EDTA依赖性假性血小板减少症血小板表面糖蛋白活化的研究

目的通过检测EDTA依赖性血小板减少症患者血小板表面糖蛋白GPⅡb/Ⅲa表达活性、血小板聚集试验及凝血项检查,分析EDTA依赖性血小板减少症的发生机理与条件。方法用BDFACS Calibur扩检测血小板表面糖蛋白GPⅡb/Ⅲa,HELENA PACKS-4多通道血小板聚集仪分析血小板的聚集功能。结论EDTA依赖性血小板减少症时GPⅡb/Ⅲa表达增强,胶原、DAP、肾上腺素及花生四烯酸诱导的血小板聚集中花生四烯酸效果最为显著。     

血小板特异性抗体联合检测在免疫性血小板减少症鉴别诊断中的价值

目的通过检测血小板减少症患者外周血B淋巴细胞血小板膜糖蛋白特异性抗体的变化,探讨其表达水平变化对血小板减少症鉴别诊断的临床意义。方法应用流式微球技术检测血小板减少症患者及健康对照者外周血GPⅡb/Ⅲa、GPⅠb/ⅠX的表达水平。结果原发ITP与继发ITP患者血小板特异性抗体GPⅡb/Ⅲa、GPⅠb/ⅠX与对照组比较差异有统计学意义(P0.05);血小板特异性抗体GPⅠb/ⅠX诊断原发ITP的敏感度43%,特异度89%;GPⅡb/Ⅲa诊断原发ITP的敏感度86%,特异度83%。两者联合诊断敏感度90%,特异度83%。结论联合检测两种血小板抗体,提高原发ITP和SLE的诊断阳性率;GPⅠb/ⅠX在ITP中的诊断优势不如GPⅡb/Ⅲa。     

人泛素-核糖体蛋白27a原核表达载体构建及表达

目的构建并表达携带谷胱甘肽S-转移酶(GST)标签的人泛素-核糖体蛋白S27a(UBRPS27a)原核表达载体。方法利用反转录聚合酶链反应从HL-60细胞中扩增RPS27A基因全长,克隆至pMD-19T载体中,酶切回收后插入原核表达载体pGEX4T-1,构建重组表达载体pGEX4T1-RPS27A,转化大肠埃希菌BL21,以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达GST-UBRPS27a融合蛋白。结果经测序与酶切鉴定,重组质粒pGEX4T1-RPS27A构建正确;经重组质粒转化的BL21细菌诱导4h后可高效表达UBRPS27a融合蛋白。结论成功构建UBRPS27a原核表达载体,为进一步研究其结构、功能及其在肿瘤发生发展中的作用奠定了基础。     

钙拮抗剂、β1受体阻滞剂对高血压病患者血小板功能的影响

目的研究抗高血压药钙拮抗剂、β1受体阻滞剂对高血压病患者血小板功能的影响.方法53例高血压病Ⅰ级、Ⅱ级患者,随机接受尼群地平或倍他乐克治疗12周,治疗前后分别经流式细胞仪测定血小板GPⅡb/Ⅲa受体表达率并比较治疗前后变化.结果尼群地平组治疗后GPⅡb/Ⅲa受体表达率显著降低,而倍他乐克组治疗前后血小板GPⅡb/Ⅲa受体表达率无显著变化.结论尼群地平有拮抗血小板功能作用,倍他乐克则无影响.     

1例静脉泵入替罗非班致肾功能衰竭血小板为0病例报告

血小板膜糖蛋白GP Ⅱb/Ⅲ a受体拮抗剂可以和GP Ⅱb/Ⅲa受体竞争性结合,阻断血小板聚集,防止血栓形成,减少急性冠脉综合征(ACS)患者的临床事件,<'[1]>.在经皮冠状动脉介入治疗(PCI)前和术中短期静脉给予GP Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂可降低手术相关的栓塞并发症.最近本院为1例要求行PCI的肾功能衰竭尿毒症期患者行PCI,术后静脉给予国产GP Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂替罗非班(商品名欣维宁,武汉远大制药厂生产,批号:070202)50 ml导致血小板降为0并引起消化道出血,现报告如下.     

