解毒祛瘀滋阴药对SLE患者Bax/Bcl-2基因mRNA表达的影响

目的：研究解毒祛瘀滋阴药对系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血淋巴细胞Bax／Bcl-2基因mRNA的影响。方法：临床选择SLE患者45例，随机分单用激素组和并用中药组，利用RT．PCR法检测各组治疗前后Bax／Bcl．2基因mRNA表达情况。结果：SLE患者的Bax／Bcl-2基因表达比值明显低于正常人（P〈0．001）；活动期低于缓解期（P〈0．05）；治疗后两组Bax／Bcl-2基因表达比值明显上升，而并用中药组治疗后明显高于单用激素组（P〈0．05）。结论：激素合解毒祛瘀滋阴药治疗，能明显提高SLE患者外周血淋巴细胞Bax／Bcl-2基因mRNA表达比值，这可能与其诱导淋巴细胞凋亡、调节免疫内环境的作用有关。     

中药狼疮定方对MRL/lpr小鼠外周血淋巴细胞凋亡和Bcl-2/Bax基因表达的影响

目的探讨中药狼疮定方对MRL/lpr小鼠外周血淋巴细胞（PBLC）凋亡及其Bcl-2/BaxmRNA表达的影响。方法将80只MRL/lpr小鼠随机分为模型组、中药组、西药组和中西药组,分别以0.9%氯化钠溶液、狼疮定悬液、强的松混悬液、狼疮定悬液联合强的松混悬液灌胃;另取20只正常昆明小鼠以0.9%氯化钠溶液灌胃。连续饲养用药12周后取血,以梯度离心法分离外周血单个核细胞,培养48h后取PBLC悬液,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率;另以RT-PCR法检测PBLC中Bcl-2/BaxmRNA的表达水平。结果正常组、中药组、西药组和中西药组PBLC培养0h和48h时凋亡率高于模型组（P〈0.05或0.01）,0h时西药组、正常组与中西药组的PBLC凋亡率无明显差异,但中药组和模型组凋亡率显著低于中西药组（P〈0.05）,48时中药组、模型组和西药组凋亡率明显低于中西药组（P〈0.05或0.01）;正常组、中药组和中西药组PBLC中Bcl-2/BaxmRNA比值水平均明显低于模型组和西药组（P〈0.05或0.01）。结论狼疮定方对MRL/lpr小鼠的PBLC凋亡率及其Bcl-2/Bax比值均可起到调节作用。     

急性髓系白血病Bcl-2/Bax比值与细胞生长类型和耐药关系的研究

为了解白血病耐药与Bcl-2,Bax基因和细胞生长的关系,运用半固体培养,MTT药敏试验和免疫组织化学测定抗原表达的方法研究40例急性髓系白血病(AML)。结果:AML患者Bcl-2/Bax比值显著高于正常对照组,分别为12.21±8.05和0.75±0.05(P<0.001)。细胞集落生长组Bcl-2/Bax比值为(14.84±8.88)较无集落生长组(7.14±3.41)明显增高(P<0.05),耐药组和药物敏感组Bcl-2/Bax比值分别为14.32±8.99和7.50±5.04,有显著性差异(P<0.05)。Bcl-2/Bax高比值患者化疗反应差,缓解率明显低于低比值患者(P<0.05)。结论:Bcl-2、Bax异常表达是AML形成、发展和产生耐药的重要因素,检测Bcl-2/Bax比值对指导治疗,药物选择及判断预后有重要意义。     

