朱红膏中汞在破损皮肤模型大鼠体内的蓄积及毒性

目的:研究朱红膏给药4周后汞在大鼠肝脏、肾脏和脑中的蓄积情况以及对肝肾的毒性作用,为朱红膏临床安全使用提供数据参考。方法:将44只SD大鼠随机分为正常组、朱红膏低、中、高剂量(1. 875,37. 5,75 mg·kg-1)组,连续给药4周后检测大鼠尿液、血液、肝脏、肾脏和脑中的汞含量,测定血清中丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST),尿素氮(serum urea nitrogen,BUN)和血肌酐(serum creatinine,SCr)的浓度,尿液中β2-微球蛋白(β2-mi SCroglobulin,β2-BMG)和N-乙酰-β-D葡萄糖苷酶(N-acetyl-beta-D glucosidase,NAG)的浓度,组织切片进行苏木素-伊红(HE)染色观察肝肾组织形态。结果:朱红膏各给药组的血汞、尿汞含量明显高于正常组(P 0. 05,P 0. 01),且呈剂量依赖性;朱红膏高剂量组血清ALT明显升高,朱红膏中、高剂量组血清SCr明显升高(P 0. 05,P 0. 01),朱红膏低剂量组的生化指标没有改变;朱红膏中、高剂量会破坏肝小叶的结构,破坏肝索单层细胞放射状排列,使肾小管管腔扩张,肾小球萎缩,甚至肾小球缺失,朱红膏低剂量组对肝脏的组织形态无显著影响,轻微改变肾脏组织形态。结论:朱红膏在低剂量下使用一个月基本安全,但长期大量使用会造成汞在肝脏、肾脏和脑蓄积,并导致肝肾毒性。讨论:未发现比肝肾实质性病变更灵敏的指标用于监控其肝肾毒性,但尿汞和血汞的含量升高有助于预知其毒性,可对汞的暴露量与毒性的关系做进一步的探讨。研究为朱红膏临床合理安全使用以及毒性的监控提供了一定的参考。     

拔毒生肌散及其拆方对大鼠破损皮肤组织形态学的影响观察

目的:观察中药外用制剂拔毒生肌散及其拆方对大鼠破损皮肤的组织形态学影响变化。方法:在大鼠破损皮肤(渗血为度)上分别外涂拔毒生肌散及其拆方,连续给药14 d后光镜下观察其对大鼠破损皮肤组织形态学的影响。结果:汞铅成分导致大鼠破损皮肤表皮增厚,真皮网织层及其深部血管出血、充血及炎细胞浸润,配伍药味可抑制表皮增厚,减轻真皮病变。结论:拔毒生肌散中汞铅成分可促进大鼠破损皮肤伤口愈合,配伍药味可减轻汞、铅成分所致真皮组织病理性损伤。     

朱红膏治疗慢性皮肤溃疡血尿汞浓度波动的临床研究

目的:探讨汞离子在人体内的吸收与排泄过程。方法:将慢性皮肤溃疡患者48例随机分为2组,试验组外用朱红膏,对照组使用不含汞的龙珠软膏,于用药前及用药后2周、4周、6周,停药后2周、6周测其血汞及尿汞浓度。结果:血汞、尿汞浓度有随时间变化的趋势;时间因素的作用因分组的不同而不同;药物因素能升高患者血尿汞浓度,停药后浓度明显下降。结论:朱红膏外用于溃疡面积小于60 cm~2慢性皮肤溃疡患者6周,血尿汞随用药时间的延长有不同类型的波动形式,但其值仍在安全范围之内。     