哺乳动物极性蛋白mInscuteable-C末端肽段/GST融合蛋白的原核表达与纯化

目的:构建哺乳动物极性蛋白mInscuteable C末端257～532位氨基酸结构域与谷胱甘肽巯基转移酶(GST)的融合蛋白GST-mInsc 257～532的原核表达载体,在大肠杆菌中表达并纯化该融合蛋白。方法:将已经构建好的mInsc 257～532位氨基酸序列克隆至原核表达载体pGEX-4T中,构建重组的质粒pGEX-4T/mInsc 257～532;将重组质粒转化感受态细菌BL21,异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达GST蛋白;经谷胱甘肽-琼脂糖球珠分离纯化;产物经SDS-PAGE电泳及Western Blot鉴定。结果:获得高表达及纯化的pGEX-4T/mInsc 257～532融合蛋白。结论:成功构建重组pGEX-4T/mInsc 257～532原核表达载体;诱导表达pGEX-4T/mInsc 257～532融合蛋白并纯化。     

GPⅡb/Ⅲa抑制剂抗血小板机理及临床应用进展

GPⅡb/Ⅲa糖蛋白复合物在血小板聚集过程中起关键作用,GPⅡb/Ⅲa抑制剂也逐渐开始应用于血栓性疾病的预防和治疗。本文着重综述GPⅡb/Ⅲa在血小板聚集中的作用及GPⅡb/Ⅲa抑制剂在抗血小板聚集的临床应用。     

ACS患者P-选择素、血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa受体及血小板聚集率的研究——附80例分析

目的：探讨不同类型ACS患者P-选择素、血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa受体及血小板聚集率的变化。方法：测定80例ACS患者[其中AMI组35例、不稳定型心绞痛（un-stableangina,UA）45例]和同期56名健康体检者（对照组）的P-选择素、血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa受体及血小板聚集率,并进行比较：P-选择素及血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa受体采用流式细胞仪检测,血小板聚集率采用四通道血小板聚集仪检测。结果：VAMI组的P-选择素、血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa受体、血小板聚集率分别为（5．8±0．4）％、（5．7±0．3）％、（67±10）％,UA组相应为（5．6±0．3）％、（5．5±0．4）％、（55±10）％,对照纽相应为（2．6±0．3）％、（3．3±0．2）％、（46±8）％。AMI组和UA组的P-选择素、血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa受体、血小板聚集率水平均较对照组高（均为P〈0．01）,而AMI组上述3项指标的水平均较UA组高（P〈0．05～0．01）。结论：ACS患者的P-选择素、血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa受体、血小板聚集率水平均较正常人高,对上述3项指标的检测有助于ACS类型的筛选,早期发现AMI,以便临床采取及时有效的干预措施。     

钙拮抗剂、β_1受体阻滞剂对高血压病患者血小板功能的影响

目的 :研究抗高血压药钙拮抗剂、β1受体阻滞剂对高血压病患者血小板功能的影响。 方法 :5 3例高血压病Ⅰ级、Ⅱ级患者 ,随机接受尼群地平或倍他乐克治疗 12周 ,治疗前后分别经流式细胞仪测定血小板GPⅡb/Ⅲa受体表达率并比较治疗前后变化。结果 :尼群地平组治疗后GPⅡb/Ⅲa受体表达率显著降低 ,而倍他乐克组治疗前后血小板GPⅡb/Ⅲa受体表达率无显著变化。结论 :尼群地平有拮抗血小板功能作用 ,倍他乐克则无影响     

血小板膜糖蛋白Ⅲa PLA1/PLA2基因多态性与冠心病的相关性研究进展

血小板的主要功能是当血管壁损伤后参与生理性止血,研究[1]发现异常血小板活化与冠心病的发生、发展、治疗和预后密切相关。纤维蛋白原受体是血小板表面最为丰富的整合素,它参与整个止血过程,是血小板激活、黏附和聚集的最后共同通路。纤维蛋白原受体主要由2个亚基组成,分别是糖蛋白Ⅱb(GPⅡb)和糖蛋白Ⅲa(GPⅢa)[2]。血小板GPⅡb/Ⅲa可以促使活化后的血小板与纤维蛋白原及相关的黏附蛋白结合,导致血小板聚集,从而在血栓形成     