苯扎贝特对ox-LDL诱导内皮细胞凋亡基因Bcl-2/Bax的影响

目的 观察苯扎贝特对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞凋亡基因Bcl-2/Bax的影响. 方法 体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),根据实验要求分为正常对照组、ox-LDL组、低浓度苯扎贝特(50μmol/L)组、中浓度苯扎贝特(100 μmol/L)组、高浓度苯扎贝特(200μmol/L)组.RT-PCR观察各组凋亡基因Bcl-2、Bax及Bd-2/BaxmRNA的变化. 结果 与正常对照组比较,ox-LDL组凋亡基因Bcl-2表达下降(P<0.05),凋亡基因Bax表达增加(P<0.05),Bcl-2/Bax比值下降(P<0.05);不同浓度苯扎贝特组与ox-LDL组比较,Bcl-2表达增加(P<0.05),Bax表达降低(P<0.05),Bcl-2/Bax上调(P<0.05),且呈浓度效应依赖关系. 结论 ox-LDL可引起内皮细胞抗凋亡基因Bcl-2表达下调,凋亡基因Bax表达上调,Bcl-2和Bax比值下降,从而引起内皮细胞凋亡增加;苯扎贝特可通过上调Bcl-2与Bax的比值抑制ox-LDL引起的内皮细胞凋亡,起到抗动脉粥样硬化作用.     

雌激素治疗对绝经妇女外周血T淋巴细胞的影响

目的探讨雌激素治疗对绝经妇女外周血T淋巴细胞的影响。方法分离外周血T淋巴细胞,采用(Annexin V-FITC/PI双染色)测定淋巴细胞凋亡率,提取外周血淋巴细胞总RNA,RT-PCR法测定T淋巴细胞抗凋亡基因bcl-2及T淋巴细胞促进凋亡基因bax含量。结果绝经组T淋巴细胞凋亡率高于生育年龄组(<0.01)。绝经+E组T淋巴细胞凋亡率低于绝经组(<0.01)。绝经组Bcl-2表达低于生育年龄组(<0.01)。绝经+E组Bcl-2表达高于绝经组(<0.01)。绝经组Bax表达高于生育年龄组(<0.01);而绝经+E组Bax表达低于绝经组(<0.01)。结论雌激素可以降低绝经妇女外周血T淋巴细胞的凋亡,主要机制可能是提高抗凋亡基因Bcl-2的表达和降低促凋亡基因Bax的表达水平。     

商陆皂苷甲对BXSB小鼠肾脏细胞凋亡及Bax和Bcl-2表达的影响

目的 通过观察商陆皂苷甲(esculentoside A,EsA)对BXSB小鼠肾脏细胞凋亡及Bax和Bcl-2表达的影响,探讨EsA治疗狼疮肾炎的可能机制.方法 将24只18周龄雄性BXSB小鼠随机分为模型对照组、地塞米松治疗组和EsA治疗组,分别腹腔注射治疗4周后留取各组动物肾组织标本,进行TUNEL法检测肾脏细胞凋亡;免疫组织化学法检测肾组织Bax和Bcl-2表达.结果 3组间肾小球和肾小管细胞凋亡指数的差异有统计学意义(P<0.05),EsA治疗组凋亡指数最高,其次是地塞米松治疗组;与模型对照组比较,EsA治疗组和地塞米松治疗组BXSB小鼠的肾组织Bcl-2光密度值明显下降,差异有统计学意义(P<0.05),EsA治疗组和地塞米松治疗组差异无统计学意义(P>0.05);Bax的表达3组间差异无统计学意义(P>0.05);而3组间肾组织Bcl-2/Bax的比值差异有统计学意义(P<0.05).结论 EsA具有诱导BXSB小鼠肾小球和肾小管细胞凋亡作用,EsA可以下调BXSB小鼠肾组织中的凋亡调节蛋白Bcl-2表达及Bcl-2/Bax比值而加速细胞凋亡的发生.     

