(jolkinolide E,7),泽漆内酯A(helioscopinolide A,8),异莨菪亭(isoscopoletin,9),西瑞香素(dephnoretin,10),3,3′-二甲氧基逆没食子酸4′-O-β-D-木糖苷(3,3′-di-O-methylellagic acid 4′-O-β-D-xylopyranoside,11)。结论:化合物1,2,10为首次从该属中分离得到,化合物3,4,11为首次从该植物中分离得到,化合物1,8,9,11对HBsAg和HBeAg有弱的抑制作用,化合物10对HBsAg有弱的抑制作用。     

Antinociceptive and anti-inflammatory kaempferol glycosides from Sedum dendroideum

Aim of the study

To identify the compounds responsible for the antinociceptive and anti-inflammatory effects previously described for Sedum dendroideum, through bioassay-guided fractionation procedures.

Materials and methods

Antinociceptive activity was evaluated through mouse acetic acid-induced writhing model. The anti-inflammatory activity was assessed through croton oil-induced mouse ear oedema and carrageenan-induced peritonitis.

Results

The Sedum dendroideum juice afforded seven known flavonoids identified with basis on NMR data. The oral administration of the major kaempferol glycosides kaempferitrin [1] (17.29 μmol/kg), kaempferol 3-O-β-glucopyranoside-7-O-α-rhamnopyranoside [2] (16.82 μmol/kg), kaempferol 3-O-neohesperidoside-7-O-α-rhamnopyranoside [3] (13.50 μmol/kg) or α-rhamnoisorobin [5] (23.13 μmol/kg) inhibited by 47.3%, 25.7%, 60.2% and 58.0%, respectively, the acetic acid-induced nociception (indomethacin: 27.95 μmol/kg, p.o.; 68.9%). Flavonoids 1, 2, 3 or 5, at the same doses, reduced by 39.5%, 46.5%, 35.6% and 33.3%, respectively, the croton oil-induced oedema (dexamethasone: 5.09 μmol/kg, s.c.; 83.7%) and impaired leukocyte migration by 42.9%, 46.3%, 50.4% and 49.6%, respectively (dexamethasone: 5.09 μmol/kg, s.c.; 66.1%).

Conclusions

Our findings show that the major kaempferol glycosides may account for the renowned medicinal use of Sedum dendroideum against pain and inflammatory troubles.     

金银花类药用植物IspE和IspH基因克隆和生物信息学分析

目的:克隆金银花类药用植物4-二磷酸胞苷-2-C-甲基赤藓糖激酶(4-diphosphocytidyl-2-C-methyl-D-erythritol kinase,IspE)和4-羟基-3-甲基-2-邻苯基二磷酸还原酶(4-hydroxy-3-methylbut-2-enyl diphosphate reductase,IspH)基因,并对其基因序列、蛋白特性和转录活性进行分析、比较.方法:从忍冬Lonicera japonica转录组测序结果中分析获得了IspE,IspH基因.分别以忍冬、红白忍冬L.japonica var.chinensis、红腺忍冬L.hypoglauca和水忍冬L.dasystyla新鲜花蕾为材料,利用RT-PCR技术克隆获得了4种金银花类药用植物IspE和IspH基因的全长cDNA.运用生物信息学分析软件,预测编码蛋白的结构和功能,并通过RT-PCR检测IspE和IspH在忍冬、红白忍冬、红腺忍冬、水忍冬花蕾中的转录情况.结果:金银花类药用植物IspE基因含有1个完整的开放阅读框,长度为1 221 bp,编码406个氨基酸;IspH含有一个完整的开放阅读框,长度为1 380 bp,编码459个氨基酸.IspE和IspH均为非分泌蛋白,均定位于叶绿体中.RT-PCR分析结果表明在忍冬、红腺忍冬和水忍冬的花蕾中IspE,IspH基因的转录水平没有显著差异,但红白忍冬花蕾中IspE,IspH基因的转录水平均显著高于忍冬.结论:克隆获得忍冬、红白忍冬、红腺忍冬和水忍冬中IspE,IspH基因,并证实了其在不同金银花类药用植物中的表达,为进一步研究IspE,IspH基因对萜类化合物生物合成和花香气以及颜色的影响奠定了基础.     

糙苏素的抗肿瘤活性研究

目的:探讨藏药螃蟹甲中环烯醚萜类成分糙苏素(phlomiol)的抗肿瘤作用.方法:采用MTT法检测糙苏素对体外培养的2种人肿瘤细胞增殖的抑制作用;体内试验采用小鼠实体瘤S180、肝癌H22细胞株接种小鼠,连续给药14 d,计算抑瘤率.采用MTT比色法检测糙苏素对S180荷瘤小鼠NK细胞杀伤活性的影响和对S180荷瘤小鼠T淋巴细胞增殖反应的影响.结果:糙苏素在50～150 mg·L-1对2种肿瘤细胞增殖均有抑制作用,且呈剂量依赖关系(r=0.989,P<0.05);体内试验结果显示小鼠分别灌胃给予2.5,5,10 mg·kg-13个剂量的糙苏素,对接种的实体瘤S180、肝癌H22细胞株的抑瘤率分别为28.5%～65.0%.35.0%～74.5%.同时,糙苏素可显著提高S180荷瘤小鼠淋巴细胞增殖活性(P<0.05),显著增加S180荷瘤小鼠NK细胞的杀伤能力(P<0.05).结论:糙苏素对体外培养的人肿瘤细胞和接种的小鼠肿瘤具有明显抑制作用,能够增强淋巴细胞增殖功能和NK细胞的杀伤能力,具有抗肿瘤和免疫调节功能.