钙拮抗剂、β1受体阻滞剂对高血压病患者血小板功能的影响

目的：研究抗高血压药钙拮抗剂、β1受体阻滞剂对高血压病患者血小板功能的影响。方法：53例高血压病Ⅰ级、Ⅱ级患者,随机接受尼群地平或倍他乐克治疗12周,治疗前后分别经流式细胞仪测定血小板GPⅡb/Ⅲa受体表达率并比较治疗前后变化。结果：尼群地平组治疗后GPⅡb/Ⅲa受体表达率显著降低,部他乐克组治疗前后血小板Ⅱb/Ⅲa受体有达率无显著变化。结论：尼群地平有拮抗血小板功能作用,倍他乐克则无影响。     

血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂治疗急性冠脉综合征的研究进展

血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂可阻断纤维蛋白原与血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体的结合,有效地抑制血小板的聚集,在急性冠脉综合征治疗中有重要作用。现就国内外有关研究报道作一综述。     

特发性血小板减少性紫癜患者IgG酶切片段F(ab'')2的免疫活性及其对血小板聚集功能的影响

目的制备特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者血浆IgG及其酶切片段，探讨其与血小板GPⅡb／Ⅲa和（或）GPⅠb／Ⅸ结合的免疫活性及其对正常人血小板聚集功能的影响。方法用改良MAIPA法和比浊法血小板聚集试验筛选出自身抗体阳性并且能抑制血小板聚集的患者，用蛋白A柱纯化其血浆IgG抗体并用胃蛋白酶制备F（ab’）2片段，改良单克隆抗体俘获血小板抗原技术（MAIPA）检测完整抗体及其酶切片段与血小板膜糖蛋白的结合活性；比浊法血小板聚集试验对比观察ITP患者血浆、纯化的IgG抗体及其酶切片段对正常人血小板聚集功能的影响。结果①68例慢性ITP患者中，34例（53．6％）血浆中抗GPⅡb／Ⅲa和（或）GPⅠb／Ⅸ自身抗体阳性，其中5例（14．7％）明显抑制了二磷酸腺苷（ADP）或瑞斯托霉素对血小板聚集的诱导作用；②用蛋白A柱结合蛋白酶酶切成功获得了纯化的IgG及F（ab’）2片段；③患者纯化的IgG及F（ab’）2片段均具有抗GPⅡb／Ⅲg或GPⅠb／Ⅸ活性，但去除IgG的血浆丧失了与GPⅡb／Ⅲa或GPⅠb／Ⅸ的结合活性；④2例患者纯化的IgG及其F（ab＇）2片段抑制ADP诱导的血小板聚集。结论F（ab’）2片段是IgG自身抗体的功能片段，它不但保留了良好的抗原结合活性并可抑制血小板聚集功能，其抑制聚集作用呈剂量依赖性。     

国产替罗非班应用于择期经皮冠状动脉介入术中的安全性观察

血小板表面糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂通过阻断血小板聚集的终末途径-GPⅡb/IⅡa受体发挥强效的抗血小板聚集作用,目前已有大量的临床试验证实其在急性冠状动脉综合征和经皮冠状动脉介入术(percutaneous coronaryintervention,PCI)中均具有显著益处,但其可轻度增加出血的发生率。目前美国食品与药品管理局(FDA)批准的(GP)Ⅱb/IⅡa受体拮抗剂有Abciximab(阿昔单抗)、tirofiban(替罗非班)、Eptifibotide(依替巴肽)共3种。盐酸替罗非班(商品名;欣维宁)是国内惟一上市的(GP)Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂,但目前国内应用仍较少,尚缺乏相关经验。…     