针刺对脑挫伤大鼠脑组织P53、Bcl-2、Bax表达的影响

目的 观察针刺对脑挫伤模型大鼠脑组织凋亡相关基因P53、Bcl-2、Bax表达的影响.方法 参照Feeney自由落体冲击造模法建立脑挫伤大鼠模型,将40只大鼠随机分为假手术组、模型组、纳络酮组、针刺组,每组10只.针刺组、纳络酮组分别给予针刺、腹腔注射纳络酮治疗,每天1次,共治疗7 d.处理结束后,采用免疫组织化学方法检测损伤脑组织P53、Bcl-2/Bax表达.结果 模型组大鼠P53、Bax表达较假手术组明显升高(P<0.01),Bcl-2/Bax比值下降;针刺组、纳络酮组与模型组比较:Bcl-2 表达明显升高(P<0.01),P53、Bax表达明显下降(P<0.01),Bcl-2/Bax比值升高. 针刺组与纳络酮组P53、Bcl-2、Bax表达无明显差异(P>0.05).结论 针刺可减少脑挫伤大鼠脑组织促凋亡基因P53和Bax表达、增加凋亡抑制基因Bcl-2的表达,升高Bcl-2/Bax比率,这可能是针刺减少脑细胞凋亡、防治继发性脑损害的机制之一.     

狼疮定对SLECD4~+T细胞凋亡及其GRα表达的作用

[目的]明确狼疮定(LCD)是否通过影响糖皮质激素受体α(glucocorticoid receptor alpha,GRα)的表达来增强糖皮质激素诱导激素不同敏感型系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus,SLE)CD4~+T细胞的细胞凋亡作用。[方法]筛选符合入选标准的激素抵抗型和敏感型的SLE患者,采集外周血并立即分选出CD4~+T细胞,分别随机分为3组,空白组加空白血清,地塞米松(Dexamethasone,DXM)组加空白血清和10μmol·m L-1 DXM,LCD+DXM组加中药含药血清2.5m L和10μmol·m L-1 DXM。分别药物处理24h后收集各组细胞,流式细胞术检测细胞凋亡,免疫荧光技术检测细胞内GRα的表达。[结果]共纳入58例符合标准的SLE患者,其中激素抵抗型25例,激素敏感型共33例。取血分离的CD4~+T细胞,经药物分别处理24h后,LCD+DXM组的激素敏感型和抵抗型的SLE CD4~+T细胞的总凋亡率均明显高于DXM组和空白组(均为P﹤0.01);DXM组的敏感型CD4~+T细胞总凋亡率明显高于空白组(P﹤0.01),而抵抗型的CD4~+T细胞总凋亡率在两组间无显著差异;LCD+DXM联合处理GC敏感型SLE患者外周血CD4~+T细胞24h后,CD4~+T细胞内标记GRα的FITC荧光抗体表达强度明显强于DXM组(P﹤0.05),但弱于空白组的荧光强度(P﹤0.05);LCD+DXM联合处理GC抵抗型SLE患者外周血CD4~+T细胞24h后,CD4~+T细胞内标记GRα的FITC荧光抗体表达强度明显强于DXM组和空白组的荧光强度(P﹤0.01和P﹤0.05);DXM组的GC敏感型和抵抗型SLE患者外周血CD4~+T细胞的标记GRα的FITC荧光抗体表达强度均低于空白组(均为P﹤0.01),GC抵抗型SLE患者外周血CD4~+T细胞内标记GRα的FITC荧光抗体表达低于GC敏感型SLE患者的CD4~+T细胞(P﹤0.01)。[结论]狼疮定能增强DXM诱导激素敏感型和抵抗型的SLE CD4~+T细胞凋亡,其作用可能与狼疮定拮抗DXM对激素敏感型和激素抵抗型SLE患者CD4~+T细胞胞浆内GRα表达的抑制作用相关;激素抵抗型SLE患者CD4~+T细胞胞浆内GRα表达低于激素敏感型患者。     