朱红膏促进皮肤溃疡愈合的安全性研究

目的研究朱红膏促进皮肤溃疡愈合的安全性,为临床用药提供依据。方法 SD雄性大鼠66只随机分为皮肤破损组、溃疡模型组、凡士林基质组及朱红膏高（38.08 mg/kg）、中（19.04 mg/kg）、低（9.52 mg/kg）剂量组。皮肤破损组仅以刀片刮伤大鼠皮肤;溃疡模型组选择皮肤缺损＋细菌感染＋埋置异物法造模;朱红膏和凡士林基质组以纱条方式在大鼠造模创面上贴敷给药14 d,每日保证给药时间4 h,观察尿β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶（NAG）活性、尿视黄醇结合蛋白（RBP）含量及肾脏组织病理改变。结果与溃疡模型组比较,朱红膏各剂量组、凡士林基质组及皮肤破损组尿NAG活性未见明显差异（P〉0.05）,尿RBP含量显著升高（P〈0.05,P〈0.01）,肾脏组织病理检查结果示,随着用药剂量的增加,肾脏组织病变有加重趋势,与皮肤破损组比较,朱红膏高剂量组有较明显病变（P〈0.05）,与溃疡模型组比较,朱红膏各剂量组、凡士林基质组及皮肤破损组肾脏病变未见明显差异（P〉0.05）。结论朱红膏中剂量用药2周可认为基本安全,朱红膏高剂量用药2周有可能引起肾脏损伤。     

含汞中药外用制剂朱红膏对皮肤溃疡模型大鼠肾脏抗氧化能力的影响

目的:研究经大鼠溃疡皮肤反复给予朱红膏对肾脏抗氧化能力的影响,进一步探讨朱红膏中汞经皮吸收作用于肾的机制。方法:将80只SD大鼠随机分8组:朱红膏A,B,C,D,E(含原药材1.219,0.609,0.305,0.152,0.076 g.kg-1)5个剂量组、基质组(凡士林)、溃疡模型组及皮肤破损组。连续给药14 d,测定尿液NAG,RBP水平及肾组织中T-AOC,SOD,GSH-PX,GSH水平。结果:与溃疡模型组比较,朱红膏A组NAG水平升高,A,B,C,D组RBP含量均明显升高;朱红膏A,B,C组T-AOC显著升高;朱红膏E组T-SOD活力升高;朱红膏A组T-SOD活力显著降低;朱红膏A,B,C组GSH-PX活力均明显升高;随剂量的增加,朱红膏各给药组GSH含量均明显升高。结论:一定剂量朱红膏外用,可以调动机体抗氧化防御系统,提高抗氧化能力,随着剂量增加,则对某些抗氧化物质活性出现明显的抑制作用。     

中药外用制剂朱红膏对皮肤溃疡模型大鼠肾脏过氧化及金属硫蛋白的影响

目的研究经大鼠溃疡皮肤反复给予朱红膏对肾组织丙二醛（MDA）、Na＋-KLATP酶及金属硫蛋白（MT）的影响,初步探讨朱红膏中汞经皮吸收作用于肾的机理。方法将80只SD大鼠随机分为8组：朱红膏A组（1218．56mg／kg）、B组（609．28mg／kg）、C组（304．64mg／kg）、D组（152．32mg／kg）、E组（76．16mg／kg）5个剂量组及基质组（凡士林）、溃疡模型组、皮肤破损组。溃疡模型采用皮肤缺损＋埋置异物＋细菌感染法造模,皮肤破损组仅以刀片刮伤大鼠皮肤,基质组及朱红膏各剂量组将药纱条直接贴敷于创面,每日给药4h,连续给药14d。测定肾组织中MDA含量、Na＋-K＋-ATP酶活力,并采用酶联免疫分析法测定MT含量。结果与溃疡模型组比较,朱红膏A组MDA含量升高（P〈0．05）;朱红膏A组Na＋-K＋-ATP酶活力显著降低（P〈0．01）,基质组与朱红膏C、D、E组酶活力均呈不同程度的升高;朱红膏A、B、C、D组MT含量均显著升高（P〈0．01）,其余差异无统计学意义（P〉0．05）。结论反复过量使用朱红膏,汞经皮吸收作用于肾脏,可以引起脂质过氧化,影响能量代谢,诱导MT的产生。     

朱红膏治疗慢性皮肤溃疡的临床安全性研究

目的观察中药外用制剂朱红膏治疗慢性皮肤溃疡的临床用药安全性。方法将符合纳入标准的慢性皮肤溃疡患者应用朱红膏纱条治疗。于用药前,用药2周、6周,停药2周时,观察患者血、尿常规,肝、肾功能,血、尿汞的变化。结果朱红膏连续用药6周时,不同时间点患者血、尿常规,肝、肾功能与用药前比较差异均无统计学意义(P0.05),血、尿汞含量虽有所升高,但与用药前比较差异亦无统计学意义(P0.05)。结论临床用药6周为朱红膏治疗慢性皮肤溃疡相对安全的用药周期。     