GPⅡb／Ⅲa受体拮抗剂在急性冠脉综合征中的应用

目前有四种静脉用GPⅡb／Ⅲa受体拮抗剂：Abciximab、Eptifibatide、Tirofiban、Lanifiban，其中前三种在美国已获准用于非ST段抬高的急性冠脉综合征(NSTEACS)的药物和冠状动脉介入(PCI)治疗。GPⅡb／Ⅲa受体暴露构型的改变结果与纤维蛋白原结合形成血小板聚集，这是血小板激活的最终途径，并决定动脉内形成的血栓的体积和长度，抑制GPⅡb／Ⅲa受体就能削弱血小板的聚集，从而防止血栓的延展和加速其崩解。NSTEACS是冠脉内斑块破裂诱发血小板聚集血栓形成的过程。已有许多的临床试验证明了GPⅡb／Ⅲa受体拮抗剂在ACS中的应用价值。     

长期规律运动对老年大鼠血小板表面Ⅱ_b/Ⅲ_a受体密度的影响

目的 :探讨长期规律运动对老年大鼠血小板表面Ⅱb/Ⅲa 受体密度的影响。方法 :以老年大鼠为研究对象进行有规律的游泳运动训练 ,90min/次 ,5次 /周 ,共 8周。与成年大鼠进行对照 ,测定运动训练前、运动训练 1周、2周、4周、8周及停止训练后 2周大鼠血小板表面Ⅱb/Ⅲa 受体密度的变化。结果 :老年大鼠运动训练 1周血小板表面Ⅱb/Ⅲa 受体密度增加 ,运动 2周后血小板表面Ⅱb/Ⅲa 受体密度较运动训练前显著降低。结论 :长期规律运动可导致血小板表面Ⅱb/Ⅲa 受体密度降低 ,可能是运动降低老年动物血小板聚集 ,改善血流状态的原因之一。     

替罗非班在急性心肌梗死经皮冠状动脉介入治疗中的应用

血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂盐酸替罗非班可阻断血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体与纤维蛋白原的结合及受损内皮细胞上血小板的黏附、聚集与激活．而达到最强的抗血小板和血栓形成作用,因此．2004年欧洲心脏病学会（ESC）专家共识已将其列入急性心肌梗死（AMI）直接支架成型术使用的IA类适应证^[1]。     

血小板糖蛋白Ⅱb／Ⅲa受体拮抗剂在治疗急性冠状动脉综合征中的应用

急性冠状动脉综合征的主要发病机制是冠状动脉内粥样斑块破裂,血小板活化聚集,血小板血栓形成,因此抗血小板治疗是治疗急性冠状动脉综合征的关键。血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(GPⅡb/Ⅲa)受体拮抗剂是通过抑制血小板聚集的最终共同通路发挥抗血小板作用,其抗血小板作用更彻底。     

血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体抑制剂在急性冠状动脉综合征中的应用

血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(GPⅡb/Ⅲa)受体抑制剂,主要抑制纤维蛋白原与血小板膜GPⅡb/Ⅲa受体的结合,是血小板聚集的终末环节抑制剂。目前主要静脉制剂包括abciximab、tirofiban和eptifibatide。本文就3种药物在急性冠状动脉综合征(ACS)治疗中的应用进展综述如下。1在非ST段抬高A     

替罗非班在急性ST段抬高心肌梗死患者介入治疗术中应用的临床观察

血小板糖蛋白Ⅱb／Ⅲa受体拮抗剂自诞生以来，已被广泛用于临床众多领域，特别在经皮冠状动脉介入治疗（PCI）中发挥极其重要的作用。该药通过与血小板表面Ⅱb／Ⅲa受体中的R／KGD片段结合，竞争性抑制纤维蛋白原与血小板结合及血小板之间的聚集，从而达到抗血小板和血栓形成的作用，减少致死性心脏事件的发生，改善预后。替罗非班是一种短效、快速、可逆的静脉用血不板GPⅡb／Ⅲa受体抑制剂，通过阻止纤维蛋白原与GPⅡb／Ⅲ受体的结合，