原发干燥综合征患者外周血T细胞亚群变化的相关研究

目的:了解原发干燥综合征患者外周血T细胞亚群的变化及其临床意义。方法:用流式细胞术检测并比较原发干燥综合征(pSS)与系统性红斑狼疮(SLE)患者和对照组外周血中T淋巴细胞亚群的差异。分析T细胞亚群与血沉、血清免疫球蛋白IgG和类风湿因子等病情活动指标的关系。结果:pSS组和SLE组外周血CD4 T淋巴细胞水平和CD4 /CD8 比值较正常对照组明显减低(P<0.05),而pSS与SLE两组则无明显差异(P>0.05)。pSS组外周血CD8 T淋巴细胞水平明显高于正常对照组(P<0.05)和SLE组(P<0.05),SLE组外周血CD8 T淋巴细胞水平也高于正常对照组(P<0.05)。pSS患者外周血CD4 T淋巴细胞水平和CD4 /CD8 比值在疾病活动期下降,并与pSS的疾病活动性指标血清IgG、血沉呈负相关性(P<0.05)。CD8 细胞水平在疾病活动期明显升高,且与以上指标呈正相关性(P<0.01)。结论:pSS患者外周血T淋巴细胞亚群存在异常,与发病密切相关。pSS患者外周血CD4 T淋巴细胞、CD8 T淋巴细胞和CD4 /CD8 比值与病情活动有关。     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞单链DNA表达研究

目的 研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)中单链DNA(ssDNA)表达情况.方法 流式细胞术检测26例SLE患者(SLE组)外周血ssDNA表达阳性的PBMC细胞百分比(ssDNA阳性率),设立正常对照组(n=17)和其他结缔组织病(CTD)对照组(n=7).结果 SLE组、正常对照组和CTD对照组外周血B淋巴细胞中ssDNA阳性率分别为(0.906±0.838)%、(0.216±0.371)%和(0.270±0.311)%.统计学分析表明,SLE组患者外周血B淋巴细胞中ssDNA阳性率显著高于两对照组(P<0.01, P<0.05);SLE组内有与无狼疮肾炎患者的外周血B淋巴细胞中ssDNA阳性率分别为(1.228±0.259)%和(0.510±0.436)%,两者比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 SLE和狼疮肾炎的发生和发展可能与患者外周血表达ssDNA的B淋巴细胞异常增多有关.     

补肾活血排毒法组方中药对慢性肾脏病大鼠肾脏细胞凋亡的影响

目的 观察补肾活血排毒法组方中药对慢性肾脏病大鼠的治疗作用及细胞凋亡的影响.方法 采用单侧输尿管梗阻(UUO)动物模型,将SD雄性大鼠分为假手术组、UUO模型组、补肾活血排毒法中药低剂量治疗组和高剂量治疗组,自动生化分析仪检测肾功能;苏木素-伊红(HE)染色检测肾脏组织病理损伤;TUNEL法检测肾组织细胞凋亡;Western blot法检测B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)水平.结果 与UUO模型组相比,补肾活血排毒法中药各剂量组血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)均明显下降(P＜0.05).病理观察,模型组可见肾小管上皮细胞凋亡、坏死、脱落,炎性细胞浸润,补肾活血排毒法中药各剂量组均较UUO模型组肾损伤程度轻(P＜0.05).TUNEL法检测UUO模型组细胞凋亡数较假手术组明显增多,补肾活血排毒法中药各剂量组可显著减少细胞凋亡数目(P＜0.05).与UUO模型组相较,补肾活血排毒法中药各剂量治疗组Bcl-2水平明显上调,Bax水平下调,Bcl-2/Bax比值升高(P＜0.05).以上结果均呈剂量依赖性.结论 补肾活血排毒法中药能明显下调血清肌酐和尿素氮水平,抑制UUO大鼠肾脏细胞凋亡,调节Bcl-2、Bax水平.     