朱红膏对动物急性毒性和皮肤刺激性的实验研究

目的研究外用制剂朱红膏对大鼠的急性毒性和对豚鼠的皮肤刺激性,为临床安全用药提供依据。方法急性毒性实验：建立朱红膏外用大鼠模型,制备破损皮肤,选取相当于临床用药剂量320倍的朱红膏（原药材609.28 mg/kg）进行实验,记录毒性反应和体质量增加情况。皮肤刺激性实验：建立朱红膏外用豚鼠模型,制备破损皮肤,采用同体左右侧自身对照法进行单次和多次给药的皮肤刺激性实验。结果急性毒性实验中,未见大鼠出现急性毒性反应,给药组大鼠体质量和对照组比较,差异无统计学意义。皮肤刺激性实验中,未见豚鼠给药处皮肤出现红斑、水肿等情况。结论一定时间内外用一定剂量的朱红膏对大鼠没有出现急性毒性反应,对豚鼠破损皮肤没有产生刺激性。     

朱红膏促进大鼠慢性皮肤溃疡创面愈合量效关系研究

目的:通过改变朱红膏纱条单位面积中药含量研究其量效关系,探讨最佳用药剂量。方法:70只SD大鼠随机分为7组:溃疡模型组,基质组(凡士林)及5个中药剂量组(A、B、C、D、E含中药分别为27.2、13.6、6.8、3.4、1.7mg/cm2)。连续给药7d,观察创面愈合速度及创面形态的变化,检测肉芽组织中总蛋白及羟脯氨酸含量。结果:基质组及中药D、E组大鼠创面愈合速度较快(P<0.01),A、B组创面愈合速度呈减缓趋势;D、E组用药早期较好的体现了提脓祛腐作用,后期创面平整光滑、质地柔软;各中药组肉芽组织中蛋白及羟脯氨酸含量均明显提高(P<0.01)。结论:朱红膏促进慢性皮肤溃疡创面愈合存在量效关系,增加剂量未见提高疗效,纱条中药含量1.7mg/cm2及3.4mg/cm2具有较好的促进愈合作用。     

朱红膏对基质金属蛋白酶活性及成纤维细胞分泌的影响

目的:观察朱红膏是否通过对基质金属蛋白酶的影响来促进创面的愈合.方法:收集阳证疮疡创面渗液8例,检测朱红膏对渗出物中明胶酶MMP-2,MMP-9酶活性的影响;在蛋白水平观察朱红膏对MMP-1,-2活性的影响;检测朱红膏对HSF细胞的细胞毒性及IC50及用药前后HSF细胞MMP-1,-2,-9的蛋白表达.结果:朱红膏对创面渗出液中MMP-2活性有明显的抑制作用,与对照组相比P＜0.01;对创面渗出液中MMP-9活性在lg·L-1时与对照组比较无差异,但高于5g·L-1时有明显抑制作用,与对照组比较有差异.当汞质量浓度为320 mg· L-1时,朱红膏溶液能直接抑制MMP-1活性(P＜0.01)和MMP-2活性(P＜0.05);但当汞质量浓度为2.56～0.51 mg·L-1时,朱红膏溶液能增强MMP-1活性(P＜0.05);同时当汞在0.51 ～64 mg·L-1时,朱红膏溶液能够增强MMP-2活性(P＜0.01).朱红膏在DMEM的饱和浓度为39.6 mg·L-1,当汞质量浓度大于1.23 mg·L-1时有细胞毒性,HSF细胞IC50汞质量浓度为61.11 mg· L-1,在1.23,0.62,0.31 mg· L-1组均可促进HSF细胞MMP-1的蛋白表达(P＜0.01);朱红膏1.23,0.62 mg· L-1组对HSF细胞MMP-2蛋白表达有抑制作用,作用不明显,0.31 mg·L-1组对MMP-2蛋白表达有促进作用,作用不明显;在汞0.62 mg·L-1时,朱红膏可促进HSF细胞表达MMP-2(P＜0.01);但在这3个汞浓度条件下,朱红膏均可降低HSF细胞MMP-9的蛋白表达.结论:朱红膏在高浓度情况下对创面渗出液的MMP-2,MMP-9均有抑制作用,且抑制作用呈朱红膏含量依赖性增强;并直接抑制体外激活的MMP-1,MMP-2活性.但低浓度情况下却刺激正常成纤维细胞MMP-1,2蛋白的表达及体外酶活性;但对正常成纤维细胞MMP-9的表达表现出抑制效应.     