环磷酰胺对儿童系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞亚群变化的影响

目的：探讨环磷酰胺对儿童系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血淋巴细胞亚群变化的影响,为治疗儿童SLE提供依据。方法：选取30例儿童SLE患者和30例健康儿童,检测其外周血T细胞、B细胞、自然杀伤(NK)细胞和自然杀伤T(NKT)细胞水平。将SLE患者分为单纯激素治疗组和环磷酰胺联合激素治疗组,每组各15例,采用流式细胞术检测2组治疗前后儿童外周血淋巴细胞亚群比率的变化。结果：与健康对照组比较,SLE患儿组CD3+CD4+ Th细胞比率明显降低（P<0.05）;CD3+CD8+ Tc细胞比率明显升高（P<0.05）;CD3－（CD16CD56）+NK和CD3+（CD16CD56）+NKT细胞比率明显降低（P<0.05）,而CD3－CD19+ B细胞比率明显增高（P<0.01）。儿童SLE患者外周血CD3+CD8+ Tc细胞比率与SLE活动指数(SLE DAI)呈正相关关系（r=0.754 7,P<0.01）;CD3－CD19+ B细胞比率与SLEDAI亦呈明显的正相关关系（r=0.158 6,P=0.029 3）;Th、NK和NKT细胞比率与SLE DAI无明显相关性（P>0.05）。与治疗前比较,单用激素治疗组患者治疗后B细胞比率明显降低（P<0.05）;NK、NKT和Th细胞比率均有所升高,Tc细胞比率降低但差异无统计学意义（P>0.05）。环磷酰胺联合激素组治疗后患者B细胞比率较治疗前明显降低（P<0.01）,NK细胞、Th细胞比率较治疗前明显升高（均P<0.01）。结论：儿童SLE患者淋巴细胞亚群比例的失调与SLE的发病有关,环磷酰胺联合激素治疗儿童SLE效果较好。     

缺血预处理对猪冬眠心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的影响

目的探讨缺血预处理对冬眠心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的影响.方法18只小型中国家猪随机分为3组:对照组(CON组)、冬眠心肌组(HM组)、缺血预处理组(IP组).采用末端标记技术(TUNEL)测定细胞凋亡,免疫组化方法检测Bcl-2、Bax蛋白表达,透射电子显微镜观察心肌细胞超微结构.结果HM组中Bcl-2蛋白表达较CON组显著增加,在IP组,Bcl-2蛋白表达较HM组进一步升高;在HM组Bax蛋白表达高于CON组,Bax蛋白表达在HM组、IP组无统计学差别.TUNEL显示,CON组极少心肌细胞凋亡,HM组细胞凋亡较CON组增多,IP组细胞凋亡较HM组减少.结论缺血预处理可能通过增加Bcl-2蛋白表达来减少冬眠心肌细胞凋亡的发生.     

复方苦参注射液对子宫内膜癌HEC-1B细胞Bcl-2/Bax、P27表达的影响

[目的]探讨复方苦参注射液（岩舒）对人子宫内膜癌HEC-1B细胞Bcl-2/Bax、P27基因表达的影响。[方法]采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法观察不同浓度复方苦参注射液及组方成分苦参注射液,白土苓注射液,顺铂注射液对人子宫内膜癌HEC-1B细胞增殖的影响;采用逆转录聚合酶链反应法（RT-PCR）检测复方苦参注射液对人子宫内膜癌HEC-1B细胞中Bcl-2/Bax、P27 mRNA表达水平的影响。[结果]复方苦参注射液、苦参注射液均可抑制HEC-1B细胞增殖,并呈剂量依赖性,组间差异有统计学意义（P〈0.05）;复方苦参注射液、苦参注射液、顺铂注射液作用于HEC-1B细胞48 h后,与空白对照组相比在mRNA表达水平Bcl-2降低,而Bax、P27表达升高,差异有统计学意义（P〈0.05）。[结论]复方苦参注射液、苦参注射液可抑制人子宫内膜癌HEC-1B细胞增殖;复方苦参注射液及苦参注射液可明显抑制Bcl-2表达并促进Bax、P27表达,说明复方苦参注射液抑制子宫内膜癌HEC-1B细胞增殖的作用机制在于苦参对Bcl-2/Bax基因家族和P27基因的表达的影响。     

中西医结合治疗糖尿病足的临床观察

[目的]观察中西医结合治疗糖尿病足的临床疗效。[方法]将32例糖尿病足患者随机分为治疗组16例和对照组16例。两组患者均给予相同的基础治疗、营养神经、抗凝、扩张血管、改善微循环、外治法治疗,治疗组在此基础上加用中医辨证施治。[结果]治疗组显效9例,有效6例,无效1例,总有效率93.7%;对照组显效5例,有效7例,无效4例,总有效率75%;两组比较,差异有显著性(χ2=15.8,P<0.05)。治疗组溃疡大小、新鲜创面肉芽例数与对照组比较,差异有显著性(P<0.05)。两组治疗后空腹血糖,餐后2h血糖均有改善,与治疗前比较,差异有显著性(P<0.05)。[结论]中西医结合治疗糖尿病足的疗效比单用西药治疗为好。     