玉红膏重复给药大鼠体内汞的吸收及蓄积研究

目的:通过经皮重复给予大鼠不同浓度含轻粉玉红膏,考察体内汞的吸收及蓄积情况,为临床安全用药提供科学依据.方法:将100只SD大鼠随机分成5组:对照组、玉红膏组、2倍浓度玉红膏组、4倍浓度玉红膏组和1.6％轻粉组.于破损皮肤重复给药(剂量为0.04 g·cm-2)2周、4周和停药4周时,分别测定大鼠血、尿中汞含量和心、肝、脑、肾组织中汞的蓄积量.结果:连续给药4周时,玉红膏组大鼠血中汞含量与对照组比较无明显差异,其他各实验组随着给药时间的延长和给药剂量的增高,吸收入血的汞含量和尿中汞的排泄量均明显增高.给药4周时,实验组各组织汞含量均升高,其中肾最高,脑最低.停药4周时,各实验组大鼠血、尿中汞含量均恢复正常,各组织汞含量明显下降.结论:玉红膏经破损皮肤给予大鼠4周,吸收入血的汞量甚微,体内汞的蓄积主要在肾脏,汞主要从尿液排泄.提示临床长期使用玉红膏应监测患者体内汞含量和肾功能指标.     

湿式催化消解-原子吸收法测定玉红膏中汞含量

目的:建立玉红膏中汞的含量测定方法。方法:采用湿式催化消解法对玉红膏进行前处理,氢化物发生-冷原子吸法收测定汞含量。结果:汞在2～20μg.L-1线性关系良好,加标回收率平均为104.27%,RSD 3.37%,样品重复测定的RSD 8.4%,测得不同批次玉红膏中的汞质量分数为0.7～1.5 mg.g-1。结论:该方法准确度高,重复性好,操作较为简便,可作为玉红膏中汞含量的质量控制方法。     

乳宁外敷膏对家兔乳腺增生模型作用的实验研究

目的　观察乳宁外敷膏抑制和治疗乳腺增生病的效果。方法　选用健康雌性日本大耳白兔 30只 ,随机分成 6组 ,用己烯雌酚复制乳腺增生病模型。在制模过程中和制模成功后分别使用乳宁外敷膏和丙酸睾丸酮软膏外贴乳房部位 ,对照观察乳房外观形态、组织学形态和血浆中雌二醇的含量。结果　乳宁外敷膏能抑制兔乳腺增生 ,降低血浆中雌二醇含量。结论乳宁外敷膏对己烯雌酚所致的乳腺增生病有一定的治疗作用 ,可部分地使其恢复正常或减轻其增生程度 ,其作用效果大致与丙酸睾丸酮软膏相似     

黄腐酸钠软膏的动物药代动力学研究

目的 :建立黄腐酸钠的血药浓度的测定方法 ,测定药代动力学参数。方法 :采用荧光分光光度法 ,测定大鼠体内黄腐酸钠的血药浓度 ,结合药效学实验确定药物达到最低有效血药浓度的时间 ,用药动学计算机软件拟合处理得药动学参数。结果 :黄腐酸钠在 1 .6～ 40 μg·mL- 1 浓度范围内呈良好的线性关系 (r=0 .9987) ,最低检测浓度为 0 .2 μg·mL- 1 。日间和日内误差均小于 2 .5 % ,方法回收率 1 0 0 .49%。该软膏中黄腐酸钠透皮吸收属零级动力学过程 ,可提供比口服液剂型稳定的血药浓度。结论 :黄腐酸钠软膏药效平稳而持久 ,是一种较理想的制剂