祛瘀生肌法对大鼠糖尿病创面新生肉芽组织中Bax和Bcl-2的影响

目的:探讨祛瘀生肌法促进糖尿病皮肤溃疡大鼠模型创面愈合的辨证用药规律。方法:72只SD大鼠尾静脉注射四氧嘧啶造成糖尿病模型后,剪去背部全层皮肤造成糖尿病皮肤溃疡,将其随机分成生肌化瘀方1(生肌方:化瘀方=1:2)组、生肌化瘀方2(生肌方:化瘀方=1:1)组和生理盐水对照组。分别干创伤后第3天、第7天和第11天取创面新生肉芽组织。采用免疫组织化学法检测新生肉芽组织中Bax和Bcl-2蛋白表达。结果:生肌化瘀方1组创面愈合时间较生肌化瘀方2组和生理盐水组短(P<0.05)。创面修复第3天,各组均未检测到Bax和Bcl-2表达。创面修复第7天和第11天,与生理盐水组和生肌化瘀方2组比较,生肌化瘀方1组新生肉芽组织中Bax和Bcl-2呈阳性表达(P<0.05)。结论:祛瘀生肌中药可调节糖尿病大鼠模型创面新生肉芽组织中Bax和Bcl-2蛋白表达,是祛瘀生肌法促进创面愈合的原因之一。重用化瘀药物有利于创面愈合。     

醋酸铅对小鼠胸腺细胞凋亡及Bax和Bcl-2基因表达的影响

目的探讨醋酸铅诱导小鼠胸腺细胞凋亡及对Bax和Bc l-2基因表达的影响。方法以3种不同浓度的醋酸铅灌胃饲养小鼠46 d后,取胸腺组织,用琼脂糖凝胶电泳法检测胸腺细胞凋亡情况,Western blot法检测胸腺组织中Bax和Bc l-2的表达情况。结果铅处理组小鼠胸腺细胞有被降解的凋亡带,并且降解条带的量随着染铅剂量的增加而增加;小鼠胸腺细胞Bax表达量均高于对照组,并且表达量随着染铅剂量增加而升高(P<0.05);而Bc l-2表达量均低于对照组,且表达量随着染铅剂量的增加而递减(P<0.05),Bc l-2/Bax表达比明显降低(P<0.01)。结论醋酸铅可诱发小鼠胸腺细胞凋亡,,促进胸腺细胞中Bax基因的表达,抑制Bc l-2基因的表达,降低Bc l-2/Bax表达比。     

中西药联合对人胃癌SGC-7901/ADR细胞Bcl-2与Bax基因表达的影响

目的探讨川芎嗪（TMP）、班贞1号联合5-氟脲嘧啶（5-FU）对人胃癌SGC7901/ADR细胞Bcl-2、Bax基因表达的影响。方法以SGC-7901/ADR细胞为靶细胞,以不加药组为阴性对照组,分别以5-FU组、斑贞1号组、斑贞1号＋5-FU组及班贞1号＋5-FU＋TMP（中西药联合）组为实验组,采用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法测定SGC-7901/ADR细胞在不同药物作用下Bcl-2、Bax基因的表达情况。结果 5-FU组与阴性对照组相比,Bcl-2、BaxmRNA表达及Bcl-2/Bax比值经比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;中西药联合组BaxmRNA表达明显增高,Bcl-2mRNA表达及Bcl-2/Bax比值明显降低,与阴性对照组及其他实验组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论中西药联合可诱导人胃癌SGC7901/ADR细胞凋亡,从而逆转了SGC7901/ADR细胞的耐药性。其机制可能与上调Bax基因、下调Bcl-2基因表达,降低Bcl-2/Bax的比值有关。